电针大鼠“四白”穴和胃扩张传入信息在孤束核的汇聚——c-fos表达的研究

目的:探讨电针足阳明经“四白”穴和胃扩张刺激诱导大鼠孤束核(NTS)的原癌基因c -fos表达及意义。方法:将SD大鼠随机分为4组:电针“四白”穴组、电针“四白”穴旁开0 .5cm组、胃扩张模型组和空白对照组。采用免疫组织化学方法观察c- fos在孤束核的表达。结果:电针“四白”穴组和胃扩张模型组孤束核内Fos样免疫反应(FLI)阳性神经元均主要分布于内侧亚核,以延髓的中尾段分布较多;电针“四白”穴组在内侧亚核内FLI神经元数目与胃扩张模型组比较无明显差异(P >0 .0 5 ) ,与“四白”穴旁开组比较,差异有非常显著性意义(P <0 .0 1 )。结论:电针“四白”穴和胃扩张刺激的感觉传入可能在孤束核发生汇聚、整合,是针刺“四白”穴调节胃功能的中枢途径之一。     

针刺大鼠“四白”传入信息对孤束核神经元放电的影响

目的:比较足阳明经中远近腧穴及手太阳小肠经腧穴和非经非穴点的传入信息在孤束核(NTS)的差异。方法:采用细胞外记录方法,以足阳明胃经“四白”穴为刺激点,并以同名经的“地仓”和“内庭”、手太阳小肠经的“颧”、非经非穴“四白”旁开点为对照,在刺激点上用手针施以捻转手法刺激30 s,在NTS寻找对来自体表刺激点有反应的神经元。结果:52只大鼠记录到资料完整的86个NTS神经元中,针刺“四白”后NTS有反应神经元出现的机率(含兴奋和抑制性神经元)为65.12%,而针刺“地仓”“内庭”“颧”“四白”旁开点有反应神经元出现的机率分别为50.00%、46.51%、34.88%、31.40%。统计表明,针刺“四白”后NTS有反应神经元出现的机率均极显著地高于针刺“地仓”“内庭”“颧”“四白”旁开点后有反应神经元出现的机率(P<0.01);针刺“地仓”和“内庭”后NTS有反应神经元出现的机率均显著高于刺激“颧”和“四白”旁开点的有反应神经元出现机率(P<0.05)。针刺上述穴和非穴区,NTS神经元主要是以兴奋为主。针刺“四白”“地仓”“内庭”“颧”“四白”旁开点,其兴奋性神经元频率变化率分别为(35.08±4.80)%、(28.25±5.46)%(、27.57±4.87)%、(20.02±4.23)%(、18.55±2.49)%,“四白”与各组之间有显著性或极显著性差异(P<0.05或P<0.01),“地仓”“内庭”与“颧”“四白”旁开点亦有显著性或极显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:与手太阳小肠经穴以及非经非穴点比较,足阳明经穴与NTS的关系更密切;足阳明经中远近腧穴的信息传入在NTS亦存在着一定的差异,这提示腧穴均有一定的特异性。     

针刺“足三里”对大鼠孤束核P物质的影响

目的 :观察延髓孤束核P物质免疫阳性反应产物的分布以及针刺“足三里”穴对其的影响。方法 :将SD大鼠随机分为三组 :电针“足三里”穴组 (n =10 )、电针“足三里”穴旁开 0 5cm组(n =10 )、空白对照组 (n =10 )。应用免疫组织化学ABC法显示延脑组织SP免疫活性切片。结果 :孤束核内P物质的免疫阳性反应产物以膨体型纤维为主 ,呈点状和串珠状 ,其敞开部有少量阳性胞体。主要分布于孤束核的内侧亚核、连合亚核 ,其余亚核内较为稀疏 ;电针“足三里”穴内侧亚核、连合亚核阳性纤维的光密度明显升高 ,其余亚核无明显变化 ;电针“足三里”穴外侧旁开 0 .5cm组与空白组相似 ,各亚核均无明显变化。结论 :针刺“足三里”可能通过抑制NTS内侧亚核和连合亚核SP的释放 ,对胃的功能活动产生兴奋作用     

