Wistar大鼠心肌梗死造模后SDF-1/CXCR4的表达

目的检测基质细胞来源因子-1（SDF-1）和其受体CXCR4在心肌梗死后不同部位心肌组织的表达，研究SDF-1／CXCR4轴在心肌梗死后血管新生中的作用，为近一步的研究进行基础研究。方法结扎Wistar大鼠左冠状动脉前降支复制的心肌梗死大鼠模型术后，分别于0．5h，7d，14d，28d处死后提取总RNA和总蛋白，分别用RT—PCR，PCR和Westem印迹检测心肌组织正常区，边缘区，梗死区在梗死后0．5h，7d，14d，28d时SDF-1、CXCR4在mRNA和蛋白水平表达变化情况。结果假手术组和对照组比较，SDF-1在心肌梗死后大鼠的心脏组织中表达有明显的增高（P〈0．01），一直持续到14d以后，在不同心肌部位的表达有明显的差异；CXCR4在心肌梗死后大鼠的心脏组织中表达有明显的增高（P〈0．01）。结论SDF-1／CXCR4轴在心肌梗死后修复中有着重要的作用。     

间质细胞衍生因子-1α在大鼠心肌梗死区的动态表达

目的探讨急性心肌梗死(AMI)后梗死心肌组织间质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)表达水平的变化。方法雄性Wistar大鼠31只,随机分为AMI组16只和假手术组15只。AMI组采用开胸并结扎左冠状动脉前降支的方法建立AMI模型。假手术组仅开胸并穿结扎线,不结扎前降支。在AMI模型建立后6 h、24 h以及6 d分别处死一批大鼠(每组每个时间点3～4只)。实时定量PCR法测定梗死区组织SDF-1αmRNA表达水平,免疫印迹法测定SDF-1α蛋白的组织表达水平。结果与假手术组相比,AMI组大鼠在梗死6 h时SDF-1αmRNA表达水平明显升高,24 h升高达到高峰(分别是假手术组的3.2倍和5倍,P<0.05),6 d表达水平下降。蛋白表达水平在6 h处于峰值水平,随后即开始下降。结论 AMI时局部心肌组织SDF-1α的表达呈动态变化,但SDF-1α蛋白表达水平与mRNA表达变化并不一致,可能与急性炎症期其他外源性物质释放(如血小板源性)有关。     

厄贝沙坦对充血性心力衰竭大鼠心肌间质MMP-2表达的干预研究

目的:探讨大鼠充血性心力衰竭心肌间质基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达和心功能变化的关系及厄贝沙坦干预对此影响.方法:选用90只SD大鼠,8只不结扎冠状动脉列为假手术组(S组);其余82只结扎其左冠状动脉主干制成心肌梗死模型后,再分为对照组(C 组)和厄贝沙干预组(E组).应用超声心动图评价各组大鼠心功能变化,用免...     

L-精氨酸增加心肌急性缺血大鼠心脏eNOS基因表达

目的　观察大鼠心梗时心脏内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)基因表达的变化和L 精氨酸 (L Arg)对大鼠eNOS基因表达的影响。方法　 4 8只健康成年SD大鼠随机分为对照组 (假手术组 )、缺血组两组。分别取 1h、2h、2 4h三个不同时间点。采用开胸结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌缺血模型 ,用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)检测大鼠心梗后不同时间及L 精氨酸 (30mg/ (kg·次 )× 3)给药后缺血心肌eNOSmRNA表达。结果　①冠脉结扎后 2h组 ,缺血组大鼠心肌eNOSmRNA表达下降 (P <0 0 5 ) ,其下降持续至结扎后 2 4h ;梗死后 2 4h组eNOSmRNA表达与结扎后 2h组相比无显著性差异 ,P >0 0 5 ;②与生理盐水组相比 ,30mg/ (kg·次 )× 3的L Arg静脉注射可增加冠脉结扎后大鼠心肌eNOSmRNA表达 (P <0 0 5 )。结论　①心梗早期大鼠缺血心肌eNOS基因表达减少 ;②L 精氨酸静脉注射增加心梗大鼠缺血心肌eNOSmRNA表达。     

