Rapamycin抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路对胃癌MGC-803细胞影响

目的探讨rapamycin作用于胃癌细胞株MGC-803后对细胞生长影响及其作用机制。方法体外培养胃癌细胞株MGC-803,使用不同浓度rapamycin干预MGC-803细胞。采用MTT法检测细胞增殖变化;实时荧光定量PCR(QPCR)检测关键基因的表达;蛋白印迹法(WB)检测相关蛋白的表达;流式细胞术检测细胞周期及凋亡的变化。结果与对照组相比,rapamycin对胃癌MGC-803细胞的增殖活性有明显的抑制作用,呈现出剂量依赖性(P0.05)。Rapamycin显著抑制PI3K、AKT、m TOR、4EBP、P70S6K基因的m RNA表达,差异有统计学意义(P0.05);Rapamycin能抑制p-m TOR、p-P70S6K蛋白的表达;Rapamycin将细胞周期阻滞在G0/G1期,并诱导细胞凋亡(P0.05)。结论靶向m TOR抑制剂rapamycin可通过调控PI3K/AKT/m TOR信号通路进而调控胃癌细胞的生长。     

PI3K/Akt信号通路对胃癌细胞SGC7901细胞化疗效果的影响

目的运用磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂(phosphatidylinositol 3-kinases,PI3-K)LY294002[2-(4-吗啉基)-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4-酮]作用于胃癌细胞系SGC7901,探讨抑制PI3K/Akt信号转导通路对胃癌细胞化疗敏感性的影响。方法采用MTT比色法,流式细胞术检测5-FU、DDP及ADM单独或联合PI3K抑制剂LY294002对人胃癌细胞SGC7901的抑制率、凋亡率。并分析单独及联合应用LY294002对SGC7901细胞周期的影响。Western-blot检测单独及联合化疗药后P-Akt蛋白在SGC7901细胞中的表达水平。结果单独使用化疗药5-FU、DDP及ADM均可抑制SGC7901细胞增殖、诱导其凋亡。当化疗药与抑制剂联合应用,对细胞的抑制作用明显增强,促凋亡作用增强,与对照组比较(P0.05)。细胞周期同步分析显示,单独用药均可将SGC7901细胞阻滞于G0/G1期。联合使用抑制剂使处于G0/G1期细胞增加。Western blot显示化疗药上调P-Akt蛋白的表达,联合使用抑制剂后SGC7901细胞P-Akt蛋白的表达与未使用抑制剂比较减弱,差异有统计学意义(P0.05)。结论阻断PI3K/Akt信号通路可提高化疗药5-FU、DDP及ADM对胃癌细胞株SGC7901的抑制率,凋亡率并使阻滞于G0/G1期细胞增多;LY294002通过阻断PI3K/Akt信号通路,抑制P-Akt蛋白表达,增强化疗药的敏感性;LY294002阻断PI3K/Akt信号通路对5-FU、DDP、ADM治疗胃癌有一定的协同或增强作用。     

ERK1/2通路抑制剂PD98059影响卵巢癌细胞SKOV3增殖、侵袭能力的研究

目的:探讨MAPK/ERK信号传导通路抑制剂PD98059对卵巢癌细胞SKOV3的增殖、侵袭能力的影响。初步探讨阻断MAPK/ERK信号传导通路治疗卵巢癌的可能性。方法:体外培养人上皮性卵巢癌细胞SKOV3,采用CCK-8细胞增殖方法检测卵巢癌细胞SKOV3增殖情况,Western blot检测p-ERK蛋白表达,Transwell细胞侵袭实验检测SKOV3细胞的侵袭能力。结果:CCK-8法显示PD98059在一定范围内能够明显抑制卵巢癌细胞SKOV3的增殖,其作用具有时间依赖性及浓度依赖性,PD98059有效浓度为25μmol/L,在此有效浓度作用下有效时间为24h;Western blot法检测结果显示PD98059能够下调pERK1/2,即抑制ERK1/2磷酸化,从而使得ERK1/2信号传导途径失活;Transwell细胞侵袭实验结果显示PD98059在一定浓度范围内能抑制卵巢癌细胞SKOV3的侵袭与转移能力。结论:PD98059可以通过抑制ERK1/2信号途径,抑制人上皮性卵巢癌SKOV3细胞的增殖、侵袭转移。     

