非小细胞肺癌中KAI1基因表达及其与P53的相关性研究

背景与目的近年研究表明,KAI1表达下调与多种肿瘤的转移有关,但其与非小细胞肺癌的关系研究较少,且导致其下调的机制尚未明确。本研究从mRNA和蛋白水平探讨KAI1基因在非小细胞肺癌组织中的表达与患者临床病理特征的关系及其与突变型P53蛋白表达的关系。方法采用RTPCR和Westernblot法,检测48例肺癌患者手术切除的新鲜癌组织标本中KAI1mRNA、KAI1/CD82及突变型P53蛋白的表达,20例肺部良性疾病组织和正常肺组织作为对照。结果肺癌组和对照组中KAI1mRNA的阳性率分别为52%和90%(P<0.01),KAI1/CD82蛋白的阳性率分别为48%和85%(P<0.01),突变型P53蛋白阳性率分别为65%和5%(P<0.01)。KAI1mRNA、KAI1/CD82和突变型P53蛋白阳性率与肺癌患者临床分期、细胞分化程度和淋巴结转移有密切关系(P<0.05或P<0.01)。肺癌组织中KAI1mRNA与KAI1/CD82表达呈密切相关性(P<0.01),KAI1/CD82与突变型P53蛋白的表达亦呈显著相关性(P<0.05),KAI1mRNA与突变型P53表达无明显相关性(P>0.05)。结论KAI1基因的低表达可能与非小细胞肺癌的发生、发展和转移有关;其下调的机制可能主要发生在转录水平并与p53基因有关,二者可能作为评估肺癌患者转移潜能的指标。     

膜细胞骨架蛋白-ezrin在肾细胞癌中的表达及意义

 目的 从蛋白和转录水平观察肾癌组织中ezrin蛋白的表达及其与肾癌临床病理特征的关系。 方法 收集80例肾癌组织及40例癌旁正常肾组织,应用组织芯片和免疫组化检测ezrin蛋白的表达情况;同时取其中50例肾癌组织及40例癌旁正常肾组织行RT-PCR检测其mRNA表达。 结果 ezrin蛋白的表达定位于细胞浆和细胞膜。ezrin蛋白的阳性表达率在肾癌组织中为95%(76/80),显著高于正常肾组织的阳性表达率75%(30 /40)(χ²=10.350,P=0.002);ezrin mRNA表达阳性率在肾癌组织中为82%（41/50),显著高于正常肾组织62.5%(25/40)(χ²=4.321,P=0.038)。免疫组化评分及ezrin mRNA阳性表达率淋巴结转移组显著高于无淋巴结转移组[(9.500±2.502) vs. （7.232±3.045）, 13/14 vs. 16/36,P<0.05];腔静脉瘤栓组显著高于无腔静脉瘤栓组[(9.315±3.027） vs. （7.563±2.991）, 14/14 vs. 22/36,P<0.05]。而肾癌组织中ezrin蛋白, ezrin mRNA表达水平与患者的性别、年龄、肿瘤分期、分级、肿瘤大小及肿瘤病理类型无关(P>0.05)。 结论 肾癌组织中ezrin蛋白及mRNA水平均呈高表达,其表达的强度与肿瘤淋巴结转移,腔静脉瘤栓形成有关。ezrin可能参与了肾癌的发生、侵袭和转移,有望成为肾细胞癌生物学行为的评估指标。     

贲门腺癌中RASSF1A基因的甲基化状态及表达

 目的 研究贲门腺癌（gastric cardiac adenocarcinoma,GCA）中RASSF1A基因的甲基化状态及其蛋白表达情况。 方法 分别应用甲基化特异性PCR（MSP）、RT-PCR及免疫组织化学SP法检测贲门癌组织及相应癌旁组织的RASSF1A甲基化情况和mRNA水平及蛋白表达情况。 结果 92例贲门癌组织中有54例发生了甲基化,甲基化率为58.7%,显著高于癌旁正常组织（P<0.01）。Ⅲ期和Ⅳ期贲门癌患者中RASSF1A基因发生甲基化的比率显著高于Ⅰ期和Ⅱ期患者（P<0.05）。92例贲门癌组织中有43例RASSF1A基因蛋白表达阴性,与相应癌旁正常组织相比有显著性差异（P<0.01）。Ⅲ期和Ⅳ期贲门癌RASSF1A基因蛋白表达显著低于Ⅰ期和Ⅱ期患者（P<0.05）。发生甲基化的贲门癌组织中RASSF1A的mRNA水平的表达显著低于未发生甲基化的贲门癌组织（P<0.01）。 结论 RASSF1A基因启动子区发生甲基化导致的基因沉默可能是贲门腺癌发生的机制之一。     

