术前化疗对期NSCLC基因变异的作用及其临床意义

目的　通过检测术前化疗与单一手术组织标本之间多种癌基因与抑癌基因分子变异的差异 ,以期探讨术前化疗对 期 NSCL C患者基因变异的影响及其临床意义。方法　分别采用 DNA印迹法及 PCR技术 ,检测 75例 期NSCL C组织 DNA标本中 c- m yc、c- erb B2及 EGFR多种癌基因扩增及 71例组织中抑癌基因 p15的纯合性丢失。结果　 1)术前化疗组的多种癌基因共扩增率为 35 .5 % ,而相应单一手术组为 6 3.6 % (P<0 .0 5 )。 2 ) p15的纯合性丢失率在术前化疗组为 2 3.3% ,较单一手术组的 70 .7%有显著性降低 (P<0 .0 0 1)。结论　术前化疗对 期 NSCL C患者癌细胞具有攻击及杀伤作用 ,从而不仅使癌基因的共扩增率下降 ,而且也使抑癌基因的丢失率降低。因此检测基因的变化在一定程度上有可能作为术前化疗对于 期肺癌治疗有效性的实验室预测指标     

非小细胞肺癌中3p14的杂合性丢失的研究

目的探讨非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）细胞中３ｐ１４位点等位基因的杂合性丢失（ｌｏｓｓｏｆｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙ,ＬＯＨ）与ＮＳＣＬＣ发生及发展之间的相关性。方法采用ＰＣＲ结合二核苷酸重复序列多态性方法并经ＬＯＨ┐银染法检测７４例非小细胞肺癌新鲜手术切除标本。结果７４例ＮＳＣＬＣ组织中３１例出现３ｐ１４ＬＯＨ,总丢失率为４３．２％;其中鳞癌的杂合性丢失为１４例（３８．９％,１４／３６）,腺癌为１３例（４４．８％,１３／２９）,３ｐ１４杂合性丢失在Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ期ＮＳＣＬＣ中分别为３１．６％（６／１９）,４２．９％（９／２１）,４７．４％（１６／３４）,而正常肺组织未见３ｐ１４ＬＯＨ。结论３ｐ１４杂合性丢失普遍出现于ＮＳＣＬＣ中,提示该位点可能存在着一个或多个抑癌基因,因此３ｐ１４丢失可能与肺癌的发生及发展相关     

肺癌生物学特性与灌注化疗疗效和生存关系的初步探讨

本文对１７例Ⅲ期肺癌，测定了癌细胞ＤＮＡ含量，ＤＮＡ指数（ＤＩ），细胞增殖核抗原（ＰＣＮＡ）。１７例肺癌均给支气管动脉灌注化疗。小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）和非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）分别缩小４８．８±３１．０％，３６．８±１７．１％（Ｘ±ＳＥ）。化疗后７例开胸手术６例切除肿瘤。ＳＣＬＣ和ＮＳＣＬＣ的中位生存期分别为３个月和８．５个月。在ＮＳＣＬＣ中，ＰＣＮＡ与肿瘤缩小范围呈负相关（ｒ＝－０．４７）；ＤＮＡ超四倍体百分比和ＤＩ存活时间呈正相关（（ｒ＝０．５１，ｒ＝０．５６）。ＳＣＬＣ则相关性差。结果表明，ＰＣＮＡ、ＤＡＮ和ＤＩ是ＮＳＣＬＣ判定疗效和预后的有用指标。     

mdm-2和p53基因变异与胃癌及淋巴转移生物学行为的关系

目的：分析癌基因ｍｄｍ－２和抑癌基因ｐ５３在胃癌及其转移灶中的变异及相互关系;探讨胃癌及其转移的分子机制。方法：采用ＤＣ－ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及ＤＮＡ测序技术检测３２例胃癌及其转移灶中的ｍｄｍ－２扩增和ｐ５３突变。结果：ｍｄｍ－２在转移淋巴结中的扩增频率（１２／２１,５７．１％）高于胃原发癌灶（１２／３２,３７．５％）,３例淋巴微转移灶中出现ｍｄｍ－２的扩增。在７例肠型胃癌的原发癌或转移灶中同     

