脂联素受体在正常SD大鼠乳鼠心肌细胞的分布和表达

目的通过体外培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,研究脂联素受体1(AdipoR1)、脂联素受体2(AdipoR2)及T-钙黏蛋白(T-cadherin)三种脂联素受体在大鼠乳鼠心肌细胞上的分布和表达。方法采用酶消化法原代培养乳鼠心肌细胞,通过α-肌动蛋白免疫荧光法对原代培养的心肌细胞进行鉴定,并在倒置相差显微镜下观察细胞生长状态。选用原代培养96h的单层心肌细胞进行实验,使用RT-PCR和细胞免疫组织化学方法检测AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin的mRNA和蛋白在心肌细胞中的表达情况。结果在SD大鼠乳鼠心肌细胞上均检测到了AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin的mRNA和蛋白表达,其中以AdipoR1和T-cad-herin的mRNA和蛋白表达量高,与AdipoR2的表达量相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论脂联素受体1、脂联素受体2和T-钙黏蛋白,三种脂联素受体在SD大鼠乳鼠心肌细胞上均有表达,并以脂联素受体1和T-钙黏蛋白的表达为主,脂联素受体2表达量较少。     

脂联素受体基因多态性与非酒精性脂肪性肝病的关系

非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一种与遗传、生活环境及人体代谢相关的疾病.NAFLD涉及多基因,与肥胖、胰岛素抵抗、脂肪酸代谢、炎性细胞因子相关的基因都可能与NAFLD有关.脂联素(adiponectin)是脂肪细胞分泌的肽类激素,被认为是NAFLD的发生因素之一.脂联素受体(adiponectin receptor,AdipoR)介导脂联素的多种生物学效应,与NAFLD、糖尿病、肥胖等多种疾病密切相关.本研究旨在分析AdipoR2基因+33371多态性与NAFLD及与部分代谢综合征相关指标的关系.     

脂联素受体及信号转导研究进展

脂联素是脂肪细胞特异分泌的细胞因子，有增强胰岛素敏感性、抗高血糖、抗动脉粥样硬化等效应。它在血清中有3种不同的低聚体形式，改变每种低聚体的相对量可以调节脂联素的活性。脂联素受体1(AdipoR1)在骨骼肌有丰富表达，脂联素受体2(AdipoR2)主要在肝脏表达。AdipoR1对脂联素球形结构域(gACRP30)有高度亲和性，AdipoR2对全长型脂联素及gACRP30有中度亲和性。已有研究表明脂联素通过激活腺苷酸活化蛋白激酶和增强胰岛素受体酪氨酸磷酸化作用等途径发挥作用。白介素-6、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ影响脂联素的表达和分泌。     

脂联素受体及信号转导研究进展

脂联素是脂肪细胞特异分泌的细胞因子,有增强胰岛素敏感性、抗高血糖、抗动脉粥样硬化等效应.它在血清中有3种不同的低聚体形式,改变每种低聚体的相对量可以调节脂联素的活性.脂联素受体1(AdipoR1)在骨骼肌有丰富表达,脂联素受体2(AdipoR2)主要在肝脏表达.AdipoR1对脂联素球形结构域(gACRP30)有高度亲和性,AdipoR2对全长型脂联素及gACRP30有中度亲和性.已有研究表明脂联素通过激活腺苷酸活化蛋白激酶和增强胰岛素受体酪氨酸磷酸化作用等途径发挥作用.白介素-6、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ影响脂联素的表达和分泌.     

脂联素及其受体对血管内皮细胞一氧化氮合酶活性差异调节的分子机制

目的:探讨脂联素Ⅰ型及Ⅱ型受体(AdipoR1和AdipoR2)在内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性调节中的作用。方法:采用随机数字表法,将体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)随机分为对照组、脂联素组、脂联素+siRNA-adipoR1组、脂联素+siRNA-adipoR2组和脂联素+L-NAME组。使用siRNA分别沉默AdipoR1和AdipoR2受体基因,Western blot方法检测脂联素作用下磷酸化eNOS的表达情况。结果:不同浓度(0、5、10和15μg/ml)以及不同时间(0、15、30和60min)脂联素干预内皮细胞,eNOS磷酸化水平不同,浓度为5μg/ml干预15min时,磷酸化的eNOS蛋白表达最多(P0.05)。特异性siRNA-adipoR1沉默AdipoR1基因而抑制其表达(P0.01),脂联素对内皮细胞eNOS的磷酸化水平明显降低(P0.05)。相反,AdipoR2的表达被siRNA-adipoR2抑制(P0.01),脂联素作用于内皮细胞时,eNOS的磷酸化水平无明显变化。NOS抑制剂L-NAME阻断NO的形成,脂联素引起内皮细胞eNOS磷酸化作用降低,磷酸化eNOS蛋白表达量减少(P0.05)。结论:脂联素通过AdipoR1影响内皮细胞eNOS的活性,促进eNOS的磷酸化(ser1177)及NO的分泌,维持正常内皮细胞的功能。     