肺癌组织中KAI 1/CD82和整合素α5的表达及意义

目的:研究KAI 1/CD82和整合素α5在肺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系.方法:应用免疫组织化学方法检测110例肺癌组织中KAI 1/CD82及整合素α5的表达情况.结果:KAI 1/CD82在肺癌中的表达阳性率为37.3%,α5的表达阳性率为44.5%.二者的表达水平在淋巴结转移方面差异有显著性意义(r＞0,P＜0.05).KAI 1/CD82的表达在TNM分期方面差异亦呈显著性意义(r＞0,P＜0.05).二者的表达水平与年龄、性别、病变部位、肿瘤大小、分化程度及病理类型无关(P＞0.05).结论:KAI 1/CD82和整合素α5与淋巴结转移相关,二者可作为判定肺癌浸润和转移的指标.     

血清ADAM8水平对肺癌的诊断价值

 目的 探讨血清去整合素－金属蛋白酶8（ADAM8）水平对肺癌诊断及预后的价值。 方法 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测98例肺癌患者、38例肺良性病变患者及24例健康人血清中ADAM8的表达水平。 结果 血清ADAM8水平在肺癌组明显高于肺良性病变组和健康人组（P<0.05）；肺良性病变组与健康人组比较差异无统计学意义（P>0.05）。肺癌组血清ADAM8水平与远处转移、TNM分期显著相关（P<0.05），而与病理类型无关（P>0.05）。早期肺癌患者血清ADAM8的水平高于非肿瘤患者（P<0.05）。ADAM8对肺癌诊断敏感度为86％，特异性为75％，ROC曲线下面积为0.872。 结论 血清ADAM8的水平可能成为肺癌诊断的参考指标。血清ADAM8水平的动态变化可作为肺癌转移倾向及预后的评价指标。     

乳腺癌中survivin的表达及其与Caspase-7和肿瘤病理特征的关系

 目的 研究乳腺癌组织中survivin的表达及其与Caspase-7和肿瘤病理特征的关系。 方法 免疫组织化学SP法检测survivin和Caspase-7在乳腺癌、 乳腺小叶增生、乳腺导管单纯性增生、乳腺癌旁不典型增生组织中的表达情况,并分析其与 临床病理学特征的关系。 结果 survivin和Caspase-7在乳腺癌中的阳性表达率分别为62.0%和81.7%,两者的表达呈 正相关 (r=10.22,P＜0.01)。在乳腺小叶增生、乳腺导管单纯性增生和乳腺癌旁 不典型增生组织中, survivin阳性表达率分别为0、0、6.67%,明显低于乳腺癌组(P<0.01) ;乳腺 良性病变组中Caspase-7 阳性表达均为100%,明显高于乳腺癌组(P<0.05)。 survivin与肿瘤大小和淋巴结转移有关,与年龄、组织学分级及C-erbB-2表达无关。 结论 survivin蛋白在乳腺癌中表达上调, 且与肿瘤大小和淋巴结转移有关,其可能通过抑制 Caspase-7的活性来抑制凋亡,促使肿瘤增殖。     