lncRNA PlncRNA-1对胃癌SGC-7901细胞生物学行为及PI3K/AKT信号通路的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)PlncRNA-1对胃癌SGC-7901细胞增殖、周期、凋亡和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测PlncRNA-1在SGC-7901细胞和正常胃黏膜上皮GES-1细胞中的表达水平,将体外培养的SGC-7901细胞分为未转染组(正常培养)、阴性组(转染阴性对照siRNA)和干扰组(转染PlncRNA-1-siRNA),qPCR检测SGC-7901细胞中PlncRNA-1表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测SGC-7901细胞增殖活力,流式细胞仪检测SGC-7901细胞周期和凋亡情况,免疫印迹法检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K、AKT、磷酸化(p)-AKT、细胞周期素D1(CyclinD1)和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达情况。结果与GES-1细胞比较,SGC-7901细胞中PlncRNA-1表达水平明显升高,差异有统计学意义(P 0.05);与未转染组比较,干扰组细胞中PlncRNA-1表达水平、细胞增殖活力和细胞在S期、G2/M期所占百分比以及PI3K、p-AKT、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达水平均明显降低,而细胞凋亡率和细胞在G0/G1期所占百分比明显升高,差异有统计学意义(P 0.05);但阴性组和未转染组之间各指标差异均无统计学意义(P0.05)。结论 PlncRNA-1在胃癌SGC-7901细胞中表达升高,干扰其表达可抑制SGC-7901细胞增殖并诱导细胞周期阻滞和凋亡,其作用机制与抑制PI3K/AKT信号通路的活化有关。     

PI3K/AKT/mTOR和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞中的相互作用机制

目的探讨磷脂酰肌醇3–激酶/蛋白激酶B/哺乳动物靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)两条信号通路对胃癌细胞功能的影响及相互作用机制。方法使用PI3K抑制剂LY294002、mTOR抑制剂AZD8055、MEK抑制剂AZD6244单独或联合作用于胃癌MGC-803细胞。应用CCK8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;蛋白印迹法(Western blot)检测通路关键蛋白的表达。结果联合使用LY294002(25μmol/L)与AZD6244(125μmol/L)、AZD8055(0.1μmol/L)与AZD6244(125μmol/L)能够显著抑制胃癌MGC-803细胞的增殖活性,且联用组比单独作用组具有更强的抑制效果(P 0.05);联用组诱导细胞凋亡数量和阻滞于G0/G1期的MGC-803细胞数量增多,高于单独作用组(P 0.05)。与LY294002、AZD8055和AZD6244单独作用相比,LY294002与AZD6244、AZD8055与AZD6244联用组MGC803细胞p-AKT、p-P70S6K和p-ERK1/2蛋白表达明显受到抑制(P 0.05)。结论 PI3K/AKT/mTOR和MAPK/ERK两条信号通路在胃癌MGC-803细胞的生长中具有协同调控作用,对于两条信号通路的多靶点抑制能够更加明显的抑制癌细胞生长。     

Fas配体对NIH3T3增殖和胶原表达的信号机制研究

目的探讨Fas配体(FasL)对小鼠成纤维细胞NIH3T3增殖和胶原表达的影响及其信号调控机制。方法采用鼠成纤维细胞系HIN3T3,以FasL为诱导剂,采用抑制剂技术和Western blot技术观察NIH3T3的增殖及胶原表达情况,同时探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt、有丝分裂原活化蛋白(MAPK)/P38、MAPK/ERK信号通路在NIH3T3增殖和胶原表达中的作用。结果研究发现低剂量的FasL可调节3T3的生长,表现为细胞数量和胶原表达水平均随FasL剂量的增加而增加,且存在剂量-效应和时间-效应;MAPK/P38及PI3K/Akt信号通路对NIH3T3的增殖具有调控作用,MAPK/P38及MAPK/ERK信号通路可调控NIH3T3胶原表达。结论Fas/FasL系统对成纤维细胞增殖和胶原表达起促进作用;FasL主要通过PI3K/Akt、MAPK/P38信号通路对成纤维细胞增殖起调控作用;通过MAPK/P38及MAPK/ERK信号通路调节成纤维细胞的胶原表达。     