神经蛇毒处理眶下神经对电针镇痛作用的影响

目的:探讨粗纤维在电针"四白"穴对内脏痛的镇痛效应中的作用及其传入途径。方法:SD大鼠36只,随机分为空白组,内脏痛组、电针组、眶下神经切断组,神经蛇毒组及生理盐水组,每组6只。切断大鼠双侧眶下神经以及双侧眶下神经鞘内注射神经蛇毒选择性破坏A类纤维,然后电针双侧"四白"穴,再腹腔注射乙酸造成内脏痛模型,观察大鼠内脏痛的行为学变化(扭体反应)以及孤束核(NTS)和三叉旁核(PTN)的c-fos表达。结果:电针组大鼠扭体次数较内脏痛组明显减少(P0.01),眶下神经切断组大鼠扭体次数较电针组明显增加(P0.01),神经蛇毒组大鼠扭体次数少于内脏痛组(P0.05)。电针组NTS的c-fos表达较内脏痛组明显减少(P0.05),眶下神经切断组较电针组明显增加(P0.01),神经蛇毒组显著低于内脏痛组(P0.05)。电针组PTN的c-fos表达较内脏痛组明显增加(P0.01),眶下神经切断组较电针组明显减弱(P0.01),神经蛇毒组较眶下神经切断组和内脏痛组明显增强(P0.01)。结论:粗纤维不是电针"四白"穴对内脏痛大鼠镇痛效应的主要传入纤维,口面部的躯体感觉传入可能经PTN中继后与内脏的感觉传入在NTS发生汇聚并进行整合,从而产生镇痛作用。     

足阳明经对大鼠胃肌电穴位特异性研究

目的:探讨足阳明经对大鼠胃肌电的穴位特异性影响.方法:采用现代电生理技术,选择足阳明经"四白"、"地仓"穴及手太阳小肠经"颧髎"穴及"四白旁开点"做同步对照,将32只大鼠随机分为四白组、颧髎组、地仓组、四白旁开组,每组8只,比较观察电针对禁食24 h麻醉状态下大鼠胃肌电的针刺效应.结果:电针四白、地仓穴组对胃电振幅、时程及峰簇数的发放具有一定的兴奋效应,其效应以四自穴作用最为明显,地仓次之,与针刺前比较均有统计学意义(P＜0.01),而电针颧髎、四白旁开点,对胃电活动则无明显作用,与针刺前比较均无统计学意义(P＞0.05).结论:电针足阳明经对大鼠胃肌电具有一定的兴奋效应,其调整作用具有经脉、穴位的相对特异性.     

电针“合谷”和“四白”穴对大鼠孤束核胃相关神经元电活动的影响

目的:用电生理学的方法探讨“合谷”穴与“四白”穴的传入信息在孤束核内的汇聚。方法:采用细胞外记录的方法,首先寻找到孤束核内对胃扩张敏感的神经元,然后分别电针刺激“合谷”穴和“四白”穴,观察其放电活动的变化。结果:共记录到278个有自发放电的孤束核神经元,以10 s为时间段,统计处理胃扩张前后各2 min的神经元放电数目,频率改变超出25%确定为胃扩张反应神经元,132个神经元被确定为胃扩张反应(敏感)神经元,146个没有明显反应。对132个胃扩张反应神经元做进一步的统计学分析,70个神经元的电活动被胃扩张刺激兴奋(70/132);62个神经元被胃扩张刺激抑制(62/132),其中36个神经元的放电活动被完全抑制。与胃扩张前(14.05±8.52 spikes/min)相比,兴奋性神经元的电活动增加(34.84±22.68 spikes/min)极为显著;抑制性神经元的放电变化也非常明显(由18.21±9.29 spikes/min变为7.30±6.20 spikes/min)。在132个胃扩张敏感神经元中,对电针“四白”穴和“合谷”穴均起反应的神经元有41个(41/132,占30.2%)。结论:电针“合谷”穴和“四白”穴和胃扩张可兴奋或抑制同一孤束核神经元的电活动,表明“合谷”穴和“四白”穴区的传入信息可汇聚到同一孤束核神经元上,提示孤束核很可能是合谷穴与口面部联系的中枢机制之一,从而为经络理论中的人体体表与体表上下的特定联系提供了新的实验证据。     

