地高辛标记探针原位杂交检测肝组织中HCV RNA

用地高辛标记ＨＣＶ５′－ＮＣ区ｃＤＮＡ探针原位杂交，检测了２４例ＨＣＶ感染的慢性肝病患者肝组织中ＨＣＶ ＲＮＡ。结果：１７例同时检测血清抗－ＨＣＶ和ＨＣＶ ＲＮＡ均阳性患者中，１４例（８２．３％）肝组织检出ＨＣＶ ＲＮＡ。７例仅有抗－ＨＣＶ阳性患者，肝组织中未检出ＨＣＶ ＲＮＡ。ＨＣＶ ＲＮＡ特异性信号主要位于肝细胞浆。感染ＨＣＶ肝细胞周围见较多的淋巴细胞和单核细胞浸润。结果提示ＨＣＶ在肝细胞浆复     

HCV感染孕妇的引产胎肝内HCV RNA的定位研究

为了探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）母婴传播是否发生产前，用逆转录－套式－聚合酶链反应检测孕妇外周血及其引产胎肝匀浆中ＨＣＶＲＮＡ，同时用原位杂交技术检测引产胎肝细胞中ＨＣＶＲＮＡ。结果从６例外周血ＨＣＶＲＮＡ阳性的中期妊娠孕妇的引产胎肝组织匀浆中，４例胎肝检出ＨＣＶＲＮＡ其中２例胎肝组织切片开发现ＨＣＶＲＮＡ原位杂交阳性胎肝细胞，阳性着色局限于胎肝细胞的胞浆内，提示ＨＣＶ母婴传播可发生于产前妊娠期，Ｈ     

逆转录－套式－聚合酶链反应检测HCV RNA正链和负链及与肝细胞癌的关系

为了解ＨＣＶ与肝癌的关系，采用ＨＣＶ５－ＮＣＲ正相引物和反相引物逆转录－套式－聚合酶链反应（ＲＴ－Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）检测了２２例肝癌手术患者血清、癌组织和癌旁组织ＨＣＶＲＮＡ正链和负链；用ＨＢＶＣ保守区引物ＰＣＲ法检测了ＨＢＶＤＮＡ。结果发现：５例抗－ＨＣＶ阳性的肝癌患者中，３例血清、癌组织和癌旁组织ＨＣＶＲＮＡ正链扩增试验均阳性；１例三者均阴性；１例血清和癌旁组织阳性。３例正链扩增试验阳性的癌组织和癌旁组织均检出了ＨＣＶＲＮＡ负链，但血清中未检出负链。在２２例ＨＣＣ中１３例血清、８例癌组织和１５例癌旁组织中检出ＨＢＶＤＮＡ。５例有ＨＣＶＲＮＡ和／或抗－ＨＣＶ阳性的肝癌患者血清、和／或癌组织、和／或癌旁组织中均伴随ＨＢＶＤＮＡ和／或ＨＢ－ＶＭ阳性。提示ＨＣＶ可在癌旁肝细胞或肝癌细胞中感染并复制；ＨＢＶ感染与肝癌发生的关系比ＨＣＶ感染更密切。     

丙型肝炎肝组织中HCV RNA和HCV NS5抗原表达及意义

目的研究丙型肝炎肝组织中ＨＣＶＲＮＡ与ＨＣＶＮＳ５抗原分布及其与肝组织损伤的关系．方法应用原位杂交和免疫组化方法检测３４例丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者肝组织中ＨＣＶＲＮＡ和ＨＣＶＮＳ５抗原表达状况,采用Ｋｎｏｄｅｌ方法评价肝组织病理损伤程度．结果分别有２１例（６１８％）和２４例（７０６％）患者肝组织中检出ＨＣＶＲＮＡ和ＨＣＶＮＳ５抗原．ＨＣＶＲＮＡ阳性信号主要位于肝细胞浆中,在胆管上皮细胞和炎性浸润细胞中也可检出,其分布与肝组织炎症坏死无固定解剖学关系．ＨＣＶＲＮＡ与肝组织中ＨＣＶＮＳ５抗原表达正相关,但二者在肝组织中的分布存在一定差异．多因素分析显示ＨＣＶＮＳ５抗原的表达与肝组织损伤相关．结论丙型肝炎肝组织中ＨＣＶＲＮＡ和ＨＣＶＮＳ５抗原表达相关,病毒在肝组织中的活跃程度与肝损伤有关     

周围血白细胞的复制型丙型肝炎病毒RNA的检测及临床意义

用简并引物作套式反转录。聚合酶链反应检测正、负链丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ。显示３０例急、慢性丙型肝炎患者的血清及血浆中，７例无症状抗－ＨＣＶ阳性者的血清、血浆及周围血白细胞（ＰＢＬ／Ｃ）中，均未检出负链ＨＣＶＲＮＡ。慢性丙型肝炎者ＰＢＩ（中正、负链ＨＣＶＲＮＡ的检出率高于急性丙型肝炎及无症状抗－ＨＣＶ阳性者（Ｐ＜０．０５～０．００１）。１７例经肝组织学检查的患者中，急性肝炎（ＡＨ）者ＰＢＬ／Ｃ的正、负链ＨＣＶＲＮＡ检出率低于慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）者（Ｐ＜０．０５）。１例ＡＨ及６例ＣＡＨ患者肝组织内正、负链ＨＣＶＲＮＡ全部阳性。证实丙型肝炎患者的ＰＢＬ／Ｃ确可被ＨＣＶ感染，病程越长，被ＨＣＶ感染的可能性越大；病情活动者，ＰＢＬ／Ｃ中负链ＨＣＶＲＮＡ的检出率越高。提示ＨＣＶ不仅可以感染ＰＢＬＣ，而且可在其中复制；负链ＨＣＶＲＮＡ的出现与病情活动有关。     

