云南不同产地粗茎秦艽中四种无机元素含量研究

目的研究云南不同产地粗茎秦艽中Fe、Mn、Cu、Zn 4种无机元素的含量。方法采用火焰原子吸收光谱法进行测定。结果该方法的加标回收率为95.8~110.3%,RSD2.42%,具有良好的准确度和精密度;粗茎秦艽中4种无机元素含量均较为丰富,不同产地粗茎秦艽中各元素的含量均有一定差异,但基本表现为FeMnZnCu。结论测定结果可为粗茎秦艽无机元素与药效关系的研究提供科学依据。     

新疆地产秦艽中龙胆苦苷含量比较

秦艽是临床上用于祛风除湿、和血舒筋、清热利尿的常用中药材。《中国药典》2000年版收载有龙胆科秦艽(大叶秦艽,又称大叶龙胆)Gentiana macro-phylla Pall.、麻花秦艽 C.straminea Maxim.、粗茎秦艽(又称粗茎龙胆)G.crassicaulis Duthie ex Burk.或小叶秦艽 G.dahurica Fisch.等4种。新疆是秦艽主产区之一,据《新疆中药资源普查名录》记载新疆龙胆科植物有秦艽和龙胆等13种。本研究用HPLC法测定5种秦艽药材有效成分龙胆苦苷含量,并与药典收载的加以比较,为新疆秦艽药用植物开发利用     

云南丽江产粗茎秦艽栽培品种的品质评价

目的:对云南丽江粗茎秦艽栽培品种的品质进行评价。方法:对原植物进行分类学鉴定并参照2005年版国家药典有关含测方法测定10批栽培品种的龙胆苦苷含量;同时采集3批野生粗茎秦艽做对照,同法测定,比较该地区栽培品种与野生药材的龙胆苦苷含量。结果:丽江栽培秦艽为粗茎秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.;13批样品的龙胆苦苷含量均大于中国药典限量(2.0%)。结论:丽江栽培的粗茎秦艽品质良好。     

粗茎秦艽醇提物体内外经皮渗透性研究

目的建立粗茎秦艽Gentianacrassicaulis透皮吸收液中多种环烯醚萜类化学成分含量测定方法,并对粗茎秦艽体内外经皮渗透特性进行研究,为粗茎秦艽经皮给药制剂的研发、临床用药和传统剂型改革提供科学依据。方法在课题组前期研究的基础上,采用醇提法制备粗茎秦艽提取液,选用3种常用的透皮促渗剂氮酮、冰片和丙二醇,利用HPLC定量评价单一促渗剂或二元复合促渗剂对粗茎秦艽中马钱苷酸、山栀苷甲酯、獐芽菜苦苷、龙胆苦苷和獐芽菜苷5种主要成分的体外经皮渗透特性的影响;以龙胆苦苷、马钱苷酸和獐芽菜苦苷3种成分为评价指标研究粗茎秦艽醇提物在活体小鼠皮肤模型的渗透特性。结果与对照组相比,促渗剂的使用可显著增加粗茎秦艽中5种主要成分的体外吸收,A(5%氮酮)、B(5%冰片)、C(5%丙二醇)、A+B(2.5%氮酮+2.5%冰片)、A+C(2.5%氮酮+2.5%丙二醇)、B+C(2.5%冰片+2.5%丙二醇)5组中马钱苷酸、山栀苷甲酯、獐芽菜苦苷、龙胆苦苷和獐芽菜苷的透皮吸收速率(J)分别可达12.306 0、1.248 8、4.187 5、153.0300、5.0126μg/(cm~2·h),促渗效果分别是对照组的9.73、2.57、13.94、15.92、8.08倍。其中,A+C组,即2.5%氮酮+2.5%丙二醇组体外促渗效果最为明显。体内经皮渗透实验表明,与空白组对比,2.5%氮酮+2.5%丙二醇组对于活体小鼠皮肤的促渗透效果表现较好。结论氮酮和丙二醇对粗茎秦艽中马钱苷酸、山栀苷甲酯、獐芽菜苦苷、龙胆苦苷和獐芽菜苷5种主要成分有良好的促渗透效果,为研究粗茎秦艽经皮给药制剂质量控制奠定基础。     

