斑点免疫金银染色法诊断囊虫病的研究

用斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)和Dot-ELISA检测40份确诊为囊虫病患者的血清。两种方法检测的阳性率均为100％,用Dot-IGSS检测,40份血清的平均滴度为1:27470,显著高于用Dot-ELISA检测的平均滴度1:9069(P<0.01)。检测50份义务献血员血清,假阳性率分别为2％和4％。10份日本血吸虫病人血清分别有1份和2份出现假阳性。与肝吸虫病人血清无交叉反应,与包虫病人血清有明显的交叉反应。     

血吸虫循环抗原检测的现场试验Ⅰ

将血吸虫肠相关趋阴极抗原的单克隆抗体用于Dot—ELISA,共检测2175份血清,其中急性血吸虫病血清210份,阳性率为91.9％;慢性血吸虫病血清798份,阳性率为86.7％;正常人血清752份,假阳性率为1.1％;除肺吸虫病外,对其他寄生虫病或非寄生虫感染疾病血清无明显交叉反应。用单盲法Dot—ELISA检测3批血清,结果敏感性为86.5％～95.1％;特异性为96.9％～100.0％。检测流行区居民547份血清,Dot—ELISA阳性反应130份;粪检阳性72例。两者均为阳性者55例,相符率为76.4％。上述结果表明,Dot—ELISA检测循环抗原确实具有较好的敏感性与特异性,适于大规模应用及流行病学调查。     

间接荧光抗体试验检测感染广州血管圆线虫大鼠血清抗体的观察

用广州血管圆线虫成虫切制成 4 μm厚的冰冻切片作抗原,用间接荧光抗体试验检测感染广州血管圆线虫大鼠血清的抗体,结果在感染后 2 wk的 50份鼠血清中,呈阳性反应46份,阳性率为 92.0％;在感染后 4 wk的 19份鼠血清中,呈阳性反应 19份,阳性率为 100％;对照的阴性血清及盐水均呈阴性反应。本法检出率高,且感染早期出现阳性反应,可作广州血管圆线虫病早期辅助诊断。     

华支睾吸虫成虫抗原免疫酶染色试验和间接免疫荧光抗体试验效果的比较

应用成虫冰冻切片抗原作免疫酶染色试验(IEST)及间接免疫荧光抗体试验(IFAT),对比检测了 51份华支睾吸虫病患者和 50份健康人血清,两法的阳性率分别为 92％和 88％;假阳性率分别为 2％和4％,应用 IEST和IFAT对比检查 22份急性血吸虫病患者血清、20份慢性血吸虫病患者血清及 15份并殖吸虫病患者血清。IEST 出现的交叉反应率分别为 14％、5％和0;IFAT出现的交叉反应率分别为 14％、10％和0。表明两法诊断华支睾吸虫病均有较高的敏感性和特异性,并且抗原定位好。而 IEST不需要特殊仪器,更适合于现场应用。     

IHA和ELISA试剂盒在血吸虫病临床检验中特异性的评价

目的 评价间接血凝试验(IHA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)两种试剂盒在血吸虫病临床诊断中价值.方法 采集非血吸虫病流行区的肝吸虫病人、肺吸虫病人、姜片虫病人、正常人群和乙肝病人血清,按照单盲试验的原则进行IHA和ELISA检测,对比分析两法特异性.结果 IHA和ELISA两种试剂盒,检测567份健康人员(献血员和中小学生)的特异性分别为97.88％和98.41％,检测65份肺吸虫病人血清的交叉阳性率为21.54％和18.46％,检测52份肝吸虫病人血清的交叉阳性率为5.77％和3.85％,检测56份姜片虫病人血清的交叉阳性率为3.57％和5.36％,检测195份乙肝病人假阳性率分别为2.56％和6.67％;两种试剂盒在检测其它三种吸虫病人的交叉反应均无显著意义(x2=0.19～0.21,P=0.661 0～0.646 7),但两法与肺血吸虫交叉反应均较高(x2=8.76～11.87,P=0.000 6～0.0031),而与肝吸虫和姜片虫交叉略高于正常人群(x2=2.33～4.13,P=0.126 6～0.0420).]HA试剂盒在检测乙肝病人和健康正常人群的阳性率无显著差异(x2=0.04,P=0.841 1),ELISA试剂盒在检测乙肝病人的阳性率显著高于健康正常人群(x2=7.90,P=0.005 0),其阳性率是健康正常人群的4.20倍.结论 在血吸虫病现场筛查和医院门诊检查血吸虫病时,IHA试剂盒优于ELISA试剂盒.     