穴位电针刺激对周围性面神经损伤兔面神经核中BDNF mRNA表达的影响

目的:观察穴位电针刺激对面神经损伤兔面神经核中脑源性神经营养因子基因(BDNF mRNA)表达的影响,揭示针刺促进损伤面神经再生修复的机理。方法:日本大耳白兔120只,随机分为假手术组(切开左侧面部皮肤后缝合)、模型组(造模后不给任何处置)、西药组(给予维生素B1、维生素B12、地塞米松)、传统针刺组(手针针刺“翳风”“颧”“地仓”“颊车”“四白”“阳白”穴)、电针刺激组(穴同传统针刺组),每组分为术后7、14、212、8 d 4个时间组。应用神经卡压法造成面神经损伤模型。采用伊红染色的方法光镜下观察面神经核中神经元细胞形态的改变,用原位杂交方法对面神经核BDNF mRNA表达阳性神经元进行染色,并用阳性细胞表达数定量分析。结果:穴位电针刺激后伊红染色可见神经细胞变性、坏死现象比模型组、西药组、传统针刺组明显改善,且电针刺激组兔面神经核中BDNF mRNA的表达明显多于其它4组(P<0.01),3个治疗组均有随治疗时间的延长而BDNF mRNA表达增高的趋势(P<0.01)。结论:穴位电针刺激对损伤的面神经修复有促进作用。     

面神经损伤的针刺效应对兔面神经核中CHAT、BDNF-mRNA表达的影响

目的：观察穴位电刺激对面神经损伤兔面神经核中胆碱乙酰转移酶（CHAT）、脑源性神经营养因子基因（BDNF—mRNA）表达的影响，揭示针刺促进损伤面神经再生修复的机理。方法：日本大耳白兔120只，随机分为假手术组（切开左侧面部皮肤后缝合）、模型组（造模后不给任何处置）、西药组（给予维生素B1、维生素B12、地塞米松）、传统针刺组（针刺翳风、颧醪、地仓、颊车、四白、阳白穴）、电针刺激组（电针针剌翳风、颧髂、地仓、颊车、四白、阳白穴），每组分为术后7d、14d、21d、28d4个时间组，应用神经卡压法造成面神经损伤模型，观察各组兔面神经核中神经元的变化。采用伊红染色的方法光镜下观察面神经核中神经元细胞形态的改变，用原位杂交方法对面神经核脑源性神经营养因子基因表达阳性神经元进行染色，并用表达阳性细胞数定量分析。结果：穴位电刺激后伊红染色可见神经细胞变性、坏死现象比其它4组明显改善，且兔面神经核中BDNF—mRNA的表达，电针刺激组表达明显多于其他对照组（P〈0．01）。结论：穴位电刺激对损伤面神经修复有促进作用。     