秦艽组6种植物的ISSR扩增结果分析

目的:采用ISSR分子标记技术对中国药典所列秦艽的4种基原植物秦艽、麻花秦艽、粗茎秦艽和小秦艽及其近缘种黄管秦艽、管花秦艽进行分子鉴定和亲缘关系分析,以期在DNA分子水平上为黄管秦艽和管花秦艽作为秦艽替代品使用的科学性和合理性提供一定的参考。方法:筛选出8条重复性好、扩增条带清晰的引物用于所有样品的PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳分析,使用NTSYSpc-2.10E软件计算相似系数并绘制聚类图。结果:ISSR指纹图谱共检测到9条种间特异性条带,可用来鉴定除小秦艽以外的5个种的秦艽;秦艽替代品黄管秦艽和小秦艽最先聚在一起,管花秦艽与小秦艽、麻花秦艽的亲缘关系更近,粗茎秦艽与其他5个种的秦艽存在较远的亲缘关系。结论:基于ISSR分子标记的聚类分析结果支持黄管秦艽和管花秦艽作为秦艽的替代品使用。     

云南粗茎秦艽斑枯病病原鉴定

目的:明确云南种植的粗茎秦艽斑枯病的发生规律及病原菌的分类地位,以期为该病的防治提供依据。方法:通过田间调查掌握该病发生的基本规律,经组织分离、柯赫氏法则验证获得病原菌,依据真菌的形态特征和ITS序列特征确定其分类地位。结果:基于真菌形态和ITS序列特征,粗茎秦艽斑枯病病原被鉴定为小孢壳针孢Septoria microspora,该病在云南粗茎秦艽主要种植区普遍发生。结论:小孢壳针孢Septoria microspora是粗茎秦艽斑枯病病原菌。     

不同生长年限粗茎秦艽地下部分龙胆苦苷含量分析

采用高效液相法分析了栽培不同生长年限粗茎秦艽的龙胆苦苷含量,研究结果表明三年生粗茎秦艽地下部分龙胆苦苷的含量高,实验结果表明人工种植粗茎秦艽的龙胆苦苷含量均高于药典规定,为栽培品的开发利用扩大提供了可靠的理论依据。     

云南野生抚育粗茎秦艽药材的品质评价

目的: 研究野生抚育粗茎秦艽药材的有效成分和化学指纹图谱,以期评价其质量,为粗茎秦艽药材的GAP种植提供科学依据。 方法: 采用Zorbax SB C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,流动相甲醇-水,梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,检测波长238 nm,柱温为25 ℃。利用国家药典委员会出版的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004 A版软件,对15批3年生野生抚育粗茎秦艽药材进行指纹图谱分析。 结果: 15批粗茎秦艽药材环烯醚萜苷类有效成分及浸出物含量符合2010年版《中华人民共和国药典》要求,各样地药材化学指纹色谱相似度>0.981,质量均一性好。 结论: 方法具有良好的精密度、重复性、稳定性,可用于粗茎秦艽药材的质量综合评价。野生抚育模式药材可作为粗茎秦艽主要种植发展模式,对云南建设"云药之乡"和发展道地药材具有重要的现实意义。     

粗茎秦艽道地药材及土壤中有机质与无机元素的分析

目的探讨粗茎秦艽道地药材土壤环境因子的特性。方法于云南省丽江和玉龙纳西族自治县采集粗茎秦艽野生品与栽培品原植物标本、道地药材及其土壤样品,采用原子吸收分光光谱法、重铬酸钾容量法等测定有机质及微量元素含量等。结果获得粗茎秦艽药材野生品、栽培品及其土壤中有机质与14种无机元素含量测定数据,其中药材中所含重金属及有害元素,野生品除铜的含量略高外,其他指标均符合国家药典相关要求,栽培品品质良好;各品种生长土壤主要指标均达到国家土壤一级标准;该物种根部对磷的吸收富集显现较高趋势。结论本研究可为粗茎秦艽道地药材的规范化种植以及种质资源评价提供基础资料。     

秦艽组六种药用植物根的形态组织比较研究

目的:比较龙胆科龙胆属秦艽组的6种药用植物(秦艽Gentiana macrophylla Pall.、粗茎秦艽G.crassicaulis Duthie ex Burk.、麻花秦艽G.straminea Maxim.、小秦艽G.dahurica Fisch.、黄管秦艽G.officinalis H.Smith和管花秦艽G.siphonantha Maxim.ex Kusnez.)的药用形态及显微鉴别特征,为中药秦艽真伪鉴别提供依据。方法:采用徒手切片法对主根的上、中、下3个部位分别做横切片,进行显微观察;根粉末经水合氯醛加热透化后显微观察。结果:粗茎秦艽根上、中、下部都没有中柱裂分。秦艽、小秦艽、黄管秦艽的根只有上部有中柱裂分;麻花秦艽和管花秦艽的根上、中、下都是完全分离的小根纠聚在一起。粉末鉴别中,小秦艽、麻花秦艽和管花秦艽都有大量的厚壁细胞,但形状不同。其他3个种没有发现厚壁细胞。结论:秦艽组6种药用植物根的形态组织显微结构有较大差异,可为中药秦艽的鉴别提供依据。     

