组织芯片应用于原发性鼻咽癌中p53表达的高通量分析

目的：通过对不同临床分期鼻咽癌(NPC)中p53蛋白表达的进一步研究，探讨高通量组织微阵列技术(high—throughput tissue microarray)应用于大规模临床标本高效筛查的可行性。方法：用组织阵列仪(tis—sue arrayer)制备连续系列分区排列的组织芯片，然后用p53单抗免疫组织化学法检测一张组织芯片上320例各类型的鼻咽活检组织标本中p53蛋白表达，并分析p53表达在不同鼻咽组织的分布状况及其与临床分期的相关性。结果：在正常鼻咽黏膜组织、癌旁组织及癌组织中p53蛋白的检出率分别为0(0／29)、16．7％(4／24)及61．4％(164／267)，NPC组织中p53蛋白表达率明显高于其他鼻咽非癌组织，P＜0．001，其中癌旁4例全为弱阳性，癌组织中164例中弱阳性为112例，占41．9％(112／267)，而强阳性为52例，占19．5％(52／267)；p53表达与鼻咽癌的临床分期无显著相关性，P=0．078，而p53过表达(强阳性)却与鼻咽癌的临床中晚期密切相关，P=0．0071。结论：鼻咽癌中p53蛋白的高频核积累提示p53蛋白功能的抑制在鼻咽癌的发生发展中起重要作用；应用组织芯片(tissue chip)大规模高效筛查临床组织标本是可行性的，具有快速、方便、经济的特点。     

重组腺病毒p53影响口腔黏膜异常增生细胞生长的分子机制

[目的]探讨重组腺病毒p53(rAd-p53)影响口腔黏膜异常增生细胞(POE-9n)生长、诱导凋亡的分子机制。[方法]利用RT-PCR及Westernblot技术检测rAd-p53转染POE-9n细胞后p53、p21CIP/WAF及bcl-2mRNA和蛋白的表达变化。[结果]POE-9n细胞经rAd-p53转染后,p53、p21CIP/WAF和bcl-2mRNA和蛋白水平的表达均出现明显变化。转染24h后,p53、p21CIP/WAFmRNA及蛋白表达显著增高(P<0.01),而bcl-2则在转染72h后表达明显降低(P<0.01)。[结论]rAd-p53转染POE-9n细胞后,外源性p53的导入使p21CIP/WAF激活,并抑制bcl-2的表达,从而诱导细胞凋亡。     

p21WAF1/CIP1和p53蛋白表达在胃癌发生发展过程中的研究

目的研究p21WAF1/CIP1和p53蛋白在胃癌发生发展过程中的作用及表达的临床病理意义.方法采用免疫组化SP法对正常胃粘膜、萎缩性胃炎伴肠上皮化生、萎缩性胃炎伴不典型增生组织各20例和78例胃癌组织标本进行p21WAF1/CIP1和p53蛋白检测.结果胃癌组织中p53蛋白阳性表达率高于正常胃粘膜、萎缩性胃炎伴肠上皮化生和不典型增生组(P＜0.05),而p21WAF1/CIP1蛋白阳性表达低于正常胃粘膜、萎缩性胃炎伴肠上皮化生组(P＜0.01)p21WAF1/CIP1、p53蛋白表达与胃癌的分化程度相关(P＜0.05);有淋巴结转移组p21WAF1/CIP1蛋白表达率低于无淋巴结转移组(P＜0.05),而有淋巴结转移组p53蛋白表达率高于无淋巴结转移组(P＜0.05);p53蛋白表达与胃癌浸润深度有关.结论p53蛋白高表达与p21WAF1/CIP1蛋白失表达可能参与胃癌的发生发展过程;检测p53和p21WAF1/CIP1蛋白作为反映胃癌病理学特点的参考指标可能有一定意义;p21WAF1/CIP1蛋白表达在胃癌可能存在非p53诱导表达途径.     

