EBER1/2、TNF-α与NHL组织坏死的相关性

目的　探讨EBV感染、TNF -α与非霍奇金淋巴瘤 (NHL )组织坏死的相关性。方法　将 12 4例NHL标本分为坏死组与无坏死组 ;分成NK/T、TCL、BCL 3种类型。采用原位杂交方法检测EBV编码的RNA (EBER 1/2 ) ,对EBER 1/2阳性标本采用免疫组织化学S -P法检测TNF -α水平。结果　坏死组 2 7例 ,无坏死组 97例 ;NK /T 2 3例、TCL 5 0例、BCL 5 1例。EBER1/2阳性率为 2 8.2 % ( 35 /12 4) ,其中坏死组阳性率为 85 .2 % ( 2 3/2 7) ,无坏死组为 12 .4% ( 12 /97) ,2组比较有非常显著性差异 ,P <0 .0 1。NK /T感染率为 5 2 .2 % ( 12 /2 3) ,TCL为 36.0 % ( 18/5 0 ) ,BCL为 9.8% ( 5 /5 1) ,NK/T、TCL与BCL比较有非常显著性差异 ,P <0 .0 1。TNF -α阳性率为 8.6% ( 3/35 ) ,且多呈弱阳性。结论　EBV感染 (EBER 1/2阳性 )主要见于NK /T和TCL ,与NHL组织坏死相关 ;TNF -α与NHL组织坏死无明显相关性 ;EBV感染导致肿瘤组织坏死的机制可能有多种途径     

EBERl／2、TNF—α与NHL组织坏死的相关性

目的 探讨EBV感染、TNF-α与非霍奇金淋巴瘤(NHL)组织坏死的相关性。方法 将124例NHL标本分为坏死组与无坏死组；分成NK／T、TCL、BCL3种类型。采用原位杂交方法检测EBV编码的RNA(EBER1/2)，对EBER1/2阳性标本采用免疫组织化学S-P法检测TNF-α水平。结果 坏死组27例，无坏死组97例；NK／T23例、TCL50例、BCL 51例。EBER1／2阳性率为28．2％(35／124)，其中坏死组阳性率为85．2％(23/27)，无坏死组为12．4％(12/97)，2组比较有非常显著性差异，P＜0．01。NK／T感染率为52．2％(12/23)，TCL为36．0％(18／50)，BCL为9．8％(5／51)，NK／T、TCL与BCL比较有非常显著性差异，P＜0．01。TNF-α阳性率为8．6％(3/35)，且多呈弱阳性。结论 EBV感染(EBER1/2阳性)主要见于NK／T和TCL，与NHL组织坏死相关；TNF-α与NHL组织坏死无明显相关性；EBV感染导致肿瘤组织坏死的机制可能有多种途径。     

NQO1和HO-1在T细胞淋巴瘤中的表达及意义

  目的   探讨醌氧化还原酶1[NAD(P)H:quinine oxidoreductase 1, NQO1]与血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)在T细胞淋巴瘤(T-cell lymphoma, TCL)中的表达及其临床病理特征间的关系。  方法  回顾性分析2012年12月至2018年5月甘肃省人民医院确诊的61例TCL患者的临床资料。采用免疫组织化学法检测NQO1和HO-1在61例TCL组织(TCL组)及20例淋巴结反应性增生组织(对照组)中的表达水平。  结果  NQO1和HO-1在TCL组织中的阳性表达率均明显高于淋巴结反应性增生组织, 差异具有统计学意义(P < 0.05);NQO1与TCL临床分期和B症状有关(P < 0.05);HO-1与TCL的临床分期、骨髓侵犯和B症状密切相关(P < 0.05);二者与TCL患者的年龄、性别、乳酸脱氢酶水平及病理分型无关(P>0.05);NQO1和HO-1的表达存在相关性(r=0.264;P=0.040)。  结论  NQO1和HO-1在TCL中高表达, 可能互相作用参与TCL的发生发展。      

