miR-19 在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义

目的：探讨肝细胞肝癌（HCC）组织中miR-19的表达情况及其临床意义。 方法：用qRT-PCR的方法检测51例HCC组织及其癌旁组织以及10例正常肝组织中miR-19的表达;分析了miR-19表达与HCC患者临床病理因素及预后的关系。 结果：miR-19的表达量在正常肝组织、癌旁组织、HCC组织中依次增高,差异均有统计学意义（均P<0.05）。miR-19表达与HCC患者的肿瘤大小（P=0.029）、转移（P=0.011）、静脉侵犯（P=0.002）及AJCC分期（P=0.008）有关,而与年龄、性别、肿瘤分化、卫星灶、肿瘤数量及AFP无相关（均P>0.05）。miR-19高表达的患者5年生存率明显低于低表达的患者（P<0.05）。miR-19高表达以及转移、静脉侵犯均为影响HCC患者生存的独立风险因素（均P<0.05）。 结论：miR-19在HCC组织中表达上调,并可能与HCC的增殖、转移有关;miR-19高表达提示预后不良。     

牛磺酸上调基因1和微小RNA-145在胃癌中的表达关系研究

目的检测牛磺酸上调基因1（TUG1）和微小RNA-145（miR-145）在胃癌中的表达情况,探讨两者在胃癌发病中的作用及关系。 方法选取2016年2月至2017年2月于海南省肿瘤医院行根治性胃切除术的局部进展期胃癌患者110例,采用实时荧光定量-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测胃癌组织和癌旁正常组织中TUG1、miR-145的相对表达量,分析TUG1、miR-145表达相关性及其与临床病理资料、术后生存的关系。 结果与正常组织相比,胃癌组织中TUG1的表达明显升高（P<0.05）,miR-145的表达明显降低（P<0.05）。胃癌组织中TUG1、miR-145的相对表达量呈明显负相关关系（P<0.05）。TUG1的表达水平与胃癌患者的淋巴结转移、肿瘤分化程度、临床分期有关（P<0.05）,miR-145的表达水平与胃癌患者的淋巴结转移、临床分期有关（P<0.05）。TUG1低表达的胃癌患者总生存率明显高于TUG1高表达者（P=0.010）,miR-145高表达胃癌患者总生存率明显高于miR-145低表达者（P<0.001）。 结论在胃癌组织中,TUG1明显高表达,miR-145明显低表达,且两者呈负相关关系,具有判断胃癌预后的价值。     

非编码RNAs在去势抵抗性前列腺癌中的研究进展

非编码RNAs(ncRNAs)是一大类不编码蛋白的RNA分子,它们从多层面调控基因的表达,影响机体细胞的代谢、增殖、分化、凋亡和肿瘤的发生、发展。部分发挥癌基因作用的ncRNAs如miR-19a、miR-125b、miR-616、miR-7、miR-221、MALAT-1、PRNCR1等在去势抵抗性前列腺癌(CRPC)组织或细胞系中表达上调,促进CRPC的发生、发展;而另一部分发挥抑癌基因作用可抑制或延缓CRPC发生、发展的ncRNAs如miR-185、miR-342、miR-15、miR-16、miR-146等却表达下调;此外,部分ncRNAs如miR-7、miR-19a、miR-125b、miR-221、MALAT-1等在血清或组织中差异表达可作为CRPC早期诊断及预后判断的生物学标志物。本文就这些ncRNAs在CRPC发生、发展、诊断及预后中的作用及研究进展进行了综述。     