脂联素受体及其与2型糖尿病的关系

人脂联素受体AdipoR1和AdipoR2均在骨骼肌丰富表达。且两者的表达呈正相关。而小鼠AdipoR1主要在骨骼肌中表达,AdipoR2则主要在肝脏表达。AdipoR1／R2的表达还受到多种因素的调节,包括胰岛素、生长激素等。此外,AdipoR1／R2在胰岛素抵抗、2型糖尿病的发生、发展中扮演了重要的角色。对脂联素受体研究的逐步深入,将加深对脂联素作用机制的了解,从而有助于2型糖尿病的预防和治疗。     

吡格列酮对高脂血症大鼠主动脉脂联素受体表达的影响

目的观察高脂血症大鼠主动脉脂联素受体(adiponectin receptors1/2,AdipoR1/2)的表达改变,探讨吡格列酮对高脂血症大鼠主动脉血管脂联素受体表达的影响。方法清洁级SD大鼠26只,随机分为正常饮食组(9只)和高脂饮食组(17只);高脂饮食组12周后检测空腹血脂,明确造模是否成功,随机分为模型组(8只)和吡格列酮组(9只),后者给予吡格列酮溶液(0.6mg/ml)连续灌胃4周,之后检测血脂水平及主动脉病理,ELISA法检测血清脂联素水平,荧光RT-PCR法检测主动脉脂联素受体AdipoR1和AdipoR2mRNA的表达,Western Bolt法检测脂联受体蛋白表达。结果高脂饲料喂养12周,高脂饮食组TG、TC、LDL水平明显升高(P0.01);给药四周后,吡格列酮组TG、TC水平明显降低(P0.01),模型组主动脉脂联素受体1/2mRNA和蛋白的表达明显下降(P0.01)。与模型组比较,吡格列酮组主动脉AdipoR(1P0.05)和AdipoR2(P0.01)mRNA的表达明显升高,主动脉脂联素受体蛋白的表达明显升高(P0.05),差异有统计学意义。结论脂联素及其受体下降可能介入高脂血症血管损伤,吡格列酮具有抗动脉粥样硬化作用,该作用可能与提高血清脂联素和主动脉血管脂联素受体表达有关。     

链脲佐菌素诱导的1型糖尿病大鼠肾脏脂联素受体的表达

目的 观察链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠在不同时期其血清脂联素和脂联素受体(AdipoR)在肾脏组织的表达水平.方法 64只雌性SD大鼠按随机数字表法分为对照组和实验组(分别为2、6、10、12周,共8组):实验组大鼠32只,一次性空腹腹腔注射STZ 60 mg/kg,诱导糖尿病大鼠模型;对照组大鼠32只,腹腔注射等体积的枸橼酸缓冲液.分别于糖尿病大鼠成模后第2、6、10、12周两组各取8只,测体重、肾重、空腹血糖、24 h尿白蛋白定量;心内采血,离心取血清,检测血肌酐,空腹血清胰岛素;ELISA方法检测血、尿脂联素浓度.取左肾常规病理组织行糖原染色,在光镜下观察肾脏的病理组织学改变,免疫组化SP法检测肾脏2种受体AdipoR1和AdipoR2表达.结果 (1)实验组6、10、12周大鼠血清和尿脂联素高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);且血清脂联素与24 h尿白蛋白排泄率、尿脂联素呈正相关(r值分别为0.806、0.696,均P＜0.01);尿脂联素与24 h尿白蛋白定量呈显著正相关(r=0.728,P＜0.01);逐步回归分析提示血清脂联素受24 h尿白蛋白定量影响最大(β=0.806,P＜0.01);(2)免疫组化半定量分析显示,AdipoR1和AdipoR2在正常大鼠肾组织中均有表达,主要分布于肾小管上皮细胞和肾小球内皮细胞.实验组造模成功6周时肾脏组织AdipoR1和AdipoR2表达,与对照组比较表达有所增强(F值分别为11.68、23.20,均P＜0.01),且与血清脂联素呈显著正相关(r值分别为0.666、0.684,均P＜0.01).结论 血清和尿脂联素水平与糖尿病肾病病程和AdipoR呈正相关,推测脂联素通过AdipoR直接作用于肾脏,尤其是作用于肾小管,在1型糖尿病肾脏病变中发挥保护作用.     

