大鼠动脉粥样硬化病变各阶段内皮依赖性舒张功能以及亲环素A表达的变化

目的:观察高脂饮食喂养大鼠动脉粥样硬化病变各阶段内皮依赖性舒张功能的改变以及亲环素A(Cy PA)的表达变化。方法:雄性Wistar大鼠30只随机分为4组,对照组(6只),动脉粥样硬化8周组(AS 8W组)8只,动脉粥样硬化12周组(AS 12W组)8只,动脉粥样硬化15周组(AS 15W组)8只。给予动脉粥样硬化组高脂饲料喂养,并给予维生素D3注射液60万IU/kg一次性腹腔注射,对照组给予基础饲料喂养。同期处死大鼠,分离腹主动脉,行苏木素伊红(HE)染色,免疫组化法检测动脉壁Cy PA的表达。另外截取约5 mm新鲜大鼠腹主动脉环,在离体器官浴槽中观察离体腹主动脉环对乙酰胆碱舒张反应。结果:随着造模时间的进展,各组大鼠分别呈现出了血管正常结构、内皮细胞破坏,平滑肌细胞增生、粥样斑块形成以及钙化斑块形成等不同的病变特征。内皮依赖性舒张功能进行性下降,对照组、AS 8W组、AS 12W组、AS 15W组最大舒张度分别为(93.46±2.80)%、(82.58±3.25)%、(61.19±3.72)%、(41.28±2.68)%,各组间差异均有统计学意义(P均0.05)。血管内皮细胞以及平滑肌细胞Cy PA的表达不断增加,四组大鼠Cy PA平均光密度测定分别为0.25±0.06、0.34±0.09、0.53±0.09、0.68±0.13,各组间比较差异均有统计学意义(P均0.05)。结论:Cy PA的表达随着病变进展不断增加,内皮依赖血管舒张功能进行性下降。Cy PA的表达与动脉粥样硬化病变严重程度有关。Cy PA可能是动脉粥样硬化的始动因素之一。     

肥胖合并动脉粥样硬化大鼠血管内皮依赖性舒张功能以及亲环素A和p-ERK1/2表达的变化

目的:观察肥胖合并动脉粥样硬化(动脉硬化)大鼠血管内皮功能的改变以及亲环素A(CyPA)和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)的表达变化。方法:雄性Wistar大鼠30只随机分为3组,对照组(10只)、动脉硬化组(10只),肥胖+动脉硬化组(10只)。对照组给予基础饲料+腹腔注射等量生理盐水;动脉硬化组基础饲料8周后给予高脂饲料+维生素D3注射液60万IU/kg一次性腹腔注射;肥胖+动脉硬化组给予高脂饲料(肥胖症模型,高脂喂养8周体重大于其余组大鼠20%)+维生素D3注射液60万IU/kg一次性腹腔注射。16周后测定血管内皮依赖性舒张功能;苏木素—伊红(HE)染色、免疫组化检测动脉血管壁CyPA及p-ERK1/2的表达。结果:与对照组相比,动脉硬化组、肥胖+动脉硬化组血管内皮依赖性舒张功能下降[(72.49±3.27)%vs(96.63±3.85)%],[(42.28±2.62)%vs(96.63±3.85)%],且肥胖+动脉硬化组下降更明显[(42.28±2.62)%vs(72.49±3.27)%],三组比较差异均有统计学意义(P均0.05)。HE染色显示,三组大鼠血管壁分别为正常结构,内皮细胞破坏、平滑肌细胞增生和粥样钙化斑块形成等不同程度病变特征。免疫组化提示三组大鼠血管内皮及平滑肌细胞内CyPA及p-ERK1/2表达逐渐升高,组间两两比较差异均有统计学意义(P均0.05)。结论:肥胖+动脉硬化组大鼠血管内皮依赖性舒张功能显著下降,动脉硬化钙化斑块严重,CyPA及p-ERK1/2表达显著增加。推测CyPA、p-ERK1/2信号机制参与肥胖症加重血管动脉硬化进展,肥胖可能是动脉硬化病变的独立危险因素。     

