CLIA法联合TPPA法在临床梅毒血清学筛查中的应用评价

目的探讨化学发光免疫分析(CLIA)法联合梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA),在临床梅毒血清学筛查中的应用价值。方法用CLIA进行特异性梅毒螺旋体抗体初筛试验,阳性标本再经TPPA和梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)复检。CLIA与TPPA结果不一致者用蛋白印迹法(WB)验证。结果 599例CLIA初筛阳性标本用TPPA法复检阳性568例、阴性31例;TRUST法复检阳性189例、阴性410例。31例TPPA阴性标本经WB试验验证结果为18例阴性、13例阳性。结论 CLIA法联合TPPA法初筛梅毒作为梅毒筛查的流程是可行的,值得推广。     

梅毒抗原血清学试验筛查在实验室诊断中的应用

目的探讨梅毒逆向筛查程序方案,分析其在实验室诊断及梅毒筛查防治中的应用价值。方法应用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)、甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST),同时对2015年1至6月杭州师范大学附属医院各门诊及病房梅毒筛查者23 389份标本进行检测。以TPPA为标准,方法间一致性比较采用Kappa检验,通过各方法的灵敏度、特异性、总符合率的比较,分析TP-ELISA作为初筛方法的梅毒逆向筛查程序的可行性,并进一步统计TP-ELISA的S/CO值与TPPA阳性结果的相关性,简化逆向筛查程序。结果 23 389份标本中,TPPA筛查阳性率为3.38%(790份),TP-ELISA、TRUST筛查阳性率分别为3.63%(849份)、1.89%(443份)。TP-ELISA与TPPA在梅毒筛查时具有非常好的一致性(K=0.954),TRUST与TPPA一致性一般(K=0.693),TP-ELISA的灵敏度为99.1%,大于TRUST的灵敏度54.7%,差异有统计学意义(P0.01)。统计发现,当TP-ELISA的S/CO值≥5.0时,其结果与TPPA结果完全一致;当TP-ELISA的S/CO值分布在1.0~4.99之间时,有66例假阳性;当TP-ELISA的S/CO值≤1.0时,所有样本中存在7例假阴性(6例样本TRUST阳性)。结论 TRUST敏感度较低,单独作为梅毒筛查不利于大量隐性梅毒患者的发现;TP-ELISA灵敏度和特异性较高,与TPPA一致,其操作简单,可以自动化批量检测,成本低,适用于临床大样本筛查。     

ELISA和TRUST检测梅毒螺旋体方法比较分析

目的 比较ELISA(酶联免疫吸附试验)、TRUST(甲苯胺红不加热血清试验)法诊断梅毒螺旋体感染的方法学差异.方法 用目前国内最常用的诊断梅毒螺旋体感染的TRUST试剂及ELISA试剂检测722例标本,同时与TPPA(梅毒螺旋体明胶凝集试验)的检测结果进行比较,从而得到各试验的假阴性率和假阳性率.结果 对722份样本的检测中,ELISA和TPPA的阳性符合率为98.26％,假阴性率和假阳性率分别为0.46％和1.91％,2种方法差异无统计学意义(P ＞0.05); TRUST和TPPA的阳性符合率为84.39％,假阴性率和假阳性率分别为21.08％和5.10％;ELISA和TURST检出率差异有统计学意义(P＜0.01).结论 ELISA测定梅毒螺旋体的方法在日常大量标本检验时优于TRUST.     

