肝癌发生过程中的差异基因表达

目的:应用寡核苷酸芯片研究正常肝脏、慢性乙型肝炎、肝硬化及肝癌的基因表达谱,筛选肝癌相关基因.方法:分别对正常肝组织及肝炎、肝硬化和肝癌组织进行总RNA抽提并纯化,反转录得到cDNA,生物素标记cRNA探针,分别与含有19378个已知基因的寡核苷酸芯片进行杂交,Gene Scanner 3000激光系统扫描,GenePix Pro3.0分析软件读取处理杂交信号.结果:在慢性乙型肝炎、肝硬化及肝癌组织中,筛选出共同差异表达基因81个,其中持续上调表达基因53个,持续下调表达基因数28个.结论:寡核苷酸基因表达谱芯片能够快速筛选出肝癌相关基因,有多种基因共同参与肝癌发生的整个过程.     

乙型肝炎病毒相关的肝硬化患者外周血单个核细胞基因表达谱的研究

目的分析乙型肝炎病毒（HBV）相关的肝硬化患者外周血单个核细胞的基因表达谱，探索慢性HBV相关的肝硬化形成的分子机制。方法应用含14 000条人体cDNA的微阵列芯片和来自外周血单个核细胞的标记cDNA，分析了10例慢性HBV相关肝硬化患者和10例健康人基因表达谱。通过应用GenePix 4000B扫描仪和ImaGene3．0分析软件比较Cy5标记的慢性HBV相关肝硬化来源cDNA与Cy3标记的健康人来源cDNA的杂交结果，获得个体基因的相对表达比值。结果和14 000条基因中，差异表达的基因有199条，占1．42％。其中108条基因表达水平上调，91条基因表达水平下调。这些差异表达的基因主要为细胞信号转导．细胞周期和代谢、凋亡及炎症相关类基因。结论HBV相关肝硬化发病过程中，发观众多基因的差异表达，为进一步阐明慢性HBV相关的肝硬化形成的分子机制提供基础。     

苦参碱对人肝癌细胞株HepG2基因表达谱的影响

目的利用基因表达谱芯片研究苦参碱对体外培养的人肝癌细胞株HepG2基因表达谱的影响。方法苦参碱处理人肝癌细胞株HepG272h后，提取研究组和对照组细胞的总RNA，将两组RNA纯化为mRNA，逆转录成cDNA，用Cy3和cy5两种不同的荧光染料进行线性扩增标记，与人全基因组基因表达谱芯片杂交，采用生物信息学方法分析两组细胞基因表达谱的改变。结果用Panther生物学软件分析，总共发现差异基因385个，其中上调基因133个，下调基因252个，并对其进行生物学功能分类。结论应用全基因组表达谱芯片检测差异表达基因，苦参碱可改变人肝癌细胞株HepG2细胞基因谱，可以通过调控凋亡基因的表达，诱导HepG2细胞发生凋亡。     

cDNA微阵列分析BALB/c小鼠肝脑组织中差异性表达基因的研究

目的分析BALB/c小鼠肝、脑组织差异基因表达谱。方法TRIZOL法提取总RNA,反转录cDNA,采用36K小鼠全基因组寡核苷酸芯片,运用荧光双交换方法分析BALB/c小鼠肝脑组织中mRNA转录本含量。经芯片扫描、图像采集后,运用MAS2.0软件对差异基因进行基因功能分析(GO)和KEGG通路分类。结果基因芯片结果表明与脑组织相比,在肝组织中共发现差异表达基因6 132个,其中包括上调基因2 974个,下调基因3 158个,GO分析上述差异表达基因主要涉及代谢、细胞信号转导、DNA结合与转录、细胞周期、细胞骨架、细胞粘附和发育等。KEGG信号通路分析显示:上调差异基因中71个通路的改变差异具有统计学意义(P0.05),下调差异基因中有80个通路的改变差异具有统计学意义(P0.05)。结论小鼠肝与脑组织基因表达谱的差异涉及多个基因表达调控途径,研究这些基因分子功能有助于深入了解各组织独特的功能表达系统。     

柴胡皂甙d诱导K562细胞凋亡的差异基因筛选

目的 筛选柴胡皂甙d(SSd)诱导人白血病K562细胞凋亡的差异基因,为白血病的治疗奠定基础.方法 用Agilent Human 1A寡核苷酸芯片检测SSd处理前后K562细胞的基因表达谱变化,并筛选SSd诱导K562细胞凋亡的相关基因.结果 359个基因发生显著性变化,其中表达上调基因138个,表达下调基因221个.结论 SSd诱导K562细胞凋亡是一个多基因参与的过程,本文筛选出的差异基因有望成为人白血病治疗的靶基因.     