PPAR-α通过PI3K/Akt/FoxO1信号通路的负性调控心肌细胞肥大

目的观察PPAR-α对心肌细胞肥大负性调控时,机体中PI3K/Akt/Fox O1信号通路的变化情况。方法实验小鼠以异丙肾上腺素诱导心肌细胞肥大,使用实时定量聚合酶链式反应检测Fox O1 m RNA、PPAR-α表达水平,同时应用Feno预处理后观察Fox O1 m RNA、PPAR-α表达水平变化。结果异丙肾上腺素诱导后,心肌细胞中的PPAR-αm RNA、Fox O1 m RNA水平降低。Feno能抑制心肌肥大细胞表面积增加,RNAi通过PPAR-αm RNA使心肌肥大细胞表面积增加,以PI3K抑制剂LY处理心肌细胞,Fox O1 m RNA表达增加。结论 PPAR-α对心肌细胞肥大负调控与PI3K/Akt通路抑制、增加Fox O1表达有关。     

过氧化氢刺激视网膜神经细胞凋亡的MAPK/AP1信号通路参与机制

目的本文对过氧化氢刺激视网膜神经细胞凋亡的MAPK/AP1信号通路参与机制进行研究,为相关治疗提供参考。方法分离培养大鼠视网膜神经细胞至生长状态良好:细胞随机分为3组:对照组(control,n=9)、过氧化氢处理组(Hyd Per,n=9)、MAPK信号通路抑制剂PD98059组(PD98059,n=9)。各组细胞给予相应处理后分析各组视网膜神经细胞中细胞凋亡蛋白及MAPK/AP1信号通路蛋白的表达。结果与对照组相比,过氧化氢刺激后视网膜神经细胞Bcl2的表达明显降低(P0.01),而Bax、Caspase6、Ras、Raf、MEK、ERK1/2及c-fos及c-jun的表达明显增强(P0.01),DHE染色后细胞的荧光强度明显增强,且PD98059处理后上述异常明显恢复(P0.01)。结论过氧化氢刺激视网膜神经细胞发生明显的细胞凋亡,且此过程与MAPK/AP1信号通路的过度活化有关。     

PI3K/Akt通路在尼古丁促NCI-H1975细胞增殖及抑制凋亡中的作用

目的探讨PI3K/Akt通路在尼古丁促进人肺腺癌细胞NCI-H1975增殖及抑制其凋亡中的作用。方法不同浓度尼古丁(0 nmol/L、1 nmol/L、10 nmol/L、100 nmol/L、1μmol/L、10μmol/L)处理细胞72 h或者1%μmol/L尼古丁处理细胞不同时间(24、48、72 h)后,用RT-PCR、Western blot测PI3K/Akt通路及其下游分子(Bad、Caspase9、Fox O3a、m TOR)的mRNA和蛋白质变化情况;不同浓度尼古丁处理细胞1 h后,用Western blot测PI3K/Akt通路及其下游分子的磷酸化蛋白质(p-Akt、p-Bad、p-Caspase9、p-Fox O3a、p-m TOR)变化情况。结果随尼古丁浓度增大或者其作用时间延长,人肺腺癌细胞NCI-H1975中PI3K mRNA及蛋白质表达上调(P0.05),PI3K/Akt通路下游分子Bad、Caspase9、FoxO3a、m TOR mRNA及蛋白质表达下调(P0.05);蛋白质磷酸化水平(p-Akt、p-Bad、p-Caspase9、p-Fox O3a、pm TOR)随尼古丁浓度增大而增高(P0.05),具有浓度依赖性。结论尼古丁可能通过PI3K/Akt通路调节其下游多个靶分子的mRNA表达、蛋白质表达及磷酸化蛋白质从而调节人肺腺癌细胞NCI-H1975的增殖与凋亡。     

