淫羊藿苷对维生素D缺乏大鼠肾上腺皮质CYP17A1mRNA表达及皮质醇的影响

目的观察淫羊藿苷对维生素D缺乏大鼠血清25(OH)D_3、1,25(OH)D_3、皮质醇及肾上腺皮质CYP17A1mRNA表达的影响。方法选用60只雄性SD大鼠,随机分为正常组,模型组[生理盐水4.0ml/(kg·d)灌胃],淫羊藿苷高剂量组[120mg/(kg·d)灌胃],淫羊藿苷中剂量组[60mg/(kg·d)灌胃],淫羊藿苷低剂量组[30mg/(kg·d)灌胃],维生素D组[30mg/(kg·d)灌胃]。造模1月后,药物干预2月,酶联免疫法(ELISA法)检测血清25(OH)D_3、1,25(OH)D_3、皮质醇;Real-Time PCR法检测肾上腺皮质CYP17A1mRNA表达。结果与正常组比较,模型组血清25(OH)D_3、1,25(OH)D3含量下降(P0.05),皮质醇含量下降(P0.05);淫羊藿苷干预后血清25(OH)D_3、1,25(OH)D3、皮质醇含量均上升(P0.05)。Real-Time PCR显示,模型组肾上腺皮质CYP17A1mRNA表达量下调(P0.05),淫羊藿苷干预后表达量均上调(P0.05)。结论淫羊藿苷可能改善维生素D缺乏大鼠皮质醇的分泌。     

淫羊藿苷对D-半乳糖致衰老大鼠肾脏VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达的影响

目的目的:探讨淫羊藿苷对D-半乳糖致衰老大鼠肾脏VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为6组:对照组,衰老模型组,淫羊藿苷低、中、高剂量组,维生素D组。Elisa法观察大鼠血清25(OH)D_3与1,25(OH)_2D_3水平,Real-Time QPCR法观察大鼠肾脏VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达。结果Elisa结果显示模型组的血清25(OH)D_3与1,25(OH)_2D_3水平均相对对照组降低(P0.05),维生素D组与部分淫羊藿苷不同剂量组的血清25(OH)D_3与1,25(OH)_2D_3水平相对衰老模型组上升(P0.05)。Real-Time QPCR结果显示相比对照组,模型组大鼠肾脏CYP27B1与VDR表达下降(P0.05),CYP24A1表达上升(P0.05);相比模型组,维生素D组与淫羊藿苷不同剂量组的大鼠肾脏CYP27B1与VDR基因相对模型组表达上升(P0.05),CYP24A1则相对下降(P0.05)。结论淫羊藿苷可以干预衰老大鼠维生素D活化表达水平,提示淫羊藿苷抗衰老作用可能与维生素D轴有关。     

衰老大鼠肾上腺皮质VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达变化以及淫羊藿苷的干预作用

目的:探讨淫羊藿苷对D-半乳糖致衰老大鼠肾上腺皮质VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为6组:对照组,衰老模型组,淫羊藿苷低、中、高剂量组,维生素D组。ELISA法观察大鼠血清25(OH)D_3,1,25(OH)_2D_3水平,Real-Time QPCR法观察大鼠肾上腺皮质VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达。结果:ELISA结果显示模型组的血清25(OH)D_3与1,25(OH)_2D_3水平均相对对照组降低(P0.05),维生素D组与部分淫羊藿苷不同剂量组的血清25(OH)D_3与1,25(OH)_2D_3水平相对衰老模型组上升(P0.05)。Real-Time QPCR结果显示相比对照组,模型组大鼠肾上腺皮质CYP27B1与VDR表达下降(P0.05),CYP24A1表达上升(P0.05);相比模型组,维生素D组与淫羊藿苷不同剂量组的大鼠肾上腺皮质CYP27B1与VDR基因相对模型组表达上升(P0.05),CYP24A1则相对下降(P0.05)。结论:淫羊藿苷可以通过影响相关基因表达上调衰老大鼠肾上腺皮质的维生素D活化水平。     