电针“足三里”穴对内脏痛大鼠延髓内脏带内c-fos和GFAP表达的影响

目的:探讨电针对内脏痛大鼠模型疼痛行为学方面的影响以及延髓内脏带中即刻早期基因c-fos和胶质原纤维酸性蛋白(Glial Fibrillary Acidic Protein,GFAP)在针刺镇痛中的表达及其意义。方法:雄性SD大鼠32只,随机分为空白对照组、内脏痛组、电针组和电针后内脏痛组,每组8只。将0·6%乙酸(V/V,10mL/kg)注射入大鼠腹腔内造成内脏痛模型。电针取双侧“足三里”穴,断续波,频率50Hz,强度2~5V,持续30min。观察并计算各组动物的疼痛指数(visceral painindex,VPI)后处死动物,延髓切片进行抗Fos蛋白或抗GFAP单一或双重标记的免疫组织化学染色,观察并记数c-fos和GFAP在中枢延髓内脏带内的表达。结果:内脏痛组和电针后内脏痛组出现典型的扭体反应,其中内脏痛组更明显,而空白对照组和电针组大鼠行为学无变化。各组c-fos阳性神经元、GFAP阳性星形胶质细胞表达主要位于延髓内脏带内孤束核、迷走神经背侧运动核。除了空白对照组,内脏痛组、电针组和电针后内脏痛组中c-fos和GFAP表达明显增高;3组之间比较,c-fos和GFAP表达内脏痛组最高,电针后内脏痛组其次,电针组最低(P<0·01)。结论:电针“足三里”穴对内脏痛模型大鼠的疼痛具有良性调节作用,其机制可能与其调节延髓内脏带内免疫阳性神经元和星形胶质细胞的功能活动有关。     

电针上巨虚、天枢穴对溃疡性结肠炎大鼠延髓Fos和GFAP表达的影响

目的:观察电针上巨虚穴和天枢穴对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜损伤与延髓内Fos和GFAP免疫反应表达的影响。方法:40只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、溃疡性结肠炎组(UC组)、UC+电针上巨虚穴组(上巨虚穴组)、UC+电针天枢穴组(天枢穴组)、UC+电针三阴交穴组(三阴交穴组),每组8只。采用三硝基苯磺酸乙醇液灌肠法诱导建立UC大鼠模型。实验结束后观察记录结肠黏膜大体形态损伤程度,取延髓组织切片进行抗Fos/抗GFAP双标记(标记神经元和星型胶质细胞)免疫组织化学染色。结果:针刺干预后,UC大鼠结肠黏膜损伤明显减轻,以上巨虚穴和天枢穴组减轻更明显,而三阴交穴组变化不明显;免疫组化观察发现各组Fos阳性神经元和GFAP阳性星型胶质细胞主要表达在延髓孤束核(NTS)内,以UC组表达最高,而上巨虚穴和天枢穴组表达最低,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:电针上巨虚穴和天枢穴对溃疡性结肠炎大鼠有治疗作用,延髓NTS内免疫阳性神经元和星形胶质细胞参与了此作用。     

NEURONS DISCHARGE AND C-FOS EXPRESSION IN NTS FOLLOWING ELECTROACUPUNCTURE AT ACUPOINTS OF STOMACH MERIDIAN OF FOOTYANGMING

The nucleus of solitary tract(NTS) is a primary center for both visceral afferents and somatic afferents.Previous experiments demonstrated that NTS is associated with the connection of the stomach and acupoints in Stomach Meridian of Foot-Yangming(ST Meridian).In this study, extracellular recording and immunochemistry method were used to analyze the discharging neurons and c-Fos protein expression in NTS after electroacupuncture at different acupoints and non-acupoint.A total of 104 discharging neurons were detected in the NTS of 52 rats, of which, 86 were provided with complete data.After acupuncturing at Sibai(ST2), Zusanli(ST36), Neiting(ST44), Quanliao(SI18) and non-acupoint, the response neuron occurring rates(RNORs) in NTS were 65.12%, 51.16%, 46.51%, 34.88% and 31.40% respectively.For RNORs, there was a significant difference among Sibai(ST2), Zusanli(ST36), Neiting(ST44), Quanliao(SI18) and nonacupoint(P0.01 or P0.05).Accordingly, in other 48 rats, the number of c-fos immunoreactive(c-fos-IR) neurons in the NTS after electroacupuncture(EA) at Sibai(ST2) was significantly higher than that of at other acupoints and non-acupoint(P0.05 or P0.01).Both EA at Zusanli(ST36) and Neiting(ST44) increased c-fos-IR neurons significantly compared with that of at Quanliao(SI18) and non-acupoint(P0.05 or P0.01), while there was no difference between EA at Quanliao(SI18) and nonacupoint(P0.05).The experiments demonstrated that the afferent convergence in NTS is different by body surface point stimulus, which suggested that NTS might be a primary center in the central nervous system(CNS) which received acupoint stimulus from ST Meridian.     