梅毒血清学检测的适宜方法探讨

目的探讨梅毒甲苯胺红不加热血清反应素试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）在梅毒检测中的应用价值，建立实验室梅毒检测和报告系统。方法用TRUST作为被检测标本的梅毒筛查试验，对筛查阳性标本进一步作TPPA确认试验。对TRUST阴性的高危人群，作TPPA复检。结果8637份被检血清，TRUST阳性者428例，阳性率为4．96％（428／8637）。对TRUST检出的428例阳性标本，TPPA确证阳性325例，阳性符合率为75．93％（325／428）。共有22例TRUST阴性的高危人群，进行了TPPA复检，结果均为阴性。结论TRUST筛查存在一定的假阳性，可用TRUST进行梅毒筛查，对筛查阳性标本进一步作TPPA确认试验。对TRUST阴性的高危人群，应进一步作TPPA复检，两试验均阴性者，告知其可四周后复查，以减少梅毒的误诊和漏诊。     

TPPA和TRUST两种检查方法在梅毒血清学检查中的应用

目的探讨分别采用明胶颗粒凝集试验(TPPA)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)两种检查方法在梅毒血清学检查中的应用。方法选择我院2005年1月—2009年12月26例梅毒血清标本作为研究对象,根据梅毒的诊断标准[2]:其中Ⅰ期梅毒10例,Ⅱ期梅毒9例,Ⅲ期梅毒4例,潜伏梅毒3例;另选10例经临床确定为类风湿性关节炎、乙型肝炎、SLE、肺结核的作为对照组;以及10例健康体检者作为研究对象。46例标本采用明胶颗粒凝集试验(TPPA)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)两种检查方法同时进行检测,操作严格按照各厂家要求进行。观察比较两种检查方法的检测阳性率及敏感性和特异性。结果 TRUST法对梅毒的检测阳性率为80.77%(21/26),TPPA法对梅毒的检测阳性率为96.15%(25/26),TPPA检测法对梅毒检测的阳性率明显高于TRUST检测法(P0.05)。TPPA检测梅毒的敏感性和特异性明显高于TRUST检查法(P0.05)。且检测Ⅲ期梅毒及潜伏梅毒的阳性率分别均高TRUST检测的阳性率,两组比较差异具有显著性。结论 TPPA的敏感性和特异性优于TRUST检测法是临床常用的梅毒确诊试验,但其不适合大量标本的筛查,更适合用于TRUST测定阳性后的确诊试验,建议临床检验医师应予以注意。     

化学发光法检测梅毒螺旋体特异性抗体的方法学评价

目的 评价化学发光法检测梅毒螺旋体特异性抗体的效果.方法 5家实验室分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光检测法(CLIA)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝胶试验(TPPA)进行临床标本的双盲检测.以TPPA结果为标准,分析其敏感性和特异性.结果 共计检测1 525例血清样品,其中TPPA确证阳性308例,阳性率为20.2%.以TPPA作参照,发光法敏感性为100%(308/308),特异性为99.3%(1 208/1 217),阳性结果预测值(PPV)为97.2%(308/317),阴性结果预测值(NPV)为100%(1 208/1 208);5种ELISA试剂总体敏感性为98.1%(302/308),特异性为97.9%(1 192/1 217),PPV为92.4%(302/327),NPV为99.5%(1 192/1 198).结论 CLIA法具有敏感性高和特异性强的特点,适合于临床实验室进行梅毒的筛查.     

HIV TP同步金标法快速检测结果的比较分析

目的为了对目标人群及临床疑似病人进行艾滋病毒(HIV)、梅毒螺旋体(TP)血清快速筛查诊断,并确保HIV、TP快速诊断试剂血清学的检测效果。方法采用Bioline同步HIV、TP胶体金快速检测试剂对浦东新区6个社区的≥60岁的老年人血清共10 000份进行TP、HIV血清学筛查,TP检测阳性者再用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)试剂进行验证,阴性者随机抽取1 000例;HIV快速检测阳性者用Determine胶体硒免疫层析试剂进行比对,阴性者随机抽取1 000例分别TPPA试剂进行验证、用Determine胶体硒免疫层析试剂进行比对;另抽取2016-2019年确证实验室HIV筛查阳性待确证样本同时Determine胶体硒免疫层析方法阳性并蛋白印迹试验(WB)确证为阳性样本1 000例,对Bioline同步快速检测试剂进行验证。结果 1)Bioline同步HIV、TP金标快速诊断法相对于TPPA法的敏感性为98.94%,特异性为100%,其检测结果与TPPA一样包含了既往和现症感染;2)Bioline同步HIV、TP同步金标快速诊断法相对于WB确证实验敏感性100%,特异性99.84%,与Determine胶体硒快速法相比较(两种快诊试剂均以WB为"金标准"),差异均无统计学意义(P 0.01)。结论 Bioline同步HIV、TP金标快速诊断法可以取代Determine胶体硒免疫层析快速诊断用于门诊基层等医疗机构及个人自测,同时可以取代TPPA法用于梅毒筛查。     