家兔动脉粥样硬化与血小板源内皮型氧化氮合酶表达的相关性

目的 探讨家兔动脉粥样硬化及斑块形成与血小板源内皮型氧化氮合酶(eNOS)表达的关系. 方法 设立模型组、治疗组和非治疗组及对照组,每组家兔6只.模型组、治疗组和非治疗组每天给予胆固醇饮食,至12周建立家兔动脉粥样硬化模型,建模后继续喂养至24周,同时治疗组服用普伐他汀10 mg/d;非治疗组仅给予普通饮食.实验终点剥离家兔主动脉观察大体和组织病理形态,反转录一聚合酶链式反应(RT-PCR)方法 检测血小板源eNOS/mRNA水平. 结果 模型组和非治疗组均可见明显动脉粥样硬化和(或)斑块形成;主动脉最大脂纹或斑块厚度占整个血管壁厚度的百分比,对照组、模型组、治疗组和非治疗组分别是0.04±0.02、0.82±0.16、0.33±0.18和0.77±0.14,治疗组与非治疗组比较,差异有统计学意义(F=33.759,P=0.001).血小板(2～4×108/ml)eNOS mRNA表达在对照组、模型组、治疗组和非治疗组分别是1.02±0.28、0.41±0.27、1.00±0.77、0.40±0.29,治疗组较非治疗组明显增高(F=3.544,P=0.02). 结论 血小板源eNOS表达与动脉粥样硬化及斑块的形成呈负相关;普伐他汀对动脉粥样硬化及斑块的逆转作用可能与血小板源eNOS有关.     

非酒精性脂肪性肝病大鼠肝X受体α基因表达变化及意义

目的研究NAFLD大鼠肝X受体α(LXRα)基因表达变化及意义。方法建立高脂饮食诱导NAFLD大鼠模型后,采用RT-RCR和Western blot法动态观察NAFLD大鼠肝组织中LXRα表达变化。结果4周时模型组大鼠血清游离脂肪酸含量达(0.33±0.03)mmol/L,对照组为(0.24±0.03)mmol/L,差异有统计学意义(P<0.05),随喂养时间延长逐渐升高,12周时模型组大鼠血清游离脂肪酸含量达(0.61±0.06)mmol/L,对照组为(0.25±0.01)mmol/L,差异有统计学意义(P<0.01)。血清ALT和AST含量在8周时模型组分别为75.8 U/L和138.9 U/L,对照组分别为54.8 U/L和81.4 U/L,差异有统计学意义(P<0.01),12周时模型组分别为102.3 U/L和179.1 U/L,对照组分别为54.3 U/L和79.2 U/L,差异有统计学意义(P<0.01)。2周时模型组大鼠肝组织中LXRα基因表达相对含量为0.62,对照组为0.33,差异有统计学意义(P<0.01),随着高脂饮食喂养时间的延长表达进一步增强,12周时模型组大鼠高达1.31,对照组为0.34,差异有统计学意义(P<0.01)。模型组大鼠肝组织中LXRα蛋白表达与基因表达趋势相同,与脂肪肝进展程度一致。结论LXRα基因表达变化与NAFLD的形成密切相关。     

局灶性脑缺血-再灌注大鼠脑中Küppel样转录因子2表达及核因子κB抑制剂的作用

目的探讨Küppel样转录因子2(KLF2)在大鼠局灶性脑缺血-再灌注(I/R)损伤后的表达及核因子κB(NF-κB)抑制剂的干预作用。方法取健康雄性SD大鼠60只,按照随机数字表法分为假手术组、I/R组、NF-κB抑制剂组,每组20只,采用大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑I/R模型,并给予NF-κB抑制剂——吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)进行干预,观察时间点为I/R后6、12、24、48 h。采用逆转录PCR及Western Blot测定缺血脑组织KLF2 mRNA及其蛋白的表达,采用ELISA法测定血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平并进行各组间的比较。结果与假手术组比较,I/R组6、12、24、48 h缺血脑组织中KLF2 mRNA及蛋白表达水平均降低(KLF2 mRNA相对表达量分别为:0.46±0.03比0.82±0.04,0.30±0.04比0.78±0.05,0.18±0.04比0.76±0.02,0.26±0.02比0.81±0.04;KLF2蛋白相对表达量分别为:0.46±0.04比0.80±0.02,0.30±0.02比0.79±0.02,0.15±0.02比0.77±0.01,0.24±0.01比0.79±0.02),I/R后24 h达最低值,而血清TNF-α水平升高,差异均有统计学意义(均P0.05);给予NF-κB抑制剂PDTC后,I/R后6、12、24、48 h KLF2 mRNA及蛋白表达水平较I/R组出现不同程度的上调,KLF2 mRNA相对表达量分别为0.61±0.04、0.44±0.03、0.34±0.02、0.43±0.04,KLF2蛋白水平的相对表达量分别为0.60±0.02、0.43±0.02、0.33±0.01、0.44±0.03,而TNF-α含量降低,差异均有统计学意义(均P0.05)。I/R组及PDTC组各时间点脑组织中KLF2 mRNA水平与血清中TNF-α水平呈负相关(r=-0.728,P0.05)。结论脑I/R后脑组织中KLF2 mRNA表达水平降低,且与血清TNF-α水平存在负相关,其可能通过NF-κB通路介导炎性反应参与脑I/R病理过程。     