膀胱尿路上皮癌(Ⅰ级)miRNAs差异表达及意义

目的 研究膀胱尿路上皮癌miRNAs的差异表达.方法 取手术切除新鲜膀胱尿路上皮癌及正常膀胱黏膜组织各3例保存于液氮中;Trizol试剂提取总RNA;使用Nanodrop及变性琼脂糖凝胶电泳进行RNA质量检测;用标记酶Hy3TM荧光基团标记RNA的探针和miRCURYTM芯片杂交;使用GenePix 4000B 芯片扫描仪及GenePix pro V6.0完成图像采集和数据分析;荧光定量RT-PCR方法验证.结果 膀胱尿路上皮癌与正常膀胱黏膜上皮组织共有192个差异表达基因,其中71个上调,124个下调;差异表达miRNAs经随机RT-PCR验证而证实.结论 膀胱尿路上皮癌与正常膀胱黏膜组织中存在差异miRNAs基因,这种miRNAs差异可能导致膀胱尿路上皮癌的发生及发展.     

应用基因芯片筛选HBV 对肝癌细胞脂代谢相关基因影响的初步研究

目的通过基因芯片技术探测HBV感染对肝癌细胞脂代谢相关基因表达的影响,为深入研究HBV在肝癌脂代谢中的作用及机制提供新的依据。方法本研究以HepG2细胞作为对照,用稳定表达HBV的肝癌细胞HepG2.2.15来模拟HBV感染的肝癌细胞,利用基因芯片对肝癌细胞HepG2和HepG2.2.15进行分析,筛选出脂代谢相关的差异表达基因,对差异基因参与的信号传导通路进行分析。RT-PCR检测显著差异表达基因CYP1A1、CYP1B1和AHR。结果基因芯片共筛选出肝癌细胞HepG2和HepG2.2.15中差异表达基因共1263个,其中涉及脂代谢的基因有92个,具有表达上调的基因53个,表达下调的基因39个,涉及细胞生长、增殖、分化、运动和耐药等多种分子功能。RT-PCR检测脂代谢差异表达基因,其结果与芯片结果一致,确定芯片检测结果可靠。结论应用人类表达芯片成功筛选出HBV转染的人肝癌细胞后的脂代谢相关差异表达基因,为HBV感染在肝癌中的作用提供线索。     

差异基因功能在酒精性肝硬化发病机制中的研究

目的探讨差异基因功能在酒精性肝硬化发病机制中的作用。方法取酒精性肝硬化及健康对照两组人外周血RNA,应用基因芯片测得两组间差异基因。随机方差模型计算每个基因的显著性水平(P value),按照P<0.05筛选,获得显著性表达的差异基因。结果两组间共发现差异表达的基因1 008个,显著性表达的上调基因188个,下调基因210个。差异基因共表达网络的节点基因为:mapk8、cxcr3、pdgfrb、calml5。结论酒精性肝硬化的发生是一个多基因参与的复杂过程。差异基因参与调控的生物学过程包括:细胞凋亡、生物信号传导、碱基切除修补、核糖核酸酶代谢、脂质代谢吸收、免疫应答等。     

人主动脉夹层与正常主动脉基因表达谱的差异

目的:利用基因芯片技术研究人主动脉夹层组织与正常主动脉组织基因表达谱的差异。方法:选取主动脉夹层病例标本5例,正常主动脉标本4例。提取总RNA,并反转录成cDNA、体外转录合成aRNA后与芯片进行杂交,对结果进行分析。同时对表达谱筛选出MYLK、PKD1、MYH11、SOD3、FLNA、TAGLN 6个差异基因进行基因转录水平的定量验证。结果:人主动脉夹层组与正常主动脉组比较基因表达差异倍数大于2的基因共有1 661个,其中有997个基因上调表达,664个基因下调表达。6个基因RT-qPCR验证结果表明,与正常组相比,6个基因都下调表达,其中MYLK、PKD1、MYH11、SOD3、TAGLN基因下调表达是有显著性差异的(P≤0.05),FLNA基因没有显著性差异(P0.05)。结论:通过全基因组表达谱芯片可以筛选主动脉夹层与正常主动脉表达差异基因,同时结合RT-qPCR验证,为研究主动脉夹层提供新的思路。     