淫羊藿苷对H295R细胞维生素D系统相关蛋白表达及孕酮、孕烯醇酮分泌的影响

目的:探讨淫羊藿苷对人肾上腺皮质细胞(H295R细胞)维生素D系统及孕酮、孕烯醇酮相关基因表达的影响。方法:MTT法检测不同浓度的淫羊藿苷和维生素D对H295R细胞增殖率的影响。ELISA法检测孕酮、孕烯醇酮分泌水平。RT-qPCR检测VDR、CYP27B、CYP24A、CYP17A1、CYP21 mRNA表达。Western blot法检测VDR、CYP27B、CYP24A蛋白表达。结果:淫羊藿苷10~(-8) mol/L浓度,维生素D在0.25×10~(-11) mol/L和0.5×10~(-11) mol/L浓度,对H295R细胞增殖无显著影响。而淫羊藿苷10~(-4) mol/L,维生素D在2×10~(-11) mol/L和4×10~(-11) mol/L浓度时对H295R细胞增殖存在一定抑制作用。与对照组比较,维生素D组与淫羊藿苷10~(-5) mol/L、10~(-6) mol/L组的VDR、CYP27B mRNA与蛋白表达明显上调,维生素D组与淫羊藿苷10~(-6) mol/L、10~(-7) mol/L组的CYP24A mRNA与蛋白表达则明显下调,维生素D组与淫羊藿苷各剂量组孕酮、孕烯醇酮分泌水平均明显下降,维生素D组与淫羊藿苷10~(-6) mol/L组CYP17A1、CYP21 mRNA表达均明显上调。结论:淫羊藿苷可能通过调节H295R细胞维生素D系统对孕酮、孕烯醇酮合成分泌产生影响。     

淫羊藿苷对异丙肾上腺素诱导的肥大HL-1心肌细胞维生素D受体mRNA表达的影响

目的探讨淫羊藿苷对异丙肾上腺素诱导的小鼠肥大HL-1心肌细胞维生素D受体mRNA相对表达量的影响。方法以2×10~4·ml~(-1)密度接种细胞,用异丙肾上腺素诱导小鼠HL-1心肌细胞损伤,实验分为正常组、模型组、淫羊藿苷低剂量组、淫羊藿苷中剂量组、淫羊藿苷高剂量组、维生素D组。MTT法检测各组HL-1心肌细胞存活率。RealTime PCR法检测各组HL-1心肌细胞维生素D受体mRNA相对表达量。结果 MTT法显示不同剂量的淫羊藿苷均可提高小鼠肥大HL-1心肌细胞的存活率,且淫羊藿苷的浓度在10μmol·L-1时,细胞存活率最高。Real-Time PCR检测结果显示,与模型组比较,不同剂量的淫羊藿苷均可明显下调(P0.05)异丙肾上腺素诱导的小鼠肥大HL-1心肌细胞维生素D受体mRNA相对表达量。结论淫羊藿苷对小鼠肥大HL-1心肌细胞具有保护作用,其机制可能通过维生素D轴调节VDR mRNA表达水平有关。     

淫羊藿苷对异丙肾上腺素诱导H9C2细胞心肌重塑模型CYP27B,维生素D受体mRNA表达的影响

目的探讨淫羊藿苷对异丙肾上腺素诱导H9C2大鼠心肌细胞心肌重塑模型CYP27B与维生素D受体mRNA表达的影响。方法将H9C2细胞随机分为6个组:对照组,模型组,淫羊藿苷0.1μmol/L+模型组,淫羊藿苷1μmol/L+模型组,淫羊藿苷10μmol/L+模型组,淫羊藿苷100μmol/L+模型组,利用浓度为80μmol/L的异丙肾上腺素(ISO)进行造模。MTT法观察H9C2心肌细胞增殖活性,Real-Time QPCR法检测CYP27B与维生素D受体mRNA表达。结果 MTT结果显示与对照组相比模型组细胞存活率下降(P0.05),经过淫羊藿苷处理后细胞存活率提高(P0.05)。Real-TimeQPCR显示模型组CYP27B与维生素D受体基因mRNA表达量相对对照组均降低(P0.05),不同浓度淫羊藿苷作用后CYP27B与VDR基因表达量相对模型组则上升(P0.05)。结论淫羊藿苷可以通过调节维生素D轴对异丙肾上腺素诱导的H9C2细胞心肌重塑模型产生保护作用。     

