转化生长因子β1在早期糖尿病肾病大鼠血清中的含量及其意义

糖尿病肾病(DN)早期的病理特点是肾脏肥大,肾小球基底膜增厚和以肾小球系膜区为主的细胞外基质(ECM)进行性积聚.分子生物学研究表明多种细胞因子参与其发病机制,其中转化生长因子β1(TGFβ1)在DN发生、发展中起着关键性作用.近年来实验和临床研究表明糖尿病(DM)状态下肾脏TGFβ1基因和蛋白表达增多[1],但DN早期TGFβ1在血清中的改变报道不多,为此本实验采用多次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠早期DN的动物模型来观察其在血清中的含量,旨在阐明其对早期DN的影响,为尽早防治DN寻求治疗措施.     

蛋白激酶C-α、蛋白激酶C-βⅠ和蛋白激酶C-βⅡ在糖尿病肾病患者肾小球中的表达及其意义

目的探讨蛋白激酶C（PKC）-α、PKC-βⅠPKC-βⅡ在人正常肾组织以及糖尿病肾病患者（DN）肾小球中的表达及其与肾小球内转化生长因子（TGF-βⅠ和血管内皮细胞生长因子（VEGF）的关系。方法以正常肾组织为对照，取糖尿病肾病患者活检肾组织，采用PAS染色判定肾小球细胞外基质（ECM）扩张程度，半定量免疫组织化学法检测PKC-α、PKC-βⅠPKC-βⅡ、TGF-βⅠVEGF在肾小球中的表达。结果（1）PKC-α、PKC-βⅠPKC-βⅡ在正常肾小球中均有表达；（2）糖尿病肾病患者肾小球中PKC-α、PKC-βⅠTGF-β1和VEGF的表达明显增强而PKC-βⅡ的表达明显减弱，且肾小球ECM明显增加。其中PKC-α与VEGF的表达变化呈正相关（r，=0．600，P=0．039），PKC-βⅠTGF-βⅠ表达呈正相关（r=0．521,P=0．043）。结论PKC-α、PKC-βⅠPKC-βⅡ在正常人以及DN患者肾小球中的表达不同；PKC-α可能通过增强肾小球内VEGF的表达，而PKC-βⅠ能通过增强肾小球内TGF-βⅠ表达参与DN的发病过程。     

PAI—1与糖尿病肾病

糖尿病肾病（DN）患者肾局部纤溶酶原激活物抑制物－1（PAI－1）表达增加，抑制了肾小球及肾小管间质细胞外基质（ECM）的降解，导致ECM进行性堆积，肾小球基底膜增厚，肾小球硬化。DN时血管紧张素Ⅱ在转录水平上可上调PAI－1基因表达，高糖增加PAI－1的含量和活性，且转化生长因子－β能诱导PAI－1的产生，从而导致肾小球硬化的发生。PAI－1抑制剂的应用将对防治DN起一定的作用。     

糖尿病肾病肾脏组织糖化终末产物的沉积及其与细胞表型转化的关系

目的观察糖基化终产物（AGEs）在肾脏组织中的沉积及其与肾脏固有细胞表型转化的关系。方法采用免疫组化染色法观察AGEs：羧甲基赖氨酸（CML）、吡咯素、戊糖苷素和细胞骨架蛋白：α-肌动蛋白（α-SMA）、L-收缩平滑肌蛋白（L-CLD）在28例2型糖尿病肾病（DN）患者肾活检组织（疾病组）的沉积，分析二者间及其与肾脏病理改变和临床表现的关系。4例增生硬化型IgA肾病及4例轻微病变型和2例正常肾组织作为对照组。结果（1）四组均可见CMI、吡咯素分别沉积在系膜区和肾间质，但对照组明硅弱于DN组；戊糖苷素只沉积在DN肾小球基底膜（GBM）。（2）系膜区α-SMA、LCLD的表达与戊糖苷素呈正相关，吡咯素的沉积与间质L-CLD有关。（3）α-SMA和L—CLD及戊糖苷素的沉积与肾小球硬化指数、间质纤维化百分数及蛋白尿、Scr正相关。结论戊糖苷素在GBM的沉积足糖尿病肾小球硬化的重要原因；AGEs对肾脏的影响部分可能是通过引起肾脏固有细胞的表型转化而起作用的。     