脂联素及其受体mRNA表达与血清游离脂肪酸、肿瘤坏死因子α的研究

目的 了解肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和游离脂肪酸(FFA)与脂联素及脂联素受体mRNA表达的关系.方法 19例肥胖和29例正常体重受试者,采用RT-PCR检测腹部皮下与大网膜脂肪组织中脂联素及其受体mRNA的表达水平,同时测定血清脂联素、TNF-α、FFA等指标.结果 (1)肥胖患者的血清TNF-α、FFA高于正常体重组;脂联素降低.(2)肥胖组中网膜脂肪组织脂联素mRNA表达量低于皮下脂肪组织和正常体重组网膜脂肪组织.(3)网膜脂肪组织脂联素mRNA表达量与脂联素水平呈负相关.(4)腹部皮下脂肪组织的脂联素受体1、脂联素受体2 mRNA表达水平与血清脂联素、FFA呈负相关.结论 肥胖人群的血清TNF-α、FFA升高,脂联素降低,且其网膜脂肪组织中脂联素mRNA表达量亦降低;血清FFA升高与腹部皮下脂联素受体表达下调相关.     

脂联素与慢性肝病的关系研究进展

脂肪组织能够分泌多种脂肪因子,这些脂肪因子通过自分泌方式调节脂肪合成和分解代谢。脂联素是脂肪因子的一种,它除了能够促进糖和脂肪代谢之外还具有抗炎,增敏胰岛素和抗动脉粥样硬化等功能因而备受关注。一、脂联素与慢性肝病脂联素是在脂肪组织中特异表达的脂肪因子。在血浆中,脂联素以低分子量多聚体和高分子量多聚体的形式存在。脂联素存在两种受体:AdipoR1和AdipoR2。这两种受体在多种组织都有表达,但主要分布在骨骼肌和肝脏。血清脂联素水平与体脂肪含量、空腹胰岛素浓度、血浆甘油三酯水平密切相关。过氧化物酶激活物增值受体γ(P…     

替米沙坦和氯沙坦对胰岛素抵抗大鼠冠状动脉脂联素受体和胰岛素抵抗的影响

目的探讨替米沙坦和氯沙坦对胰岛素抵抗(IR)大鼠冠状动脉脂联素受体和IR的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为对照组(Con组)、胰岛素抵抗组(IR组)、替米沙坦干预组[TEL组,5 mg/(kg·d)]和氯沙坦干预组[LOS组,10 mg/(kg·d)]。测定并比较各组大鼠空腹血糖、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和空腹胰岛素、血清脂联素(APN),并计算胰岛素敏感指数(ISI)。检测冠状动脉APN、脂联素受体1(AdipoR1)和脂联素受体2(AdipoR2)mRNA和蛋白的表达。结果与IR组比较,TEL组和LOS组血清APN水平均增加(P0.05),且TEL组TG水平、空腹血糖和ISI低于IR组(P0.05)。IR组冠状动脉APN mRNA、AdipoR1 mRNA、AdipoR2 mRNA表达低于Con组(P0.05),TEL组和LOS组冠状动脉APN mRNA、AdipoR1 mRNA、AdipoR2 mRNA表达较IR组增高(P0.05)。与IR组比较,TEL组和LOS组冠状动脉APN、AdipoR1和AdipoR2表达增加(P0.05)。结论替米沙坦和氯沙坦均能增加IR大鼠血清APN水平,抑制冠状动脉APN、AdipoR1和AdipoR2表达的下降。     