Neuron Discharge and c-Fos Expression in the Nucleus of the Solitary Tract Following Electroacupuncture at Acupoints of the Yangming Stomach Meridian of Foot

The nucleus of the solitary tract (nucleus tractus solitarii; NTS) is a primary center for both visceral afferents and somatic afferents. Previous experiments have demonstrated that the NTS is closely connected to the stomach and acupoints in the Yangming Stomach Meridian of Foot (ST Meridian). In this study, extracellular recording and immunochemistry methods were used to analyze the discharge of neurons and c-Fos protein expression in the NTS following acupuncture at different acupoints and a nonacupoint. A total of 104 discharging neurons were detected in the NTS of 52 rats, of which 86 provided complete data. After acupuncture at Sibai (ST 2), Zusanli (ST 36), Neiting (ST 44), Quanliao (SI 18), and the nonacupoint, the neuron response rate in the NTS was 65.12%, 51.16%, 46.51%, 34.88% and 31.40% respectively. For neuron response rate, there was a significant difference among Sibai (ST 2), Zusanli (ST 36), Neiting (ST 44), Quanliao (SI 18), and the nonacupoint (p < 0.01 or p < 0.05). In the other 48 rats, the number of c-Fos immunoreactive neurons in the NTS by electroacupuncture (EA) at Sibai (ST 2) group was significantly higher than that EA at other acupoints and the nonacupoint (p < 0.05 or p < 0.01). EA at both Zusanli (ST 36) and Neiting (ST 44) increased c-Fos immunoreactive neurons significantly over EA at Quanliao (SI 18) and the nonacupoint (p < 0.05 or p < 0.01), while there was no difference between EA at Quanliao (SI 18) and the nonacupoint group (p > 0.05). The experiments demonstrated that the afferent convergence in NTS are different by body surface points stimulus, which suggests that the NTS might be a primary center in the central nervous system receiving acupoints stimulus from the ST Meridian.     

NEURON DISCHARGE AND C-FOS EXPRESSION IN NUCLEUS OF THE SOLITARY TRACT FOLLOWING ELECTROACUPUNCTURE AT ACUPOINTS OF STOMACH MERIDIAN OF FOOT-YANGMING

Objective: The nucleus of the solitary tract(NTS) is a primary center for both visceral afferents and somatic afferents.Previous experiments demonstrated that NTS is associated with connection of the stomach and acupoints in the Stomach Meridian of Foot-Yangming(ST Meridian).In this study, an extracellular recording and immunochemistry method was used to analyze the neuron discharge and c-fos protein expression in the NTS following acupuncture at different acupoints and non-acupoint.Methods: A total of 104 discharging neurons were detected in the NTS of 52 rats, of which, 86 were provided with complete data.Results: After acupuncture at Sibai(ST2), Zusanli(ST36), Neiting(ST44), Quanliao(SI18) and non-acupoint, the response neuron occurring rates(RNORs) in the NTS were 65.12%, 51.16%, 46.51%, 34.88% and 31.40%, respectively.For RNOR,there was a significant difference among ST2, ST36, ST44, SI18 and non-acupoint(P0.01 or P0.05).Accordingly, in other 48 rats, the number of c-fos immunoreactive(c-fos-IR) neurons in the NTS after electroacupuncture(EA) at ST2 was significantly higher than at other acupoints and non-acupoint(P0.05 or P0.01).Both EA at ST36 and at ST44 increased c-fos-IR neurons significantly as compared with EA at SI18 and non-acupoint(P0.05 or P0.01), while there was no difference between EA at SI18 and at non-acupoint groups(P0.05).Conclusion: The experiment demonstrated that the afferent convergence in the NTS was different by body surface point stimulus, which suggested that NTS might be a primary center in the central nervous system receiving acupoint stimulus from ST Meridian.     