香烟烟雾暴露对大鼠肺组织血小板衍生生长因子BB表达的影响

目的 研究烟雾暴露对大鼠肺组织血小板衍生生长因子BB(platelet derived growth factor-BB,PDGF BB)和核因子κB(nuclear factor-κB,NFκB) p65表达的影响,探讨烟雾暴露致大鼠肺动脉高压的发生机制.方法 雄性Wistar大鼠32只,随机分为对照组、烟雾暴露4、8、12周组,每组8只,制备各组烟雾暴露致肺动脉高压模型.RT-PCR方法检测PDGF-BB mRNA表达,免疫组织化学方法测各组大鼠肺组织PDGF-BB、NF-κBp65蛋白表达.结果 ①大鼠肺组织中PDGF BB mRNA相对表达量在烟雾暴露4周组(2.823±0.453)、8周组(4.015±0.052)、12周组(6.098±0.439)高于对照组(1.024±0.231),差异有统计学意义(P＜0.05);②大鼠肺组织中PDGF-BB蛋白相对表达量在烟雾暴露4周组(0.220±0.005)、8周组(0.367±0.004)、12周组(0.492±0.003)高于对照组(0.077±0.003),差异有统计学意义(P ＜0.05),NF-κBp65蛋白相对表达量在烟雾暴露4周组(0.330±0.003)、8周组(0.452±0.003)、12周组(0.596±0.003)高于对照组(0.186±0.001),差异有统计学意义(P＜0.05);③PDGF-BB蛋白的表达与PDGF-BB mRNA的相对表达量及与NF-κBp65蛋白的表达均呈正相关(r=0.686、r=0.501,P值均＜0.01).结论 烟雾暴露大鼠肺组织中PDGF-BB在转录和翻译水平表达均增高,且PDGF-BB和NFκB蛋白表达有相关性,提示PDGF-BB和NF-κB在烟雾暴露引起肺动脉平均压增高的过程中可能发挥了一定作用.     

高钠饮食对内皮源性血管活性物质水平的影响

目的观察高钠饮食下大鼠血浆和心肌组织中内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及eNOS mRNA等浓度,探讨高钠饮食下大鼠血管内皮系统的分子生物学机制。方法 SD大鼠84只随机分为2组:高钠饮食组(n=42),饮用含0.9%氯化钠盐水;对照饮食组(n=42),饮去离子水。适应性喂养2周,实验喂养8周。分别检测血浆及心肌组织ET-1、NO、eNOS浓度及心肌eNOSmRNA表达。结果高钠饮食组血钠及ET-1水平显著性高于对照组(P0.05),eNOS及NO显著性低于对照组(P0.05);高钠饮食组心肌组织NO、eNOS及eNOSmRNA显著性低于对照组(P0.05),心肌组织ET-1水平显著性高于对照组(P0.05)。结论此研究进一步说明高钠饮食通过影响血管内皮系统功能可引起动脉粥样硬化性血管病变及靶器官损害。     

Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1在动脉粥样硬化血管壁中的表达及其与基质金属蛋白酶2及转化生长因子1的相关性

目的 研究Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)在动脉粥样硬化血管壁中的表达及其与基质金属蛋白酶2(MMP2)、转化生长因子1(TGF-β1)的相关性。方法 选择30只载脂蛋白E基因敲除小鼠为实验组,高脂饲料喂养,另选30只C57BL/6小鼠为对照组,普通饲料喂养。在喂养的第10、16、22、28及34周,取眼球血监测小鼠血脂水平;取小鼠腹主动脉作为标本,包埋切片并进行苏木精-伊红染色观察血管壁形态;应用免疫组化染色观察血管壁中ROCK1、MMP2、TGF-β1的表达;使用Image Pro Plus 6.0软件测量切片中血管壁厚度、斑块面积、血管壁中ROCK1、MMP2及TGF-β1的表达量。采用SPSS 27.0统计软件进行数据分析。采用单因素方差分析进行组间比较,两两比较采用Tukey检验。采用Pearson相关与线性回归分析ROCK1与血管壁厚度及斑块面积、MMP2、TGF-β1的关系。结果 成功建立动脉粥样硬化小鼠模型。在喂养第10、16、22、28及34周,实验组血脂水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。自喂养第16周起,实验组小鼠血管内均有斑块形...     

