HPLC同时测定脉络宁注射液中8种主要成分的含量

目的:建立用高效液相色谱法梯度洗脱同时测定脉络宁注射液中绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、肉桂酸、3,4-二-O-咖啡酰基奎宁酸,3,5-二-O-咖啡酰基奎宁酸,4,5-二-O-咖啡酰基奎宁酸含量的方法,并对3个批次脉络宁注射液中上述8种化合物进行定量分析。方法:流动相乙腈-0.8%醋酸,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,柱温30℃,检测波长λ1=327 nm(绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3,4-二-O-咖啡酰基奎宁酸,3,5-二-O-咖啡酰基奎宁酸,4,5-二-O-咖啡酰基奎宁酸),λ2=278 nm(肉桂酸);进样量为10μL。结果:绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、肉桂酸、3,4-二-O-咖啡酰基奎宁酸,3,5-二-O-咖啡酰基奎宁酸,4,5-二-O-咖啡酰基奎宁酸的线性范围分别为2.57～25.7(r=0.999 7),2.05～20.5(r=0.999 7),2.26～22.6(r=0.999 9),1.92～19.2(r=0.999 9),1.16～11.6(r=0.999 7),2.282～22.82(r=0.999 8),1.839～18.39(r=0.999 8),2.194～21.94(r=0.999 7)mg·L-1,加样回收率分别为95.26%(RSD 1.21%),96.03%(RSD 1.09%),97.25%(RSD 2.18%),100.98%(RSD 1.98%),97.44%(RSD 2.38%),97.78%(RSD 2.24%),98.37%(RSD 2.15%),95.82%(RSD2.30%)。结论:方法简便、快捷,准确、重复性好,可为脉络宁注射液提供质量控制依据。     

基于HPLC特征图谱及4种咖啡酸衍生物定量分析的蒙药材蓝刺头质量评价研究

目的:建立蒙药材蓝刺头HPLC特征图谱及咖啡酸、3,4-O-双咖啡酰基奎宁酸、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸以及1,5-O-双咖啡酰基奎宁酸4种成分的定量分析方法,为该蒙药材的质量评价和控制提供科学依据。方法:以甲醇-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为331 nm,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min,进样量为10μL,对16批蒙药蓝刺头药材进行特征图谱研究,利用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2004 A版)"进行评价,并对色谱峰进行指认。对药材特征图谱中的咖啡酸、3,4-O-双咖啡酰基奎宁酸、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸以及1,5-O-双咖啡酰基奎宁酸4种咖啡酸衍生物进行含量测定。结果:建立了蒙药材蓝刺头的HPLC特征图谱分析方法及16批药材的共有模式,并指认了其中8个特征峰,同时建立了4个咖啡酸衍生物的含量测定方法,咖啡酸在10.848～108.48 ng、3,4-O-双咖啡酰基奎宁酸在17.712～177.12 ng、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸在13.260～132.60 ng以及1,5-O-双咖啡酰基奎宁酸在24.672～246.72 ng的范围内线性关系良好,r均大于0.9950,平均加样回收率分别为99.87%、99.93%、100.62%、99.75%。结论:该研究建立的HPLC特征图谱结合多成分含量测定方法可为蒙药蓝刺头药材的质量控制提供科学依据。     

HPLC法同时测定灯盏细辛注射液中10种成分

目的建立HPLC法同时测定灯盏细辛注射液(灯盏细辛)中5-咖啡酰基奎宁酸、绿原酸、4-咖啡酰基奎宁酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酸酰奎宁酸、野黄芩苷、异绿原酸B、3,5-二咖啡酰基奎宁酸、灯盏花甲素、4,5-二咖啡酰基奎宁酸的含有量。方法该药物水提液的分析采用InertsilODS-3色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相0.4%磷酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.9 m L/min;柱温30℃;检测波长327 nm。结果 10种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 0),平均加样回收率94.11%~100.64%,RSD 1.12%~2.77%。结论该方法简便准确,重复性好,可用于灯盏细辛注射液的质量控制。     

菊花含量测定方法提高

目的:改进《中国药典》中菊花含量测定方法,使其中3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸与其同分异构体1,5-O-二咖啡酰基奎宁酸得到良好分离,提高测定结果准确性。方法:Inertsil ODS-3 C 18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇-0.2%冰醋酸溶液梯度洗脱,检测波长为348 nm,柱温30℃,流速1 mL/min,进样量10μL。结果:绿原酸、木犀草苷和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸分离良好,在12.583~314.582、12.595~314.878、15.599~389.978μg/mL的范围内呈现良好的线性关系(r=0.9999、1.0000、0.9995);平均加样回收率分别为98.21%、102.18%、97.77%,RSD为1.54%、0.99%、1.01%(n=6)。结论:该方法专属性强,准确、灵敏,解决了现行方法的问题。     

