兔视网膜脉络膜经瞳孔温热疗法生物学效应初探

目的：探讨经瞳孔温热疗法（TTT）对灰兔视网膜脉络膜的生物学效应,为临床合理应用提供参考依据.方法：使用半导体激光器对8只灰兔视网膜进行照射,光斑直径1.2mm,曝光时间1min,激光功率分别为150,200,250,300mW,分别于激光后1h及1mo行光、电镜观察.结果：150mW激光照射时,仅使视网膜色素上皮（RPE）轻度变化;200mW时除RPE变化外,脉络膜细胞变性,毛细血管内红细胞淤滞、变形;随能量加大（250mW）,RPE受损加重,外层视网膜也同时受累,晚期视细胞层及外颗粒层消失;当激光能量达到300mW时,全层视网膜均受到损伤,并可引起脉络膜出血,甚至出现新生血管内皮细胞.结论：TTT对正常灰兔视网膜脉络膜的效应与激光能量成正比,RPE及邻近脉络膜是TTT的主要作用部位.     

不同激光强度经瞳孔温热疗法对色素兔视网膜细胞凋亡的影响

目的 观察不同激光能量的经瞳孔温热疗法（TTT）对色素兔视网膜的病理损伤及对细胞凋亡的影响。 方法 将14只有色家兔随机按不同激光能量分为空白组、50、70、90、110、130、150 mW组，每组2只兔4只眼行TTT治疗照射后,分别于24、48 h后取视网膜组织进行光学显微镜检查及用原位末端转移酶标记（TUNEL）技术和流式细胞仪检测细胞凋亡。 结果 直接检眼镜下激光反应斑颜色随能量增加由灰变白逐渐变浅，即由灰白——白——浓白，直径逐渐增大。苏木素 伊红（HE）染色：50~70 mW组光学显微镜下视网膜各层结构无明显改变；90~130 mW组视网膜结构完整,视锥、视杆细胞肿胀，内颗粒层可见少量的固缩核和细胞浆空泡化。以上能量组激光照射后24、48 h，光学显微镜下视网膜结构与空白对照组无明显差别。150 mW组激光照射后24 h视网膜组织各层肿胀、变性，感光细胞内外节部分缺失；而激光照射后48 h视网膜组织可见明显坏死，全层均可见细胞缺失。TUNEL检测结果显示，各能量组外颗粒层均可见阳性细胞，随激光能量的增加而增加，并逐渐累及内颗粒层和神经节细胞层。流式细胞仪检测结果显示，激光照射后24 h，各能量组均可见细胞凋亡峰。 结论 兔视网膜在能量为50~70 mW的TTT照射后，视网膜组织未见明显改变，但感光细胞凋亡显著增加。随着TTT激光能量增加，视网膜组织出现肿胀、变性甚至坏死。细胞凋亡逐渐累及内颗粒层和神经节细胞层。 (中华眼底病杂志, 2006, 22: 249-252)     

He-Ne激光对兔眼小梁切除术后滤过道成纤维细胞增殖的影响

目的 研究兔眼小粱切除术前辅助使用He-Ne激光照射滤过区对滤过道成纤维细胞增殖情况的影响.方法 随机选取健康新西兰大白兔29只(58眼)用于实验.实验一:将健康新西兰大白兔8只(16眼)随机分为4组,即100 mW·cm-2、150 mW·cm-2、200 mW·cm-2激光手术组及空白对照组,每组各2只(4眼),激光手术组兔眼使用不同功率密度的He-Ne激光照射,空白对照组兔眼不行激光照射.照射部位选择兔眼鼻上象限角膜缘紧邻上直肌处,照射距离10cm,光斑直径4 mm,照射时间10 min,每天1次,连续照射3d.最后一次照射24h后处死动物,取照射区组织采用病理学和免疫组织化学技术.检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA),并使用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminaldeoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling,TUNEL)观察照射区成纤维细胞增殖和凋亡的病理改变.实验二:将另外21只兔(42眼),采用200 mW·cm-2 He-Ne激光同上法预处理每只兔右眼手术区,最后一次照射24h后实施小梁切除术(即激光联合小粱切除术组),左眼行单纯小粱切除术为单纯手术对照组,分别于手术后7d、14d、28d检测滤过区组织上述指标.结果 实验一:各He-Ne激光联合小梁切除术组与空白对照组均仅检测到少量PCNA阳性细胞,未见明显TUNEL凋亡细胞,差异均无统计学意义(均为P>0.05).实验二:200 mW·cm-2 He-Ne激光联合小梁切除术组与单纯手术对照组PCNA阳性细胞率术后7d最高,14d显著降低,28d降至最低.术后7d、14d,200 mW·cm-2 He-Ne激光联合小梁切除术组PCNA阳性细胞率分别为(19.34±2.35)%、(10.48±3.29)%,均明显低于单纯手术对照组(22.88±3.29)%、(14.35±2.56)%(均为P<0.05);术后28 d,2组PCNA阳性细胞率均较低,差异无统计学意义(p>0.05).2组各时间点亦未检测到明显TUNEL凋亡细胞.结论 He-Ne激光照射对正常兔眼结膜下及巩膜成纤维细胞活性无明显影响,小粱切除术前辅助使用200 mW·cm-2 He-Ne激光照射可以抑制术后早期成纤维细胞增殖,可能有助于抑制滤过泡的瘢痕化而提高手术成功率.     