淫羊藿苷对衰老大鼠肾上腺皮质CYP24A1、CYP27B1、CYP19A1、CYP17A1基因mRNA表达影响

目的探讨淫羊藿苷对D-半乳糖致衰老大鼠肾上腺皮质CYP24A1、CYP27B1、CYP19A1、CYP17A1基因mRNA表达的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为6组:正常组,衰老模型组,淫羊藿苷低、中、高剂量组,维生素D组。Elisa法观察大鼠血清25(OH)D3水平,高效液相检测大鼠血清DHEA、睾酮水平,Real-TimeQPCR法观察大鼠肾上腺皮质CYP24A1、CYP27B1、CYP19A1、CYP17A1基因mRNA表达。结果 Elisa结果显示模型组大鼠血清25(OH)D3水平相对于正常组降低(P0.05),淫羊藿苷不同剂量组以及维生素D组相对于模型组升高(P0.05)。高效液相显示模型组的血清DHEA、睾酮水平均相对正常组降低(P0.05),维生素D组与部分淫羊藿苷不同剂量组的血清DHEA、睾酮水平相对衰老模型组上升(P0.05)。Real-TimeQPCR结果显示相比正常组,模型组大鼠肾上腺皮质CYP27B1、CYP19A1、CYP17A1表达下降(P0.05),CYP24A1表达上升(P0.05);相比模型组,维生素D组与淫羊藿苷不同剂量组的大鼠肾上腺皮质CYP27B1、CYP19A1、CYP17A1基因相对模型组表达上升(P0.05),CYP24A1则相对下降(P0.05)。结论衰老大鼠体内肾上腺皮质性激素相关基因表达水平下调同时衰老大鼠肾上腺皮质维生素D活化与作用降低,淫羊藿苷可以提高衰老大鼠肾上腺皮质维生素D活化与作用水平同时增加衰老大鼠肾上腺皮质性激素相关基因表达与生成。     

淫羊藿苷对H9C2细胞心肌肥厚模型CYP24A、肾素RENIN、脑钠肽BNP基因表达的影响

目的:探讨淫羊藿苷对异丙肾上腺素诱导H9C2大鼠心肌细胞心肌肥大模型CYP24A,肾素RENIN,脑钠肽BNP基因mRNA表达的影响。方法:将H9C2细胞随机分为7个组:正常组,模型组(异丙肾上腺素ISO),模型+淫羊藿苷4个剂量组,模型+维生素D组进行干预。Real-Time QPCR法检测CYP24A,RENIN,BNP基因mRNA表达。结果:Real-Time PCR显示异丙肾上腺素(ISO)模型组的CYP24A基因表达量下调(P<0.05),BNP与RENIN表达量上调(P<0.05);不同浓度的淫羊藿苷+ISO组,CYP24A的表达量相比模型组均有不同程度上调(P<0.05),BNP与RENIN基因的表达与模型组相比则发生下调(P<0.05);ISO+维生素D组的RENIN和BNP的表达量相对模型组均下调(P<0.05),CYP24A组则上调(P<0.05)。结论:淫羊藿苷可能通过调节维生素D轴对抗RAS激活对异丙肾上腺素诱导的肥厚H9C2心肌细胞产生保护作用。     

密骨打老儿丸对去卵巢骨质疏松大鼠腰椎和肾脏维生素D受体mRNA表达的影响

目的探讨密骨打老儿丸(打老儿丸加淫羊藿、骨碎补、补骨脂、菟丝子等)对去卵巢骨质疏松大鼠生化指标的影响。方法 72只SD雌性大鼠,随机分为6组:假手术组、模型组、维生素D3(2 mg/kg)组和密骨打老儿丸小、中、大剂量组。假手术组仅行假手术,其余5组分别行卵巢切除术。术后1周分别灌胃给予密骨打老儿丸和维生素D33个月。采用酶联免疫吸附法检测血清1,25-二羟基维生素D3(1,25(OH)2D3)水平。测定股骨骨密度,采用实时荧光RT-PCR测定第2腰椎和肾脏组织维生素D受体(VDR)mRNA表达。结果与假手术组相比,模型组股骨骨密度、血清和肾脏1,25(OH)2D3、腰椎和肾脏组织VDR mRNA表达均下降。与模型组比较,密骨打老儿丸中、大剂量组和维生素D3组均可使股骨骨密度、血清和肾脏1,25(OH)2D3、腰椎和肾脏组织VDR mRNA表达增加。结论密骨打老儿丸和维生素D3显著提高去卵巢大鼠腰椎和肾脏组织VDR mRNA表达,促进肠钙吸收与成骨细胞活性,增强骨质量。     