1152例梅毒孕妇及所产新生儿的梅毒血清学试验结果分析

目的探讨梅毒孕妇及所产新生儿的梅毒血清学试验在先天梅毒早期诊断的价值。方法收集2013—2017年海南省预防与控制梅毒母婴传播项目中的1 152例梅毒孕妇及其所产的1 152例新生儿标本,进行梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体明胶凝聚试验(TPPA)及梅毒螺旋体免疫球蛋白M(IgM)抗体试验(TP-IgM)检测。结果 1 152例孕妇中TRUST和TPPA的阳性率分别为78.82%(908例)和100.00%;1 152例新生儿中TRUST和TPPA的阳性率分别为47.14%(543例)和97.14%(1 119例);新生儿确诊先天梅毒37例(3.21%),TP-IgM阳性有34例,新生儿TRUST滴度大于或等于母亲TRUST滴度的4倍有10例(7例TP-IgM阳性,3例TP-IgM阴性)。结论 TP-IgM检测为先天梅毒诊断的必要的梅毒血清学检查,再联合TRUST和TPPA检测可提高诊断先天梅毒的准确率,新生儿梅毒TRUST滴度≥1∶64,可作为先天梅毒诊断的重要依据。     

3种梅毒检测方法的比较

目的：对3种梅毒检测方法进行对比分析，选择合适的方法进行献血者的筛查。方法：用非特异性的甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、酶联免疫吸附试验（ELISA）方法对献血者进行梅毒筛检，阳性标本用梅毒确证试验（TPPA）法进行确证。结果：TRUST法灵敏度为60％（42／70），假阳性率6．67％（3／45），漏检率40％（28／70）；ELISA法灵敏度为98．57％（69／70），假阳性率2．82％（2／71），漏检率为1．43％（1／70）。结论：ELISA法具有较高的灵敏度和特异性，漏检率较低，非常适合用于献血者的梅毒筛查。     

四种试验方法检测早期梅毒患者的结果分析

目的了解镀银染色法、聚合酶链式反应(PCR)、梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒明胶颗粒凝集试验(TPPA)等4种方法,对检测早期梅毒患者的临床价值。方法 2012年1月至2016年7月,在广西部分地区的性病门诊收集疑似早期梅毒患者300例,分别采集组织液与血清标本。组织液标本采用镀银染色法检测梅毒螺旋体,PCR方法检测TP polA基因;血清标本用于TRUST检测非梅毒螺旋体抗体,TPPA检测梅毒螺旋体抗体。统计学资料采用SPSS 13.0软件进行分析。结果在215例确诊的早期梅毒患者中,梅毒PCR检测阳性标本210例,敏感性为97.7%;镀银染色法检测出105例,敏感性为48.8%;TRUST检测出196例,敏感性为91.2%;TPPA检测出208例,敏感性为96.7%。结论不同试验检测方法对早期梅毒患者的诊断有不同的临床应用价值,一期梅毒应当做病原学检查及梅毒血清学试验,二期梅毒应当以梅毒血清学试验为主,当出现结果异常时,应要求患者进行随访再检测以明确诊断。     