ｄｄＰＣＲ与 ＡＲＭＳ-ＰＣＲ检 测 ＮＳＣＬＣ患者ＥＧＦＲ基因Ｔ７９０Ｍ突变的比较研究

目的：通过对比微滴式数字 ＰＣＲ（ｄｒｏｐｌｅｔｄｉｇｉｔａｌＰＣＲ,ｄｄＰＣＲ）和突变扩增阻滞系统 ＰＣＲ（ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｒｅｆｒａｃ ｔｏｒｙｍｕｔａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍＰＣＲ,ＡＲＭＳ ＰＣＲ）检测非小细胞肺癌（ｎｏｎ ｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ,ＮＳＣＬＣ）表皮生长因子受体（ｅｐｉ ｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＥＧＦＲ）基因 Ｔ７９０Ｍ突变的检测效能,综合分析两种检测方法的优势及适用范围。方法： 回顾性收集 １１５例 ＮＳＣＬＣ患者的标本,同时使用 ｄｄＰＣＲ和 ＡＲＭＳ ＰＣＲ两种方法检测 ＥＧＦＲ基因 Ｔ７９０Ｍ突变状态, 比较两种方法的检测结果,并分析不同样本类型对 ｄｄＰＣＲ检测结果的影响。结果：ｄｄＰＣＲ检测 Ｔ７９０Ｍ阳性率为 ６５．２％,ＡＲＭＳ ＰＣＲ阳性率为 ２７．８％,ｄｄＰＣＲ检测敏感性显著高于 ＡＲＭＳ ＰＣＲ（Ｐ＜０．０５）,两种方法检测一致率为 ６２．６％。ｄｄＰＣＲ＋ＡＲＭＳ－样本的 Ｔ７９０Ｍ平均阳性微滴数和平均突变丰度（１１,０．３５％）均显著低于 ｄｄＰＣＲ＋ＡＲＭＳ ＋样本（６３２．３,１７．７％）。ｄｄＰＣＲ检测基因组 ＤＮＡ和外周血游离 ＤＮＡ阳性率分别为 ５５．９％和 ７８．７％,不同样本类 型 Ｔ７９０Ｍ突变阳性微滴数和突变丰度无显著差别。结论：ｄｄＰＣＲ和 ＡＲＭＳ ＰＣＲ均可用于 ＮＳＣＬＣ患者 ＥＧＦＲ基因 Ｔ７９０Ｍ突变检测,二者具有良好的一致性,ｄｄＰＣＲ具有更高的灵敏性,在检测突变丰度较低的样本方面具有优势。     

非小细胞肺癌p16基因突变的初步研究

为了解非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）ｐ１６基因突变的情况,本研究应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术检测了２４例ＮＳＣＬＣ肿瘤组织中ｐ１６基因外显子２的突变情况,现将结果报告如下。１　材料与方法２４例ＮＳＣＬＣ肿瘤组织及同一病例非肿瘤肺组织均为住院病例手术切除标本,并经病理证实。按常规方法提取ＤＮＡ。ＰＣＲ反应在ＰＥ９６００热循环仪中进行,扩增ｐ１６基因第２外显子,引物序列：　　ＰＳ１：５′－ＡＣＡＡＧＣＴＴＣＣＣＴＴＣＣＧＴＣＡＴＧＣ－３′ＰＳ２：５′－ＴＣＴＧＡＧＣＴＴＴＧＧＡＡＧＣＴＣＴＣＡＧ－３′循…     

非小细胞肺癌的c－erbB－2基因扩增及17P13丢失研究

本文采用ＤＮＡ印迹及ＲＦＬＰ方法分别检测非小细胞肺癌组织中ｃ－ｅｒｂＢ－２基因的扩增以及１７Ｐ１３．３基因的丢失，以期研究人体肺癌的发生与原癌基因活化及抑癌基因失活之间的相关性。经检测表明２０例肺癌组织中出现ｃ－ｅｒｂＢ－２扩增拷贝数大于正常组织２－５倍以上者为５例，扩增阳性率为２５％，而１８例肺癌组织中出现１７Ｐ１３．３基因丢失或部分丢失为７例，阳性率为３８．８％，上述结果提示中国人肺癌的发生与某些原癌基因的活化以及抑癌基因的失活密切相关。     