肿瘤细胞裂解物联合IL-2预防黑色素瘤发生并抑制肿瘤生长的免疫机制

目的 探讨肿瘤细胞裂解物（TCL）联合IL-2对黑色素瘤的预防和抑制作用及其免疫机制。方法 超声破碎仪制备B16F10黑色素瘤细胞TCL。24只C57BL/6小鼠随机分为四组,分别予PBS、IL-2、TCL及TCL+IL-2预防性免疫3周,第4周对侧植瘤。观察小鼠出瘤时间及肿瘤大小,连续采集外周血行流式细胞术动态监测CD4+T及CD8+T细胞。流式细胞术及免疫组织化学检测小鼠脾脏及肿瘤组织CD4+T及CD8+T细胞。结果 TCL+IL-2组预防性免疫后明显延迟了小鼠的出瘤时间（P=0.034）,且肿瘤体积（P=0.023）及瘤重（P=0.0015）也明显小于对照组。流式细胞术动态监测结果提示TCL+IL-2组及单纯TCL组外周血中CD8+T细胞较对照组均有明显上升（P=0.0016, P=0.012）。TCL+IL-2组的CD4+T细胞在植瘤后较对照组有所下降（P=0.0089）。脾脏及肿瘤组织中CD4+T细胞及CD8+T细胞的结果与外周血中的表达趋势相同。结论 TCL联合IL-2的肿瘤疫苗通过激活CD8+T细胞途径,预防小鼠黑色素瘤的发生并抑制肿瘤生长。     

鼻NK/T细胞淋巴瘤的免疫表型、EBV感染及TCRγ基因重排的检测

 目的 检测鼻NK/T细胞淋巴瘤（NK/TCL）的免疫表型、EBV感染及TCRγ基因重排,为诊断和鉴别诊断提供依据。方法 收集诊断鼻NK/TCL48例患者石蜡包埋标本,用免疫组化SP法标记LCA、CD79α、CD20、CD56、CD3、CD45RO及EBV抗体研究其免疫表型;EBER探针原位杂交方法检测EBV编码的小分子RNA（EBER）;聚合酶链式反应扩增方法检测TCRγ基因重排。结果 48例鼻NK/TCL均表达LCA,CD3、CD45RO、CD56和EBV阳性率分别为44%、52%、73%和19%,CD79α和CD20均阴性;EBER阳性率为81%;TCRγ基因重排阳性率为19%。结论 鼻NK/TCL免疫表型不一致,并非所有病例CD56阳性,石蜡切片中CD3阳性定位于细胞质;EBER在肿瘤细胞中高表达,提示它们可能为NK细胞来源;部分TCRγ基因重排阳性病例应为鼻NK样T细胞淋巴瘤。     

TIM-3 配体galectin-9 诱导NK/T细胞淋巴瘤细胞的凋亡及其机制

目的：观察TIM-3 在NK/T细胞淋巴瘤（natural killer/T cell lymphoma, NK/TCL）细胞株中的表达及其配体galectin-9（GAL-9）诱导瘤细胞凋亡的作用及其部分机制。方法：Western blotting 测定NK/TCL细胞株SNK-1、SNK-6、SNT-8 和健康人外周血NK细胞中TIM-3 的表达;采用不同质量浓度重组人GAL-9（rhGAL-9）作用于NK/TCL细胞株24 h 后,通过CCK-8 法检测细胞增殖活性;流式细胞术Annexin-V/PI 双染法检测瘤细胞凋亡;Western blotting 检测caspase-3、PARP及其剪接体和MAPK信号通路蛋白磷酸化表达水平变化。结果：NK/TCL细胞株SNK-1、SNK-6 和SNT-8 的TIM-3 表达较健康人外周血NK细胞显著增高,其中SNK-1、SNK-6 细胞株与对照组相比差异具有统计学意义（P<0.05）;CCK-8 检测结果显示,rhGAL-9 对NK/TCL细胞增殖活力具有明显抑制作用,并有浓度依赖性;流式细胞术检测显示,rhGAL-9 可诱导3 种NK/TCL细胞株凋亡;Western blotting 结果显示,cleaved-caspase-3、cleaved-PARP蛋白表达量增高,MAPK通路中JNK蛋白磷酸化水平升高。结论：TIM-3 在NK/TCL细胞株中异常高表达,其配体GAL-9可诱导细胞凋亡,其机制可能与JNK磷酸化水平升高相关。     