局灶性脑缺血-再灌注大鼠脑中Kuppel样转录因子2表达及核因子κB抑制剂的作用

目的：探讨Kuppel样转录因子2（KLF2）在大鼠局灶性脑缺血-再灌注（I／R）损伤后的表达及核因子κB（ NF-κB）抑制剂的干预作用。方法取健康雄性SD大鼠60只,按照随机数字表法分为假手术组、I／R组、NF-κB抑制剂组,每组20只,采用大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑I／R模型,并给予NF-κB抑制剂———吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（ PDTC）进行干预,观察时间点为I／R后6、12、24、48 h。采用逆转录PCR及Western Blot测定缺血脑组织KLF2 mRNA及其蛋白的表达,采用ELISA法测定血清中肿瘤坏死因子α（ TNF-α）水平并进行各组间的比较。结果与假手术组比较,I／R组6、12、24、48 h缺血脑组织中KLF2 mRNA及蛋白表达水平均降低（ KLF2 mRNA相对表达量分别为：0.46±0.03比0.82±0.04,0.30±0.04比0.78±0.05,0.18±0.04比0.76±0.02,0.26±0.02比0.81±0.04;KLF2蛋白相对表达量分别为：0.46±0.04比0.80±0.02,0.30±0.02比0.79±0.02,0.15±0.02比0.77±0.01,0.24±0.01比0.79±0.02）,I／R后24 h达最低值,而血清TNF-α水平升高,差异均有统计学意义（均P<0.05）;给予NF-κB抑制剂PDTC后,I／R后6、12、24、48 h KLF2 mRNA及蛋白表达水平较I／R组出现不同程度的上调,KLF2 mRNA相对表达量分别为0.61±0.04、0.44±0.03、0.34±0.02、0.43±0.04,KLF2蛋白水平的相对表达量分别为0.60±0.02、0.43±0.02、0.33±0.01、0.44±0.03,而TNF-α含量降低,差异均有统计学意义（均 P<0.05）。I／R组及PDTC组各时间点脑组织中KLF2 mRNA水平与血清中TNF-α水平呈负相关（ r=—0.728,P<0.05）。结论脑I／R后脑组织中KLF2 mRNA表达水平降低,且与血清TNF-α水平存在负相关,其可能通过NF-κB通路介导炎性反应参与脑I／R病理过程。     

香烟烟雾暴露对大鼠肺组织缺氧诱导因子1α表达的影响

目的 研究烟雾暴露对大鼠肺组织缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible faetor-1α,HIF-1α)和核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB) p65表达的影响,探讨烟雾暴露致大鼠肺动脉高压的发生机制.方法 雄性Wistar大鼠32只,随机分为对照组、烟雾暴露4、8、12周组,每组8只,制备各组烟雾暴露模型.右心导管法测肺动脉平均压(mPAP),并计算右心肥厚指数(RVHI),荧光定量PCR测各组大鼠肺组织HIF-1α mRNA,免疫组织化学方法测各组大鼠肺组织HIF-1α、NF-κB p65蛋白表达.结果 ①大鼠mPAP烟雾暴露8周组[(14.700±1.125) mm Hg]、12周组[(17.830±2.437)mm Hg]明显高于对照组[(10.670±1.125)mm Hg],差异有统计学意义(P＜0.05);烟雾暴露12周组大鼠RVHI(0.260±0.006)高于对照组(0.220±0.020),差异有统计学意义(P＜0.05);②大鼠肺组织中HIF-1αmRNA相对表达量在烟雾暴露8周组(1.170±0.211)、12周组(1.360±0.185)高于4周组(0.920±0.141)及对照组(0.760±0.137),差异有统计学意义(P＜0.05);③各烟雾暴露组大鼠肺血管平滑肌中HIF-1α及NF-κBp65蛋白的表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);④HIF-1α蛋白的表达与mPAP、RVHI、HIF-1α mRNA的相对表达量及NF-κBp65蛋白的表达均呈正相关(r=0.688、r =0.497、r =0.706、r =0.583,P值均＜0.01).结论 HIF-1α和NF-κB在烟雾暴露大鼠肺组织中表达均增高,HIF-1α和NF-κB在烟雾暴露引起肺动脉平均压增高的过程中可能发挥了一定作用.     