重组人p53腺病毒治疗原发性肝癌的血清p53蛋白检测及其临床意义

目的:初步观察重组人p53腺病毒注射液(recombinant adenovirus-p53,rAd-p53)治疗肝癌临床疗效,和治疗前后血清p53蛋白的变化及其临床意义。方法:对38例原发性肝癌患者,采用瘤内注射、血管介入和静脉滴注rAd-p53联合化疗和放疗,行至少1个疗程以上的治疗,治疗结束一个月后评价疗效。应用ELISA检测患者治疗前和治疗后血清p53蛋白。结果:38例患者总的疾病控制率为94.74%,其中CR7例,PR11例,SD18例,PD2例。38例肝癌患者经人p53腺病毒注射液治疗后血清p53蛋白含量比治疗前明显升高(P<0.01)。治疗前血清p53蛋白较高的患者比p53蛋白低的对人p53腺病毒注射液的治疗反应较好。结论:人p53腺病毒注射液治疗对肝癌具有一定疗效,临床应用安全;治疗前血清p53蛋白含量以及动态变化可能是预测rAd-p53治疗肝癌疗效的有价值指标,并对人p53腺病毒注射液的临床应用具有一定的指导作用。     

白血病中p21WAF1.p53的表达及其关系

目的探讨p21WAF1蛋白在白血病中的表达及白血病中p21WAF1与p53的关系;方法用免疫组化方法检测40例白血病患者骨髓中p21WAF1和p53蛋白表达;结果40例白血病患者p53蛋白表达阳性率为42.5%(17/40);p21WAF1蛋白表达阳性率为17.5%(7/40),其中慢性白血病阳性率占50%(5/10),急性白血病阳性率为6.7%(2/30).二者之间有显著性差异(P＜0.01);p21WAF1蛋白表达情况与p53表达阳性或阴性表达无明显相关(P＞0.05).结论在白血病细胞中p21WAF1的表达与分化密切相关;其表达不一定仅依赖于p53的诱导.     

鼻咽癌p53 p21 WAF1和MDM2蛋白异常表达的临床意义

目的：探讨p53、p21^WAF1、MDM2蛋白在原发鼻咽癌（NPC）异常表达的临床意义。方法：采用LSAB法检测69例原发NPC组织中p53、p21^WAF1和MDM2蛋白的表达状况。结果：1）p53、p21^WAF1和MDM2蛋白在原发NPC组织的阳性表达率分别为79．7％、84．1％、和82．6％；高表达率分别为50．7％、46．4％和31．9％。2）p53蛋白的高表达率随TNM分期的升高而增多，P＝0．042。3）p53或MDM2蛋白高表达者的复发间期显著短于相应蛋白低表达／阴性者，分别P＝0．038和P＝0．002。4）p53和MDM2蛋白同时高表达者、MDM2蛋白高表达同时p21^WAF1蛋白低表达／阴性者的复发间期明显短于对照组，分别P＜0．001；p21^WAF1蛋白高表达同时p53蛋白低表达／阴性者、p53和MDM2蛋白同时低表达／阴性者的复发间期显著长于对照组，分别P＝0．002和P＝0．014。5）p53和MDM2蛋白高表达同时p21^WAF1蛋白低表达／阴性者的复发间期明显短于对照组，P＜0．001；p53和MDM2蛋白低表达阴性同时p21^WAF1蛋白高表达者的复发间期明显长于对照组，P＝0．002。结论：p53或MDM2蛋白高表达提示有促进NPC复发的作用，p21^WAF1蛋白高表达提示有抑制NPC复发的作用。单独检测p53或MDM2蛋白在原发NPC组织的表达情况可以和为预测NPC复发倾向和临床预后的参考指标；如同时检测p53、MDM2和p21^WAF1蛋白的两项或三项指标，预测意义更理想。     

p53、p21在食管癌和鼻咽癌中的表达及意义

目的：对比研究食管鳞癌和鼻咽癌的p53、p21基因表达情况，探讨改进食管癌临床放射治疗的方法。方法：采用许氏ABC免疫组化法对43例食管鳞癌和39例鼻咽鳞癌标本进行p53、p21表达率和表达强度的对比分析研究。结果：p53、p21两种细胞增殖指标在食管鳞癌和鼻咽鳞癌中的表达率和表达强度基本相近，经统计学检验无明显差异（p≥0.05）。结论：p53、p21蛋白表达异常在食管癌和鼻咽癌存在某些共性，食管癌可以借鉴鼻咽癌成功的非常规放射治疗方式。     