基于RNA-seq探讨二氢丹参酮Ⅰ抑制胃癌细胞增殖的作用机制

为了阐明二氢丹参酮 Ⅰ（DHTS）抗胃癌的作用机制,为其在临床应用中提供思路及数据支持。方法 采用RNA测序(RNA seq)技术探索DHTS抗胃癌的具体作用机制。结果 发现4 353个差异基因表达。这些差异基因参与了肿瘤发生发展的多条信号通路,主要涉及PI3K/Akt/mTOR信号转导通路等。在测序结果中,有89个差异基因被注释到PI3K/Akt/mTOR信号转导通路,推测该信号转导通路和DHTS诱导胃癌细胞凋亡密切相关。Western blot检测验证了DHTS可显著抑制PI3K、Akt及mTOR的磷酸化,且显著增加Caspase 3和LC3蛋白的表达水平,从而促进胃癌细胞凋亡和自噬,抑制胃癌细胞增殖。结论 DHTS促进胃癌细胞凋亡,是通过活性氧介导的氧化应激促进细胞凋亡,具体作用机制可能是：活性氧介导的氧化应激抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,从而诱导细胞凋亡以及自噬,进而抑制胃癌细胞的增殖生长。     

PI3K/Akt信号通路在不同类型乳腺癌细胞系中的表达及机制

目的分析PI3K/Akt信号通路在不同类型乳腺癌细胞系中的表达及机制。方法通过MTT研究不同浓度的紫杉醇对不同类型的乳腺癌细胞系的不同抑制时间,采用蛋白印迹法检测PI3K/Akt的蛋白表达情况。结果在紫杉醇的作用下,随着剂量和时间的改变,灵敏度最高为MCF-7 (20190809),MDA-MB-453 (20190801)细胞的抑制效果最明显,抑制效果最差的为T47D (201900703)。Western Blot结果显示,MCF10A、MDA-MB-453的PI3K/Akt信号蛋白水平显著高于T47D和MCF-7,各蛋白的表达水平与β-actin比较,差异有统计学意义(P0. 05)。结论紫杉醇对不同类型的乳腺癌细胞具有良好的疗效,发挥作用的机制可能是通过介导PI3K/Akt信号通路中的PI3K和ILK蛋白。     

IGFBP-rP1通过调控MEK/ERK信号通路对抑制子宫内膜癌HEC-1A细胞增殖的影响及机制探讨

目的:探讨外源性胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1 (IGFBP-rP1)联合MEK/ERK信号通路抑制剂PD98059对子宫内膜癌细胞HEC-1A增殖的影响及其机制.方法:体外培养人子宫内膜癌细胞HEC-1A细胞,向培养基中添加不同浓度人重组胰岛素生长因子结合蛋白相关蛋白1 (rhIGFBP-rP1)和PD98059,上调IGFBP-rP1的水平,采用Cell CountingKit-8(CCK-8)法检测不同浓度rhIGFBP-P1及rhIGFBP-P1联合MEK/ERK信号通路抑制剂PD98059对HEC-1A细胞增殖的影响,并用蛋白免疫印迹(western blot)法分析不同浓度rhIGFBP-rP1作用下子宫内膜癌细胞HEC-1A细胞总的ERK1/2和磷酸化ERK1/2水平变化.结果:添加rhIGFBP-rP1子宫内膜癌细胞HEC-1A增殖受到明显抑制,其抑制作用呈浓度和时间依赖性(P＜0.05);4ag/ml rIGFBP-rP1对HEC-1A增殖抑制作用随着时间延长越来越明显,12、24、48、72 h增殖抑制率比较差异有统计学意义(P＜0.05).而MEK/ERK通路抑制剂PD98059能增强其抑制作用,rIGFBP-rP1(4μg/ml)与PD98059(25 μmol/L)联用,以上各时间点细胞增殖抑制率分别增至(10.04±2.71)％、(17.02±1.58)％、(28.59±2.04)％、(35.29±1.12)％,各组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);Western blot示添加rhIGFBP-rP1,磷酸化的ERK1/2水平显著降低,磷酸化的ERK1/2水平与rhIGFBP-rP1呈剂量依赖性.结论:IGFBP-rP1可以通过MEK/ERK信号通路抑制细胞增殖.     

