异位妊娠病因中的胚胎异常发生

选用42例异位妊娠的胚胎样本的石蜡包埋回顾性材料,行DNA流式细胞计数,以观察是否存在来源于正常二倍体核型DNA的畸变。结果14例(33％)为DNA非整倍体,与输卵管着床有关。DNA非整倍体峰的DNA指数范围是1.14～2.17。8例观察到接近二倍DNA(Near-diploid DNA)的变化;6例为四倍体。以18例已知的染色体核型的流产物作为对照组,结果三例核型正常者在流式细胞计数中显示为DNA二倍体;10例21-三体中有     

孕妇血浆中胎儿DNA在产前诊断中的初步应用--胎儿SRY基因、STR基因型的鉴定

目的 :利用孕妇血浆中游离胎儿 DNA进行非创伤性产前基因诊断。方法 :对 6 5例 5～ 4 1孕周孕妇血浆胎儿DNA进行 SRY的 PCR扩增 ,以检出男性胎儿 DNA;同时采用短串联重复序列 (STR)多态位点即 CSFIPO、TPOX、THO1(CTT)三个位点的复合扩增方法对 19例妊娠女性胎儿的孕妇血浆 DNA进行扩增 ,以检出女性胎儿 DNA。两种扩增均采用母体血浆直接作为模板进行。结果 :SRY- PCR中 ,4 6例妊娠男性胎儿的孕妇中 ,有 30例血浆中出现 SRY基因扩增带 ,19例妊娠女性胎儿的孕妇血浆中仅 1例孕中期者为假阳性 (5 .3% )。本研究孕早、中、晚期的性别符合率分别为 6 0 %、84 .0 9%、5 0 % ,总符合率为 73.85 % .CTT- PCR中 ,19例妊娠女胎孕妇血浆中有 15例检出父源性等位基因即女性胎儿 DNA。结论 :应用孕妇血浆中胎儿 DNA作产前诊断敏感性和特异性较高 ,尤其是在孕中期 ,它是一种非创伤性产前诊断方法 ,适用于临床。     

弓形体病与先天性畸形

弓形体病原体在人体能产生轻微症状,但在孕期可通过胎盘对胎儿有较大威胁。自1986年11月至1987年7月,我们对6例畸形儿及同期有不良生育史者9例作了有关弓形体的研究与测定,以观察先天性弓形体感染与胎儿畸形关系。测定内容1.孕期:采孕妇及其丈夫血作弓形体间接血凝试验(IHA)、间接荧光抗体试验(IFA)、DNA杂交试验(应用DNA 重组技术建立的特异性弓形体探针来检测标本)。2.分娩期:取羊水、脐血测定IHA、IFA 及DNA 杂交试验。     

不明原因重复性自然流产妇女配偶精子DNA完整性

目的:探讨精子DNA完整性与重复性自然流产(RSA)的关系。方法:85例不明原因RSA妇女配偶(RSA组)和50例已生育的成年健康男性(对照组)的精液,应用精子染色质扩散实验(SCD)检测精子DNA完整性。将RSA组根据1年后怀孕结果分为3个亚组:怀孕组(30例)、流产组(26例)、未孕组(29例)。结果:RSA妇女配偶DNA损伤精子的百分率(14.6±6.9)%与对照组的(12.9±3.8)%相比无统计学差异(P0.05)。DNA损伤精子百分率大于20%视为精子DNA完整性异常,则有17.6%的RSA患者配偶的精子DNA完整性异常,6%的正常生育男性精子DNA完整性异常,但差异无统计学意义(P0.05)。怀孕组、流产组、未孕组配偶的DNA损伤精子百分率分别为(12.4±5.3)%,(14.6±6.5)%和(16.8±8.1)%,未孕组与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05),怀孕组、流产组与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:精子DNA完整性异常与RSA继发不育有关,有必要筛查RSA患者配偶的精子DNA完整性。     