游离脂肪酸调节脂肪细胞脂联素受体基因的表达

采用RT-PCR法检测以游离脂肪酸（FFA）孵育的（前）脂肪细胞中脂联素受体（AdipoR）mRNA的表达规律。结果表明3T3-L1脂肪细胞AdipoR1和AdipoR2基因表达呈分化依赖性增强。油酸仅对前脂肪细胞AdipoR的表达起抑制作用，而高浓度棕榈酸能抑制（前）脂肪细胞AdipoR的表达。     

APPL1研究进展

APPL1（adaptor protein,phosphotyros ineinteraction,PH domain and leucine zipper containing 1）是近来发现的一种细胞内转接蛋白,是介导脂联素信号的调节蛋白,并可参与胰岛素等多种信号转导通路,与胰岛素抵抗、内皮细胞功能紊乱、肥胖及2型糖尿病等相关。有研究表明,低水平APPL1可预测2型糖尿病的发生危险,其可能参与胰岛素抵抗和2型糖尿病的病理生理过程。     

APPL1研究进展

APPL1(adaptor protein,phosphotyrosine interaction,PH domain and leucine zipper containing 1)是近来发现的一种细胞内转接蛋白,是介导脂联素信号的调节蛋白,并可参与胰岛素等多种信号转导通路,与胰岛素抵抗、内皮细胞功能紊乱、肥胖及2型...     

针刺对高脂大鼠主动脉脂联素受体基因表达的影响

目的探讨AdipoR的不同亚型在高脂饮食机体主动脉表达的变化以及针刺对该变化的影响。方法将高脂喂养12周的SD大鼠检测血脂、一氧化氮(NO)和髓过氧化物酶(MPO),根据体重随机分为模型和针刺组,干预4周后检测血脂、NO、MPO、主动脉AdipoR1和AdipoR2基因表达,并设普食对照组。结果干预前,与对照组比较,模型组和针刺组大鼠TG、TC、MPO明显升高,NO明显降低。干预后,模型组TG、TC、MPO、NO无明显变化,主动脉AdipoR1和AdipoR2基因表达明显降低;针刺后TG、TC和MPO明显降低,NO明显回升,主动脉AdipoR2基因表达明显上调,AdipoR1基因表达无明显变化。结论高脂饮食造成机体主动脉AdipoR1和AdipoR2基因表达低下,影响了脂联素信号对主动脉的保护作用;针刺能够上调脂联素信号保护高脂对主动脉的损伤,其作用主要通过AdipoR2介导的。     

脂联素基因多态性与非酒精性脂肪肝及其代谢紊乱的关系

目的探讨脂联素单核苷酸多态性SNP45T→G和SNP276G→T与非酒精性脂肪肝及其合并代谢紊乱的相关性。方法以PCR-RFLP技术,对408例研究对象脂联素基因SNP45、SNP276多态性进行基因分型,其中264例（亚组）测定BMI、FBS、ALT、TC、TG和FINS、脂联素水平,计算HOMA-IR。结果（1）SNP45和SNP276两个多态性位点的基因型和等位基因频率在非酒精性脂肪肝组、非酒精性脂肪肝合并代谢紊乱组和对照组中的分布无显著差异;（2）在亚组受试人群中,SNP45位点为GG或GT者的TG、FBS高于T/T者;在对照组中,SNP45位点为GG或GT者的TG高于T/T者;在非肥胖组SNP45位点为GG或GT者的HOMA指数、BMI、TG及ALT高于T/T者（P〈0.05）;（3）在非肥胖组SNP276位为GG或GT者的HOMA高于T/T者（P〈0.005）,G/G者的BMI大于GT或TT者（P〈0.05）;（4）在亚组、非肥胖组和正常组SNP45位点为GG或GT者的脂联素水平较T/T者低,没有发现SNP276G/T基因型与脂联素水平之间的差异。结论脂联素基因SNP45和276多态性与武汉地区汉族人群中非酒精性脂肪肝无明显相关性。在非肥胖组脂联素基因SNP45、SNP276变异与IR、BMI相关,脂联素基因SNP45变异对脂联素水平、TG、FBS和ALT的代谢产生影响。     