肝细胞癌组织中HCV复制中间体的研究

本文报道在逆转录反应时仅加入与负链（复制中间体）ＨＣＶＲＮＡ互补的有义外引物，待将逆转录酶变性灭活后，再加入反义外引物，然后进行两轮聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增。用这种逆转录反应和套式ＰＣＲ方法，检测了ＨＣＣ组织和对照血清中负链ＨＣＶＲＮＡ的存在状况。结果负链ＨＣＶＲＮＡ在１０例（其中３例为已测血清总ＨＣＶＲＮＡ阳性，余７例为随机选择）ＨＣＣ组织中检出５例，而在５例（其中３例与组织配对）总ＨＣＶＲＮＡ的ＨＣＣ阳性病人血清则均阴性。表明ＨＣＣ组织中确有ＨＣＶ复制，从而进一步提示ＨＣＶ感染与我国ＨＣＣ的发生密切相关。     

联检C100－3抗体、第2代抗体与HCV RNA诊断丙型肝炎的比较

对江苏省南通市不同人群７７０例份血清联合检测Ｃ１００－３抗体和第２代抗体，并对其中抗－ＨＣＶ阳性和非甲非乙型肝炎患者用多聚酶链反应（ＲＣＲ）法检测了ＨＣＶＲＮＡ。在８９例急性肝炎中。检出的１４例急性丙型肝炎（丙肝）ＨＣＶＲＮＡ全数阳性，第２代抗体２例阳性，Ｃ１００－３抗体均阴性。慢性肝炎及肝炎后肝硬化２３０例共检出ＨＣＶ感染２４例（１０．４％），４５１例献血员检出丙肝３例（０．７％），以上两组患者３项标记阳性率相近。在检出的４２例ＨＣＶ感染中，仅１４例有输血史。比较３项标记，ＰＣＲ法检测ＨＣＶＲＮＡ最灵敏，对急性丙肝尤有诊断价值，并能直接反映ＨＣＶ复制；抗－ＨＣＶ可用于慢性ＨＣＶ感染的检测，第２代抗体优于Ｃ１００－３抗体。     

肝癌组织中丙型和乙型肝炎病毒基因状况研究

采用逆转录巢式ＰＣＲ技术检测了５１例ＨＣＣ患者的肝癌及癌周肝组织中ＨＣＶＲＮＡ正负链，同时以巢式ＰＣＲ技术检测了这些组织中的ＨＢＶＤＮＡ。结果，１１．８％（６／５１）检出组织中ＨＣＶＲＮＡ正链：其中５例在癌周肝组织，２例在癌组织中检测出ＨＣＶＲＮＡ负链，由于负链ＲＮＡ为ＨＣＶ的复制中间体，不释放到细胞外，其检出ＨＣＶ感染与ＨＣＣ关系的研究提供了进一步的病因证据，组织中ＨＢＶＤＮＡ检出率高达９２．２     

肝病患者肝组织中HCV抗原检测及意义

应用免疫组织化学方法对一组肝病患者石蜡包埋肝组织中丙肝毒抗原进行了检测，２５２分肝组织中，采用多克隆抗体ＨＣＶ检出ＨＣＡｇ阳性２５份（９．９２％）采用单克隆抗ＨＣＶ－ＮＳ３检出ＨＣＶ－ＮＳ３蛋白阳性１９份（７．５４％），１９份ＨＣＶ－ＮＳ３阳性肝组织均同时表现ＨＣＡｇ阳性，二者在肝细胞分布状况相似，另有６例肝组织中检出ＨＣＡｇ阳性，阳性细胞周围多无坏死灶和炎性，不同病理类型肝炎患者肝组织中丙肝病毒     

联检C100—3抗体,第2代抗体与HCV RNA诊断丙型肝炎的比较

对江苏省南通市不同人群７７０例份血清联合检测Ｃ１００－３抗体和第２代抗体，并对其中抗－ＨＣＶ阳性和非甲非乙型肝炎患者用多聚酶链反应（ＲＣＲ）法检测了ＨＣＶ ＲＮＡ。在８９例急性肝炎中。检出的１４例急性丙型肝炎（丙肝）ＨＣＶ ＲＮＡ全数阳性，第２代抗体２例阳性，Ｃ１００－３抗体均阴性。慢性肝炎及肝炎后肝硬化２３０例共检出ＨＣＶ感染２４例（１０．４％），４５１例献血员检出丙肝３例（０．７％），以上两组