细胞凋亡及相关基因bax和bcl-2蛋白在食管癌中的表达和临床意义

近年来关于细胞凋亡和凋亡相关基因在食管癌发生发展中的作用引起了国内外学者的广泛关注和研究,bax 和bcl－2是一对作用相反的凋亡促进和抑制基因,它们之间的平衡对细胞凋亡的调节起重要作用。我们应用DNA末端标记和免疫组化方法检测70例食管癌组织细胞凋亡状态及凋亡相关基因bax和bcl－2蛋白的表达,并探讨其在食管癌发生发展中的作用。1 材料与方法1．1 标本来源 采用1988年至1996年我院食管癌根治术后食管鳞癌石蜡包埋组织70例。按WHO病理分级：G1 20例G2 36例G3 14例。UICC临床分期T1 4例T2 28例T3~T4 38例。淋巴…     

新型金纳米笼分子探针在光热治疗和放射增敏中的价值研究

目的：探讨靶向金纳米笼（ GNCs）分子探针在小鼠乳腺癌4T1细胞靶向光热治疗和放射增敏价值。方法利用GNCs构建CD44－PEG－GNCs分子探针;通过电感耦合等离子体质谱（ ICP－MS）与电镜（ TEM）来检测4T1细胞对Au的摄取情况;用CCK－8检测该探针对4T1细胞活性影响;近红外激光照射4T1细胞后用CCK－8、Hoechst／PI双染检测GNCs的光热杀伤效果;用6 MV的X线照射4T1细胞并用克隆形成实验和Hoechst／PI双染来检测4T1细胞活性。结果 ICP－MS和TEM显示4T1细胞摄取大量GNCs,其中对CD44－PEG－GNCs摄取量约是PEG－GNCs的3～4倍;细胞毒性实验显示在一定浓度范围内GNCs对4T1细胞活力影响较小,48 h后细胞活力为81．2％;近红外激光照射及X线放射后CCK－8、Hoechst／PI 双染和克隆形成实验结果表明光热治疗联合放射的含 CD44－PEG－GNCs的肿瘤细胞大量凋亡,效果明显优于其他组。结论 GNCs分子探针细胞毒性小,对4T1细胞有较好的主动靶向作用,提示有对肿瘤光热治疗和放射增敏作用。     

自分泌IGF-1/IGF-1R环路促进NK/T细胞淋巴瘤细胞株迁移和侵袭

目的 探讨IGF-1/IGF-1R信号通路对NK/T细胞淋巴瘤(NK/TCL)细胞株迁移和侵袭的作用及其调控机制.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫荧光技术检测IGF-1和IGF-1R的表达,Transwell技术观察NK/TCL细胞迁移和侵袭.酶联免疫吸附实验(ELISA)检测MMP-2、MMP-9及TIMP1水平.结果 NK/TCL细胞株SNK-1和SNK-6均表达IGF-1与IGF-1R,而健康人NK细胞不表达IGF-1R.IGF-1R抑制剂显著抑制SNK-1和SNK-6的迁移和侵袭.外源性IGF-1则促进细胞迁移及侵袭,而IGF-1R抑制剂能阻断该效应.IGF-1R下游相关激酶p38、PI3K及JNK的抑制剂均可降低细胞迁移能力.外源性IGF-1可上调MMP-2、MMP-9的分泌水平,IGF-1R抑制剂则抑制MMP-2、MMP-9的分泌.结论 NK/TCL细胞株中存在IGF-1/IGF-1R自分泌环路,并通过IGF-1/IGF-1R通路促进MMP-2、MMP-9分泌及IGF-1R下游p38、PI3K及JNK等激酶促进肿瘤细胞的迁移和侵袭.     