酶标记抗原对流免疫电泳检测特异性肺吸虫抗体的初步报告

应用酶标抗原对流免疫电泳对抗肺吸虫成虫抗原兔血清进行棋盘测定,显示酶标记抗原稀释度在1:80时可获得高敏感反应,血清稀释度至1:2,043,仍显示清晰的沉淀带。44例肺吸虫病患者血清的阳性率为90.9％(40/44);53例肝吸虫病患者及39名健康人     

酶联免疫吸附试验诊断肝吸虫病的实验观察

我们应用酶联免疫吸附试验(简称酶标),采取肝吸虫冷浸抗原对部分肝吸虫病患者及流行区人群进行了实验观察。材料和方法一、抗原滴定:将1%肝吸虫成虫冷浸抗原与重度感染肝吸虫病患者血清分别稀释后进行交叉方阵滴定,以消光值1.0的抗原稀释     

间接炭粒凝集试验诊断肺吸虫病的研究

本文观察了肺吸虫炭粒抗原用于诊断肺吸虫病的结果。抗原制备以10～12mg研磨、超声粉碎、浸渍的成虫全抗原致敏100mg活性炭的效果为最适宜。炭粒抗原的特异性较高。 对现症肺吸虫病人、正常人及其他疾病患者的血清作微量间接炭粒凝集试验的结果表明,以≥1:32作为诊断标准,对肺吸虫病的敏感性为100％,特异性为97.3％,而与正常人及其他疾病患者的交叉反应仅2.4％。 本法的敏感性不亚于酶联免疫吸附试验(100％)和间接血凝试验(96.9％),而高于对流免疫电泳(84.1％)和琼脂凝胶扩散试验(73.4％),对近期(2～7个月)疗效的考核尚欠理想,而对一年后的疗效考核可能有一定意义。     

使用不同抗原的间接血凝试验在包虫病诊断中应用的评价

本文报告了使用不同抗原的包虫病间接血凝试验方法的实验结果。采用高浓度戊二醛化和1/20000鞣酸处理的绵羊红细胞,用绵羊肝包囊液粗抗原和部分纯化抗原致敏。用包虫病人血清进行方阵滴定,包囊液粗抗原,亲和层析抗原、Oriol氏法纯化抗原和Burstein氏法纯化抗原的最适致敏浓度分别为250、25、25和6.25μg/ml。血清终点稀释度的倒数皆为1024。用包囊液粗抗原对1295名健康人血清做间接血凝试验(IHA)结果,抗体滴度≥64者仅6例(0.46％)。95例牛肉绦虫病人血清的阳性率为1.05％(1/95)。这种致敏红细胞的冻干制剂,在室温下存放18个月后,仍保持稳定。囊液粗抗原、亲和层析抗原、Oriol氏法纯化抗原和Burstein氏法纯化抗原致敏红细胞,对47例包虫病人血清做IHA结果阳性率各为91.49％、44.68％、76.59％和85.12％,阳性血清抗体滴度的几何均值分别为389.29±2.55、247.69±4.20、271.21±2.45和343.65±2.43。29份囊虫病人血清IHA的结果为囊液粗抗原致敏红细胞的阳性率为27.5％,阳性血清的几何均值为128。其他三种抗原致敏的红细胞均为阳性。说明三种纯化抗原致敏红细胞与囊虫病人血清不发生交叉反应。根据本项实验结果建议将Burstein氏法纯化抗原致敏绵羊红细胞的间接血凝试验做为常规方法。     