己酮可可碱对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织线粒体解耦联蛋白表达的影响

目的 探讨己酮可可碱(PTX)对非酒精性脂肪肝性肝病(NAFLD)大鼠线粒体解耦联蛋白(UCP)-2 mRNA表达的影响. 方法 SD大鼠60只,正常喂养1周后随机分为3组,每组20只.其中对照组20只,以普通饲料喂养,实验组和干预组各20只,以高脂饲料喂养,干预组高脂饮食4周后,在饮水中加用已酮可可碱(PTX)(100 mg·Kg-1·d-1),于第24周处死,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测肝脏UCP-2mRNA的表达. 结果 对照组大鼠肝脏UCP2mRNA呈微量表达(1.2±0.1),实验组大鼠肝脏UCP2mRNA呈强表达(4.0±0.3),干预组大鼠肝脏UCP2mRNA呈弱表达(3.0±0.2),3组间UCP-2mRNA表达差异有统计学意义(F=160.67,P＜0.01). 结论 己酮可可碱可下调NAFLD大鼠肝细胞UCP-2mRNA的表达.     

戒烟对烟雾暴露大鼠肺血管结缔组织生长因子及基质金属蛋白酶-2表达的影响

目的 观察烟雾暴露后戒烟对大鼠肺血管结缔组织生长因子(CTGF)与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响,探讨吸烟对肺血管重塑的作用.方法 雄性SD大鼠40只,随机分为对照组(C组)、烟雾暴露4周组(S1组)、烟雾暴露4周戒烟4周组(Q1组)、烟雾暴露12周组(S2组)、烟雾暴露12周戒烟4周组(Q2组),每组8只.造模成功后取肺组织,HE染色测定肺血管管壁厚度占血管外径的百分比(WT％)及管壁面积占血管总面积的百分比(WA％),免疫组化染色检测肺血管壁CTGF及MMP-2蛋白的表达,RT-PCR法测定CTGF及MMP-2 mRNA的表达,并分析其相关性.结果 ①WT％及WA％比较:S1组[(42.48±6.17)％、(62.21±5.79)％]与S2组[(51.84±8.88)％、(74.09±10.51)％]均高于C组[(30.21±8.51)％、(48.82±10.78)％],S2组高于S1组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05)；Q1组[(31.86±5.74)％、(50.76±11.15)％]低于S1组,Q2组[(40.54±11.87)％、(63.39±10.95)％]低于S2组,高于Q1组及C组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05)；Q1组与C组比较差异无统计学意义(P＞0.05).②CTGF蛋白及mRNA表达:S1组(0.269±0.041、1.725±0.529)与S2组(0.388±0.034、2.541±0.945)均高于C组(0.204±0.046、0.716±0.439),S2组高于S1组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05)；Q1组(0.225±0.036、1.018±0.571)低于S1组,Q2组(0.303±0.039、1.903±0.881)低于S2组,高于Q1组及C组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05)；Q1组与C组比较差异无统计学意义(P＞0.05).③MMP-2蛋白及mRNA表达:S1组(0.388±0.041、1.167±0.639)与S2组(0.578±0.387、3.721±0.825)均高于C组(0.190±0.022、0.276±0.256),S2组高于S1组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05)；Q1组(0.202±0.036、0.548±0.297)低于S1组,Q2组(0.395±0.039、2.934±0.683)低于S2组,高于Q1组及C组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05)；Q1组与C组比较差异无统计学意义(P＞0.05).④CTGF蛋白与mRNA、MMP-2蛋白与mRNA均呈正相关(r值分别为0.816、0.663,P值均＜0.05)；CTGF与MMP-2蛋白呈正相关(r=0.608,P＜0.05)；CTGF、MMP-2蛋白分别与WT％及WA％呈正相关(r值为0.627～0.690,P值均＜0.05).结论 戒烟可减轻烟雾暴露大鼠的肺血管重塑.     