达乌里秦艽化学成分的研究

秦艽为常用中药,是众多祛风湿方剂的主要原药材。其来源于龙胆科龙胆属(Gentiana L.)秦艽组植物。该组植物全世界约20种,我国有17种,作为药用的有12种,《中国药典》2005年版将其中的秦艽Gentiana m acrophy lla Pall.、麻花秦艽G.stram inea M ax im.、粗茎秦艽G.crassicau lis     

基于UPLC-ESI-HRMS~n的代谢组学技术对粗茎秦艽不同部位化学成分研究

目的分析粗茎秦艽Gentiana crasicaulis不同部位化学成分的差异。方法运用四级杆-静电场轨道阱高分辨液质联用(UPLC-ESI-HRMSn)技术对粗茎秦艽不同部位的化学成分进行采集,所得数据运用主成分分析(PCA)法与正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)处理,粗茎秦艽不同部位的差异指标成分通过精准的一级质谱质荷比和二级质谱碎片离子同对照品图谱和软件数据库搜索以及相关文献报道成分进行判别分析。结果共鉴定36个成分,包括环烯醚萜类12个、黄酮类11个、三萜类4个、酯类2个、木脂素类1个、其他类6个,其中4个成分首次在该植物中报道,通过OPLS-DA,筛选出根与地上部分间16个差异性较大的化学成分。结论粗茎秦艽环烯醚萜类差异成分主要分布于根部,而黄酮类和三萜类差异成分则主要集中于地上部分(花和茎叶),为粗茎秦艽资源的综合利用提供了依据。     

靶向轮廓分析核磁定量法测定4种秦艽中龙胆苦苷与马钱苷酸

目的:建立靶向轮廓分析核磁定量法(TP-q HNMR)同时测定秦艽、麻花艽、粗茎秦艽、小秦艽4种秦艽中龙胆苦苷、马钱苷酸的含量。方法:采集龙胆苦苷、马钱苷酸标准核磁共振氢谱,采用Chenomx NMR suit自建龙胆苦苷与马钱苷酸核磁共振氢谱数据库;秦艽药材采用甲醇超声法提取,提取液吹干以氘代甲醇复溶,同等条件下于记录核磁共振氢谱;基于Chenomx对谱图进行预处理与靶向轮廓分析定量;并采用HPLC-UV法验证TP-q HNMR法测定结果。结果:基于Chenomx的TP-q HNMR法测定秦艽中龙胆苦苷与马钱苷酸含量测定结果准确可靠,与HPLC-UV法无显著差异。所考察的4种秦艽中龙胆苦苷与马钱苷酸含量高低依次为:粗茎秦艽秦艽麻花艽小秦艽。结论:所建立的TP-q HNMR法准确、可靠,可用于秦艽的质量控制,促进了核磁定量技术在中药质量控制中的应用。     

濒危药用植物麻花秦艽和粗茎秦艽cpDNA提取研究

目的：对麻花秦艽和粗茎秦艽叶绿体基因组进行提取研究,为进一步研究秦艽叶绿体的基因组序列特征、遗传多样性以及资源保护研究奠定基础。方法：本文以麻花秦艽、粗茎秦艽为对象,采用改良的蔗糖密度梯度离心方法进行提取,优化纯化方法,分离得到秦艽叶绿体后测定cpDNA浓度,检测其OD值并扩增ITS2序列验证其纯度。结果：获得高质量、高纯度的cpDNA（0．1～0．4μg／10g）,扩增ITS2序列验证其无核污染,满足后续测序要求。结论：cpDNA的纯度和质量对叶绿体基因组测序的正确率和可信度具有重要的影响。本文获得了高纯度、高质量的秦艽cpDNA,为秦艽叶绿体基因组全序列的获得提供保障。     