STAT3及其下游miR-92a/KLF4/PI3K/Akt轴在先天性巨结肠病变组织中的表达

背景与目的：信号传导与转录激活因子（STAT）蛋白家族在多种遗传性疾病中异常表达,然而STAT3在先天性巨结肠（HD）进程中的表达及意义如何？为此,本研究探讨STAT3及其下游miR-92a/KLF4/PI3K/Akt信号轴在HD病变组织中的表达,以期为临床该病的治疗提供新靶点。 方法：采用S-P免疫组化染色法观察68例HD患儿病变及正常结肠组织内STAT3的表达及组织定位。分别采用qRT-PCR和Western blot法对比分析患者病变及正常结肠组织样本中STAT3、miR-92a和KLF4/PI3K/Akt信号通路标志分子总RNA和蛋白表达变化。 结果：免疫组化染色法结果显示HD患者病变结肠组织中STAT3的阳性表达明显高于正常组织（P<0.05）。qRT-PCR结果表明,HD病变结肠组织中STAT3、miR-92a、KLF4、PI3K、Akt的RNA表达较正常组织明显上调（均P<0.05）及蛋白表达较正常组织明显上调（均P<0.05）;Western blot结果显示,HD病变结肠组织中STAT3、KLF4、p-PI3K和p-Akt蛋白表达较正常组织均明显上调（均P<0.05）,而PI3K和Akt表达量两者无统计学差异（均P>0.05）。此外,相关性分析结果表明,HD患者病变结肠组织中STAT3和miR-92a的表达呈明显正相关（r=0.992,P=0.003）。 结论：STAT3在HD病变组织中表达升高,并可能通过上调miR-92a的转录水平,介导KLF4/PI3K/Akt信号通路活化,从而诱导HD的发生发展,靶向STAT3及miR-92a/KLF4/PI3K/Akt信号轴,有望为临床HD的防治提供新的思路。

     

miR-150 和miR-134 在结直肠癌及腺瘤中的表达

目的：探讨miR-150和miR-134在结直肠癌与结直肠腺瘤中的表达及意义。 方法：采用实时定量荧光PCR（qRT-PCR）检测40例结直肠癌组织及其癌旁正常组织与29例结直肠腺瘤组织中miR-150和miR-134表达,并分析两者与结直肠癌临床病理因素之间的关系。 结果：与癌旁正常组织比较,miR-150在腺瘤组织中表达明显升高,而在癌组织中表达明显降低（均P<0.05）;miR-134在腺瘤组织中表达明显降低（P<0.05）,但在癌组织中表达差异无统计学意义（P>0.05）;miR-150表达水平与结直肠癌的组织学类型及分化程度有关（P=0.033,P=0.041）;miR-134表达水平与结直肠癌的各项临床病理因素均无明显关系（均P>0.05）。 结论：miR-150在结直肠癌中表达下调,提示其可能有潜在的抑癌作用,miR-150和miR-134在结直肠腺瘤中的表达均发生异常,提示两者均可能与结直肠腺瘤的发生密切相关。     

miR-143和miR-145在胃间质瘤组织中的表达及其意义

目的 探讨miR-143和miR-145在胃间质瘤发生发展中的作用.方法 采用茎环即时RT-PCR方法检测21例胃间质瘤及其正常胃组织中miR-143和miR-145的表达,分析其与临床病理因素的关系.结果 本组胃间质瘤组织中miR-145表达显著高于正常胃组织(P＜0.01),且核分裂数≥5/50 HPF病例的miR-145表达显著低于核分裂数＜5/50 HPF病例(P=0.02),巨大肿瘤(直径＞10 cm)的miR-145表达显著低于大肿瘤(5～10 cm)病例及小肿瘤(2～5 cm)病例(P=0.048),Fletcher分级高危病例的miR-145表达显著低于中危及低危分级病例(P=0.048),低危组与中、高危组miR-145表达相比差异有统计学意义(P=0.01).胃间质瘤组织中miR-143表达与正常胃组织相比差异无统计学意义(P=0.06). 结论 miR-145在胃间质瘤组织中表达上调,且与肿瘤大小、核分裂象及Fletcher分级等密切相关,提示其在胃间质瘤的发生发展过程中发挥重要作用.     