兔和人眼的二极管激光周边虹膜切开术

一、材料和方法使用日本产DC—2000型ALGaAS二极管激光光凝机。此机发射800nm连续光波,电热冷却,1mW氦氖气体激光瞄准管,装在日本产SL—1600型裂隙灯显微镜臂上。最大输出能量,角膜上1500mW、200um光斑,和1000mW、75um光斑。配用Abraham接触镜,裂隙灯显微镜16倍放大。虹膜切开术均用改良法,即先做4—6个点射成环形使虹膜延伸,环形中部做穿透性多次击射。兔眼实验灰兔十只。全麻及角膜表面麻醉.治疗前30分钟4％匹鲁卡品点眼缩瞳. 先取4只兔,以切开虹膜和最小损伤晶体为标准,探索出虹膜切开的最佳设置为:环形击射200um光     

微脉冲半导体激光照射对正常大鼠视网膜损伤的观察

目的观察810 nm微脉冲半导体激光照射对正常棕色挪威大鼠（BN 大鼠）视网膜的损伤。方法使用不同能量及负载系数（duty cycle, D C）的810 nm微脉冲半导体激光对130只BN大鼠眼进行照射。分别于激光照射后第1、3、7、1 4、28 d进行彩色眼底照相、荧光素眼底血管造影及组织病理学观察，并检测热休克蛋白(HSP-70)在视网膜的表达情况，用TdT介导dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检查细胞凋亡 。结果阈值及阈上能量条件下，低DC时激光照射部位无光学显微镜下的组织病理学改变，高DC时出现可累及视网膜内核层组织的严重损伤；微脉冲半导体激光照 射后1 d大鼠视网膜内核层细胞HSP-70阳性表达细胞即较正常视网膜明显增加，3 d时达到高峰，以后逐渐下降，14 d时恢复近正常水平。HSP-70阳性细胞数量 随激光能量提高而增加。TUNEL染色可见激光照射部位凋亡细胞主要存在于视网膜色素上皮（RPE）层、外核层、内核层，甚至脉络膜层，其数量随激光能量增高而增多。在激光照射后第3 d，凋亡细胞数量最多。结论810 nm微脉冲半导体激光照射后，视网膜损伤程度与激光能量及DC呈正相关。低能量高负载系数（50 mW，50％）或高能量低负载系数（100 mW，5％～15％）时，损伤限于RPE层，避免了神经上皮层的损伤。激光照射后HSP-70高表达及细胞凋亡可能在组织损伤修复过程发挥重要作用。 （中华眼底病杂志，2008，24：122-126）     

在免眼中进行经瞳孔阈值下温热疗法的组织学效应和蛋白表达

目的：研究阈值下经瞳孔温热疗法（TTT）对视网膜组织学的效应。方法：对正常视网膜色素的兔眼进行TTT，通过1个810nm激光二极管产生直径为1．2mm能量为50mW的光斑，持续时间为15、30和60秒。4周后进行荧光血管造影并摘除眼球，通过电子显微镜和免疫组化染色来检查。     

应用经瞳孔温热疗法光凝兔眼视网膜即刻组织学观察及凋亡细胞检测

目的 观察经瞳孔温热疗法（TTT）治疗视网膜所引起的即刻组织学反应，同时检测视网膜光斑处细胞凋亡现象。方法 取健康灰色家兔10只，随机将每只兔的左右两眼分为对照眼和实验眼。用波长810nm的激光光凝兔眼视网膜，形成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级光斑，即刻摘除眼球。取光凝视网膜用石蜡包埋，苏木精-伊红染色，并行细胞凋亡的检测。结果 Ⅰ级光斑视网膜色素上皮细胞、感光细胞和外核层细胞水肿破坏，细胞结构混乱；Ⅱ级光斑上述细胞溶解破坏；Ⅲ级光斑视网膜全层破坏严重。细胞凋亡检测见各级光斑区域光细胞呈阳性表达。结论 不同光斑区的激光引起的视网膜破坏程度及侧重部位不同，而这种破坏表现为细胞凋亡的产生。     