鼻咽癌组织中survivin、bcl-2和p53蛋白的表达及其相关性

目的研究鼻咽癌组织中survivin、bcl2和p53蛋白表达及其相关性。方法采用自行制作的鼻咽癌各发展阶段组织微阵列,结合免疫组织化学方法,检测其survivin、bcl2和p53蛋白的表达情况。结果survivin蛋白在鼻咽癌和癌旁上皮中的阳性表达均高于其在鼻咽上皮组织中的表达,bcl2、p53蛋白在鼻咽癌组织中阳性表达率显著高于癌旁上皮和鼻咽上皮组织,p53蛋白在癌旁上皮的表达高于鼻咽上皮组织;鼻咽癌组织中survivin与bcl2,survivin与p53蛋白阳性表达密切相关。结论survivin、bcl2和p53基因在鼻咽癌的发生发展过程中密切相关,共同促进鼻咽癌的发生发展。     

重组人类p53腺病毒联合同步放化疗治疗中晚期子宫颈鳞状细胞癌的临床观察

 目的　探讨重组人类p53腺病毒（rAd-p53）瘤内注射联合同步放化疗治疗中晚期子宫颈癌患者的近期疗效及安全性。方法　将21例确诊中晚期子宫颈鳞状细胞癌的患者,随机分为两组,治疗组（10例）行rAd-p53瘤内注射+同步放化疗,对照组（11例）仅行同步放化疗,比较两组治疗结束时患者的近期疗效及主要不良反应。结果　治疗组 完全缓解（CR）2例,部分缓解（PR）6例,稳定（SD）2例,总有效率 80 %;对照组 PR 3 例,SD 6例,进展（PD）2例,总有效率 27.3 %,治疗组和对照组疗效差异有统计学意义（t＝76.00,P＜0.05）,rAd-p53的药物毒副作用主要是自限性发热,两组骨髓抑制反应的发生率差异无统计学意义（t＝119.50,P＞0.05）。结论　rAd-p53瘤内注射在中晚期子宫颈癌的同步放化疗中具有增效作用,rAd-p53瘤内注射是安全有效并方便的治疗手段。     

PCNA和p53蛋白表达与鼻咽癌放射敏感性关系的研究

目的　探讨增殖细胞核抗原 (PCNA )和p5 3蛋白表达与鼻咽癌放射敏感性的关系。方法　应用免疫组化法 ,检测 5 1例放疗前鼻咽癌组织中PCNA和 p5 3蛋白表达情况。 结果　 5 1例鼻咽癌组织中PCNA和 p5 3蛋白表达阳性者分别有 5 0例( 98.0 % )和 46例 ( 90 .2 % ) ,高表达者分别有 16例 ( 3 1.4% )和 2 2例 ( 4 3 .1% ) ;鼻咽癌组织中PCNA表达与 p5 3蛋白表达显著相关(P <0 .0 1) ;PCNA和 p5 3蛋白阳性表达水平越高 ,则鼻咽癌对放射治疗越敏感 ,放疗后鼻咽局部癌肿完全消退率越高 (P <0 .0 5 ) ;PCNA和 p5 3蛋白同时高表达者比单一指标高表达者 ,对放射敏感性更高 (P <0 .0 5 )。 结论　PCNA和 p5 3蛋白是反映鼻咽癌放射敏感性和预测其放疗疗效的重要指标     