中药秦艽生态适宜性区划研究

为了预测中药秦艽在我国的生态适宜区分布,寻找影响适宜性分布的主要生态因子,该研究通过实地调查及网络共享平台数据获取313份秦艽、186份麻花艽、343份小秦艽和131份粗茎秦艽的分布信息,利用Max Ent模型和Arc GIS技术,综合55项环境因子,分析影响中药秦艽生态适宜性的主要环境因子。分别分析影响4个种的主要环境因子后认为,降水量和海拔对4个种生态适宜性分布均产生主要影响。秦艽生态适宜区主要集中甘肃南部、山西全省、陕西中部和青海东部;麻花艽生态适宜区主要集中在甘肃西南部、青海东部、四川北部及西北部和西藏东部;小秦艽生态适宜区主要集中在甘肃西南及南部、青海东部、山西全省和陕西北部;粗茎秦艽生态适宜区主要集中在四川和云南北部,西藏东部、甘肃南部和青海东部也有分布。秦艽药材的生态适宜性区划结果与每种来源的秦艽实际分布相一致。该研究可以为中药秦艽野生资源的收集、保护和栽培区域的选择提供参考依据。     

濒危药用植物麻花秦艽和粗茎秦艽cpDNA 提取研究

目的：对麻花秦艽和粗茎秦艽叶绿体基因组进行提取研究,为进一步研究秦艽叶绿体的基因组序列特征、遗传多样性以及资源保护研究奠定基础。方法：本文以麻花秦艽、粗茎秦艽为对象,采用改良的蔗糖密度梯度离心方法进行提取,优化纯化方法,分离得到秦艽叶绿体后测定cpDNA 浓度,检测其OD 值并扩增ITS2 序列验证其纯度。结果：获得高质量、高纯度的cpDNA (0.1~0.4 μg/10 g),扩增 ITS2 序列验证其无核污染,满足后续测序要求。结论：cpDNA 的纯度和质量对叶绿体基因组测序的正确率和可信度具有重要的影响。本文获得了高纯度、高质量的秦艽cpDNA,为秦艽叶绿体基因组全序列的 获得提供保障。     

秦艽亟需保护与发展

秦艽为龙胆科植物秦艽，药用根，中国《药典》中收载有四种：秦艽（Gentiana macrophylla Pall．）、麻花秦艽（Gentiana atramiea Mxicm．）和粗茎秦艽（Gentiana．crassicautis Duthie．ex Burk．）及小秦艽（Gentiana dahutina Fisch．），药用和商品上同功混用。为祛风除热、活血止痛、关节拘弯、手足不遂等病的要药。《神农本草经》中为中品，是中国药材公司原确定的76种大宗药材之一。     

秦艽及其伪品的比较鉴别

秦艽为常用中药 ,我国九五版药典收载秦艽为龙胆科植物 :1 )秦艽 Gentiana macrophylla Pall.,2 )麻花秦艽 G.straminea Maxim.,3)粗茎秦艽G. crassiculis Duthie ex Burk.,4)小秦艽 G.dahurica Fisch.的干燥根。在商品中 ,将秦艽、粗茎秦艽统称为大秦艽 ,根据性状 ,又分别叫鸡腿艽、萝卜艽、牛尾艽 ,将麻花秦艽又叫麻花艽或辫子艽。近些年来 ,商品中麻花艽出现了混淆品即伪品。如西藏黑秦艽 G.waltonii Burkill的根、毛茛科乌头尾植物牛扁 Aconitum ochranthum C.A.Mey.的根、唇形科植物甘肃丹参 Salvia przewalskii Max-im.的根 (…     

秦艽亟需保护与发展

秦艽为龙胆科植物秦艽，药用根，中国《药典》中收载有四种：秦艽（Gentiana macrophylla Pall．）、麻花秦艽（Gentiana atramiea Mxicm．）和粗茎秦艽（Gentiana．crassicautis Duthie．ex Burk．）及小秦艽（Gentiana dahutina Fisch．），药用和商品上同功混用。为祛风除热、活血止痛、关节拘弯、手足不遂等病的要药。《神农本草经》中为中品，是中国药材公司原确定的76种大宗药材之一。     

UPLC-Q-Exactive四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用快速分析粗茎秦艽化学成分

目的利用UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪联用技术,对粗茎秦艽块根中的化学成分快速识别和鉴定。方法以100%甲醇作为提取液制备供试液,采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,质谱采用正负离子监测模式、全扫描及自动触发二级质谱扫描的功能,快速识别和鉴定粗茎秦艽中的化学成分。结果通过高分辨数据共鉴定34个化学成分,包括环烯醚萜类13个、黄酮类5个、酯类5个、三萜类3个、有机酸类2个、苯丙素类1个、其他类5个,其中12个成分经与对照品比对而准确鉴定,15个化学成分为首次从该植物中分得。结论 UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用技术可以快速鉴定粗茎秦艽中的化学成分,为粗茎秦艽化学成分的提取分离及其药效物质基础提供科学依据。