三种实验室检测方法对梅毒诊断的临床意义分析

目的检验三种梅毒实验室检测方法的梅毒阳性检出率,分析各检测指标间的相互关系,探讨其临床意义。方法抽取性病门诊就诊者的静脉血,用梅毒酶联免疫吸附试验(ELISA)检测梅毒抗体,同时用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)检测同一份血清,二种方法均为阳性者用荧光梅毒螺旋体抗体吸收法(FTA-ABS)检测及免疫印迹法(WB)确认,对试验数据进行统计分析和检查。结果在所有784名性病门诊就诊者中,ELISA检测梅毒抗体阳性者306人,阳性率39.03%;TPPA法检测梅毒抗体阳性为297人,阳性率为37.88%;经FTA-ABS检测确证阳性299人,阳性率为38.14%;最终WB结果与FTA-ABS检测一致。结论为了提高梅毒的检出率及正确性,对高度疑似梅毒的患者,应同时进行两种抗体的检查。     

不同梅毒血清学检测方法的临床价值

目的:评价常用的4种梅毒血清学试验检测方法在临床诊断中的价值。方法:分别用快速血浆反应素试验(RPR)、胶体金免疫层析法(GICA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和微粒子化学发光法(CMIA)对264例标本进行梅毒血清学试验检测,同时与明胶颗粒凝集法(TPPA)的检测结果进行比较,得出不同检测方法的敏感度和特异性。结果:RPR、GICA、ELISA、CMIA的敏感度分别为67.5%、92.1%、96.0%和98.4%,特异性分别为89.1%、100%、100%和100%。结论:RPR可结合其他方法对梅毒进行联合诊断和对已诊断的患者进行疗效观察;GICA适合快速初筛,检测结果需结合其他方法进一步确认;ELISA和CMIA均可替代TPPA法作为临床诊断试验选用。     

妊娠梅毒母婴传播干预后先天梅毒发病情况分析

目的了解深圳市启动预防与控制梅毒母婴传播项目后,先天梅毒的发病情况,为先天梅毒的预防、诊断、治疗及随访管理提供参考依据。方法对宝安区妇幼保健院建档的疑似先天梅毒患儿的发病情况进行分析,对孕妇开展血清学筛查及确诊,根据19S-IgM-梅毒螺旋体明胶凝集试验(19S-IgM-TPPA)确诊先天梅毒,对疑似先天梅毒病例,根据随访结果进一步明确诊断。结果 2004-2009年共检测孕妇67 693例,孕妇梅毒阳性率0.59%;在310例疑似先天梅毒患儿中共确诊79例,发病率从2004年的431例/10万活产儿下降至2009年的127例/10万活产儿。结论 6年间孕妇梅毒的阳性率及先天梅毒的发病率均显著性下降。     

梅毒胶体金法在临床诊断中的应用价值

目的了解梅毒胶体金法在自愿咨询检测(VCT)门诊、社区卫生服务中心和非政府组织(NGO)工作室等临床诊断中的应用价值。方法应用梅毒螺旋体(TP)抗体检测试剂(胶体金法)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA),同时对2011-2013年医院哨点监测性病门诊送检的血清标本进行检测。结果对1204例样本进行检测,梅毒胶体金法阳性检出率为20.51%(247/1204),ELISA法为21.01%(253/1204),TPPA法为20.02%(241/1204)。以TPPA为金标准,梅毒胶体金、ELISA的敏感性均为99.59%,特异性分别为99.27%、98.65%。胶体金法与TPPA法和ELISA法经Kappa一致性检验比较(u分别为135.20、137.71,k=0.98,P0.05),具有极强的一致性。结论梅毒胶体金检测敏感性高、特异性强,具有简便、迅速的特点,值得在临床诊断中推广应用。     