辣椒素处理对电针“四白”穴诱导三叉神经脊束核尾侧亚核c-fos表达的影响

目的:探讨四白穴针刺效应的传入途径。方法:SD大鼠36只,随机分成空白组、假手术组、辣椒素组、溶媒组、电针"四白"穴+辣椒素组、电针"四白"穴+溶媒组。游离一侧眶下神经,辣椒素组将浸泡有1.5%辣椒素的棉条包绕在眶下神经上。溶媒组用浸泡在溶媒中的棉条包绕在眶下神经上。采用免疫组化技术观察三叉神经脊束核尾侧亚核(cSTN)的c-fos表达。结果:空白组在cSTN各层可见到零星、散在的阳性细胞。溶媒组、辣椒素组以及假手术组cSTN的c-fos阳性细胞数与空白组相似。电针"四白"穴+溶媒组c-fos在cSTN内主要集中在浅层(Ⅰ-Ⅱ层),其阳性细胞的数量明显多于其余各组(P<0.01);cSTN的深层(Ⅲ-Ⅳ层)c-fos数量多于空白组、溶媒组和假手术组(P<0.01,P<0.05,P<0.05)。电针"四白"穴+辣椒素组cSTN的Ⅰ-Ⅱ板层的c-fos阳性细胞数与电针"四白"穴+溶媒组相比明显减少(P<0.01),但cSTN的Ⅲ-Ⅳ板层的c-fos阳性细胞数与电针"四白"穴+溶媒组相比无明显变化(P>0.05)。结论:C纤维可能是四白穴针刺效应(调节胃功能活动)的主要传入途径。     

电针足阳明经穴对家兔胃粘膜损伤细胞保护作用的研究

本实验采用无水乙醇灌胃造成胃粘膜损伤后 ,分别电针足阳明经“四白”、“梁门”、“足三里”三个不同段代表穴 ,及“足三里”外 2cm的对照点 ,观察其对胃粘膜损伤后的细胞保护作用 ,以证实足阳明经与胃的相关性。结果发现 ,分别电针“四白”、“梁门”、“足三里”7日后 ,均能使胃粘膜损伤指数显著降低。电针“足三里”后 ,胃液及胃粘膜PGE2 与其他各组比较均显著增高 (P <0 0 5或 0 0 1 ) ,血清NO与模型组、电针“足三里”外 2cm组比较亦见明显增高 (P <0 0 5) ;电针“四白”、“梁门”、“足三里”以及空白组胃粘膜EGF与未经电针的模型组比较均有显著差异 (P <0 0 5或0 0 1 )。提示 ,电针家兔足阳明经不同节段的腧穴均对胃粘膜损伤细胞有保护作用 ,其中以“足三里”最满意 ,说明足阳明经与胃具有相关性 ,与此同时 ,同一经脉的穴位对相关脏腑的作用亦有着相对的特异性     

c-fos在电针调控大鼠胃运动中的表达及其意义

目的 :探讨原癌基因c fos在穴位电针对胃运动影响中的表达及其意义。方法 :采用免疫组织化学方法及电生理的方法 ,观察电针刺激“足三里”等不同穴位 ,c fos在中枢延髓的孤束核(NTS)及迷走神经背运动核 (DMV)中的表达 ,同时采用浆膜法检测胃电变化情况。结果 :电针刺激“足三里”等不同穴位c fos在NTS及DMV中的表达情况不同 ,且胃电也发生较为明显的变化。结论 :穴位电针对胃运动具有调节作用。以c fos的表达作为激活标志 ,提示这种调节作用可能是通过对NTS及DMV神经元的激活而实现的