大鼠血清高密度脂蛋白对动脉粥样硬化的抵抗作用

目的探讨大鼠血清高密度脂蛋白(HDL)对动脉粥样硬化(AS)的抵抗作用及可能机制。方法将24只体质量在200 g左右的SD大鼠随机分为实验组和对照组,每组各12只,均行胸腹主动脉球囊血管成形术,实验组术前1周开始给予高脂喂养。取术前1周、术后2周和6周大鼠静脉血做血脂检测,行胸主动脉组织形态学分析,行免疫组化染色检测三磷酸腺苷结合盒转运子A1(ABCA1)的表达。结果 (1)实验组高脂喂养后血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)显著增高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)轻度升高,HDL-C/LDL-C比值由高脂喂养前的(6.21±0.87)降至术后2周的(0.70±0.25)和术后6周的(0.30±0.05),呈时间依赖性下降(均为P0.05)。(2)术后2周,两组均可见胸主动脉内弹力板断裂,新生内膜形成,实验组见内膜脂质沉积,但未见脂质斑块形成;术后6周,实验组可见新生内膜增厚明显,并粥样斑块形成,内膜/中膜面积百分比和管腔面积狭窄率均大于对照组,但差异无统计学意义(11.85%±4.86%比9.13%±7.66%,3.39%±1.50%比2.59%±2.12%,均为P0.05)。(3)双因素相关分析,内膜/中膜面积百分比和管腔面积狭窄率与HDL-C/LDL-C比值均呈负相关。(4)实验组术后2周和6周血管内膜及中膜ABCA1表达水平均高于对照组[2周:(50.5±3.1)比(38.8±2.5);6周:(35.6±2.8)比(20.4±5.1),P均0.05]。结论大鼠具有很高的血清HDL储备能力,在一定时间内,具有抵御高LDL-C致AS的作用,其机制可能与血清高HDL水平促进ABCA1表达,增强血管壁泡沫细胞胆固醇逆转运和延缓粥样斑块形成有关。     

过氧化物酶体增殖物激活受体在代谢综合征大鼠血管重构和功能改变中的作用

目的 研究代谢综合征(MS)大鼠主动脉过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)表达与血管重构和功能改变的关系.方法 健康8周龄雄性Wistar大鼠30只随机分为正常对照组(n=15)和MS组(n=15).MS组大鼠高脂饮食喂养24周建立MS模型.喂养连续期间检测鼠尾血压、血糖、胰岛素、血脂,24周喂养结束行葡萄糖耐量试验和高胰岛素-正常血糖钳夹试验,然后处死动物,取部分腹主动脉组织行HE染色和油红O染色,观察组织形态学改变,用图像分析系统测定内膜及中膜面积;应用多道生理仪测血管反应性,评价血管功能.取主动脉组织采用Western blot方法检测PPARγ、PPARδ和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达.结果 1)MS组体质量、内脏脂肪、血压、血浆三酰甘油(TG)显著增加(P<0.05或P<0.01),且存在严重的胰岛素抵抗[GIR(1.3±0.8) vs (7.0±1.7)mg/(kg·min),P<0.01]和糖耐量减退,表现为典型的MS特征;2)与对照组相比,MS组大鼠主动脉内皮依赖和非依赖舒张功能减退;3)与对照组相比,MS组大鼠主动脉内膜增厚,中膜层平滑肌细胞增殖明显,内膜面积/中膜面积值增高,油红染色显示动脉粥样硬化明显;4)MS组大鼠主动脉PPARγ蛋白表达明显高于对照组,而PPARδ和eNOS表达明显减低.结论 MS大鼠主动脉结构重构明显和舒张功能障碍,血管组织PPARγ蛋白表达增加,而PPARδ表达减低,可能致脂质积聚,加剧炎症反应,并抑制eNOS表达,这可能是MS血管结构和功能改变的机制之一.     

烟雾暴露大鼠肺血管重塑及其与过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的关系

目的 探讨烟雾暴露对大鼠肺血管过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)表达的影响及其在肺血管重塑中的作用.方法 雄性SD大鼠30只,随机分为对照组、烟雾暴露6周组、烟雾暴露12周组,建立大鼠烟雾暴露模型.HE染色观察各组大鼠肺组织形态学改变,测量肺血管管壁厚度与血管外径的比值(WT％)及管壁面积与血管总面积的比值(WA％);免疫组织化学染色检测肺血管PPAR-γ的表达量,并分析各指标的相关性.结果 ①烟雾暴露6周组WT％及WA％[(45.61±2.43)％及(59.69±12.59)％]与烟雾暴露12周组[(54.23±6.22)％及(76.26±8.36)％]均高于对照组[(32.89±7.65)％及(33.05±14.84)％],差异均有统计学意义(P值均＜0.05);烟雾暴露12周组WT％及WA％高于烟雾暴露6周组,差异均有统计学意义(P值均＜0.05);②烟雾暴露6周组与烟雾暴露12周组PPARγ蛋白表达[(0.48±0.08),(0.37±0.07)]均低于对照组(0.51±0.07),差异均有统计学意义(P值均＜0.05);烟雾暴露12周组PPAR-γ蛋白表达低于烟雾暴露6周组,差异有统计学意义(P＜0.05);③肺血管PPAR-γ与WT％及WA％呈负相关(r值分别为-0.715和-0.683,P值均＜0.05).结论 烟雾暴露可下调大鼠肺血管PPAR-γ的表达,参与肺血管重塑.     