5-Aza-CdR对食管鳞癌甲基化基因的影响

目的探讨5-aza-CdR对食管鳞癌甲基化基因的影响。方法应用人类全基因组寡核苷酸微阵列芯片,荧光双交换法检测5-aza-CdR干预的食管鳞癌细胞Eca-109与正常培养的Eca-109细胞中的差异表达基因,并进行生物信息学分析。结果经统计学分析,共筛选获得384个差异表达基因,其中303个基因表达上调,81个基因表达下调;差异基因的功能涉及信号转导、物质合成代谢、细胞周期、细胞增殖、细胞凋亡、DNA转录、DNA复制、DNA修复、氧化还原、物质运输、免疫反应等;上调表达基因中有138个基因分别含有1～5个CpG岛序列,占总上调基因的45.54%。结论5-aza-CdR可以影响食管鳞癌细胞中基因异常的甲基化修饰,调控肿瘤细胞的异常凋亡和分化,为进一步研究食管鳞癌致病分子机制,提供表观遗传学的依据。     

青少年高血压的研究进展

随着人们生活和行为方式的改变,高血压发病明显呈年轻化趋势。在青少年时期识别高血压病高危人群有助于早期进行有效干预和治疗,降低未来高血压的发生率及其严重性。现试从青少年高血压的诊断、发病因素、特点、治疗策略等方面的研究进展作一综述。     

C·肉毒杀鼠素(冻干剂)应用研究

目的为研究C·肉毒杀鼠索对杀灭达乌尔黄鼠(简称黄鼠)的大面积应用情况和对家畜、家禽的毒害作用,进行了C·肉毒杀鼠素的应用研究.方法大面积投毒采用ES-2药饵撒播机[1],间隔约80m进行条投.羊、鸡采用直接灌胃.结果大面积应用的灭鼠率为83.72%.对羊、鸡最高剂量分别为500万MLD、150万MLD,均未出现中毒现象.结论 C·肉毒杀鼠素是较为理想的草原大面积杀灭黄鼠的理想、首选药物.     

Morbidity in cardiovascular diseases in immigrants in Sweden

INTRODUCTION: Although immigration to Sweden has increased in the last few decades, the incidence rates of cardiovascular disease and coronary heart disease in immigrants are unknown. The aim of the present study is to estimate whether place of birth affects the incidence rates of cardiovascular disease and coronary heart disease. MATERIAL AND METHODS: The study was designed as a follow-up study on morbidity in cardiovascular disease and coronary heart disease between 1 January 1997 and 31 December 1998, including three and a half million persons with age range 35-64 years, of whom 550 000 were born abroad, from the database MigMed consisting of the whole Swedish population. Incidence rates and relative risks were estimated by indirect standardization and a proportional hazard model. RESULTS: The age-adjusted risk of coronary heart disease was higher in most foreign-born groups than in Swedes. For example, in nine of 12 male groups, the relative risks varied between 1.1 and 2.2, and in seven of 12 female groups, the relative risks varied between 1.4 and 2.5. When also adjusting for level of education and employment status, the risks were still high, but on a lower level. CONCLUSIONS: Foreign-born people possess an over-risk of cardiovascular or coronary heart disease(CVD/CHD) compared with Swedish-born persons, also when level of education and employment status are taken into account.     