水朝阳草薄层色谱鉴别方法的建立

目的:建立水朝阳草的薄层色谱鉴别方法。方法:取本品粉末2 g,加石油醚(30~60℃)40 mL,超声处理20 min,弃去石油醚,药渣挥干,加稀盐酸1 mL与乙酸乙酯50 mL,超声处理40 min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇2 mL使溶解,作为供试品溶液。另取绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸对照品,加甲醇制成每1 mL各含1 mg的溶液,作为对照品溶液。将供试品溶液10μl、对照品溶液5μL点于聚酰胺薄膜上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(1∶15∶1∶1∶2)的上层溶液为展开剂,展开后,置紫外光灯(365 nm)下检视。结果:薄层色谱图谱检出绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸,且斑点清晰,专属性强。结论:该方法可作为水朝阳草的薄层鉴别方法。     

光叶丁公藤酚性成分研究

目的研究光叶丁公藤Erycibe schmidtii藤茎的化学成分。方法利用正、反相硅胶色谱柱、Sephadex LH-20色谱及半制备高效液相色谱等方法分离纯化,通过核磁共振波谱分析方法鉴定结构。利用NO相对生成率法对量较多的化合物进行抗炎活性检测。结果从光叶丁公藤藤茎95%乙醇提取物中分离得到12个化合物,分别鉴定为咖啡酸(1)、N-反式-对羟基苯乙基阿魏酰胺(2)、绿原酸(3)、绿原酸甲酯(4)、4-O-咖啡酰基奎宁酸(5)、4-O-咖啡酰基奎宁酸甲酯(6)、4,5-O-双咖啡酰基奎宁酸(7)、4,5-O-双咖啡酰基奎宁酸甲酯(8)、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸(9)、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸甲酯(10)、3,4-O-双咖啡酰基奎宁酸(11)、3,4-O-双咖啡酰基奎宁酸甲酯(12)。化合物1和2对RAW 264.7细胞释放NO显示出一定的抑制活性。结论化合物5~7、9、11、12为首次从该属植物中分离得到,化合物1、2、4~12为首次从该植物中分离得到。化合物1和2有一定抗炎活性。     

五味消毒饮HPLC指纹图谱建立及10种成分同时测定

目的建立五味消毒饮(金银花、蒲公英、野菊花等)HPLC指纹图谱,并同时测定新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、秦皮乙素、咖啡酸、木犀草苷、异绿原酸B、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸、蒙花苷的含量。方法该药物甲醇提取液的分析采用ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长320 nm。结果10批样品指纹图谱中有34个共有峰,相似度均大于0.970。10种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9998),平均加样回收率95.16%~104.50%,RSD 1.09%~4.90%。结论该方法准确可靠,重复性好,可用于五味消毒饮的质量控制。     

3种经典工艺生产的金银花提取物中绿原酸类成分含量比较

目的:比较3种经典工艺生产的金银花提取物中绿原酸、3,5-二咖啡酰基奎宁酸和总绿原酸的含量差异。方法:用经典的水-醇法、石-硫法和改良石-硫法生产金银花提取物,用高效液相-梯度洗脱法测定3种提取物中绿原酸和3,5-二咖啡酰基奎宁酸的含量,用分光光度法测定3种提取物中总绿原酸含量。结果:3种提取物中绿原酸含量分别为5.03、4.01、5.68,3,5-二咖啡酰奎宁酸含量分别为0.41、0.73、1.24,总绿原酸含量分别为13.53、19.85、27.87。结论:改良石-硫法生产的金银花提取物中绿原酸、3,5-二咖啡酰基奎宁酸和总绿原酸含量最高。     

大菟丝子及其清炒品中黄酮和有机酸类成分含量的比较

目的比较大菟丝子及其清炒品炮制前后7种成分的含有量。方法采用高效液相色谱法对大菟丝子及其清炒品中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、芦丁、异槲皮苷和3,5-二咖啡酰奎宁酸进行定量分析。结果指标性成分在测定范围内与峰面积线性关系良好(r≧0.9997);绿原酸和3,5-二咖啡酰奎宁酸在大菟丝子药材中的含量较高;大菟丝子清炒品中绿原酸和3,5-二咖啡酰奎宁酸的含量明显下降,咖啡酸、芦丁和异槲皮苷的含量也有所降低,新绿原酸和隐绿原酸的含量明显升高。结论该方法准确、稳定、可靠、重复性好,可为其炮制前后质量控制与深入研究提供参考。其中黄酮类成分的首次确认,可为大菟丝子作为菟丝子代用品提供依据。     

祁菊秸秆中奎宁酸酯类成分的分离与结构鉴定

[目的]对祁菊非药用部位秸秆70%乙醇提取物的化学成分进行研究,为提高现有药用植物资源的再生能力和内在质量奠定化学基础。[方法]利用正相硅胶、反相ODS、Sephadex LH-20等柱色谱及高效液相色谱等方法进行分离纯化,并通过理化性质及波谱分析鉴定化合物结构。[结果]从祁菊非药用部位秸秆70%乙醇提取物中分离鉴定了8个奎宁酸酯类单体化合物,分别为3-O-咖啡酰基奎宁酸(1),绿原酸甲酯(2),4-O-咖啡酰基奎宁酸(3),1,5-二咖啡酰基奎宁酸(4),1,4-二咖啡酰基奎宁酸(5),3,5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(6),3,4-二咖啡酰基奎宁酸(7),3,4-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(8)。[结论]化合物2为首次从该种植物中分离得到,3、5、6、8为首次从秸秆中分离得到。