噎膈血瘀证患者血清对食管癌EC9706细胞增殖 及PI3K/Akt信号通路蛋白表达的影响

摘要:目的　通过观察血瘀型噎膈患者血清对食管癌EC9706细胞增殖、形态变化及PI3K/Akt介导的信号通路蛋白表达的影响,探讨食管癌瘀血内结证候形成的分子机制。方法　将EC9706细胞于37℃,5%饱和湿度的CO2培养箱孵育24 h,饥饿24 h,分别加入倍比梯度的血瘀证、脾气虚证患者和健康人血清,MTT染色法检测细胞增殖变化;光镜下观察各组间细胞形态;Western blotting法检测PI3K/Akt信号通路蛋白表达差异。结果　血瘀型噎膈患者血清刺激细胞的50%增殖率为711 μl/10 ml培养液体积,光镜观察,该型噎膈患者血清刺激细胞呈长梭形改变,细胞连接成网状;在PI3K/Akt信号通路中,血瘀型噎膈患者血清对EC9706细胞蛋白EGFR、PI3K、Akt、p-Akt和 NF-κB的表达具有特征性促表达作用,与其他各血清干预的细胞比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　噎膈血瘀证患者血清提供利于细胞增殖的微环境,该证候的分子机制与PI3K/Akt信号通路蛋白超标达密切相关。     

ERK信号通路在紫杉醇诱导大肠癌细胞凋亡中的作用

目的 观察紫杉醇对大肠癌细胞系CX1细胞的杀伤作用,并探讨MAPKs/ERK信号传导通路抑制剂PD98059对其的影响.方法 通过MTT法比较紫杉醇和紫杉醇+PD98059分别作用于CX1细胞后的药物敏感度,并应用流式细胞术对二者作用下的细胞进行细胞解析,观察细胞周期变化.结果 大肠癌CX1细胞在紫杉醇作用72 h后,IC50为2.14 × 10-7mol/L,而在紫杉醇联合PD98059作用72 h后,IC50为6.91×10-9mol/L.通过细胞的周期解析发现紫杉醇和PD98059共同作用的细胞其凋亡比例为31.41%,远远高于紫杉醇单独作用引起的凋亡(15.60%),二者之间差异有统计学意义(P＜0.05).而未加药及单加PD98059的CX1细胞其凋亡细胞只占5.27%及5.61%,二者之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 紫杉醇可以诱导大肠癌细胞凋亡,而针对MAPK/ERK信号通路的抑制剂PD98059可增强紫杉醇的凋亡作用.     

Id-1介导E2-2对PI3K/Akt信号通路及内皮祖细胞增长的影响

目的探讨分化抑制因子1(Id-1)和转录因子E2-2(E2-2)对PI3K/Akt通路的影响情况,并明确其在内皮祖细胞(EPCs)增长中的作用。方法采用免疫共沉淀检测Id-1及E2-2是否存在相互作用。在EPCs细胞模型中,过表达及干扰Id-1及E2-2,采用CCK-8法检测细胞增长情况,RT-PCR和Western blot技术检测PI3K及Akt表达水平。结果免疫共沉淀检测发现,Id-1及E2-2之间存在蛋白-蛋白相互作用。过表达Id-1可显著下调E2-2表达水平,上调PI3K/Akt表达水平,细胞增长能力增强;过表达E2-2后PI3K/Akt表达降低,细胞增长减弱;共转染Id-1及E2-2则发现,二者可协同影响PI3K/Akt表达水平。结论 Id-1和E2-2之间存在相互作用,Id-1对PI3K/Akt起促进作用,而E2-2则发挥抑制效应,二者协同调控PI3K/Akt信号通路,进而影响EPCs的增长。     

PI3K/Akt通路在大鼠矽肺纤维化中的作用研究

探讨PI3K/Akt通路在大鼠矽肺纤维化过程中的作用。将SD雄性大鼠75只均分成3组,矽肺组大鼠以非暴露式气管内注入50 mg/m l二氧化硅混悬液1 m l建立矽肺模型,于染尘3、7、14、21和28 d分别股动脉放血处死各组5只大鼠,取肺组织进行病理观察及总RNA和蛋白的提取,分别采用RT-PCR及WB检测PI3K、AktmRNA及p-Akt的表达变化。染尘3 d后肺组织出现炎性反应,7 d后见细胞性结节并进行性加重。PI3K、AktmRNA和p-Akt蛋白随着染尘时间延长有不同程度变化,但统计学差异不显著。提示PI3K/Akt通路可能在大鼠矽肺纤维化中发挥作用,但发挥作用的时间段有待进一步探讨。     

PI3K/Akt/mTOR信号传导通路在肿瘤的研究进展

PI3K/Akt/mTOR信号传导通路是哺乳动物细胞内非常重要的信号传导通路之一,它通过影响其下游多种效应分子的活化状态,发挥在细胞内抑制凋亡、促进增殖的作用.最新研究表明PI3K/Akt/mTOR信号传导通路与包括肝癌、结肠癌、肺癌、乳腺癌等多种肿瘤的发生发展密切相关,且PI3K/Akt/mTOR信号传导通路的研究在肿瘤的治疗中同样发挥着重要的作用.因此文章将PI3K/Akt/mTOR信号通路的组成、分子机制、功能、及其在肿瘤治疗中的应用前景等方面的研究进展作一综诉.     