高龄老年高血压的临床研究进展

随着社会老龄化进程的加快,80岁以上高龄老人的绝对数量以及占总人口的比例均在增加,如何提高高龄老年高血压的防治水平备受关注。现试从高龄老年高血压的临床特点、治疗策略等方面的临床研究进展作一综述。     

中国老年性耳聋的研究与干预进展

老年性耳聋已成为影响我国老年人生活质量的最主要的慢性病之一。助听器是目前帮助听力损失的老年人克服交流障碍的主要手段。在我国,数字助听器已逐渐取代模拟助听器并且体现出了更好的效果。但是老年听力损失患者中使用助听器的比例仍然很小。人工耳蜗植入也已被应用在老年患者中。我国针对老年人的听力康复服务还有较长的路要走。     

Epstein-Barr virus in malignancies in renal transplant recipients in Japan

A role for Epstein-Barr virus (EBV) in the development of malignancies including lymphomas, and carcinoma of the stomach, nasopharynx, thymus and salivary gland is suggested. It is indicated that EBV evokes polyclonal-B-cell-proliferative diseases in immunocompromised hosts, such as transplant patients, which results in monoclonal malignant lymphomas. The suppression of immune functions in these patients is thought to lead to incomplete elimination of the cells expressing EBV latent infection genes. To examine the etiological role of EBV in the development of malignancies following renal transplant in Japan, 42 malignancies in 1744 cases of renal transplant were studied for the presence and type of EBV. The polymerase chain reaction revealed that 5 malignancies were positive for EBV, all type A: 2 of 2 cases of non-Hodgkin's lymphoma (NHL), 2 of 8 cases of gastric adenocarcinoma of the common type, and 1 of 2 cases of gastric plasmacytoma. In situ hybridization revealed positive signals in the nucleus of tumor cells in 2 cases of NHL and 1 of plasmacytoma. Positive signals were found in the small lymphoid cells but not in the tumor cells in 2 cases of gastric carcinoma. On the basis of these findings, a role for EBV in the development of malignancies in renal transplant patients is unlikely except for lymphoid neoplasias.Abbreviations PCB polymerase chain reaction - EBV Epstein-Barr virus - NHL non-Hodgkin's lymphoma     

糖尿病大鼠心室肌细胞钾通道的改变

目的研究糖尿病大鼠心室肌细胞钾通道的改变及增加葡萄糖代谢对其的作用。方法取体重150～200g的雄性SpragueDawley大鼠,腹腔注射链脲菌素(STZ)建立糖尿病模型,采用酶解法获得单个心室肌细胞,应用膜片钳全细胞记录技术记录钾电流。结果糖尿病大鼠心室肌细胞瞬间外向性钾流(Ito)密度较对照组显著降低[ 60mV时,分别为(15.90±1.19)pA/pF(n=25)和(28.55±0.97)pA/pF(n=12),P<0.001];分别用100nmol/L胰岛素及1.5mmol/L二氯乙酸在体外预处理心室肌细胞4～5h和3～4h使Ito密度恢复至对照组水平[ 60mV时,分别为(29.40±0.38)pA/pF(n=20)和(27.35±0.97)pA/pF(n=12)]。结论糖尿病大鼠心室肌细胞钾通道功能发生改变,增加葡萄糖代谢可逆转这一改变,提示葡萄糖代谢与Ito功能间存在一定关系。     

Sex Differences in Ethanol-induced Dopamine Release in Nucleus Accumbens and in Ethanol Consumption in Rats

In vivo microdialysis was used to examine changes in nucleus accumbens and striatal dopamine, dihydrophenylacetic acid (DO-PAC), and homovanillic acid (HVA) following acute administration of ethanol (0.0, 0.25, 0.5, 1.0, or 2.0 g/kg) in male and female Long-Evans rats. Following dialysis, rats were trained to bar-press for oral ethanol reinforcement. In nucleus accumbens, females showed significant increases in extracellular dopamine following 0.25 or 0.5 g/ kg ethanol, but did not show significant increases over baseline at the higher doses. Males showed slight increases in dopamine at the lower doses and decreased dopamine at 2.0 g/kg. In striatum, both sexes showed increased dopamine at the lower doses and decreased dopamine at 2.0 g/kg. There were slight increases in nucleus accumbens DOPAC and HVA at some doses in both sexes, but no changes in striatal metabolite levels. In addition to showing increased responsiveness to ethanol-induced mesolimbic dopamine stimulation, females consumed more ethanol than males during behavioral testing. The pattern of both greater ethanol-induced nucleus accumbens dopamine release and greater ethanol consumption in females supports the hypothesis that ethanol reward is mediated, at least in part, by the mesolimbic dopamine system.