脂联素受体1基因多态性与2型糖尿病相关性研究

目的研究西安地区汉族人群中脂联素受体1（AdipoR1）的两个单核苷酸多态性（SNP）位点与2型糖尿病（T2DM）的关系。方法采用突变特异性扩增系统（ARMS）结合测序方法对西安地区100例T2DM患者（T2DM组）及84名正常对照者（NC组）AdipoRl基因的两个SNP位点进行分析。结果（1）AdipoR1基因SNP-106A／G、SNP 5843A／G在DM组与NC组间基因型频率及等位基因频率差异无统计学意义。（2）AdipoR1基因5843G／G型T2DM患者的诊断年龄明显早于A／A型＋A／G型。结论在西安地区的汉族人群中，AdipoR1基因-106A／G、5843A／G的单个核苷酸多态性可能与T2DM的发病无关。携带5843G／G基因型的T2DM患者发病年龄较早。     

T-钙粘蛋白——一种新的脂联素受体

脂联素(ADP)是来源于脂肪组织的细胞因子,具有抗炎、抗动脉粥样硬化、防止动脉内膜中层增厚和增加胰岛素敏感性的作用。脂联素的这些效用必须通过脂联素受体(AdipoR)的介导方能实现。T-钙粘蛋白的组织分布非常广泛,在心血管系统高表达,在肌肉组织低表达。T-钙粘蛋白是脂联素六聚体和高分子质量多聚体的受体,其与脂联素球形结构域、脂联素三聚体都不能结合。T-钙粘蛋白在活体内可诱导血管增殖。T-钙粘蛋白亦有抑制血管内膜增生、阻止动脉粥样硬化发展、抑制肝脏糖异生的作用。     

吡格列酮对2型糖尿病大鼠骨骼肌脂联素受体1表达的影响

目的观察吡格列酮对2型糖尿病大鼠血清脂联素以及骨骼肌脂联素受体1(AdipoR1)表达的影响,探讨吡格列酮对2型糖尿病胰岛素抵抗的改善作用及机制。方法 40只8周龄健康雌性SD大鼠,随机分为正常对照组(n=10)、糖尿病组(n=15)及吡格列酮组(n=15)。用高糖高脂饲料加小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,成模后吡格列酮组给予10 mg/(kg.d)吡格列酮灌胃,正常对照组和糖尿病组给予同体积生理盐水灌胃,共12周。3个月后股静脉取血,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清脂联素水平,留取大鼠骨骼肌,光、电镜观察骨骼肌结构,免疫组织化学染色法测定骨骼肌AdipoR1蛋白的表达。结果与正常对照组(1.73±0.32 mg/L)比较,糖尿病组血清脂联素(1.01±0.27 mg/L)水平显著降低,而吡格列酮组(1.34±0.43 mg/L)较糖尿病组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。骨骼肌AdipoR1免疫组织化学染色正常对照组着色深且广泛,糖尿病组较正常对照组染色浅,吡格列酮组较糖尿病组染色深,但较正常对照组浅。光镜及电镜结果显示大鼠骨骼肌结构未见明显异常。结论 2型糖尿病大鼠血清脂联素水平及骨骼肌AdipoR1表达降低并导致糖脂代谢紊乱及胰岛素抵抗。吡格列酮可上调血清脂联素及骨骼肌AdipoR1的表达,从而调节糖脂代谢,改善胰岛素抵抗。     

非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏脂联素受体的表达

目的 探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝脏脂联素受体(AdipoR)mRNA的表达.方法 喂养高脂饲料建立NAFLD大鼠模型,分别于2、4、8、12周检测血清生化指标,并取肝组织测肝指数(肝湿重/体重),以RT-PCR法检测肝脏AdipoR1和AdipoR2 mRNA的表达,肝组织冰冻切片苏丹Ⅲ脂肪染色、石蜡切片苏木素-伊红常规染色和Masson三色纤维染色,镜下观察.结果 模型组大鼠2、4、8、12周肝脏AdipoR1 mRNA表达逐步上升,AdipoR2 mRNA表达逐步下降,两者分别于4周、2周开始显著差异于对照组(P均<0.01).模型组肝脏AdipoR2表达与肝指数(r=-0.431,P=0.006)、纤维化评分(r=-0.353,P=0.025)均呈显著负相关.结论 NAFLD大鼠肝脏AdipoR1 mRNA表达增加,AdipoR2 mRNA表达减少,提示肝脏AdipoR表达异常可能参与NAFLD的发病机制.