抑癌基因ING1、p21/WAF1、P53蛋白在胃癌中的表达

目的　研究ING1、p2 1 /WAF1、p53基因蛋白在胃癌组织中的表达意义及相互关系。方法　对 71例胃癌组织应用Envision免疫组化法 ,检测 p33ING1 、p2 1 /WAF1、p53的表达情况 ,分析其相关性 ,结合临床病理因素 ,探讨胃癌发生、进展及预后的关系。结果　p33ING1 与p2 1 /WAF1、p53表达有相关性 (P <0 .0 5) ,p33ING1 表达率为 62 .0 % (44/71 ) ,与正常组织相比呈低表达 ,与胃癌的浸润、淋巴结转移、远隔转移、分化程度有相关性 (P <0 .0 1 ) ;p2 1 /WAF1表达率为54 .9% (39/71 ) ,与胃癌浸润相关 (P <0 .0 5) ;p53表达为 63 .4 % (45/71 ) ,与浸润及淋巴结转移相关 (P <0 .0 1 )。结论　ING1是抑癌基因 ,其蛋白p33ING1 在胃癌中低表达 ,对胃癌的发生、发展可能起重要作用 ,p33ING1 、p2 1 /WAF1、p53表达可作为判断胃癌恶性程度及预后的重要指标     

上皮性卵巢癌组织中p21WAF1表达及其与P53和PCNA的相关性

背景与目的:近年研究表明,p21WAF1下调与多种肿瘤发生、发展有关,但其与上皮性卵巢癌的关系研究甚少,本研究从mRNA和蛋白水平探讨p21WAF1基因在上皮性卵巢癌发生发展中的作用及其与P53和PCNA蛋白表达的相关性.方法:应用RT-PCR法检测55例上皮性卵巢癌、32例良性卵巢肿瘤和30例正常卵巢组织中p21WAF1 mRNA表达,免疫组化法检测P21WAF1、P53、PCNA蛋白表达,并结合其临床病理参数及预后进行分析.结果:上皮性卵巢癌、良性卵巢肿瘤、正常卵巢组织中p21WAF1 mRNA阳性率分别为40.00%、56.25%、73.33%(P=0.012),P21WAF1蛋白阳性率分别为36.36%、56.25%、80.00%(P=0.001).上皮性卵巢癌p21WAF1 mRNA及其蛋白表达均低于其它两组,而P53、PCNA蛋白表达阳性率显著高于其它两组(P＜0.05).上皮性卵巢癌中p21WAF1 mRNA表达与其蛋白表达呈显著性正相关,与PCNA表达呈负相关,与P53表达无显著性相关.P21WAF1蛋白表达与PCNA、P53表达均呈负相关.P21WAF1蛋白低表达与卵巢癌FIGO分期晚有显著性相关(P=0.032),与患者年龄、组织学类型、病理分级、残余肿瘤大小无显著性相关(P＞0.05),而p21WAF1 mRNA与上述各项临床病理参数均无显著性相关(P＞0.05).单因素分析显示p21WAF1 mRNA与P21WAF1蛋白低表达患者预后差(P＜0.05).结论:上皮性卵巢癌组织中P21WAF1表达下调.p21WAF1基因检测结果有可能作为预测上皮性卵巢癌预后的一种参考指标.     