EB 病毒与非霍奇金淋巴瘤——附180 例报道

 目的　探讨 NHL与 EBV感染的相关性。方法　用 ISH方法检测 1 80例 NHL中EBV编码的 RNA( EBER1 /2 )。结果　 ( 1 ) EBER1 /2感染率为 42 .8% ( 77/1 80 ) ,感染率依次为TCL64.8%、NK/T46.2 %、BCL9.5 %。其中 TCL、NK/T与 BCL相比 ,P≤ 0 .0 0 5 ;( 2 )结内、结外EBV感染率依次为 2 2 .2 %、5 3.8% ,有显著差异 ,P<0 .0 0 5 ;( 3)面中线 (鼻腔 /口咽环 ) EBER1 /2感染率 72 .4% ( 5 5 /76) ,多形细胞性 EBER1 /2感染率 70 .1 % ( 5 4 /77)。结论　本地区 NHL与 EBV感染关系密切 ,TCL、NK/T淋巴瘤感染率明显高于 BCL,而且有部位限制性和亚型倾向性.     

50例乳腺癌患者BBCA1基因exon11突变研究

[目的]检测50例乳腺癌患者BRCA1基因exon11突变情况及突变位置,探讨BRCA1突变与乳腺癌的关系。[方法]采取50例乳腺癌全血标本为实验组,28例非癌乳腺全血标本为对照组。应用PCR和DNA直接测序法检测所有标本BRCA1基因exon11的突变情况。[结果]28例非癌乳腺组织BRCA1基因exon11未检出突变,50例乳腺癌中有6例发生基因突变。占总例数的12．0％。6例中2例发生多个位点突变,19号标本5个突变位点：2685T→C,2201C→T。2731C→T,3232A→G,3667A→G;30号标本2个突变位点：2685T→C;204T→A。8个位点为错义突变：2532T→C,2685T→C2例,2731C→T,3232A→G,3667A→G2例,2041T→A。3个位点为同义突变：2630T→G2例,2201C→T。发现两个新位点2201位和2731位。[结论]BRCA1基因exon11突变与乳腺癌的发生关系密切,对其进行检测可能对乳腺癌的患病风险评估及早期诊断具有重要意义。     

CNTN1基因对乳腺癌细胞株Hs578T增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的：研究CNTN1基因对乳腺癌细胞株Hs578T细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力的影响。方法：将前期构建的稳定表达pEGFP－N1－CNTN1的Hs578T细胞系,采用MTT、流式细胞仪技术、平板克隆实验及Transwell实验检测pEGFP－N1－CNTN1对Hs578T细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力的影响。结果：与空白组及对照组相比,过表达CNTN1基因的Hs578T细胞增殖能力、克隆形成、迁移及侵袭能力增强（P＜0．05）。结论：CNTN1基因能够增强Hs578T细胞的增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力。     

乙肝病毒感染与肝癌关系的免疫组化研究

肝癌病因研究结果表明，乙型肝炎病毒（HBV）是肝癌发生的重要病因因素。本研究采用免疫组化的方法，对≤5cm小肝癌及其癌周肝组织同时进行HBsAg、HBcAg标记及p53、C－myc基因表达检测，探讨HBV在肝癌发生中的病因学和临床意义。1材料和方法1，1材料本所1974年至1986年间的肝癌手术标本中，对≤5cm的104例肝癌及22例非肝癌肝标本进行检测，同时对资料较全的62例肝癌作基因蛋白表达测定。1．2方法标本均用10％甲醛固定，常现脱水、石蜡包埋、smp连续切片。以PAP法标记癌内及癌周肝中HBsAg、HBcAg，用ABC法分别检测p53、C－myC基因…     

血浆 MAL 基因甲基化检测对于肺癌早期诊断的意义

目的：研究肺癌患者、肺结核患者及健康人群 T 淋巴细胞相关蛋白（T －lymphocyte maturation －asso-ciated protein,MAL）基因启动子区的甲基化状态,进一步探讨血浆 MAL 基因甲基化检测对于肺癌早期诊断及鉴别肺癌与肺结核疾病的意义。方法：采用甲基化特异性 PCR（methylation special PCR,MSP）方法,检测75例肺癌组织标本、癌旁组织标本和对应的血浆标本及58例肺结核组织标本及对应的血浆标本的 MAL 基因启动子区甲基化状态;同时检测30例正常人群的血浆标本 MAL 甲基化状态作为对照。结果：肺癌组织和癌旁组织中 MAL 基因甲基化发生率分别为78．7％（59／75）和2．7％（2／75）,差别具有统计学意义（P ＜0．001）;肺癌和肺结核组织中 MAL 基因甲基化发生率分别为78．7％（59／75）和3．4％（2／58）,差别具有统计学意义（P＜0．001）;肺癌患者与肺结核患者对应的血浆中 MAL 基因甲基化发生率分别73．3％（55／75）和1．7％（1／58）,差别也具有统计学意义（P ＜0．001）。正常健康人群的血浆标本中未发现 MAL 基因甲基化改变;肺癌组和肺结核组分别与健康人群组比较,肺癌组明显高于健康人群（P ＜0．001）,而肺结核组患者与健康人群比较无明显差异（P ＝0．47）。组织标本和血浆标本的检出率具有一致性（P ＞0．05）。根据病理类型、TNM分期、性别、吸烟史等对肺癌患者进行分组,各组之间均无明显差异（P ＞0．05）。结论：MSP 法检测血浆 MAL 基因甲基化状态,可以作为一种有潜力的肺癌早期诊断方法,对于鉴别肺癌和肺结核也有一定的帮助。     