全氟化碳对动脉粥样硬化大鼠内皮功能的影响

目的:观察腹腔注射全氟化碳(PFC)对动脉粥样硬化(AS)大鼠血清及主动脉组织一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素-1(ET-1)含量的影响,初步探讨PFC对AS大鼠内皮的可能保护作用。方法:将40只Wistar雄鼠随机分为空白对照组、动脉粥样硬化模型组、PFC低剂量组、PFC高剂量组,每组10只。除对照组用普通饲料外,其余均以高脂饲料喂养,建立实验性大鼠AS模型,治疗组在造模的同时给予不同剂量药物干预。12周后,测定各组大鼠血清及主动脉组织eNOS、NO、ET-1的含量,行HE染色观察各组大鼠主动脉病理变化。结果:模型组eNOS、NO含量显著降低,ET-1含量显著升高,与对照组比较有显著差异(P0.05);PFC高剂量组较模型组血清及主动脉eNOS、NO含量显著升高,ET-1含量显著降低(P0.05);PFC低剂量组与模型组相比血清中各指标差异无统计学意义,主动脉组织中ET-1含量显著降低(P0.05);PFC高剂量组与低剂量组相比eNOS、NO含量显著升高,ET-1含量显著降低(P0.05);PFC高剂量组较PFC低剂量组减轻AS大鼠主动脉组织形态学变化更明显。结论:PFC可能通过升高AS大鼠血清及主动脉组织eNOS、NO含量,降低ET-1含量,起到内皮保护功能,发挥抗AS的作用。     

烟雾暴露大鼠肺血管内皮型一氧化氮合酶及一氧化氮的表达变化

目的 探讨不同烟雾暴露量对大鼠肺动脉压及肺血管内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和一氧化氮(NO)表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠21只,随机分为对照组(C组)、烟雾暴露1个月组(S1m组)、烟雾暴露3个月组(S3m组),建立大鼠被动吸烟模型.检测各组大鼠平均右心室收缩压(mRVSP)及右心室肥大指数(RVHI),硝酸还原酶法检测肺组织NO的表达,免疫组化法检测肺血管eNOS的表达.结果 ①S3m组mRVSP及RVHI[(65.63±0.93)mmHg,(54.79±7.13)％]高于S1m组[(23.57±14.51)mmHg,(36.62±1.32)％]与C组[(16.85±1.26)mmHg,(32.41±0.26)％],差异均有统计学意义(P值均＜0.01),C组与S1m组差异无统计学意义(P＞0.05);②S1m组与S3m组肺血管内皮细胞eNOS蛋白(0.32±0.04,0.24±0.03)均低于C组(0.43±0.06),差异均有统计学意义(P值均＜0.01),S3m组低于S1m组,差异有统计学意义(P＜0.01);③S1m组和S3m组肺组织NO[(1.98±0.20)μmol/gprot,(0.95±0.09)μmol/gprot]均低于C组[(2.98±0.19)μmol/gprot],差异均有统计学意义(P值均＜0.01),S3m组低于S1m组,差异有统计学意义(P＜0.01);④mRVSP与RVHI呈正相关(r=0.713,P＜0.01),肺组织NO与mRVSP呈负相关(r=-0.615,P＜0.05),肺血管eNOS与肺组织NO呈正相关(r=0.944,P＜0.01).结论 烟雾暴露可能下调大鼠肺血管内皮细胞eNOS的表达,进而影响NO的合成,参与肺动脉压高压的形成,且该作用在一定范围内呈时间依赖性.     