维生素D轴:淫羊藿干预女性生殖系统疾病的潜在靶点

维生素D轴由活性维生素D、VDR及CYP27A1、CYP27B1、CYP24A1等酶组成,除能改善骨骼系统疾病外,还对女性生殖系统有着较好的调节作用。淫羊藿具有补肾壮阳、祛风除湿之功效,常用于治疗女性不孕、月经不调、卵巢早衰等症。基于课题组前期研究发现,淫羊藿与维生素D轴存在密切关联。据此推测,淫羊藿可能是通过调节机体维生素D轴的表达水平治疗女性生殖系统疾病,维生素D轴可能是中药淫羊藿干预女性生殖系统疾病的潜在靶点。     

维生素D缺乏的认识与处理

19世纪，维生素D缺乏被认定为工业化城市中儿童流行性佝偻病的病因。这个发现导致了多种食物的营养强化，并解决了一个与雏生素D相关的重要健康问题。而最近的研究表明：维生素D的缺乏和不足与各年龄段人群的其他病理状态有关。在骨骼发育、骨健康保养和神经肌肉功能方面，维生素D都扮演着重要角色。     

维生素D预防应用后儿童维生素D缺乏及中毒情况随访

目的：随访0～1岁婴儿补充维生素D后维生素D缺乏及中毒的情况。方法：2011年1月～2013年1月对前来进行儿童保健的500名儿童在半月时开始补充VitD,并定期随访,于6月及1岁时分别进行血肝功、碱性磷酸酶、钙、磷及C反应蛋白的化验检查。结果：经过口服维生素D预防后佝偻病的患病率极低,且均为早期,无典型临床表现,予以维生素D3治疗后基本上都恢复正常;无维生素D中毒。结论：临床工作中补充维生素D500-1000单位既可预防维生素D缺乏,又不会出现维生素D中毒。     

黄芪对维生素D缺乏大鼠骨质的保护作用

目的：观察黄芪对维生素D 缺乏大鼠骨质的保护作用。方法：选用30只雄性SD大鼠,随机分为3组：对照组、模型组、黄芪组。实验周期8周。实验结束后,酶免法检测血清25羟维生素D3[25（OH）VD3]、成纤维生长因子-23[FGF-23]、Klotho,股骨HE 染色。结果：与正常对照组比较,维生素D 缺乏大鼠模型组血清25（OH）VD3、Klotho降低,FGF-23升高,存在骨质疏松。与模型组比较,黄芪组血清25（OH）VD3、FGF-23降低,Klotho升高;黄芪组骨质疏松明显改善。结论：黄芪具有调节维生素D 缺乏大鼠FGF-23、Klotho,保护骨质作用。     

固表止汗方洗浴联合维生素D 滴剂治疗维生素D 缺乏性佝偻病临床研究

目的：观察固表止汗方洗浴联合维生素D 滴剂治疗肺脾气虚型维生素D 缺乏性佝偻病（VDDR） 的临床疗效。方法：选取60 例肺脾气虚型VDDR 患儿，按随机数字表法分为对照组与观察组各30 例。研究 过程中，对照组剔除4 例，观察组剔除5 例，最终纳入研究对照组26 例，观察组25 例。对照组给予维生素D 滴剂治疗，观察组在对照组基础上给予固表止汗方洗浴治疗，2 组均治疗1 个月。比较2 组临床疗效，血钙、 血磷、25-羟基维生素D［25（OH） VD］、碱性磷酸酶（ALP） 水平与中医证候积分，观察2 组治疗前后汗出情 况。结果：治疗后，观察组临床疗效总有效率92.00%，高于对照组65.38%（P＜0.05）。2 组中医证候积分均 较治疗前降低（P＜0.05），观察组中医证候积分低于对照组（P＜0.05）。2 组血钙、25（OH） VD 水平均较治 疗前升高（P＜0.05），ALP 水平均较治疗前降低（P＜0.05）。2 组血磷水平与治疗前比较，差异均无统计学意 义（P＞0.05）。治疗后，观察组ALP 水平低于对照组（P＜0.05），25（OH） VD 水平高于对照组（P＜0.05）， 2 组血钙、血磷水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。观察组对汗出的改善效果优于对照组（P＜ 0.05）。结论：固表止汗方洗浴联合维生素D 滴剂治疗肺脾气虚型VDDR 的临床疗效优于单独使用维生素D 滴 剂治疗，可有效缓解患儿的临床症状，降低ALP 水平，提高25（OH） VD 水平。     