50例T细胞非霍奇金淋巴瘤的临床分析

背景与目的：T细胞非霍奇金淋巴瘤(T-cell non-Hodgkin’s lymphoma,T-NHL)在亚洲国家相对高发,且其发病具有种族及地域特征。本研究旨在讨论新疆医科大学第一附属医院收治的T-NHL患者的发病特点、病理类型及生存情况。方法：收集2002年1月—2012年12月本院诊治的50例T-NHL患者,对发病特点、病理类型及生存情况进行分析。结果：T-NHL患者汉族37例,维吾尔族13例;最常见病理类型为结外NK/T细胞淋巴瘤(NK/T cell lymphoma,NK/TCL),共16例(32%)。儿童组患者病理类型均为T淋巴母细胞性白血病/淋巴瘤(T-lymphoblastic leukemia/lymphoma,T-LBL),青年组及中年组最常见类型为NK/TCL,老年组最常见类型为血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(angioimmunoblastic T-cell lymphoma,AITL)。临床分期Ⅰ、Ⅱ期患者均为NK/TCL,Ⅲ、Ⅳ期患者最常见为周围T细胞淋巴瘤-非特指性(peripheral T-cell lymphomas-unspecified,PTCL-U)及AITL。汉族与维吾尔族患者最常见的病理类型分别为NK/TCL及T-LBL。全组患者的5年总生存率为39%。NK/TCL、间变性大细胞性淋巴瘤(anaplastic large cell lymphoma,ALCL)、AITL、PTCL-U和T-LBL的3年总生存率分别为71%、61%、53%、19%和7%(P<0.05);中年组、青年组、老年组和儿童组5年生存率分别为67%、35%、21%和0(P<0.05)。结论：新疆地区T-NHL可能具有独特的临床特征：总发病率与国内报道相似,高于国外报道,汉族发病率高于维吾尔族;病理类型构成与欧美国家存在较大差异;不同年龄组、分期及民族的病理类型分布存在显著差异。长期生存率低、不同病理类型及年龄组均是影响生存的重要因素。     

沙利度胺联合干扰素治疗复发难治T细胞淋巴瘤二例并文献复习

目的 探讨沙利度胺联合干扰素治疗复发难治T细胞淋巴瘤(TCL)的效果及患者不良反应.方法 观察使用沙利度胺联合干扰素治疗2例复发难治TCL患者的效果及不良反应,并复习相关文献.结果 2例患者均达部分缓解(PR),无明显不良反应.结论 沙利度胺联合干扰素治疗复发难治TCL有一定的疗效,可作为治疗复发难治TCL的一种新的选择.     

用RT-PCR法检测新鲜癌组织中多药耐药基因(mdr-1)表达的体会

恶性肿瘤细胞的多药耐药性（MDR）已普遍受到关注，其分子学基础之一是mdr-1基因的过表达。检测mdr-1基因的方法较多，本研究旨在介绍反转录多聚酶链反应（RT－PCR）检测mdr-1基因表达的经验。方法：选取安阳市肿瘤医院1994年11月~1995年9月术前未作治疗的恶性肿瘤切除标本151份。以RT－PCR检测其mdr-1基因的表达情况，评价RT－PCR检测mdr－1基因中的注意事项及优点。结果：151例均经病检证实为恶性肿瘤，包括胃及贫门癌51例，食管癌46例，大肠癌16例，乳癌15例，甲状腺癌10例，肺癌9例，宫颈癌4例，mdr－1基因在上述肿瘤中的阳性表达率依次分别为对33．3％、37％、31．3％、13．2％、40％、55％、0。结论：RT－PCR检测肿瘤组织中mdr-1基因的表达简单方便、可靠准确，较其它方法为好。     