基质细胞衍生因子-1/CXC趋化因子受体4在支气管哮喘大鼠气道炎症及气道重塑中的作用

目的 探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)在支气管哮喘(哮喘)大鼠气道炎症及气道重塑中的作用.方法 将18只SPF级SD雌性大鼠按随机数字表法随机分为对照组、哮喘4周组和哮喘8周组,每组6只.卵清白蛋白(OVA)致敏后,雾化吸人OVA制作哮喘模型.哮喘模型成功后,测定气道压力;通过HE染色、Image-Pro Plus图像分析软件分析大鼠气道平滑肌的嗜酸粒细胞浸润情况,测定支气管管腔的内周长、管壁面积、支气管平滑肌面积以及平滑肌细胞核数;RT-PCR、Western blot方法检测各组大鼠肺组织SDF-1、CXCR4的表达变化;免疫组织化学法检测各组大鼠气道壁SDF-1表达的变化;统计数据并分析SDF-1、CXCR4与哮喘气道重塑及气道炎症的关系.结果 哮喘4周组、哮喘8周组大鼠的气道反应性、气道壁嗜酸粒细胞计数、支气管管壁面积、支气管平滑肌面积、平滑肌细胞核数目均明显高于对照组,哮喘两组间上述指标差异均有统计学意义(均P＜0.01);RT-PCR检测结果显示,哮喘4周组、哮喘8周组大鼠肺组织SDF-1(分别为0.583±0.004和0.724±0.008)、CXCR4(分别为0.467±0.003和0.655±0.002)的表达明显高于对照组(SDF-1为0.146 ±0.003、CXCR4为0.281±0.002),哮喘8周组的SDF-1及CXCR4的表达亦明显高于哮喘4周组,差异均有统计学意义Western blot检测结果显示,(均P＜0.01).Western blot检测结果显示,哮喘4周组、哮喘8周组大鼠气道壁SDF-1的表达(分别为0.270 ±0.006和0.350±0.009)明显高于对照组(0.180±0.009),哮喘8周组的SDF-1的表达量亦高于哮喘4周组,差异均有统计学意义(均P＜0.01);各组大鼠肺组织、气道壁SDF-1、CXCR4mRNA及蛋白的表达与气道反应性、嗜酸粒细胞浸润数、支气管壁面积、支气管平滑肌厚度及支气管平滑肌细胞核数均呈正相关(均P＜0.01).结论 SDF-1/CXCR4信号轴可能在哮喘气道炎症及气道重塑病理过程中起重要作用.     

胸腺素β4对大鼠急性心肌梗死后心功能的影响

目的探讨慢病毒介导的胸腺肽β4基因经梗死区直接注射对大鼠急性心肌梗死后心功能的影响。方法雄性SD大鼠32只,随机分为4组,每组8只。假手术组:开胸+不结扎冠状动脉,心肌内分五点注射生理盐水50μl;生理盐水组:开胸+冠状动脉左前降支结扎,梗死区心肌内注射等量生理盐水50μl;胸腺肽β4组:开胸+冠状动脉左前降支结扎,梗死区心肌内注射pGC-FU-胸腺肽β4 50μl;空载病毒组:开胸+冠状动脉左前降支结扎,梗死区心肌内注射空载病毒50μl。4周后,大鼠心脏超声测定心功能,Western blot法检测胸腺肽β4和血管内皮生长因子蛋白的表达,RT-PCR法检测胸腺肽β4基因的表达。结果胸腺肽β4组LVEF较生理盐水组和空载病毒组明显提高(P<0.01)。胸腺肽β4组心肌组织中胸腺肽β4和血管内皮生长因子蛋白表达较假手术组、生理盐水组和空载病毒组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论经梗死区直接注射慢病毒载体携带的胸腺肽β4基因可以改善心肌梗死后的心功能。     

依普利酮抑制急性心肌梗死大鼠心肌纤维化的作用机制

［］目的 观察依普利酮对急性心肌梗死大鼠心肌中转化生长因子β1(TGF-β1)及心肌纤维化的影响。方法 将结扎左冠状动脉致急性心肌梗死大鼠模型,随机分为急性心肌梗死组和依普利酮治疗组,假手术组为仅打开心包腔而未行冠状动脉结扎大鼠。分别用依普利酮(30mg.kg-1.d-1)和等量生理盐水灌胃4周。心肌Masson染色法测定心肌胶原密度,测算心肌胶原容积分数(CVF)和血管周围胶原面积(PVCA);碱水解法测定羟脯氨酸(Hyp)含量;放射免疫法检测心肌醛固酮(Ald)含量;Western-blot检测心肌TGF-β1表达。 结果 (1)急性心梗组大鼠心肌组织中CVF、PVCA、Hyp较假手术组显著增加(P ＜0.01),心肌Ald、TGF-β1表达显著升高,(P ＜0.01)。(2) 依普利酮治疗组大鼠心肌中CVF、PVCA、Hyp较急性心梗组显著降低(P ＜0.01),心肌TGF-β1表达显著减低(P ＜0.05)。 结论 抑制急性心肌梗死大鼠心肌组织中TGF-β1表达,这可能是依普利酮抑制心肌纤维化的机制之一。     