He-Ne激光对兔眼小梁切除术后滤过道瘢痕化的影响及其机制

目的:研究He-Ne激光对兔眼小梁切除术后滤过道瘢痕化的影响及其机制,探讨He-Ne激光在青光眼小梁切除术中的应用价值。方法:于小梁切除手术前采用功率密度200mW/cm2He-Ne激光照射兔眼(右眼)手术区,照射部位选择鼻上象限角膜缘紧邻上直肌处,光斑直径4mm,照射时间10min,1次/d,连续照射3d。最后一次照射后24h实施双眼小梁切除术。手术后第7,14,28d检测手术区组织结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF);第14和第28d检测胶原密度(masson染色)。左眼设为单纯手术对照组。每时间点各7只兔。结果:手术后第7,14d,He-Ne激光组CTGF表达较对照组减少(P=0.01;P=0.005)。手术后第14,28dHe-Ne激光组胶原密度显著低于对照组(P=0.013;P=0.01)。结论:功率密度200mW/cm2He-Ne激光预照射小梁切除术手术区域,可下调术后该区域成纤维细胞CTGF表达并减少胶原合成,可能有助于减少兔眼小梁切除术后滤过道瘢痕形成。He-Ne激光有可能为预防青光眼滤过手术后瘢痕化提供新的方法。     

微脉冲半导体激光对兔眼视网膜损伤的形态学观察

目的:研究微脉冲半导体激光对兔眼视网膜损伤的生物学效应.方法:有色兔8只16眼,每眼上、下方视网膜随机分别行810nm半导体激光连续波阈值光凝及微脉冲阈下光凝,于光凝后即刻观察光斑反应和眼底荧光造影后荧光素渗漏情况,并在光镜和电镜下观察其对视网膜和脉络膜造成的组织学改变.结果:微脉冲激光阈下光凝后光斑不可见,亦无荧光素渗漏,视网膜损伤不明显;阈值光凝后可见光斑反应并有荧光素渗漏,视网膜损伤明显,外核层细胞数量减少,内、外核层均出现少量核固缩和胞质空泡化,视网膜色素上皮细胞增生,Bruch膜完整无损.结论:微脉冲激光光凝视网膜不会损伤视网膜,但确定阈能量时要从低能量起,且选择周边视网膜.     

微脉冲半导体激光对兔视网膜损伤的实验研究

目的初步研究微脉冲半导体激光对兔眼视网膜损伤的生物学效应。方法8只有色兔(16眼)中每只眼的上、下方视网膜随机分别行810nm半导体激光连续波阈值光凝及微脉冲阈下光凝,于光凝后即刻观察光斑反应和眼底荧光造影后荧光素渗漏情况,并在光镜和电镜下观察其对视网膜和脉络膜造成的组织学改变。结果微脉冲激光阈下光凝后光斑不可见,亦无荧光素渗漏,视网膜损伤不明显;阈值光凝后可见光斑反应并有荧光素渗漏,视网膜损伤明显,外核层细胞数量减少,内、外核层均出现少量核固缩和胞浆空泡化,视网膜色素上皮细胞增生,Bruch膜完整无损。结论微脉冲激光光凝视网膜不会损伤视网膜,但确定阈能量时要从低能量起,且选择周边视网膜。     

Strabisme Alternant - Etude clinique - traitement

The author defines motor and sensory alternation: the term alternation should not be used in isolation, it should always be accompanied by the name of the parameter concerned. Sensory alternation is always found together with motor alternation but the reverse is not true.The examining criteria for a diagnosis of sensory alternation are given, sensory alternation must not be confused with alternating inhibition. Working from clinical observations of cases of motor alternating strabismus, the author selects 2 types of binocular sensory relations which allow one to differentiate between:- cases of primary alternating strabismus- cases of secondary alternating strabismusThese forms will develop in different ways; in both cases a cure is possible providing that the right treatment is prescribed and once prescribed carefully followed, etc. It is always a case of serious forms of strabismus whose developmental period is spread over several years.According to the authors, the frequency of cases of true primary strabismus is from 1–3%, the frequency of cases of secondary alternating strabismus varies according to the type of therapy practised on cases of monocular strabismus with amblyopia. These latter will become cases of alternating strabismus under the influence of certain types of therapy carried out over several years (penalization, rocking, alternated occlusion, etc...).Experimental data on kittens confirm clinical data; kittens placed in abnormal environments during the sensitive period will show modification in the distribution of cortical cells and the absence of binocular cells (either because the excitation of the two eyes was not simultaneous, or not identical: artificial strabismus, occlusion, opaque glasses). This disturbances become irreversible after a certain period of exposure (a function of age, length of exposure, etc...).It is thus necessary to bear in mind: 1) the iatrogenic risks of certain orthoptic treatments, 2) the necessity for a binocular form of treatment as soon as possible, as once a certain stage is passed, cortical plasticity diminishes and the elaboration of normal binocular relations becomes impossible.

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