Vav1与浸润T细胞活性肿瘤局部IDO表达相关性的研究

  目的  通过对Vav1与肿瘤浸润T淋巴细胞（tumor infiltrating T lymphocytes,TIL-T）活性关系的研究,提出T细胞失能的可能分子机制;初步探讨TIL-T中Vav1的表达情况及其与肿瘤局部微环境中吲哚胺2,3双加氧酶（indoleamine-2,3-dioxygen? ase,IDO）表达的相关性。  方法  收集天津医科大学附属肿瘤医院肺外科手术切除的新鲜肺癌标本、癌旁正常肺组织及蜡块40例,通过实时定量RT-PCR检测TIL-T中Vav1 mRNA表达变化;免疫印迹及免疫沉淀技术检测Vav1蛋白表达及磷酸化活性。BrdU法检测T细胞增殖活性。此外,运用Real time-PCR法检测肺癌组织中IDO mRNA表达水平,免疫印迹及免疫组化检测IDO蛋白表达情况。  结果  部分肺癌局部浸润的T细胞处于功能抑制状态,这种抑制状态可能与细胞内重要的信号传导蛋白Vav1的表达量及活性相关。IDO表达阳性组肺癌标本局部TIL-T中Vav1 mRNA水平及Vav1蛋白的表达和磷酸化水平明显低于IDO表达阴性组（P < 0.05）。  结论  Vav1的表达和活化在TIL-T功能中具有重要的作用。肿瘤局部微环境中的IDO蛋白可能是影响TIL-T中Vav1表达和活化的重要因素之一。IDO可能通过抑制Vav1的表达及磷酸化活化过程,使TIL-T的主动免疫受损,从而降低宿主的抗肿瘤免疫效应。      

用RT—PCR法检测新鲜癌组织中多药耐药基因（mdr—1）表达的体会

目的：恶性肿瘤细胞的多药耐药性（ＭＤＲ）已普遍受到关注，其分了学基础之一是ｍｄｒ－１基因的过表达，检测ｍｄｒ－１基因的方法较多。本研究旨在介绍反转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ｍｄｒ－１基因表达的经验。方法：选取安阳市肿瘤医院１９９４年１１月～１９９５年９月术前未作治疗的恶性肿瘤切除标本１５１份。以ＲＴ－ＰＣＲ检测其ｍｄｒ－１基因的表达情况，评价ＲＴ－ＰＣＲ检测ｍｄｒ－１基因中的注意事项及优点     

胃癌p53,c—erbB—2和nm23癌基因蛋白的免疫组织化学研究

目的利用胃癌生物学恶性信息,探讨术前检测ｐ５３、ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｎｍ２３蛋白对胃癌的诊断价值。方法收集胃癌手术标本１４１例,胃镜活检标本９３例,应用免疫组化技术检测ｐ５３、ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｎｍ２３蛋白在上述组织中的表达。结果ｐ５３阳性率为４５．８％～５６．３％,ｃ－ｅｒｂＢ－２为１８．３％～３０．２％,ｎｍ２３为７２．９％～８１．３％,在非胃癌组织中无表达;ｃ－ｅｒｂＢ－２的表达与肿瘤组织的大小、癌细胞的分化程度及Ｌａｕｒéｎ分型有关,且ｃ－ｅｒｂＢ－２表达阳性组５年生存率低于阴性组;ｎｍ２３的表达与肿瘤的生长方式、浸润深度和淋巴结转移有关。三种癌蛋白的阳性率在胃癌的胃镜活检标本和手术标本中无显著差别。结论对胃癌组织进行ｐ５３、ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｎｍ２３蛋白的检测,有助于胃癌的诊断、良恶性病变的鉴别诊断、非手术临床分期的判断和评估胃癌患者的预后。