腱糖蛋白-C在载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块不同时期表达的变化

目的:探讨腱糖蛋白-C(TN-C)在载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化斑块形成过程中不同时期表达的动态变化。方法:取雄性SPF级ApoE~(-/-)小鼠50只(模型组),高脂饲料喂养,建立小鼠动脉粥样硬化模型,雄性SPF级野生型C57BL/6小鼠50只为对照组,同样高脂饮食。分别于喂养4、8、16、24、32周时处死小鼠,检测血脂,显微镜观察斑块病理改变并进行定量分析,免疫组化方法检测动脉粥样硬化斑块内TN-C表达。结果:模型组小鼠总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均高于对照组小鼠(P均0.05)。随着造模时间的进展,模型组小鼠斑块面积及斑块面积/管腔面积比值不断增加,各时期比较差异均有统计学意义(P均0.05)。模型组小鼠斑块内TN-C表达量随着动脉粥样硬化进展而增多,32周小鼠斑块内部TN-C表达升高最显著,高于8、16、24周小鼠(分别为0.49±0.07 vs 0.04±0.02、0.12±0.03、0.21±0.04,P0.05)。结论:TN-C的表达量随着斑块进展不断增加,可能与动脉粥样硬化进展及斑块不稳定性有关。     

丹皮酚对动脉粥样硬化大鼠CRP的影响

目的探讨丹皮酚对动脉粥样硬化（AS）大鼠血清炎性因子C反应蛋白（CRP）的影响。方法采用高脂饲料喂养和维生素D3腹腔注射的方法建立大鼠AS模型,分为正常组、模型组、阳性组（辛伐他汀10mg/kg）、丹皮酚组（20mg/kg）,每组8只。灌胃给药4周后,各组取血清,ELISA法测定CRP的表达水平;取主动脉,光镜下观察病理改变,进行作病变分级评分。结果丹皮酚能改善AS大鼠的主动脉病变,与模型组比较有统计学意义（P〈0.01）;丹皮酚可降低血清CRP水平,为（6.0±1.5）ng/L,与模型组（8.8±1.3）ng/L比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论丹皮酚治疗大鼠AS的作用机制可能与降低炎性因子CRP的表达、抑制炎症反应有关。     

ErbB2受体在糖尿病心肌病大鼠中表达和磷酸化的改变

目的探讨糖尿病心肌病大鼠心肌中ErbB2受体表达和磷酸化的改变。方法选取8周龄雄性SD大鼠36只。按电脑随机数法分为：4周糖尿病组、4周对照组、12周糖尿病组、12周对照组。腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导糖尿病模型。分别在诱导糖尿病后第4、12周测定大鼠心脏质量,计算心脏质量/体质量,采用心脏超声评估大鼠心功能;采用Masson染色方法观察大鼠心肌间质纤维化程度并计算心肌胶原容积分数（collagen volume fraction,CVF）;采用实时聚合酶链反应（PCR）方法检测大鼠心肌组织ErbB2受体mRNA的表达水平;采用蛋白免疫印记法（Western-blot）检测大鼠心肌组织ErbB2受体蛋白磷酸化水平。结果与同期对照组相比,第4,12周糖尿病组心脏质量/体质量均明显增高,差异有统计学意义[（3.41±0.12）mg/g vs.（2.32±0.22）mg/g,P〈0.01;（3.72±0.38）mg/g vs.（2.39±0.0.26）mg/g,P〈0.01]。第4,12周糖尿病组心肌CVF均明显高于同期对照组,差异有统计学意义[4.48%±0.21%vs.2.79%±0.36%,P〈0.01;15.29%±0.67%vs.3.01%±0.13%,P〈0.01]。4周糖尿病组的左心室收缩末内径、左心室射血分数、心肌组织ErbB2受体mRNA表达和蛋白磷酸化水平与4周对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。12周糖尿病组左心室收缩末内径大于12周对照组,差异有统计学意义[（3.570±0.232）mm vs.（3.060±0.376）mm,P〈0.05]。12周糖尿病组左心室射血分数小于12周对照组,差异有统计学意义[72.5%±3.81%vs.82.6%±2.97%,P〈0.01]。与12周对照组比较,12周糖尿病组心肌组织ErbB2受体mRNA表达显著减少,差异有统计学意义（0.73±0.22vs.1.05±0.33,P〈0.01],ErbB2受体蛋白磷酸化水平也显著减少（0.87±0.01vs.0.95±0.02,P〈0.01）。结论糖尿病大鼠心肌组织中ErbB2受体mRNA表达和蛋白磷酸化水平的下调参与了糖尿病心肌病的发展。