龙牡壮骨颗粒治疗维生素D缺乏性佝偻病的临床研究

目的:研究龙牡壮骨颗粒对维生素D缺乏性佝偻病的临床疗效性及安全性。方法:对50例维生素D缺乏性佝偻病患儿给予龙牡壮骨颗粒口服治疗,观察患儿治疗前后疾病及中医证候疗效的改变情况等。结果:疾病疗效、中医证候疗效好转率都达到88%。头部、胸骨骨骼畸形、牙齿迟出前后证候积分差异无统计学意义(P0.05)。下肢骨骼畸形用药前后证候积分差异有统计学意义(P0.05)。食欲食量、面色、汗证、肌肉、毛发、精神、夜惊、枕秃用药前后证候积分有统计学意义(P0.01)。结论:龙牡壮骨颗粒对维生素D缺乏性佝偻病的临床疗效显著,对面色、汗证、肌肉、毛发、精神、夜惊、枕秃症状有明显改善作用,临床上有很好的应用价值及前景。     

维生素D对树突状细胞分化的调节在心肌重塑中的机制探讨

心肌重塑是冠心病、高血压、心肌炎等心血管系统疾病共同的病理机制。心血管系统疾病的免疫发病机制的提出,为心肌重塑防治提供新的理论依据及思路。维生素D在心肌重塑中存在多途径、多靶点的作用,是有效防治心血管疾病的潜在靶点。树突状细胞与Th17/Treg均参与心血管疾病的心肌重塑,树突状细胞分化对Th17/Treg的平衡存在调节作用。维生素D在免疫调节方面具有多元化特征,能够通过影响树突状细胞的分化和成熟进而干预Th17/Treg的平衡。由此推测,维生素D可能影响树突状细胞分化对Th17/Treg平衡调节在心肌重塑中发挥重要作用。深入探讨维生素D在免疫方面对心肌重塑的干预机制,为中医药进行心血管疾病的防治及药物作用靶点的探索提供新的思路。     

从维生素D轴探讨巴戟天抗抑郁症的作用机制

通过非关联文献情报发现工具ARROWSMITH发现巴戟天与抑郁症以及维生素D轴的关联文献,并对文献统计研究,提示巴戟天可调节人体维生素D轴,其治疗抑郁症的机制可能与维生素D轴有关。     

维生素D与“肾藏精主生殖”的功能探讨

随着对人体生殖功能与维生素D内分泌系统之间作用机制的深入研究,维生素D除了调节钙磷代谢的功能外,与人类生殖也具有密切关系。维生素D缺乏会出现两性生殖功能异常。中医学认为肾藏精主生殖,生殖功能异常与肾虚证之间存在一定的联系。对维生素D的作用机制与肾藏精主生殖的相关性研究予以阐述和探讨。     

维生素D受体基因多态性与成人迟发自身免疫型糖尿病的相关性研究

目的：探讨维生素D受体（VDR）基因BsmI酶切位点多态性与深圳市成人迟发性自身免疫性糖尿病（LADA）的关系。方法：对25例LADA、32例2型糖尿病（T2DM）患者和30例正常人（NC）采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCRRFLP）技术分析VDR—Bsm I位点基因型。结果：T2DM患者VDR基因B等位基因频率明显高于正常对照纲（20-3％vs．6．7％，P〈0．05），基因犁Bb明显高于正常对照组（40．6％vs．13．3％，P〈0．05），基因型bb明显低于止常对照组（59．4％vs．86．7％，P〈0．05）；LADA患者Bb基因型频率以及B等位基因频率与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：VDR基因BsmI位点多态性与LADA易感性可能无关，但与T2DM的易感性密切相关。