血管内皮生长因子受体3与PI3K/AKT在胃癌组织中的表达及意义

 目的 观察血管内皮生长因子受体3（VEGFR-3）和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B (PKB或Akt)在胃癌组织及相应癌旁组织中的表达情况。 方法 采用RT-PCR法检测36例胃癌及相应癌旁对照组织中VEGFR-3、PI3K、Akt mRNA 的表达;免疫组织化学法检测VEGFR-3、P-Akt蛋白的表达,并用图像分析方法测定平均吸光度值。 结果 1. RT-PCR 胃癌组织中VEGFR-3mRNA、PI3KmRNA、AktmRNA与癌旁对照组织的表达水平相比,差异有统计学意义(P<0.05),且VEGFR-3mRNA与PI3KmRNA、AktmRNA表达呈正相关 (P<0.05)。VEGFR-3 mRNA表达与TNM分期、浸润深度、淋巴结转移与远处转移有关(P<0.05)。2. 免疫组织化学 VEGFR-3、P-Akt蛋白在胃癌组织中的表达水平明显高于癌旁对照组织(P<0.05),且VEGFR-3、P-Akt蛋白表达水平呈正相关(P<0.05)。 结论 VEGFR-3阳性表达的胃癌患者可能更易发生淋巴结转移,VEGFR-3可作为评估患者预后的重要指标。VEGFR-3与PI3K/Akt的表达具有一定的相关性。     

胃癌患者外周血人端粒酶逆转录酶mRNA表达及其临床意义

目的研究胃癌患者外周血人端粒酶逆转录酶（hTERT） mRNA的表达,并探讨其临床意义。方法应用TaqMan 实时定量RT-PCR法检测58例患者、20名健康对照者外周血hTERT mRNA的表达,随访2年。结果胃癌患者外周血hTERT mRNA阳性率为55.17%,显著高于健康对照组（P＜0.001）;hTERT mRNA表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移和临床分期相关,其中淋巴结转移和远处转移是影响hTERT mRNA 表达的独立因素;近期疗效无效的患者hTERT mRNA 的阳性率显著高于近期疗效有效的患者（P=0.003）。化疗前hTERT mRNA阳性与阴性患者的1年生存率分别是28.13%和76.92%。结论外周血hTERT mRNA可作为检测胃癌患者微转移的分子标志,定期监测有助于评估化疗疗效和预测预后。淋巴结转移和远处转移与hTERT mRNA 表达密切相关。     

KAI1／CD82 mRNA和蛋白在鼻咽癌组织中的表达及意义

目的 探讨KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法 采用免疫组化SP法检测70例鼻咽癌和30例正常鼻咽部组织中KAI1／CD82蛋白的表达情况;逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测28例鼻咽癌和15例正常鼻咽部新鲜组织中KAI1／CD82 mRNA的表达情况。分析KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白的表达与临床病理特征之间的关系。结果 KAI1／CD82 mRNA在鼻咽癌组织中的阳性表达率为42.9％（12／28）,低于正常鼻咽部组织中的73.3％（11／15）,差异无统计学意义（P＞0.05）;KAI1／CD82蛋白在鼻咽癌组织中的阳性表达率为44.3％（31／70）,低于正常鼻咽部组织中的700％（21／30）,差异有统计学意义（P＜0.05）。KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白在鼻咽癌组织中的表达与患者的性别、年龄、病理类型、T分期均无关（P＞0.05）,而与淋巴结转移有关。KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白在无淋巴结转移组中的阳性表达率分别为85.7％和68.4％,明显高于淋巴结转移组的28.6％和35.3％,差异均有统计学意义（P＜0.05）。KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白在N1、N2、N3亚组间表达率的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 KAI1／CD82 mRNA和CD82蛋白在鼻咽癌组织中表达下调,该基因可以抑制鼻咽癌发生、发展及淋巴结转移,有望作为鼻咽癌诊断和预后判定的一种有效分子标记物。     

FEZ1蛋白和mRNA在胃癌组织中的表达及其意义

 目的 探讨肿瘤抑制基因FEZ1蛋白和mRNA在胃癌组织中的表达及其意义。 方法 采用免疫组织化学SP法及RT-PCR技术分别检测了36例胃癌及正常胃组织中FEZ1蛋白和mRNA的表达情况,分析其阳性表达与临床病理指标的关系。 结果 FEZ1蛋白在胃癌组织中的阳性表达率(55.6%)明显低于正常胃组织(86.1%),并且其在胃癌组织中的阳性表达率与分化程度密切相关(P＜0.05)。FEZ1 mRNA在胃癌组织中的表达水平为（0.677±0.120）,显著低于正常胃组织中的表达水平（0.746±0.119）,并且其在胃癌组织中的表达水平也与分化程度和淋巴结转移之间存在显著相关性（P＜0.05)。 结论 FEZ1的表达可能与胃癌的发生发展有关。     

