三七总皂苷对血管内皮细胞凋亡及凋亡调控基因的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)在不同浓度和不同作用时间下对内皮细胞凋亡率及凋亡调控基因(Fas)的作用及三七总皂苷对其影响.方法采用流式细胞技术测定在血管紧张素Ⅱ不同浓度和不同作用时间下,内皮细胞凋亡率及Fas和Bcl-2表达量的变化.结果血管紧张素Ⅱ可明显促进凋亡率及Fas的表达量,且其作用呈剂量依赖性和时间依赖性;经药物处理后的内皮细胞对AngⅡ的反应完全不同,凋亡率明显降低,同时Fas的表达量随药物浓度增加和作用时间延长而降低,Bcl-2则增高.结论血管紧张素Ⅱ具有明显的促进细胞凋亡和凋亡基因表达的作用;三七总皂苷对细胞凋亡和Fas表达有一定的调节作用.     

莪术油注射液对肝星状细胞凋亡的影响

在各种治疗肝纤维化的方法中,以肝星状细胞(HSC)为靶点成为目前的研究热点[1-2].国艳等[3]研究发现,莪术油注射液对体外培养的HSC有明显促凋亡作用,但其凋亡机制尚不清楚.我们进一步检测和证实了莪术油注射液对HSC的促凋亡作用;并同时检测促凋亡基因Fas、抑凋亡基因bcl-2与凋亡蛋白酶caspase-3,试图揭示莪术油注射液促进HSC凋亡作用的可能机制.     

α-硫辛酸对高糖诱导的血管内皮细胞凋亡的保护作用

目的 观察α-硫辛酸对高糖诱导的血管内皮细胞凋亡是否有保护作用.方法 以不同浓度α-硫辛酸干预高糖作用下的血管内皮细胞(ECV304),共同孵育72h,以Annexin-FITC/PI双染流式细胞术和TUNEL法检测细胞凋亡.结果 高糖明显增加内皮细胞凋亡(P＜0.01);以不同浓度α-硫辛酸干预,内皮细胞凋亡明显减少(P＜0.01),这种作用具有浓度依赖性.结论 α-硫辛酸对高糖诱导的血管内皮细胞凋亡有保护作用.     

活血益气方药对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的研究活血益气方药对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法以左冠状动脉结扎致急性心肌梗死大鼠为模型,造模后分别给予活血、益气、气血注射液及卡托普利治疗,采用TUNEL、免疫组化方法检测模型、假手术及给药动物的心肌细胞凋亡情况及凋亡调控基因的表达.结果不同治则中药对心肌细胞凋亡有明确的抑制作用,以活血药物的作用最好;中药可以显著上调抑制凋亡基因的表达和下调促凋亡基因的表达.结论不同治则中药对心肌梗死后心力衰竭心肌细胞凋亡有抑制作用,可能通过影响凋亡相关基因的表达起作用.     

Exenatide对软脂酸诱导RINm5f细胞凋亡的保护作用

目的 探讨软脂酸对胰岛细胞RINm5f的损伤作用及艾塞那肽(Exenatide)对其的保护作用.方法以体外培养的大鼠胰岛细胞RINm5f为模型,利用MTT比色法检测Exenatide对细胞增殖的影响及其对软脂酸诱导的RINm5f凋亡的保护作用；流式细胞术观察RINm5f的凋亡率；利用AO/EB双染方法,激光共聚焦技术观察RINm5f细胞凋亡形态学改变.结果Exenatide对RINm5f的促增殖作用呈时间和剂量依赖性；激光共聚焦显微镜下,Exenatide与单纯软脂酸组比较较少见凋亡细胞；Exenatide组凋亡率明显低于软脂酸组,并呈剂量依赖性.结论Exenatide有促进胰岛细胞增殖作用,并可抑制软脂酸诱导的凋亡,是其保护胰岛细胞的机制之一.     