DNA倍体图像分析用于评价宫颈非典型不成熟化生

目的:探讨DNA图像分析技术在评价宫颈非典型不成熟化生(AIM)生物学性质中的作用。方法:运用计算机图像分析软件测定宫颈非典型不成熟化生30例的DNA质量、非整倍体(AN)含量、DNA指数(DI),以40例良、恶性宫颈病变为对照,其中正常上皮组10例,CINⅠ组10例,CINⅢ组10例,宫颈鳞癌组10例。结果:DNA质量、非整倍体含量、DNA指数随病变严重程度的增加而升高,三者联合分析有助于评价病例的生物学性质,从30例宫颈非典型不成熟化生病例中筛选出2例,其DNA质量、非整倍体含量、DNA指数均达到CINⅢ组的均值水平,认为是高恶性潜能病例。结论:计算机分析技术方便客观,通过综合分析DNA质量、非整倍体含量和DNA指数有助于提示宫颈非典型不成熟化生病例的生物学性质,对高恶性潜能病例具有筛查作用。     

DNA定量分析和宫颈液基细胞学检查在宫颈病变中的诊断价值

目的:探讨DNA倍体检测和宫颈液基细胞学检查在宫颈病变诊断中的应用价值.方法:对3296例患者进行DNA倍体检测和宫颈液基细胞学检查,对其中110例检出DNA异倍体和(或)液基细胞学异常者行宫颈活检,分析两种方法对诊断宫颈病变的临床意义.结果:①液基细胞学的阳性率和DNA异倍体细胞的检出率分别为8.1%和7.0%,差异无统计学意义(P>0.05);随着DNA异倍体细胞数量的增加,液基细胞学检查的阳性率相应增加,且细胞病变的严重程度相应增加.②以3个以上(中量)DNA异倍体出现作为活检标准,发现宫颈病变的敏感性为76.9%,特异性为71.1%;以液基细胞学检查中低级别鳞状上皮内病变(LSIL)及以上阳性作为活检标准,发现宫颈病变的敏感性为58.5%,特异性为77.8%.③液基细胞学检查为正常或良性改变的9例妇女,由于DNA异倍体出现,予组织病理学检查,检出CIN Ⅰ和CIN Ⅱ各1例;DNA异倍体为阴性的15例患者,结合液基细胞学检查的阳性结果,予组织病理学检查检出CINⅠ 3例,CIN Ⅱ 1例.④液基细胞学检查ASCUS 46例,DNA异倍体阴性者发现宫颈病变的阳性率15.4%,而DNA异倍体阳性者发现宫颈病变的阳性率为54.5%;两者比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:在宫颈癌筛查中,宫颈液基细胞学检查和DNA倍体检测相结合,可减少漏诊,提高细胞学检查的质量.     

病原体及巨细胞病毒感染与输卵管妊娠的关系

目的　探讨解脲支原体、沙眼衣原体、巨细胞病毒感染与输卵管妊娠的关系。方法应用PCR技术 ,检测 12 8例输卵管妊娠患者 (观察组 )和 5 0例行附件切除术、无输卵管妊娠史的卵巢囊肿患者 (对照组 )的宫颈分泌物和输卵管组织中解脲支原体、沙眼衣原体、巨细胞病毒DNA。结果(1)观察组 5 6例宫颈分泌物检测出解脲支原体DNA ,阳性率为 4 3 8% ,对照组 10例宫颈分泌物检测出解脲支原体DNA ,阳性率为 2 0 0 % ;观察组 4 8例输卵管组织检测出解脲支原体DNA ,阳性率为37 5 % ,对照组 5例输卵管组织检测出解脲支原体DNA ,阳性率为 10 0 % ;两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1) ;(2 )观察组 35例宫颈分泌物检测出沙眼衣原体DNA ,阳性率为 2 7 3% ,对照组 5例宫颈分泌物检测出沙眼衣原体DNA ,阳性率为 10 0 % ;观察组 34例输卵管组织检测出沙眼衣原体DNA ,阳性率为 2 6 6 % ,对照组 3例输卵管组织检测出沙眼衣原体DNA ,阳性率为 6 0 % ;两组比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;(3)观察组 2 1例宫颈分泌物检测出巨细胞病毒DNA ,阳性率为 16 4 % ,对照组 3例宫颈分泌物检测出巨细胞病毒DNA ,阳性率为 6 0 % ;观察组 2 5例输卵管组织检测出巨细胞病毒DNA ,阳性率为 19 5 % ,对照组 2例输卵管组织检测出巨细胞病     