应变/应变率成像结合基质金属蛋白酶-9评价心力衰竭大鼠心肌收缩功能及心室重构

目的 应用应变/应变率成像(S/SRI)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达评价心肌梗死后心力衰竭(心衰)大鼠心肌收缩功能及心室重构.方法 70只雄性SD大鼠随机分为4组:手术4周组及手术8周组,开胸结扎左冠状动脉前降支;假手术组,同样开胸,但不结扎;正常组作为对照.应用S/SRI定量评价心肌局部收缩功能,用Western blot法检测各组实验大鼠心肌MMP-9蛋白表达.结果 (1)除下壁中间段及基底段外,手术4周组各节段收缩期峰值应变、收缩期峰值应变率、收缩末期应变均明显下降(P<0.05),收缩后应变指数升高(P<0.05);手术8周组各指标值较手术4周组变化更明显(P<0.05).(2)手术4周组和手术8周组大鼠心肌MMP-9蛋白的表达明显增加(P<0.05),且手术8周组MMP-9蛋白的表达高于手术4周组(P<0.05).结论 S/SRI技术可定量检测心衰大鼠局部心肌收缩功能,在术后8周内大鼠心肌组织MMP-9蛋白的表达随心衰的进展而增高.     

姜黄素对急性心肌梗死大鼠心功能及心肌纤维化的作用

目的:研究姜黄素对心肌梗死大鼠心脏功能改善作用及对心肌胶原含量的影响。方法:将60只健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(10只,存活9只)和手术组[50只,结扎左冠状动脉前降支,被随机分为下述4组,于28日各组处理及存活大鼠为:心梗组(8只),对照组(腹腔注射混合溶液,10只)和姜黄素组(腹腔注射姜黄素100mg·kg-1·d-1,12只)]。4周后用M型超声检测大鼠心脏的左室缩短分数(LVFS),左室射血分数(LVEF)和心率(HR)。Masson染色观察大鼠心肌梗死后纤维化变化情况。采用免疫组化技术检测大鼠心肌胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ表达及胶原Ⅰ/Ⅲ比值。结果:4周后,与心梗组和对照组比较,姜黄素组LVFS[(17.23±1.97)%、(19.34±0.83)%比(26.70±1.15)%],LVEF[(42.08±5.50)%、(41.63±1.81)%比(56.76±2.49)%]显著提高,HR[(433.16±20.05)次/min、(433.04±24.17)次/min比(403.96±7.08)次/min]显著降低,心肌胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ的含量及I/III比值[(13.5±0.9)、(13.9±1.0)比(10.3±1.6)]显著降低,P均0.01。Masson染色表明急性心梗可引起明显的左心室间质纤维化。结论:姜黄素可明显改善急性心梗大鼠心脏功能,抑制心肌纤维化水平。     

二氯化钴预处理对脑梗死大鼠基质细胞衍生因子1α和趋化因子受体4表达的影响

目的探讨缺氧缺血环境中基质细胞衍生因子(SDF-1α)和趋化因子受体4(CXCR4)生物轴对脑保护作用及二氯化钴预处理的影响。方法选择成年雄性SD大鼠168只,随机分为干预组84只,模型组84只。按缺血后再灌注时间分为再灌注6、24h、3、5、7、14d6个时间点。采用改良Longa方法制备局灶性脑缺血模型,通过免疫组织化学法及Western blot法观察2组大鼠脑组织皮质区脑缺血后再灌注各个时间点SDF-1α及CXCR4表达变化。结果干预组于脑缺血再灌注6h皮质区SDF-1α、CXCR4阳性细胞表达明显增加,7d表达至最高水平,随后表达逐渐减少,14d仍有阳性表达。干预组各时间点皮质区SDF-1α、CXCR4阳性细胞表达明显高于模型组(P0.05)。模型组及干预组大鼠皮质区脑组织6h时SDF-1α、CXCR4蛋白表达即明显增加,7d达高峰,14d仍有阳性表达;干预组各时间点CXCR4蛋白表达明显高于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论二氯化钴可能通过上调SDF-1α、CXCR4表达水平,诱导脑缺氧耐受,促进间充质干细胞向缺血组织迁移,发挥脑保护作用。     