全反式维甲酸和Caspase抑制剂Z-VAD-FMK对胰腺癌细胞凋亡的作用

目的观察全反式维甲酸(ATRA)对体外胰腺癌细胞生长的影响以及caspase抑制剂Z-VAD-FMK对细胞凋亡的作用.方法胰腺癌细胞PaTu8988与ATRA或与ATRA+caspase抑制剂Z-VAD-FMK共同孵育后,用MTT方法观察细胞活性,观察细胞超微结构改变,DNA断裂分析,流式细胞仪检测凋亡细胞比例和测定caspase-3活性.结果ATRA对细胞的生长有明显的抑制作用.ATRA诱导后电镜和DNA断裂分析发现典型凋亡特征.与ATRA处理组相比,ATRA和Z-VAD-FMK联合作用对细胞凋亡比例无影响.ATRA组caspase-3蛋白的活性随孵育时间延长而升高,且与凋亡比例相关,Z-VAD-FMK处理组caspase-3活性明显下降.结论ATRA能够抑制胰腺癌细胞生长并诱导细胞凋亡.同时,与Z-VAD-FMK联合作用能抑制caspase蛋白活性,但未使细胞凋亡比例相应降低,提示在胰腺癌凋亡过程中可能有其他蛋白酶的作用.     

氯沙坦与卡托普利合用对凋亡调控基因的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在不同浓度和不同作用时间下对内皮细胞凋亡调控基因的作用及卡托普利和氯沙坦对其影响.方法采用流式细胞技术测定了AngⅡ在不同浓度和不同作用时间下凋亡基因Fas和Bcl-2表达量的变化和卡托普利、氯沙坦及两者合用时对其的影响.结果AngⅡ可明显促进凋亡基因的表达量,且其作用呈剂量依赖性和时间依赖性;经药物处理后的内皮细胞对AngⅡ的反应完全不同,Fas的表达量随药物浓度增加和作用时间延长而降低,Bcl-2则增高;单用氯沙坦对凋亡基因表达无明显作用,卡托普利有一定的作用,两者合用时作用较明显.结论AngⅡ具有明显的促进凋亡基因表达的作用;卡托普利对基因表达有一定的调节作用,合用卡托普利和氯沙坦有较明显的调节作用.     

胆碱对H2O2诱导的心肌细胞凋亡的保护作用

目的 探讨M3受体激动对H2O2诱导的大鼠培养心肌细胞凋亡的作用.方法 以 H2O2诱导大鼠培养心肌细胞损伤模型为基础,给予M3受体激动剂胆碱和M3受体阻断剂4DAMP进行干预.流式细胞仪检测细胞凋亡;RT-PCR检测凋亡抑制蛋白Bcl-2.结果 ①胆碱可显著降低 H2O2对心肌细胞的损伤,提高心肌细胞存活率,并降低细胞的凋亡率;②胆碱可增加凋亡心肌细胞Bcl-2的表达;③M3受体阻断剂4DAMP可逆转胆碱的上述作用(P＜0.01) .结论 激动M3受体对H2O2诱导的心肌细胞凋亡有保护作用,其机制可能与凋亡抑制蛋白Bcl-2有关.     

PHI对Burkitt淋巴瘤Daudi细胞株凋亡调控的实验研究

目的:研究PHI在体外对伯基特淋巴瘤淋巴瘤Daudi细胞株的作用,观察PHI对诱导淋巴瘤细胞凋亡的影响,初步探讨其可能的机制.方法:用MTT比色法检测体外Daudi细胞在PHI作用后增殖率的变化.用流式细胞术观察PHI诱导Daudi细胞凋亡.用蛋白免疫印迹法(Western Blot)观察在PHI作用下凋亡相关蛋白Bc...     

羟基喜树碱诱导胃癌细胞凋亡的实验研究

目的 研究羟基喜树碱(HCPT)诱导胃癌细胞的凋亡作用,探讨其治疗胃癌的作用机制.方法 应用MTT、TUNEL染色、流式细胞仪技术研究HCPT对胃癌细胞SGC-7901、MKN-45、MKN-28的细胞毒和诱导凋亡的作用.结果 HCPT具有很强的细胞毒作用,对三株不同分化程度胃癌细胞的SGC-7901(中分化)、MKN-45(低分化)、MKN-28(6高分化)的IC50为0.008～0.012mg/ml.HCPT作用于细胞后,可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化:细胞核固缩,染色质凝集,呈新月型紧贴于核膜周边,核碎裂,染色质片断化,凋亡小体形成等.流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体"凋亡峰".流式细胞仪计数显示,HCPT诱导胃癌细胞SGC-7901、MKN-45、MKN-28的凋亡率分别为21.88%、12.35%、30.26%.HCPT诱导胃癌细胞的凋亡率与胃癌的分化程度有关.TDT染色法显示,细胞凋亡指数在12.35%～30.26%之间.HCPT的作用表现为细胞周期特异性,HCPT主要作用于细胞周期的S期,抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡,使细胞阻滞于S期.结论 HCPT对胃癌细胞具有很强的细胞毒作用,诱导凋亡是其主要作用机制之一.     