ERK信号转导通路调控乙醛刺激的肝星状细胞增殖的研究

目的特异性ERK阻断剂PD98059作用于乙醛刺激的HSC后,观察HSC内ERK活性、细胞增殖、细胞周期时相和细胞周期蛋白(Cyclins)表达的变化;为肝纤维化的发生和防治提供依据.方法体外培养人鼠HSC;HSC经PD98059预处理,用乙醛刺激后收集细胞,分别采用Western?blot、MTT比色法、流式细胞仪、RT-PCR法检测ERK活性、细胞增殖、细胞周期时相及CycinnDlmRNA表达的变化.结果HSC被乙醛刺激后,磷酸化ERK(p-ERK)水平增高、细胞周期蛋白CyclinDlmRNA表达增加、细胞由G1-S期转化增多、促进细胞增殖;20、50、100rLmol几PD98059均能抑制乙醛刺激的HSC内p-ERK水平,50、100pmol几的PD98059可明显抑制乙醛刺激的HSC内CyclinDlmRNA表达,并明显抑制细胞由Gl-S期的转化和细胞增殖,与对照组比较有统计学差异(P<0.05).结论乙醛刺激HSC后,引起ERK信号传导通路活化;ERK信号传导通路调控乙醛刺激的HSC增殖可能与其调控HSC内CycinnDlmRNA表达和细胞周期变化有关.     

姜黄素诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡机制

目的探讨姜黄素诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的可能机制。方法体外培养人胃癌细胞SGC-7901,细胞计数盒8(CCK8)法观察不同浓度姜黄素对胃癌细胞SGC-7901的增殖抑制作用;流式细胞仪检测SGC-7901细胞周期;Western blot检测SGC-7901细胞核转录因子κB(NF-κB)、livin、caspase-3蛋白表达情况。结果与对照组比较,各剂量姜黄素组SGC-7901细胞增殖活力均受到抑制,呈剂量效应关系(r=0.901,P0.01)与时间效应关系(r=0.389,P0.01);与对照组(2.8%)比较,20、40、60μmol/L姜黄素组SGC-7901细胞凋亡率[分别为7.7%、13.4%、20.7%]明显升高(P0.05);与对照组(58.59%)比较,20、40、60μmol/L姜黄素组SGC-7901细胞周期G1期比例[分别为60.24%、65.13%、68.35%]明显升高(P0.05);与对照组比较,姜黄素组SGC-7901细胞内NF-κB、livin蛋白表达降低,caspase-3蛋白表达升高(P0.05),呈剂量效应关系。结论姜黄素可抑制人胃癌细胞SGC-7901的活性,其机制可能与姜黄素下调NF-κB信号通路,促进livin解除对caspase的抑制效应而激活caspase-3,发挥其诱导细胞凋亡作用有关。     

PI3K/Akt通路在滋养细胞侵蚀能力中的调控机制

目的:探讨PI3K/Akt信号转导通路在滋养细胞侵蚀能力中的调控机制。方法:体外培养滋养细胞系。应用Western blot法检测表皮生长因子(EGF)刺激EVT后Akt、磷酸化Akt及MMP9表达的变化。应用细胞侵蚀小室检测滋养细胞的侵蚀能力。使用PI3K选择性抑制剂LY294002处理细胞,检测以上各项结果的变化。结果:①随EGF浓度增高,滋养细胞的Akt表达无明显变化,磷酸化Akt表达升高,MMP9表达升高;②EGF能够显著促进滋养细胞的侵蚀运动能力;③PI3K抑制剂LY294002明显逆转EGF对EVT侵蚀力的促进效应。结论:表皮生长因子可以活化滋养细胞的PI3K/Akt信号通路,进而促进细胞侵蚀,使用PI3K抑制剂LY294002,上述作用被抑制。