硫化氢下调Yes相关蛋白1和含PDZ结合基序的转录共激活因子抑制大鼠心肌梗死心肌细胞凋亡及改善心肌纤维化的机制研究

目的探讨外源性硫化氢(H2S)对心肌梗死(心梗)后大鼠心肌纤维化和心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法 43只SD大鼠按随机数字表法分为4组:对照组12只、心梗组13只、硫化氢组6只和心梗+硫化氢组12只。采用异丙肾上腺素腹腔注射法(50 mg/kg, 1次/d, 共2 d)建立急性心梗大鼠模型, 末次给药后48 h记录心电图及肌钙蛋白变化确定造模情况。造模成功后, 心梗组和心梗+硫化氢组大鼠每日腹腔注射硫氢化钠(56 μmol/kg, 1次/d, 持续6周)。6周后比较各组大鼠心脏彩色超声观察心功能变化情况, Masson染色观察各组大鼠心肌胶原容积分数, TUNEL染色检测各组大鼠心肌细胞凋亡率, 酶联免疫吸附(Western blot)法检测Yes相关蛋白1(YAP1)、含有PDZ结合基序的转录共激活因子(TAZ)、哺乳动物STE20样激酶2(MST2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)、基质金属蛋白酶3(MMP3)/基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP2)比值、B细胞淋巴瘤因子(Bcl-2)等蛋白在各组大鼠心肌组织的表达变化情况。结果与对照组比较, 心...     

心肌梗死后基质细胞衍生因子-1的表达及其意义

目的 探讨大鼠心肌梗死(MI)后不同时间,梗死组织基质细胞衍生因子-1(SDF-1)的表达以及与骨髓间充质干细胞（MSC）迁移的关系,为细胞移植提供可靠依据。方法 在MI后不同时间,用PCR测定梗死组织中SDF-1表达的水平。提取梗死心肌组织提取液,在Costar Transwell 双层细胞培养皿观察MI后不同时间梗死心肌组织对MSC迁移能力的影响。结果 SDF-1在组织脏器内的表达存在差异,MI梗死心肌组织中SDF-1的表达呈现出时间变化的趋势,梗死后48 h 达到高峰水平。梗死后的心肌组织对MSC迁移的影响与SDF-1的表达呈相同的变化程序,梗死后48 h 对MSC的趋化作用最强。经SDF-1的受体CXCR4特异性阻滞剂处理后,MSC向梗死组织提取液迁移的能力受到明显抑制。结论 MI后的早期,局部组织中SDF-1的表达明显升高,并可在MI后2周内维持在一个相对高的水平,其对于移植细胞向梗死区域迁移具有重要的作用。     

犬间质来源细胞因子-1的基因克隆和体内分布及在急性心肌梗死中的表达变化

目的克隆犬间质来源细胞因子-1（Stromal derived factor-1，SDF-1）全长cDNA，并研究其在犬体内不同组织的表达分布情况及其在急性心肌梗死后的动态变化规律。方法用RT-PCR的方法克隆出犬SDF-1全长cDNA，经过双向序列测定加以确认。通过结扎冠状动脉左前降支制备犬急性心肌梗死模型。实验动物分为2组：心肌梗死组犬（MI组）和假手术组犬（S组），MI组再按观察时点随机分为2h，7d和4周，采用Real-timeRT-PCR检测SDF-1的mRNA表达情况，用HE染色观察心肌形态变化。结果（1）成功克隆犬SDF-1全长cDNA；（2）SDF-1在正常犬的心肌、脑、脾脏、肝脏、血管、肾脏、骨骼肌、睾丸和肺中均有构成性表达；（3）AMI后，心梗区的SDF．1mRNA的表达于2h开始下降，7d继续下降，4周开始回升，接近正常对照（假手术组）的水平，周围正常心肌于2h开始下降，7d开始回升，4周继续上升。心梗2h，SDF-1mRNA表达水平，心梗区高于周围正常区（P〈0．01），7d和4周时则低于周围正常区（P〈0．05）。结论SDF．1在正常的生理功能调节中具有重要的意义，它还可能与干细胞向缺血心肌的动员和归巢相关。     