丹皮酚诱导人MCF-7细胞凋亡的机制

目的 观察丹皮酚诱导人MCF-7乳腺癌细胞凋亡形态学和凋亡率的机制.方法 应用MTT法观察丹皮酚对MCF-7细胞的细胞毒作用；应用hoechst单染观察丹皮酚对肿瘤细胞形态学的影响；Annexin V-FITC/PI双染,流式细胞仪测定丹皮酚诱导MCF-7细胞凋亡的凋亡率.结果 丹皮酚作用于MCF-7细胞的IC50为60 mg/L;细胞形态学出现核碎裂、凋亡小体等典型的细胞凋亡特征；60 mg/L丹皮酚作用24 h、48 h的凋亡率分别为14.24％和28.47％.结论 丹皮酚通过诱导MCF-7细胞凋亡而抑制肿瘤细胞生长.     

LY294002对舌鳞状细胞癌Tca8113 细胞生长及凋亡的影响

目的 观察PI3k/Akt抑制剂LY294002对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞生长及凋亡的影响. 方法 用不同浓度LY294002作用于Tca8113细胞.MTT法检测Tca8113细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,透射电镜观察细胞形态. 结果 经LY294002作用后,Tca8113细胞凋亡率增加;40μmol/L的LY294002作用72 h后,Tca8113细胞呈典型的凋亡改变;Tca8113的抑制率和凋亡率均与LY294002浓度和作用时间呈正相关(r分别为0.509、0.412,P均<0.01). 结论 LY294002抑制Tca8113生长并促进其凋亡.     

雌激素对血管平滑肌细胞凋亡及c-myc基因表达的影响

目的探讨17β雌二醇(E2)对血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的影响及其可能机制.方法应用流式细胞仪检测低、高浓度17βE2(10、100 nmol/L)对传代的VSMC凋亡率的影响,并通过细胞免疫组化方法观察对凋亡相关基因c-myc表达的影响.结果17β E2作用下VSMC凋亡率显著高于对照组(P＜0.01),伴随着VSMC凋亡率的增加,c-myc蛋白的表达亦增强,且表现明显的浓度依赖性.结论17β E2具有诱导VSMC凋亡的作用,其部分机制可能是通过上调促凋亡基因c-myc的表达有关.     

核因子-κB与细胞凋亡关系的研究进展

核因子-κB是一类具有多向转录调节作用的核蛋白因子,存在于多种组织的多种细胞中,具有广泛的生物学活性,激活后参与许多基因的转录调控,在感染、炎症反应、氧化应激、细胞增生、细胞凋亡等过程中发挥作用.近年的研究表明NF-κB与细胞凋亡的关系密切,其参与多种凋亡相关基因的转录调控,在肿瘤的发生、发展过程中发挥重要作用.许多高表达NF-κB的细胞表现出对放疗、化疗、细胞因子介导的凋亡的抵抗作用,而现在又发现NF-κB具有促进细胞凋亡的作用.因而NF-κB与细胞凋亡存在双向调节关系:既可抑制细胞凋亡,也可促进细胞凋亡.是抑制凋亡,还是促进凋亡依赖于细胞类型和刺激因素的不同,但具体机制还不十分清楚.本文对其与细胞凋亡关系的研究作一综述,同时也为进一步改善肿瘤的有效治疗提供理论基础.     

乙醇对大鼠血管内皮细胞的促凋亡作用

目的 探讨乙醇对大鼠血管内皮细胞的促凋亡作用.方法 乙醇灌胃制备大鼠实验模型,选用平铺内皮细胞,苏木素-伊红染色染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的-生物素平移末端标记和分光光度法了解乙醇对大鼠血管内皮细胞的促凋亡作用.结果 正常对照组未见凋亡细胞,而实验各组均可见凋亡细胞,其凋亡率有时间依赖性;实验各组血清中丙二醛含量显著增加和总抗氧化能力显著降低,其值具有时间依赖性.结论 过量乙醇使体内氧化-抗氧化系统严重失衡可导致内皮细胞凋亡.     