乙型肝炎病毒X基因经p53依赖性与非依赖性途径对p21WAF1表达的影响

背景与目的:研究表明,在不同情况下乙型肝炎病毒 X基因(HBx)对 p21WAF1的表达具有不同的影响,但作用机制仍不清楚.本研究的目的是探讨 HBx对 p53下游基因 p21WAF1的影响.方法:通过正、反义野生型 p53(wtp53)与 HBx单转染及共转染人肝癌细胞株 SMMC-7721细胞,以及 HBx转染不同内源性 p53状态的肝癌细胞株,检测 p21WAF1启动子荧光素酶基因表达,并用流式细胞仪观察细胞周期的变化 ,Western blot法比较 p53、p21WAF1表达水平的变化.结果:正、反义 wtp53与 HBx 单转染及共转染 SMMC-7721细胞 ,HBx与正义 wtp53共转染组(1.007± 0.098)与单转染正义 wtp53(0.490± 0.012)相比,p21WAF1启动子荧光素酶基因表达明显升高(P< 0.05),其余各组 HBx均可导致 p21WAF1启动子荧光素酶基因表达明显减少(P< 0.05).Western blot法表明 HBx可导致 p53的表达增加,但 p53表达较低的 SMMC-7721细胞转染 HBx后 p21WAF1蛋白的表达减弱 ,p21WAF1启动子荧光素酶基因表达(0.053± 0.010)也较对照组(0.094± 0.013)明显减少(P< 0.05),而 p53表达较强的 HepG2细胞转染 HBx后 p21WAF1蛋白的表达增强、p21WAF1启动子荧光素酶基因的表达(1.252± 0.052)较对照组明显升高(0.767± 0.031)(P< 0.05).细胞周期结果表明瞬时转染 HBx的 SMMC-7721和 Hep3B细胞停滞在 G0-G1期细胞数(42.31%、36.96%)较对照组(47.10%、42.90%)减少,而瞬时转染 HBx的 HepG2细胞(63.62%)停滞在 G0-G1期的细胞数较对照组(57.42%)增加,但稳定筛选后 ,pcDNA3HBxHepG2细胞(57.31%)停滞在 G0-G1期细胞数较对照组(61.49%)减少.结论:HBx一方面可能引起 p53蛋白在细胞内积聚导致 p21WAF1表达升高,另一方面可直接抑制 p21WAF1启动子的转录活性.     

肝细胞肝癌p21WAF1与p53的表达及其意义

目的探讨HCC中p21     

p53和p21WAF1蛋白在肝细胞肝癌中表达的意义

 【摘要】　目的　探讨p53和p21WAF1蛋白在肝细胞肝癌（HCC）中的表达及其意义。方法　应用免疫组织化学SP法检测41例HCC及相应30例癌旁肝组织中p53和p21WAF1蛋白的表达。结果　p53和p21WAF1蛋白在HCC中阳性表达率分别为43.9 ％和75.6 ％，明显高于癌旁组织，差异有统计学意义（P＜0.01）。HCC中p53蛋白表达与p21WAF1蛋白表达无明显相关性（P＞0.05）。p53蛋白表达在不同组织学分级、有无肝内或门静脉转移之间差异有统计学意义，而p21WAF1蛋白表达在不同临床病理特征间差异无统计学意义。结论　p53和p21WAF1蛋白高表达均在HCC发生、发展中起作用，但两者间并无相关性。p21WAF1的诱导存在着不依赖p53的途径。     

睑板腺癌组织p21、p53蛋白表达及临床意义

目的研究p21、p53蛋白在睑板腺癌组织中表达及临床意义。方法选取80例睑板腺癌患者,取其睑板腺癌组织及其中40例患者的癌旁组织作为检测标本。免疫组化法检测p21、p53蛋白的阳性表达率。睑板腺癌患者睑板腺癌组织p21、p53蛋白表达情况影响因素的多因素分析采用Logistic回归分析。相关性分析采用Spearman相关性分析。结果睑板腺癌组织中p21、p53蛋白阳性表达率均明显高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.01)。不同分化程度、淋巴结转移情况、局部浸润情况和复发情况睑板腺癌患者睑板腺癌组织p21、p53蛋白阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。淋巴结转移、局部浸润和复发是睑板腺癌患者睑板腺癌组织p21蛋白阳性表达的独立危险因素(P<0.05);淋巴结转移、局部浸润是睑板腺癌患者睑板腺癌组织p 53蛋白阳性表达的独立危险因素(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,睑板腺癌组织中p21蛋白与p53蛋白表达呈正相关(r=0.413,P<0.01)。结论p21、p53蛋白在睑板腺癌组织表达水平明显较高,其中p21蛋白对早期疾病和预后均存在一定影响,而p53蛋白仅对疾病早期有一定影响,且p21、p53蛋白在睑板腺癌发生、发展过程中具有协同作用。     

Prognostic Significance of p53 and p21WAF1/CIP1 Immunoreactivity and Tumor Micronecrosis for Recurrence of Meningiomas