基质细胞因子对CD34+骨髓干细胞心肌归巢影响的实验研究

目的研究骨髓干细胞向心肌梗死区迁移归巢的机制,探讨其对心肌梗死的作用。方法开胸结扎冠状动脉前降支制备大鼠心肌梗死模型,心肌梗死边缘区注射基质细胞因子(SDF-1),通过病理学检测方法,研究心肌梗死后心肌细胞分泌细胞因子的变化及与骨髓干细胞迁移归巢之间的关系。结果心肌梗死后1dSDF-1表达最高,为(2.62±0.28)ng/ml,7d时为(0.24±0.11)ng/ml,浓度迅速降低,两者比较P<0.01,至14d时已检测不到SDF-1的表达;假手术组始终无SDF-1的表达。在心肌梗死区边缘局部注射SDF-124h后,可见CD34+骨髓干细胞浸润,为(22.48±4.36)个/高倍视野;未注射SDF-1的心肌梗死区也可见CD34+骨髓干细胞浸润,但仅为(8.03±1.14)个/高倍视野,P<0.01。心肌梗死后14d,注射SDF-1组与未注射组心肌梗死区毛细血管密度分别为(9.47±2.4)和(2.77±1.64)个/高倍视野,两者比较,P<0.01。结论在心肌梗死区边缘局部注射SDF-1,可以促进CD34+骨髓干细胞向心肌梗死区归巢,可能参与毛细血管增生和坏死心肌的修复。     

阻断整合素α4对大鼠心肌梗死后心功能的影响

摘要:目的 探讨阻断整合素α4对大鼠心肌梗死后心功能的影响.方法 28只雌性SD大鼠,通过结扎冠状动脉左前降支,建立心肌梗死模型后,随机分为实验组和对照组,每组14只.实验组腹腔内注射整合素α4抗体,对照组注射同种型对照抗体IgG.造模2和4周后,心脏超声测量大鼠心功能,Western blot检测心肌梗死区血小板生长因子(PDGF)、血管生长因子(VEGF)和血管生长因子受体2(FLK-1)蛋白表达,并测量心肌梗死面积.结果 与对照组比较,实验组大鼠心功能明显升高;心肌梗死区PDGF、VEGF和FLK-1蛋白表达明显升高;心肌梗死面积明显降低(P＜0.05).结论 阻断整合素α4可以降低大鼠心肌梗死面积,提高心功能.     

基质细胞衍生因子-1α及相应受体血小板源性因子受体-4在冠状动脉疾病中表达及其临床意义

目的:检测基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)及相应受体血小板源性因子受体-4(CXCR4)在冠状动脉疾病中的表达水平,探讨SDF-1α在冠状动脉疾病中的作用及其临床应用价值。方法:分别采用酶联免疫吸附法和流式细胞法(FCM)检测42例冠心病患者[13例急性心肌梗死(急性心肌梗死组),14例不稳定性心绞痛(不稳定性心绞痛组),15例稳定性心绞痛(稳定性心绞痛组)]及16例正常健康对照者(正常对照组)血浆SDF-1α和其相应受体CXCR4表达水平。同时,分离不稳定性心绞痛组患者外周血单个核细胞进行体外研究,用酶联免疫吸附法测定SDF-1α(终浓度,500ng/ml)干预前后单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和组织型金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达水平。结果:SDF-1α表达在稳定性心绞痛组有升高趋势,但与正常对照组相比较,差异无显著性(P>0.05);在不稳定性心绞痛组和急性心肌梗死组SDF-1α表达明显降低(P<0.05)。其相应受体CXCR4在稳定性心绞痛组表达有升高趋势,但与正常对照组相比较,差异无显著性(P>0.05);而在不稳定性心绞痛组和急性心肌梗死组CXCR4表达明显升高(P<0.01)。同时,体外研究结果显示,肿瘤坏死因子-α和单核细胞趋化蛋白-1在SDF-1α干预后的表达较干预前明显降低(P<0.01);而组织型金属蛋白酶抑制剂-1     