非小细胞肺癌ＳＦＲＰ１基因甲基化的研究

目的　检测ＳＦＲＰ１基因在非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）组织和血浆中的甲基化状态,分析其临床意义。方法　留取７８例ＮＳＣＬＣ患者术中癌组织、正常肺组织及术前血浆标本,２５例肺部良性病变组织及５０例肺部良性病变患者或健康志愿者血浆标本为对照,甲基化特异性聚合酶链反应（ＭＳＰ）检测ＳＦＲＰ１基因启动子区甲基化情况,并分析与临床病理特征之间的相关性。结果　７８例ＮＳＣＬＣ组织中,ＳＦＲＰ１基因启动子甲基化比例为３２.１％,高于正常组织的７.７％和２５例肺部良性病变组织的０（Ｐ＜０.０１）;ＳＦＲＰ１基因启动子甲基化与患者淋巴结转移相关（Ｐ＝０.０３９）。ＮＳＣＬＣ术前血浆ＤＮＡ中ＳＦＲＰ１甲基化比例为２８.２％,高于对照组的４.０％（Ｐ＜０.０１）,且血浆ＤＮＡ甲基化状况与组织中具有良好的一致性。结论　血浆ＤＮＡ中ＳＦＲＰ１甲基化检测可能对ＮＳＣＬＣ早期诊断有益。     

食管癌组织多种肿瘤抑制基因微卫星多态位点的杂合丢失和不稳定

目的：研究ｐ５３,ｐ１６,Ｒｂ,ＤＣＣ,ＡＰＣ等多种已知抑癌基因在食管癌组织中的缺失及与临床病理的关系。方法：采用ＰＣＲ银染技术,检测高发区３６例配对的食管癌标本１４个微卫星ＤＮＡ多态位点的杂合丢失和不稳定性。结果：分别与ｐ５３,ｐ１６及Ｒｂ连锁的Ｄ１７Ｓ２６１,Ｄ９２Ｓ１６２,Ｄ９２Ｓ１７１,ＩＦＮＡ和Ｄ１３Ｓ１７０均有高频率的杂合丢失;两个以上的位点异常者占８６％,ｐＴＮＭⅢ期患者微卫星ＤＮＡ     

滤泡性淋巴瘤与反应性淋巴滤泡增生的免疫组化及DNA图像分析研究

目的：观察滤泡性淋巴瘤（ＦＬ）与反应性淋巴滤泡增生（ＲＦＨ）中滤泡生发中心细胞（ＧＣＣｓ）核ＤＮＡ含量、倍体情况以及ｂｃｌ－２癌基因蛋白、免球蛋白轻链（ＩｇＬ）表达情况，探讨它们对于二都鉴别诊断的意义。方法：对２１例ＦＬ及２１例ＲＦＨ进行ｂｃｌ－２蛋白、Ｋｆｐｐａ、Ｌａｍｂｄａ轻链蛋白免疫组化检测及ＤＮＡ图像细胞分析。结果：６１．９％ＦＬ中ＧＣＣｓ有ｂｃｌ－２表达而ＲＦＨ的ＧＣＣｓ均为ｂｃｌ－２阴     

原发性非小细胞肺癌（NSCLC）中MTS2／p15基因丢失的研究

目的探讨ＭＴＳ２／ｐ１５基因缺失与人体非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）的发生及发展的相关性。方法采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术，分别检测１６０例不同病理类型及分期的肿瘤组织，１０例非癌性肺组织及２例胎肺组织中ｐ１５基因的纯合性丢失。结果１６０例ＮＳＣＬＣ组织中ｐ１５基因的丢失率以腺癌为最高６４．７％，鳞癌其次４３．９％，混合型鳞腺癌为最低３７．０％，１０例非癌性肺组织及２例胎肺组织均未见有ｐ１５基因的丢失。经ＴＮＭ分期分析表明，Ⅰ期ｐ１５基因丢失率为３４．６％，Ⅱ期为４７．４％，Ⅲ期为６１．４％，Ⅲ期的ｐ１５丢失率明显高于Ⅰ期（Ｐ＜０．００５）。结论ＭＴＳ２／ｐ１５基因缺失除与ＮＳＣＬＣ的发生相关外，还可能涉及到患者病程的进展。     

非小细胞肺癌的c—erbB—2基因扩增及17P13丢失研究

本文采用ＤＮＡ印迹及ＲＦＬＰ方法分别检测非小细胞肺癌细胞中ｃ－ｅｒｂＢ－２基因的产以及１７Ｐ１３．３基因的丢失，以期研究人体肺癌的发生与原癌基因活化及抑癌基因失活之间的相关性，经检测表明２０便肺癌组织中出现ｃ－ｅｒｂＢ－２扩增拷贝数大于正常组织２－５倍以上者为５例，扩增阳性率为２５％，而１８例肺癌组织中出现１７Ｐ１３．３基因丢失或部分丢失为７例，阳性率为３８．８％，上述提果提示中国人肺癌的发生与某     