Recurrence is an important factor for prognosis of meningioma patients, this also occurring with some lesions diagnosed histopathologically as benign. To analyze their relationships with clinicopathological factors, p53 and p21^WAF1/CIP1 immunoreactivity, 80 meningiomas were classified into four groups with regard to the World Health Organization (WHO) histological classification and recurrence: 40 cases of Group I (typical type)-NR (no recurrence); five cases of Group I-R (recurrence); 20 cases of Group II (atypical or anaplastic type)-NR and 15 cases of Group II-R.Micronecrosis was detected in 25% of Group II-NR and 73.3% of Group II-R (P=0.007, odds ratio (OR) =8.25, 95% confidence interval (CI) =1.79–38.01). Patients receiving radiation therapy had a lower risk of recurrence (P=0.041, OR =0.20, 95% CI =0.05–0.85). Immunoreactivity for p53 protein was positive in 22% of Group I and 54% or Group II (P=0.005), and in 80% of Group I-R and 15% of Group I-NR (P=0.006, OR = 22.7, 95% CI = 2.15–239.4). p21^WAF1/CIP1 protein was detected in 22% of Group I and 48% of Group II (P=0.017), but with no link to recurrence. Multivariate analysis also showed p53 immunoreactivity in Group I (benign lesions) and micronecrosis in Group II (atypical/anaplastic meningiomas) to be strong prognostic factors for recurrence (P<0.05). These results indicate that p53 immunoreactivity and micronecrosis can help predicting recurrence of meningiomas.     

p53、p21WAF-1和p63在胃肠间质瘤中表达的相互关系及意义

目的探讨p53、p21WAF-1和p63在胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumor, GIST)中的表达和相互关系及其临床病理意义。方法 应用免疫组化S-P法检测70例手术切除胃肠间质瘤中p53、p21WAF-1和p63蛋白表达情况。结果 p53、p21WAF-1和p63在GIST中表达率分别为62.86%(44/70)、34.29%(24/70)和14.29%(10/70);p53与肿瘤部位、肿瘤坏死、肿瘤大小、核分裂像、Fletcher分级有关(P＜0.05);p21WAF-1与肿瘤细胞类型、肿瘤大小、核分裂像、Fletcher分级有关(P＜0.05);p63与核分裂像和肿瘤坏死有关(P＜0.05);p53与p21WAF-1的表达呈负相关(r=-0.538, P=0.000)。结论 p53、p21WAF-1和p63蛋白表达与GIST生物学行为关系密切, 三者有可能成为判断GIST生物学行为的评价指标。     

HCV C蛋白、p53、Mdm2、p14和p21在原发性肝癌中的表达及相关性

目的:研究原发性肝癌(HCC)组织中核心蛋白、突变p53、Mdm2、p14和p21的表达及其相关性,探讨HCV核心蛋白对突变p53、Mdm2、p14和p21表达影响及临床意义。方法:收集42例HCC石蜡组织,采用免疫组织化学EnVision法检测HCC组织中核心蛋白、突变p53、Mdm2、p14和p21的表达,用统计学方法及临床联系分析它们之间的关系。结果:核心蛋白、突变p53、Mdm2、p14和p21的阳性表达主要定位于细胞核中;HCC组织中核心蛋白、突变p53、Mdm2、p14和p21阳性率分别为40.5%、47.62%、75.57%、45.24%、19.05%;5组间的Kruskal-Wallis检验P=0.000,差异显著,核心蛋白与突变p53、Mdm2、p14和p21间的Mann-WhitneyU秩和检验P值分别为0.043、0.009、1.0、0.023;HCVC蛋白与突变p53、p14、p21阳性强度两者间相关性Spearman检验P值分别为0.000、0.000、0.43,相关系数rs分别为0.67、0.64、-0.29;p53和Mdm2、p21阳性强度间相关性Spearman检验p值为0.000、0.174,rs分别为0.72、-0.45。结论:在HCV感染的HCC中HCVC蛋白可能促进野生p53突变和表达,p14的表达与C蛋白有关联;突变p53和p14很可能促进Mdm2的表达;HCC中p21表达缺陷是十分常见的,HCV相关的HCC主要与p53通路改变有关,C蛋白可能下调p21的表达。因此,HCV相关的HCC中C蛋白、突变p53、Mdm2很可能促进肝细胞增生或恶性生长。