恶性肿瘤患者外周血CD146＋T淋巴细胞的检测及其临床意义

 目的 探讨CD146^＋T淋巴细胞在肿瘤患者外周血中的变化及其临床意义。 方法 用流式细胞术检测47例健康对照组和188例肿瘤患者外周血中CD3^＋CD146^＋T淋巴细胞的数量,并观察其在肿瘤疾病中的变化。 结果 （1）与健康对照组比较,总肿瘤组、肝癌、肺癌组、食管癌、乳腺癌、胃癌、胰腺癌组的CD146^＋T/T比例显著升高,差异有统计学意义（P<0.001）。（2）与健康对照组比较,肿瘤组的外周血T细胞绝对数是降低的（P<0.05）,而CD146^＋T绝对数却是与健康对照相似（P>0.05）;（3）恶性肿瘤患者外周血CD146⁺ T比例与T细胞绝对计数负相关（n=188,r=-0.297,P<0.001）。（4）肿瘤转移组与未转移组的CD146^＋T/T比例的比较未观察到差异有统计学意义（P>0.05）。 结论 肿瘤患者外周血CD146^＋T比例增高,可能是机体抗肿瘤免疫调节的一个重要方面。     

非小细胞肺癌化疗前后外周血LUNX mRNA检测的临床意义

 目的 通过检测中晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血中循环癌细胞的Lunx mRNA表达情况,探讨全身化疗对外周血循环癌细胞的影响。 方法 NSCLC组为63例中晚期NSCLC患者,化疗方案为含铂类的两药联合方案,化疗2周期后评价客观疗效。分别在化疗前、化疗1周期后、化疗2周期后抽取外周血静脉血。肺部良性疾病患者10例和健康志愿者10例为对照组。用RT PCR法检测外周血中循环癌细胞Lunx mRNA的表达情况。 结果 NSCLC组化疗前外周血Lunx mRNA阳性表达率为73.02%,而肺部良性疾病患者和健康志愿者外周血均没有表达。外周血循环癌细胞Lunx mRNA表达情况与年龄、性别、不同病理类型、行为状态评分的关系不密切,而与临床分期密切相关（P=0.04）。化疗完成2周期的60例中CR 0例,PR 21例、SD 23例、PD16例。外周血Lunx mRNA阳性率在化疗1周期和2周期后均为38.33%,较化疗前显著降低（P=0.00）。Lunx mRNA阳性率在PR、SD、PD三个亚组分别为23.81%、26.09%、75.00%,PR组和SD组的阳性率较化疗前显著降低（P=0.01、P=0.00）,而PD组与化疗前 相比差异无统计学意义（P=0.65）。 结论 Lunx mRNA是检测NSCLC外周血微转移的良好分子标志物。患者临床分期越晚,外周血循环癌细胞阳性率越高。全身化疗可显著降低有效或稳定患者的外周血循环癌细胞检出率,对病情进展的患者则没有作用,而且这种变化在化疗初始阶段即已出现,可帮助我们提前判断化疗对病情的控制情况,从而制定更合理的治疗计划。     

卵巢浆液性肿瘤组织中hk10基因的表达

 目的 研究卵巢癌组织中人激肽释放酶10（hk10）的表达,探讨hk10在卵巢癌诊断中的意义。 方法 （1）应用RT-PCR检测10例卵巢浆液性囊腺癌组织、10例卵巢浆液性囊腺瘤组织及10例正常卵巢组织中hk10 mRNA的表达。（2）应用免疫组织化学法检测60例卵巢浆液性囊腺癌、24例卵巢浆液性囊腺瘤及24例正常卵巢组织中hk10蛋白的表达。 结果 （1）hk10 mRNA在卵巢癌组的表达明显高于正常卵巢和卵巢良性肿瘤组（P＜0.01)。而卵巢良性肿瘤组和正常卵巢组的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。（2）hk10蛋白在卵巢癌组的阳性表达率明显高于正常卵巢组和卵巢良性肿瘤组（P＜0.01);随着卵巢癌病理级别的增加hk10的蛋白表达增强（P＜0.01);Ⅱ期和Ⅳ期卵巢癌hk10蛋白阳性表达率高于Ⅰ期卵巢癌。 结论 hk10 mRNA及蛋白在卵巢癌组织中表达显著增高,在卵巢癌组织中hk10蛋白表达程度与病理级别及临床分期相关,hk10基因在卵巢癌早期诊断研究中意义重大。     