一种改良的Dot-ELISA法

改良的Dot-ELISA法,即将点好抗原的NC膜固着于PVC浅孔软板内进行试验。本文以血吸虫卵抗原、肺吸虫成虫抗原、华枝睾吸虫成虫抗原、细粒棘球蚴囊液抗原等4种抗原膜,用改良的Dot-ELISA法,对血吸虫病、肺吸虫病、华枝睾吸虫病、细粒棘球蚴病患者血清各15例以及正常人血清33份进行试验。结果表明:各种抗原与其对应的血清反应在适宜的比例中阳性率可达93％～100％。假阳性率3％。这种改良的Dot-ELISA法,简便易行,可望发展成为一种适用于现场开展多种寄生虫调查的药盒。     

日本血吸虫31／32kDa分子抗原快速诊断试剂盒的研制与 …

目的 基于纯化的日本血吸虫３１／３２ｋＤａ分子抗原,建立一种敏感、特异、简便、快速诊断血吸虫病的试剂盒。方法 采用Ｃｈａｐｐｅｌｌ方法分离纯化Ｓｊ３１／３２ｋＤａ抗原并建立快速ＥＬＩＳＡ,检测急、慢性血吸虫病人,并以肺吸虫病人、肝吸虫病人及正常人血清作为平行对照。结果 血吸虫病人４５７例,阳性检出率９４．３％,６７例肺吸虫病人及７６例肝吸虫病人血清均不出现明显交叉反应,正常人群假阳性率为１％。结论     

间接荧光抗体试验检测感染广州血管圆线虫大鼠…

用广州血管圆线虫成虫切制成４μｍ厚的冰冻切片作抗原，用间接荧光抗体试验检测感染广州血管线虫大鼠血清的抗体，结果在感染后２ｗｋ的５０份鼠血清中，呈阳性反应４６份，阳性率为９２。０％；在感染后４ｗｋ的１９份鼠血清中，呈阳性反应１９份，阳性率为１００％；对照的明性血清及盐水均呈阴性反应。本法检出率高，且感染早期出现阳性反应，可作广州血管圆线虫病早期辅助诊断。     

IEST检测感染犬弓首线虫幼虫鼠血清抗体的研究

用感染犬弓首线虫幼虫鼠肝石蜡切片作为抗原片进行免疫酶染色试验（IEST），检测30份犬弓首线虫幼虫感染鼠血清抗体（IgG），阳性率为96.67％。12份旋毛虫感染鼠血清及12份健康鼠血清抗体均为阴性，结果表明本法的敏感性和特异性均较高。     

肝吸虫皮试反应与粪检符合率的观察

我县应用昌潍医学院寄生虫学教研室供应的1:2000肝吸虫皮内试验抗原,对490例同时做皮试及粪检,阳性率分别为68.78％和8.37％。对皮试阴性153人做粪检,阳性2人,阳性率1.30％。可看出皮试阳性反应率显著高于粪检阳性率,其他寄生     

日本血吸虫31/32kDa分子抗原快速诊断试剂盒的研制与现场应用

目的基于纯化的日本血吸虫31／32kDa分子抗原,建立一种敏感、特异、简便、快速诊断血吸虫病的试剂盒。方法采用Chappell方法分离纯化Sj31／32kDa抗原并建立快速ELISA,检测急、慢性血吸虫病人,并以肺吸虫病人、肝吸虫病人及正常人血清作为平行对照。结果血吸虫病人457例,阳性检出率为94．3％,67例肺吸虫病人及76例肝吸虫病人血清均未出现明显交叉反应,正常人群假阳性率为1％。结论提示采用纯化的优势诊断抗原分子建立的快速诊断试剂盒有较好的现场应用潜能,且具有简便、快速、无需特殊设备等优点,值得推广应用。     