孕妇血浆中胎儿DNA在产前诊断中的应用

目的依据孕妇血浆中存在游离胎儿DNA的理论,寻找一种无创性产前基因诊断的新方法。方法提取42例孕14~40周的产妇血浆中游离胎儿DNA,采用引物延伸预扩增(primerextensionpreamplification,PEP)后行PCR,特异性扩增其Y染色体重复序列(DYZ3)基因。同时采用9个短串联重复序列(shorttandemrepeat,STR)多态性位点的多重扩增方法以检出血浆中胎儿DNA。结果DYZ3-PCR中,32例妊娠男性胎儿孕妇中有28例血浆中出现基因扩增带,检出率为87.5%,10例妊娠女性胎儿孕妇血浆有2例假阳性结果。性别总符合率为85.7%,STR-PCR中,检测出孕妇血浆中父源性胎儿DNA的存在。结论应用孕妇血浆中胎儿DNA作产前诊断敏感性和特异性较高,是一种无创性产前基因诊断方法,具有广泛的临床应用前景。     

FQ-PCR检测宫颈涂片剩余细胞内HPV 16、18型感染的临床意义

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测宫颈涂片剩余细胞内人乳头瘤病毒(HPV)16、18型感染,建立快速、灵敏的检测方法的临床意义.方法采用FQ-PCR技术检测124例异常宫颈细胞和组织标本HPV16、18型感染状况.结果细胞学诊断低度鳞状上皮内病变( LSIL) 45例,其中 FQ-PCR检测宫颈细胞标本HPV16、18型DNA阳性14例(阳性率31.1%);高度鳞状上皮内病变(HSIL) 38例,HPV16、18型DNA阳性26例(68.4%);未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞(ASCUS) 30例,HPV16、18型DNA阳性10例(33.3%);鳞状细胞癌9例, HPV16、18型DNA阳性8例(88.9%).组织学检查诊断CIN Ⅰ级67例,其中 FQ-PCR检测活检组织标本HPV16、18型DNA阳性28例 (阳性率41.8%);CIN Ⅱ14例,HPV16、18型DNA阳性9例(64.3%);CIN Ⅲ级11例,HPV16、18型DNA阳性8例(72.7%);鳞状细胞癌23例,HPV16、18型DNA阳性17例(73.9%).细胞和活检组织两种标本检出的HPV16、18型DNA阳性率差异无显著性(χ2=1.54, P＞0.05). 结论FQ-PCR方法检测宫颈细胞标本HPV16、18型感染,具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点,适用于大规模筛查和在临床日常工作中采用.     

血浆游离DNA浓度与卵巢癌诊断及临床特征相关性的研究

目的:探讨血浆游离DNA含量与卵巢癌诊断及临床特征相关性的研究。方法:收集2016年4月至2017年1月上海交通大学医学院附属仁济医院收治的卵巢癌患者术前外周血61例,健康女性外周血39例。使用Qiagen QIAamp循环游离DNA试剂盒提取入组人群的血浆游离DNA,采用Qubit 3.0荧光计定量血浆游离DNA的浓度,分析血浆游离DNA浓度在卵巢癌患者和健康女性的差异,以及与卵巢癌患者临床特征的相关性。结果:卵巢癌患者血浆游离DNA浓度(1.18±0.19 ng/μl)显著高于健康女性(0.38±0.04 ng/μl)(P0.001),ROC曲线下面积(AUC)为0.755(P0.001);卵巢癌患者血浆游离DNA水平与患者年龄、病理类型、FIGO分期、淋巴结转移、单双侧、CA_(125)水平及ki67表达量无关,与肿瘤体积的对数呈正相关(r=0.78,P0.001)。结论:血浆游离DNA浓度有助于卵巢癌的诊断,并可间接反映卵巢癌患者体内的肿瘤负荷。