ＸＲＣＣ１、ＤＮＡ ＰＫｃｓ和ＰＣＮＡ在非小细胞肺癌中的表达及其与放疗疗效的关系研究

目的　探讨Ｘ线修复交叉互补基因（ＸＲＣＣ１）、ＤＮＡ ＰＫｃｓ和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）中的表达及其与放疗疗效的相关性,为预测ＮＳＣＬＣ放疗的敏感性提供理论依据。方法　６２例经病理活检证实的ＮＳＣＬＣ患者行三维适形放射治疗,放疗前后胸部增强ＣＴ扫描,按照ＷＨＯ实体瘤近期疗效标准进行评价;用免疫组化染色法检测放疗前ＮＳＣＬＣ组织中ＸＲＣＣ１、ＤＮＡ ＰＫｃｓ和ＰＣＮＡ蛋白的表达情况;将放疗的近期疗效与３种蛋白免疫组化结果进行统计分析。结果　按ＸＲＣＣ１蛋白（－）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）分组经放疗后有效率（ＣＲ＋ＰＲ）分别为７０.０％、６６.７％、６４.０％、４０.０％,组间比较差异有统计学意义（P＜０.０５）;按ＤＮＡ-ＰＫｃｓ蛋白（－）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）分组经放疗后有效率分别为８５.７％、７６.５％、５５.６％、２７.３％,组间比较差异有统计学意义（P＜０.０５）;按ＰＣＮＡ蛋白（－）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）分组经放疗后有效率分别为０、３８.５％、６０％、７０.８％,组间比较差异有统计学意义（Ｐ＜０.０５）。结论　ＸＲＣＣ１、ＤＮＡ-ＰＫｃｓ蛋白表达与ＮＳＣＬＣ三维适形放射治疗的近期疗效呈负相关,ＰＣＮＡ蛋白表达与其呈正相关,检测这３种蛋白的表达在一定程度上可作为预测ＮＳＣＬＣ三维适形放射治疗的近期疗效指标。     

差别PCR技术及检测卵巢癌C－erb－B2癌基因扩增的研究

癌基因的扩增见于多种人类肿瘤，有预后价值。本文报告了应用差别（Ｄ－）ＰＣＲ技术，检测人卵巢癌组织Ｃ－ｅｒｂ－Ｂ２基因拷贝数的改变。在这一技术中，靶基因（Ｃ－ｅｒｂ－Ｂ２基因）和单拷贝参照基因（ＩＦＮＧ），在同一反应管中进行扩增，靶基因拷贝数为靶基因和参照基因扩增产物带晁密度的比值。在本组１１例卵巢癌标本中，有１例存在Ｃ－ｅｒｂ－Ｂ２癌基因低拷贝数的扩增，并对１０份送检的卵巢肿瘤组织和同源正常组织同时作印迹转变分析，和Ｄ－ＰＣＲ检测结果一样，未发现有Ｃ－ｅｒｂ－Ｂ２癌基因的扩增。Ｄ－ＰＣＲ检测癌基因的扩增快速、简便，无需应用放射性同位素，具有较好的应用价值。     

多药耐药相关蛋白基因在非小细胞肺癌表达的临床意义

目的 探索多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）在非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）的表达,以及与病理类型、病期及预后的关系。方法 以原位杂交法检测冰冻ＮＳＣＬＣ组织。结果 全组５８例ＮＳＣＬＣ、ＭＲＰＭＲＮＡ总表达率为７４．１％,鳞癌为７２．０％,腺癌为７３．３％。ＭＲＰ的表达与病理类型、ＴＮＭ发期及分化程度无关。４７例接受化疗的ＮＳＣＬＣ中,３５例ＭＲＰ表达者生存率明显低于ＭＲＰ表达者,中位生存期分别为８．７个月     