基于重组优势多表位抗原的梅毒间接酶联免疫吸附试验与梅毒螺旋体血凝试验和甲苯胺红不加热血清试验检测梅毒螺旋体抗体的比较研究

目的 建立操作简便、特异性好、敏感性高的血清梅毒抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)。方法 通过计算机分析选择梅毒螺旋体优势抗原表位,构建了梅毒螺旋体多表位优势嵌合抗原(rTpN15-TpN17-TpN42-TpN47)表达载体,转化宿主菌HB101进行表达,纯化获得高纯度融合抗原。在此基础上,以纯化抗原包被酶联板,建立检测血清中梅毒抗体的间接ELISA法。利用该方法与梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)同时检测了126例梅毒可疑血清样本,对检测结果进行了比较研究。结果 梅毒螺旋体多表位优势嵌合抗原(rTpN15-TpN17-TpN42-TpN47)在大肠杆菌中获得了高效表达,并成功建立了检测血清中梅毒抗体的间接ELISA法及试剂。对126例梅毒可疑血清样本的检测结果,ELISA、TRUST、TPHA的检出阳性率分别为75.40％(95/126)、72.22％(91/126)、70.63％(89/126),其中TRUST有29例,TPHA有6例为可疑阳性。TPHA检测的6例可疑阳性中,有5例ELISA、TRUST均为阳性;而TRUST测出的29例可疑样品中,仅7例ELISA、TPHA阳性。结论 多表位嵌合抗原ELISA试剂在特异性、敏感性与TPHA法相近,但明显优于TRUST法。     

The sensitivity of syphilis assays in detecting different stages of early syphilis

Our aim was to determine the sensitivity of the Murex ICE enzyme immunoassay (EIA) as a screening test for early syphilis and to determine how many additional cases of infection were detected by performing additional tests when requested on clinical grounds.This was an observational study on consecutive patients diagnosed with syphilis in the Department of Genitourinary Medicine, Edinburgh between January 1st 2004 and April 1st 2005. Additional tests were performed on sera that gave a positive or equivocal EIA on screening as well as by clinical request on sera from contacts of syphilis, and those with clinical signs of syphilis. Additional tests included a Venereal Diseases Research Laboratory (VDRL) carbon antigen test, a Treponema pallidum particle agglutination (TPPA) test, INNO-LIA line immunoblot assay, and an EIA specific for anti-treponemal IgM.A total of 105 patients were diagnosed with syphilis: primary (50), secondary (26), early latent (8), and of unknown duration (21). The TPPA was the most sensitive test in primary syphilis and had a sensitivity of 96% (48/50), which was significantly higher (P <0.05) than the sensitivity of 84% (42/50) for the screening EIA: seven of the EIA negatives were detected by EIA-IgM, six by TPPA, five by immunoblot, and two by VDRL. EIA-IgM was negative in six primaries; all were positive by TPPA and immunoblot.We conclude that, in order to maximize the serological detection of primary syphilis a specific EIA-IgM test and a TPPA test should be performed whenever there is a clinical suspicion of primary infection. This is particularly important when an EIA such as Murex ICE is used as a single screening test as it is less sensitive than the TPPA in primary infection.     

Evaluation of the fluorescent treponemal antibody absorption test for detection of antibodies (immunoglobulins G and M) to Treponema pallidum in serologic diagnosis of syphilis

We compared the fluorescent treponemal antibody-absorption (FTA-ABS) (immunoglobulin (Ig)G + IgM) assay with the (micro-) Treponema pallidum haemagglutination assay (TPHA), the T. pallidum particle agglutination assay (TPPA), the Murex syphilis ICE (ICE) enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), the Diesse Enzywell TP (TP) (ELISA) using 122 serum samples and the Western blot (WB) assay using 42 serum samples whose results were inharmonious with other tests. Additionally, the Captia syphilis-M (IgM) (ELISA) were performed. All sera had already been examined by the rapid plasma reagin (RPR) card test, a non-treponemal test and the TPHA, a treponemal test using routine screening tests. Agreements of the FTA-ABS with the TPHA test, the TPPA test, the ICE test and the TP test were 97.5%, 95.9%, 98.3% and 98.3%, respectively. The results suggest that the FTA-ABS test is a useful confirmatory test, but can be inadequate as a confirmatory test for serologic diagnosis of syphilis by giving equivocal and false-negative results even rarely.     