蛋白激酶C和TGF-β1在糖尿病大鼠肾脏中的表达

目的研究糖尿病大鼠肾小球中蛋白激酶C（PKC）活性变化和转化生长因子-β1（TGF-β1）的动态变化，探讨二者之间相互关系及其与糖尿病肾病（DN）发生发展的关系。方法用链脲佐菌素制备糖尿病大鼠实验模型，将大鼠随机分为正常对照组（N）、糖碌病2w组（DM2）和糖尿病4w组（DM4）。断头处死，分离肾小球，提取纯化胞浆及胞膜蛋白，利用（γ-32^P）-ATP底物磷酸化的方法检测胞浆及胞膜PKC括性。用免疫组织化学和400倍光镜检测TGF-β1在各组大鼠肾脏的表达。结果（1）糖尿病大鼠肾小球细胞内总的PKC活性与对照组无显著性差异，胞浆PKC活性略有下降，相差不显著；肾小球细胞膜PKC活性明显高于正常对照组，膜结合PKC百分比显著增加，且细胞膜PKC活性与肾脏肥大指数及Cer呈正相关。（2）糖尿病组TGF-β1的表达多于正常组。（3）肾小球细胞膜PKC活性与TGF-β1的表达正相关。结论高血糖慢性刺激可引起肾小球PKC活性增高，并诱导TGF-β1的表达。在糖尿病早期肾内血流动力学改变中发挥着重要的调控作用。     

TGF—β信号通路在糖尿病肾病中的作用

糖尿病肾病（DN）是糖尿病常见的慢性微血管并发症,是终未期。肾病的主要原因之一,其基本病理改变是肾小球肥大,细胞外基质（ECM）积聚、基底膜增厚,导致弥漫性或结节性肾小球硬化和肾问质纤维化,并最终发展为肾功能衰竭。发病机制复杂,至今尚未完全阐明。     

糖尿病肾病蛋白尿的发生机制

糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是导致终末期肾衰竭的重要原因。蛋白尿是DN最常见的临床表现，与DN的严重程度及病情进展密切相关。在发生糖尿病的最初几年为DN的潜伏期，主要表现为肾脏肥大及肾小球滤过率（GFR）增高，之后便向以微量白蛋白尿为首发临床表现的DN发展。     

大黄酸抑制TGF—β1诱导的肾小管上皮细胞肥大及细胞外基质产生

目的观察大黄酸对TGF-β1诱导的近端肾小管上皮细胞细胞肥大及细胞外基质(ECM)的影响。方法在体外以TGF-β1（2μg／L）刺激LLC-PK1细胞,诱导细胞肥大和ECM合成增加。与此同时,以不同浓度的大黄酸处理细胞,检测细胞体积,蛋白质含量以及3H-亮氨酸掺入以观察细胞肥大的变化;检测细胞孵育24h后上清的纤维连接蛋白(FN)含量,3H-脯氨酸掺入以及细胞胶原Ⅳ及FNmRNA的表达以观察大黄酸对ECM的影响。结果TGF-β1（2μg／L）刺激可以导致LLC-PK1细胞出现细胞肥大,表现为细胞体积,细胞内蛋白量及3H-亮氨酸掺入量明显增加。大黄酸处理后细胞体积及细胞内蛋白量明显降低。TGF-β1也明显增加LLC-PK1细胞3H-脯氨酸掺入量、培养上清中FN含量、以及细胞内胶原Ⅳ和FNmRNA的表达。大黄酸则抑制上述ECM合成的增加,明显降低细胞内胶原Ⅳ,FNmRNA表达水平。结论大黄酸可以逆转TGF-β1诱导的近端肾小管上皮细胞肥大,抑制TGF-β1刺激的ECM合成。这可能是大黄酸预防或改善糖尿病肾脏病变,延缓糖尿病肾病进展的作用机制之一。     

PAI-1与糖尿病肾病

糖尿病肾病 (DN)患者肾脏局部纤溶酶原激活物抑制物 1(PAI 1)表达增加 ,抑制了肾小球及肾小管间质细胞外基质 (ECM)的降解 ,导致ECM进行性堆积 ,肾小球基底膜增厚 ,肾小球硬化。DN时血管紧张素Ⅱ在转录水平上可上调PAI 1基因表达 ,高糖增加PAI 1的含量和活性 ,且转化生长因子 β能诱导PAI 1的产生 ,从而导致肾小球硬化的发生。PAI 1抑制剂的应用将对防治DN起一定的作用     

苦参碱对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的 探讨苦参碱对糖尿病(DM)大鼠肾脏的保护作用及机制.方法 采用单侧肾切除、腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病肾病(DN)大鼠模型,并设立正常对照(NC)组;DN对照(DN)组,苦参碱治疗组(MT)(100 mg·kg~(-1)·d~(-1)),腹腔给药8 w后处死所有大鼠,检测苦参碱对DM大鼠肾功能的影响,病理切片HE染色,观察肾脏病理改变,免疫组化检测肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)的表达水平.结果 与NC组大鼠比较,DN组大鼠尿蛋白排泄量增多,肾小球体积增加,血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)升高,肾组织TGF-β1表达上调(P<0.01).苦参碱明显减少DN大鼠尿蛋白排泄量,降低血清BUN、Cr水平(P<0.05,P<0.01),肾小球体积明显改善,肾组织TGF-β1表达明显下调(P<0.05,P<0.01).结论 苦参碱显著改善抑制肾脏TGF-β1表达,改善肾小球肥大,减轻蛋白尿,对DM大鼠肾损害具有保护作用.