舒林酸对人结肠癌细胞凋亡及相关基因表达谱的作用

目的:观察舒林酸对人结肠癌LOVO细胞株凋亡的影响,以及舒林酸作用后的该细胞基因表达谱改变.方法:应用透射电镜,流式细胞仪观察舒林酸作用48 h、72 h对LOVO细胞凋亡的影响;基因芯片法检测舒林酸作用前后LOVO细胞的差异表达基因.结果:经舒林酸处理后细胞有典型的凋亡小体形成:经舒林酸0.6、0.9、1.2 mmo1/L作用后,细胞凋亡率与对照组比较明显升高(48h:4.2±1.04,4.26±0.28,7.51±2.09 vs 1.81±0.9l:72 h:6.21±0.56,7.48±1.45,10.40±1.30 vs 2.06±1.43:均P<0.05).与含有17101个cDNA的基因芯片杂交.筛选出差异表达基因1O13条,其中178条为凋亡相关基因(表达上调82条,下调96条),占所有差异表达基因的17.87%.结论:舒林酸具有诱导LOVO细胞发生凋亡的作用.上调或下调某些凋亡相关基因的表达可能是其诱导凋亡的分子机制之一.     

内质网应激信号在姜黄素诱导Jurkat细胞凋亡中的作用

目的 观察姜黄素对Jurkat细胞的作用,研究内质网应激信号在姜黄素诱导Jurkat细胞凋亡中的作用.方法 在体外培养体系中,通过甲基噻唑蓝(MTT)比色法分析姜黄素对Jurkat细胞存活和增殖的作用,流式细胞学分析姜黄素对Jurkat细胞凋亡的作用,Western印迹检测Jurkat细胞凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶...     

天花粉蛋白对胃癌多药耐药细胞的细胞毒和诱导凋亡作用

目的研究天花粉蛋白(TCS)对胃癌多药耐药细胞细胞毒和诱导凋亡作用,探讨其治疗胃癌多药耐药的可能性.方法采用生长曲线、MTT、电镜、TUNEL染色和流式细胞仪等技术,研究TCS对胃癌多药耐药细胞SGC-7901/VCR和MKN-45/VCR的增殖抑制和诱导凋亡作用.结果 TCS明显抑制胃癌多药耐药细胞SGC-7901/VCR和MKN-45/VCR的生长,其作用与对其本细胞的抑制作用相近.TCS对SGC-7901/VCR和MKN-45/VCR细胞有较强的细胞毒作用,TCS对SGC-7901和SGC-7901/VCR的IC50分别为28.6μg/mL和35.3 μg/mL;对MKN-45和MKN-45/VCR的IC50分别为和10.67μg/mL和14.61μg/mL.TCS作用于MKN-45细胞后,光镜和电镜下能见到典型的细胞凋亡形态学特征:细胞核染色质致密浓缩,染色质断裂、凋亡小体形成等.TUNEL检测显示耐药细胞凋亡指数为2.8%～11.5%,流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体"凋亡峰",耐药细胞凋亡率在4.73%～21.5%,细胞凋亡与TCS作用时间和浓度相关.结论 TCS对胃癌多药耐药细胞有较强的细胞毒和诱导凋亡作用,具有治疗胃癌多药耐药的潜在价值.     

缺血预处理的神经保护机制:胱天蛋白酶与神经元凋亡

缺血预处理可通过多种途径调动自身保护机制诱导内源性神经保护,具有潜在的临床应用价值.抗凋亡是缺血预处理保护机制中的重要环节,胱天蛋白酶(caspase)家族是细胞凋亡执行过程中的关键分子,在脑缺血后神经元凋亡中起着重要作用.文章对缺血预处理诱导神经保护的机制以及胱天蛋白酶家族在缺血后神经元凋亡中的作用进行了综述.     

桦褐孔菌提取物对人胃癌BGC-823细胞株诱导凋亡作用和抗增殖的机制

目的 探讨桦褐孔菌提取物在体外对人胃癌BGC-823细胞株的诱导凋亡和抗增殖的作用机制.方法 应用TUNEL法和免疫细胞化学染色法检测桦褐孔菌提取物对人胃癌BGC-823细胞株的作用.结果 10～80 mg/L桦褐孔菌提取物作用人胃癌BGC-823细胞株后,肿瘤细胞凋亡率与药物浓度正相关,Ki-67阳性表达率随药物浓度的增加而减少,表现出浓度依赖性关系.80 mg/L桦褐孔菌提取物作用48 h后,bcl-2基因蛋白的阳性表达率明显降低,而bax、caspase-3基因蛋白阳性表达率明显升高.结论 桦褐孔菌提取物对人胃癌BGC-823细胞株有诱导凋亡和抗增殖作用,其诱导凋亡的分子生物学机制可能是通过下调bcl-2和上调bax的表达,启动caspase凋亡信号实现的.