潜在血源传播梅毒患者血清抗体检测方法的筛选

目的 筛选潜在血源传播梅毒患者血清抗体检测方法。方法 采用回顾性研究,以市售ELISA试剂盒和rTpN15-17-47-ELISA对24 580例潜在的血源传播患者作梅毒筛选,再对上述任一试验结果阳性者血清行ELISA、rTpN15-17-47-ELISA双孔重复试验与TPPA确诊检测,确定ELISA法和rTpN15-17-47-ELISA法的灵敏度;同时以ELISA法和rTpN15-17-47-ELISA法检测类风湿性关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)等免疫系统疾病患者和健康人血清标本,以判别上述方法的特异性。结果 市售ELISA试剂盒和rTpN15-17-47-ELISA阳性检出率分别为5.9%(1 453/ 24 580)和6.1%(1 501/24 580),ELISA试剂盒和rTpN15-17-47-ELISA的灵敏度分别为97.2%(1 439/1 480)和99.3%(1 470/1 480)。结论 对潜在血源传播的梅毒患者以rTpN15-17-47-ELISA具有高灵敏度的特异性且成本低廉,有推广价值。     

171例梅毒血清学检测阳性及追踪结果分析

目的:研究不同检测方法对梅毒血清学检测的影响,找出最好的筛查方法,减少因输血引起的梅毒传染,协助梅毒诊断。方法:171例分为3组,TP-ELISA及TRUST试验均为阳性的为第1组,仅TP-ELISA阳性的为第2组;仅TRUST阳性的为第3组。对第2、3组3个月后再进行TP-ELISA及TRUST复查,观察有无梅毒血清学变化。结果:171例其中TP-ELISA首次确认阳性163例,TRUST首次确认阳性167例,两者同时阳性159例,TP-ELISA阴性,而TRUST阳性的8例(4.6%);TRUST阴性,而TP-ELISA阳性4例(2.3%);血清学检测有显著性差异(χ2=46 134.421 1,χ23.84,P0.05);8例TRUST阳性者3个月后有2例TP-ELISA阳性,血清学检查差异有统计学意义(χ2=5.25,χ23.84,P0.05)。结论:部分学者认为的TP-ELISA检测优于RPR、TRUST实验不科学,梅毒检测的最佳方案应为一次TP-ELISA和一次梅毒非特异性抗体检测。     

Enzywell recombinant enzyme immunoassay for the serological diagnosis of syphilis

The aim of this study was to evaluate Enzywell TP, a new rapid enzyme immunoassay (EIA) that uses 2 recombinant Treponema pallidum antigens for the serological diagnosis of syphilis. Specificity was evaluated by screening 1055 unselected bloods requesting serological tests for syphilis in parallel with Enzywell TP and the Syphilis ICE EIA which is our standard screening test for syphilis. Sensitivity was evaluated using a panel of 159 known treponemal sera representing various stages of syphilis and 5 treponemal sera detected on screening. The specificity of Enzywell TP on initial and repeat testing (99.6% and 99.7% respectively) was similar to that of the Syphilis ICE test (99.8% and 99.9% respectively). The sensitivity of Enzywell TP (100%) was similar to that of Syphilis ICE (99.4%): both tests were significantly more sensitive (P=0.01) than the fluorescent antibody absorbed test (94.5%) but not the T. pallidum particle agglutination (TPPA) assay (99.4%). Both Enzywell TP and Syphilis ICE were positive with sera from 16 known HIV-infected patients who had been treated for syphilis many years previously (mean 9.4 years) confirming the value of these tests in excluding previous syphilis in HIV-infected individuals. We conclude that the Enzywell recombinant EIA is simple, rapid, highly sensitive and specific, and is a welcome addition to the range of currently available diagnostic tests for syphilis.