McAb-RIHA法检测日本血吸虫病患者血清循环抗原的效果

本文报告了用抗日本血吸虫肠相关趋阴极抗原单克隆抗体致敏血球建立反向间接血凝试验,对66例急性血吸虫病,123例慢性血吸虫病,57例肝吸虫病,54例钩虫病和82例非疫区健康人血清的检测效果。结果显示,该方法检测急、慢性血吸虫病血清的敏感性分别达到98.5％和81.3％,与肝吸虫病血清交叉反应率为10.5％,与钩虫病血清未见交叉反应,与非疫区健康人血清仅有1.2％的假阳性反应。与平行对照的McAb-Dot-ELISA反应结果相比,两者在检测敏感性和特异性上差别均无显著意义,具有较高符合率,表明McAb-RIHA试验是一种诊断效率和可靠性较高的检测日本血吸虫病血清循环抗原的方法,尤其适宜基层和现场应用。     

应用单克隆抗体酶联免疫吸附试验双抗体法检测人体丝虫病循环抗原

应用兔抗微丝蚴抗体及抗班氏丝虫微丝蚴代谢抗原(ES34株)或抗马来丝虫3期幼虫抗原(HC11株)单克隆抗体(McAb)酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体法检测人体丝虫病循环抗原时,微丝蚴血症者阳性率分别为94.5％(103/109)及89.0％(97/109),且ES34株单克隆抗体ELISA检测结果显示微丝蚴密度与抗原滴度呈正相关;部分微丝蚴血症者尿液中亦可测得丝虫抗原;晚期丝虫病人阳性率分别为57.4％(31/54)及61.1％(33/54);获自美国及中国贵阳非丝虫病流行区正常人血清阳性率分别为0～4.1％及2.8～4.1％;30份肠道蠕虫感染者血清全部为阴性。血清中丝虫循环抗原的存在似与活动性感染有关。     

免疫酶染色试验诊断弓形虫感染的研究

以弓形虫的玻片为抗原,进行了免疫酶染色试验(IEST),检测11份阳性兔血清和34份弓形虫病人血清,阳性率分别是100％和94.1％。4份阴性兔血清和108份阴性人血清,其假阳性率为0％和1.85％。此法与血吸虫病、肺吸虫病、疟疾等均无交叉反应,表明对弓形虫有较高的特异性。15份已知血清每隔半月进行了4次重复试验,其符合率及GRMT均无显著性差异。此法还对健康体检者、不良生育史孕妇和智力低下的儿童进行了检测,其结果分别为8.46％、16.33％和28.26％。此检出结果与IFA无差异。本法具简单、经济、敏感、特异、重复性好等优点,可在现场推广应用。     

胶乳凝集试验检测日本血吸虫病抗体的实验观察

本文对检测血吸虫病抗体的胶乳凝集试验重新进行了评价,证明共价结合的日本血吸虫卵胶乳抗原有较高的敏感性和特异性。143例慢性及32例急性血吸虫病患者的阳性率分别为89.5％及93.8％;92份北京地区献血员及142份美国献血员血清未发现假阳性反应;100份上海居民血清假阳性率3％。曼氏血吸虫病和埃及血吸虫病患者的阳性率分别为40.5％(17/42)及45.5％(5/11);与丝虫病、华支睾吸虫病及肺吸虫病间有7.7～10％的交叉反应,但强度明显低于同种反应。本法抗原稳定、操作简便、快速,适合现场应用。     

PVF抗原片环卵沉淀试验诊断日本血吸虫病敏感性和特异性的进一步观察

据80份粪检阳性的血吸虫病人血清,95份经吡喹酮治疗后3～8年的血吸虫病患者血清和90份非流行区健康人血清,按单盲法混合编号的考核实验结果:PVF—COPT使用江苏省寄研所提供的冷冻干卵抗原和热处理超声干卵抗原,对血吸虫病人血清的阳性率均为83.8％;在有血吸虫病治疗史者血清的阳性率分别为22.1％和15.8％;对正常人血清的假阳性率分别为8.9％和6.7％.此外,对肺吸虫、华枝睾吸虫病和姜片虫病人血清采用冷冻干卵抗原的交叉反应阳性率分别为8％、12％和4％。与常规法COPT的平行对比实验结果均无显著的差异.但标准化的PVF—COPT能预制定量的干卵抗原片,有利于提高COPT的稳定性.操作上较常规法COPT简便.