急性心肌梗死大鼠心脏一氧化氮合酶表达的改变

目的 通过建立大鼠心肌梗死模型，观察急性心肌梗死对大鼠心脏内皮型一氧化氮合酶mRNA和诱导型一氧化氮合酶蛋白表达的影响。方法48只健康成年SD大鼠（体重200～250g）随机分为假手术组和缺血组，取1、2、8和24h四个不同时间点观察。采用开胸结扎冠状动脉左前降支建立心肌缺血模型，逆转录聚合酶链反应检测大鼠心肌梗死后1、2及24h三个时段缺血心肌内皮型一氧化氮合酶mRNA的表达；免疫组织化学染色检测冠状动脉结扎后8h缺血心肌诱导型一氧化氮合酶蛋白的表达。结果冠状动脉结扎后2h，缺血组大鼠缺血心肌组织内皮型一氧化氮合酶mRNA表达下降（P〈0．05），并持续至结扎后24h；结扎后24h组内皮型一氧化氮mRNA的表达与结扎后2h组相比无显著性差异（P〉0．05）。冠状动脉结扎后8h，梗死区存活心肌组织细胞诱导型一氧化氮合酶蛋白大量表达，而假手术组未见诱导型一氧化氮合酶蛋白表达。结论正常大鼠心肌组织有内皮型一氧化氮合酶基因表达，无诱导型一氧化氮合酶蛋白表达。在心肌梗死早期缺血心肌内皮型一氧化氮合酶mRNA表达减少。心肌急性缺血刺激早期诱导大鼠缺血心肌组织诱导型一氧化氮合酶蛋白大量表达。     

胸腺肽β4在大鼠心肌梗死模型中介导心脏功能保护机制

目的探讨胸腺肽β4在大鼠心肌梗死模型中介导心脏功能保护机制。方法选择雌性SD大鼠54只,通过左前降支冠状动脉结扎建立心肌梗死模型,随机分为2组:实验组大鼠腹腔内注射胸腺肽β4(5 mg/kg),对照组大鼠腹腔内注射磷酸盐缓冲液,每组27只。2～4周后心脏超声测量大鼠心功能(左心室收缩末内径、左心室舒张末内径、左心室短轴缩短率、左心室射血分数),Western blot检测梗死区生物活性蛋白因子,并测量心肌梗死面积和心肌收缩速率。结果与对照组比较,实验组大鼠注射胸腺肽β4后,心肌缺血组织中血管生长因子相关蛋白表达明显升高,心脏功能与心肌的收缩速率明显升高,而心肌梗死面积明显缩小,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胸腺肽β4保护心脏功能防止心肌缺血后器官功能失调。     

心肌梗死后Akt介导的间质细胞源因子1调控循环血内皮祖细胞归巢

目的 探讨急性心肌梗死引起的缺血心肌中Akt-SDF-1信号分子变化情况及其与内皮祖细胞归巢之间的关系.方法 利用左前降支冠状动脉结扎术制备大鼠心肌梗死模型后,局部心肌注射Akt抑制剂或等体积二甲基亚砜,分别于术后1、7、14、28天取材,用酶联免疫吸附测定法检测Akt及SDF-1表达变化情况,用流式细胞仪(FACS)及免疫组织化学法检测循环血及局部心肌内皮祖细胞数量变化情况,免疫组织化学法计数血管数量.结果 酶联免疫吸附测定结果显示,急性缺血诱导局部心肌Akt和SDF-1表达水平呈进行性升高,FACS及免疫组织化学检测也显示循环血及心肌局部内皮祖细胞数量呈进行性增加,14天达高峰,28天后以上各项指标明显回落,血管计数也显示相同的动态变化,Akt抑制剂显著抑制上述各项指标的动态演变,使其在心肌梗死后各时间点无显著性差异.结论 心肌梗死后缺血心肌可通过Akt-SDF-1信号通路调控循环血内皮祖细胞归巢、梗死心脏局部干细胞生存和血管新生.     

急性心肌缺血大鼠诱生型一氧化氮合酶的检测

目的 观察诱生型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide sythase,iNOS)蛋白在心肌梗死后早期大鼠心脏的表达变化.方法 将12只大鼠随机分为心肌梗死组和假手术组.采用开胸结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌缺血模型,用免疫组织化学方法检测大鼠心肌梗死后24 h缺血心脏iNOS蛋白颗粒的表达.结果 在大鼠冠状动脉结扎后24h,梗死周围区心肌组织细胞出现大量iNOS蛋白表达,与假手术组相比差异有统计学意义(P＜0.01)假手术组未见iNOS蛋白表达.结论 正常心肌组织无iNOS蛋白表达,心肌梗死后早期缺血心肌组织检测到大量iNOS蛋白表达.