HGF和VEGFR-3在大肠癌中的表达及其在淋巴管生成和转移中的作用

目的观察肝细胞生长因子(HGF)和血管内皮生长因子受体3（VEGFR-3）在大肠癌组织中的表达,检测大肠癌组织中的微淋巴管密度(LMVD),探讨HGF和VEGFR-3 在大肠癌淋巴管生成及转移中的作用。方法应用免疫组织化学（SABC）法检测52例大肠癌、20例大肠息肉组织和20例健康对照组织中HGF和VEGFR-3的表达,并应用podoplanin标记淋巴管,检测各组组织中的淋巴管密度,结合大肠癌患者的临床病理资料,分析其相关性。结果(1)大肠癌组织中HGF和VEGFR 3均被染成棕褐色或棕黄色,阳性表达率分别为75%、67.3%,相对表达量分别为(0.36±0.07)、(0.41±0.10),均明显高于大肠息肉组[25%、30%; (0.24±0.06)、 (0.28±0.03）] 和正常大肠组织[15%、10%;(0.23±0.06)、(0.21±0.03）]的表达(P<0.01)。且微淋巴管密度(LMVD)也明显增多[(4.13±1.99) vs. (2.59±1.46) vs. (2.40±1.44),P<0.01]。(2)大肠癌组织中HGF、VEGFR 3的相对表达量,LMVD三者间呈两两正相关。39例HGF表达阳性的大肠癌,其LMVD明显大于HGF表达阴性者[(4.25±2.13) vs. (2.73±1.54),t=3.051,P=0.003];35例VEGFR-3表达阳性的大肠癌,其LMVD也明显大于VEGFR 3表达阴性者[(3.79±1.26) vs. (2.64±1.32),t=3.235,P=0.002]。(3)HGF、VEGFR 3和LMVD的表达与大肠癌患者年龄、性别以及肿瘤分化程度无关(P>0.05),但与Dukes分期(P=0.034,P=0.021,P=0.006)、淋巴管有无转移明显相关(P=0.015,P=0.012,P=0.001)。结论HGF与大肠癌的淋巴管生成及转移有一定的相关性,并可能通过VEGF-C、D/VEGFR-3 信号途径间接促进淋巴管增生,从而促进肿瘤细胞的淋巴转移。     

重组人内皮抑素联合化疗治疗晚期NSCLC近期疗效观察

目的观察抗肿瘤新药重组人血管内皮抑素注射液联合化疗治疗晚期NSCLC的有效性和安全性。方法经组织学或细胞学确诊的Ⅳ期NSCLC患者34例接受重组人血管内皮抑素加常规化疗药物联合治疗,重组人血管内皮抑素剂量为（8.3~10）mg/m²,总量15 mg,加入生理盐水500 ml中缓慢静脉滴注（3～4）小时,滴注过程中给予心电监护,第1～14天连续给药;同时联合给予NCCN指南推荐的化疗药物治疗,每3周重复。按照RECIST标准评价近期客观疗效,按照NCI CTC 3.0版的分级标准评价药物毒性。治疗1周期后评价毒性,2周期后评价疗效。结果所有34例患者均可评价疗效,其中PR9例,SD19例,PD6例,临床有效率为26.47%（9/34）,临床受益率为82.35%（28/34）,初治和复治患者的RR率为42.86%和15%（P<0.05）,CBR率分别为92.86%和75%（P<0.05）,未出现严重不良反应。结论重组人内皮抑素联合化疗治疗晚期NSCLC耐受性好,可以提高化疗的有效率,用于一线治疗时疗效提高更为显著。