局部晚期非小细胞肺癌βⅢ -ｔｕｂｕｌｉｎ和Ｓｔａｔｈｍｉｎ的表达及与紫杉醇耐药性关系的研究

目的：探讨局部晚期非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）βⅢ-ｔｕｂｕｌｉｎ和Ｓｔａｔｈｍｉｎ表达与紫杉醇化疗耐药性关系。方法：回顾性分析８４例接受紫杉醇化疗的局部晚期ＮＳＣＬＣ患者的临床病理资料。免疫组织化学法检测肿瘤标本βⅢ-ｔｕｂｕｌｉｎ和Ｓｔａｔh-ｍｉｎ蛋白的表达,并对疗效进行分析。结果：βⅢ-ｔｕｂｕｌｉｎ阳性表达率为４８.８１％（４１／８４）,Ｓｔａｔｈｍｉｎ阳性表达率为５１.１９％（４３／８４）,均与性别、年龄及组织类型无关。化疗有效率（ＣＲ＋ＰＲ）为４１.６７％,βⅢ-ｔｕｂｕｌｉｎ高表达的患者有效率低（２４.３９％）,进展率高（１３.８９％）;βⅢ-ｔｕｂｕｌｉｎ低表达患者有效率高（５８.１４％）,进展率低（０）,差异均有显著性（Ｐ＜０.０１）。Ｓｔａｔｈｍｉｎ（＋）组的有效率为２７.９１％,低于Ｓｔａｔｈｍｉｎ（－）组的５６.１０％,而其进展率为１１.６３％,高于Ｓｔａｔｈｍｉｎ（－）组０,差异均有显著性（Ｐ＜０.０５）。联合检测显示：βⅢ-ｔｕｂｕｌｉｎ（＋）且Ｓｔａｔｈｍｉｎ（＋）组有效率为２１.８８％,βⅢ ｔｕｂｕｌｉｎ（－）且Ｓｔａｔｈｍｉｎ（－）组有效率为６２.５０％,两者差异显著（Ｐ＜０.０１）。结论：βⅢ-ｔｕｂｕｌｉｎ和Ｓｔａｔｈｍｉｎ高表达的局部晚期ＮＳＣＬＣ患者对紫杉醇化疗耐药。     

非小细胞肺癌中P—gp,p53,bcl—2蛋白表达及其相关性研究

目的 研究非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）中ｐ５３、ｂｃｌ－２蛋白以及耐多药基因ＭＤＲ１产物Ｐ－糖蛋白（Ｐ－ｇｐ）的表达及相互关系,探讨它们在ＮＳＣＬＣ发展、预后及耐药中的作用。方法 采用免疫组化Ｓ－Ｐ法,对６０例ＮＳＣＬＣ及其癌旁正常肺组织中ｐ５３、ｂｃｌ－２蛋白和Ｐ－ｇｐ进行检测。结果 ｐ５３、ｂｃｌ－２蛋白及Ｐｇｐ在ＮＳＣＬＣ中表达明显高于癌旁正常组织（Ｐ〈０．０１）。两者都与患者预后显著负相关（     

伴行放化疗治疗Ⅲ期非小细胞肺癌的研究进展

本文综述了伴行放化疗（ｃｏｎｃｏｍｉｔａｎｔ ｒａｄｉｏｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，ＣＲＣＴ）治疗Ⅲ期非癌（ＮＳＣＬＣ）的研究现状。不能手术的Ⅲａ、Ⅲｂ期ＮＳＣ：Ｃ病人治疗后，主要死亡原因为局部控制困难和远处转移。改变放疗和化疗的结合方式及提高放疗剂量是治疗的关键。放疗同时应用化疗可以改善肿瘤的局部控制率，延长病人生存期，是值得进一步研究的治疗方式。     

表皮生长因子受体在肺癌组织中的表达

目的 探讨肺癌组织中表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达水平及其临床意义。方法 采用免疫组化ＡＢＣ法检测３９例肺良性疾病、９５例原发性肺癌及癌旁肺组织中ＥＧＦＲ的表达水平。结果 非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）组织ＥＧＦＲ表达阳性率为８７．９％（８０／９１），肺良性病变肺组织为１０．３％（４／３９），４例小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）无ＥＧＦＲ表达。在ＮＳＣＬＣ中，距癌组织３ｃｍ以内癌旁肺组织ＥＧＦＲ阳性率为６３     

脑胶质瘤c─myc癌基因重排与MDR1基因的变化

作者对２２例脑胶质瘤Ｃ─ｍｙｃ癌基因和ＭＤＲ１基因Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析发现有５例胶质瘤Ｃ－ｍｙｃ癌基因发生基因重排，其中２例伴有重排序列的扩增。这些标本同时出现ＭＤＲ１基因限制片段拷贝量的倍增（ＥｃｏＲＩ，６．６ｋｂ），其倍增是脑组织２～２８倍。这一分子事件不仅反映Ｃ─ｍｙｃ癌基因与脑胶质瘤的恶性程度和预后关系密切，而且也与胶质瘤的耐药性有关。