长链非编码RNA LINC00313与miR-342-3p/膜联蛋白A2轴在肝细胞癌细胞中的作用与机制

背景与目的 肝细胞癌（HCC）是造成癌症相关性死亡的常见原因之一，研究表明长链非编码RNA（lncRNA）调控微小RNA（miRNA）的表达，进而通过抑制靶mRNA翻译或促进mRNA降解来参与肿瘤发生及进展过程。LINC00313作为一种具有致癌活性的lncRNA参与肿瘤发生及进展过程；膜联蛋白A2（ANXA2）在包括HCC的多种恶性肿瘤中表达上调，促进恶性表型的发生，并可能受上游miR-342-3p的调控。因此，本研究探讨LINC00313、miR-342-3p、ANXA2在HCC细胞中的表达及其相互关系。方法 用qRT-PCR与Western blot检测人肝实质细胞及HCC细胞系（Li-7、HuH-7、Hep3B2.1-7）中LINC00313、miR-342-3p及ANXA2表达。将体外培养的Li-7细胞分为空白对照组（无处理）、LINC00313 siRNA组（转染LINC00313 siRNA）、miR-342-3p模拟物组（转染miR-342-3p模拟物）、共转染阴性对照组（转染阴性siRNA序列与阴性miRNA序列）、共转染组（转染LINC00313 siRNA及miR-342-3p抑制物），用qRT-PCR与Western blot检测各组细胞LINC00313、miR-342-3p及ANXA2表达；MTT实验及平板集落形成实验检测各组细胞增殖；进行TUNEL染色检测各组细胞凋亡；Transwell侵袭及Western blot分别检测各组细胞侵袭数目及上皮-间充质转化（EMT）相关蛋白波形蛋白（vimentin）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达；免疫荧光染色检测各组细胞Bcl-2关联X蛋白（Bax）/B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）；双荧光素酶报告实验分析Li-7细胞中LINC00313对miR-342-3p、miR-342-3p对ANXA2的靶向调控。建立皮下裸鼠异种移植瘤模型，验证LINC00313沉默对Li-7细胞体内生长的影响。结果 与人肝实质细胞比较，Li-7、HuH-7、Hep3B2.1-7细胞的LINC00313、ANXA2 mRNA及蛋白表达均明显升高，而miR-342-3p表达均明显降低（均P<0.05）。与对照组比较，LINC00313 siRNA组、miR-342-3p模拟物组细胞ANXA2 mRNA及蛋白表达、增殖率、集落生成率、侵袭细胞数目、vimentin蛋白表达均明显降低（P<0.05），miR-342-3p表达、凋亡率、E-cadherin蛋白表达、Bax/Bcl-2比值均明显升高（均P<0.05）；与LINC00313 siRNA组比较，共转染组细胞ANXA2 mRNA及蛋白表达、增殖率、集落生成率、侵袭细胞数目、vimentin蛋白表达均明显升高，而miR-342-3p表达、凋亡率、E-cadherin蛋白表达、Bax/Bcl-2比值均明显降低（均P<0.05）。Li-7细胞中，LINC00313可靶向下调miR-342-3p表达，miR-342-3p可靶向下调其ANXA2表达（均P<0.05）。体内实验结果显示，与无处理的Li-7细胞移植瘤比较，LINC00313敲低的Li-7细胞移植瘤的体积与质量均明显降低，肿瘤组织中LINC00313、ANXA2 mRNA及蛋白表达均明显降低，而miR-342-3p表达明显升高（均P<0.05）。结论 LINC00313在HCC细胞中的表达上调，LINC00313可能通过抑制miR-342-3p而增加后者靶基因ANXA2的表达，进而促进HCC细胞的恶性表型。     

长链非编码RNA牛磺酸调节基因1和miR-132的表达与乳腺癌预后的关系

目的探讨乳腺癌中长链非编码RNA（LncRNA）牛磺酸调节基因（TUG）1和miR-132表达情况及两者表达水平与患者预后的关系。 方法收集2014年1月至2017年11月如皋市人民医院90例手术切除的乳腺癌组织和相应癌旁组织,采用qRT-PCR法检测TUG1和miR-132表达水平,使用Kaplan-Meier法计算TUG1和miR-132表达对乳腺癌患者生存率的影响,采用Cox回归模型分析乳腺癌预后的影响因素。 结果与癌旁组织相比,乳腺癌组织中TUG1表达水平明显升高（t=65.781,P<0.001）,miR-132表达水平显著下降（t=33.089,P<0.001）,均与雌激素受体（ER）、人表皮生长因子受体2（HER-2）、FIGO分期、分化程度和淋巴结转移相关（均P<0.05）。乳腺癌组织中TUG1和miR-132表达之间呈负相关关系（r=-0.767,P=0.025）。TUG1高表达者3年生存率为80.77%（42/52）,显著低于低表达者97.37%（37/38）（χ²=5.639,P=0.018）;miR-132低表达者3年生存率为81.25%（39/48）,显著低于高表达者95.24%（40/42）（χ²=4.085,P=0.043）。Cox回归分析发现,ER、HER-2、FIGO分期、分化程度、淋巴结转移、TUG1和miR-132均是乳腺癌患者预后的影响因素（均P<0.05）。 结论在乳腺癌组织中,TUG1表达水平显著上调,miR-132表达水平显著下调,且两者呈负相关,都是影响预后的独立因素。TUG1可能通过调控miR-132的表达发挥促癌基因的作用,有望成为乳腺癌独立预后标志物和治疗新靶点。     

miR-18a-3p在肝癌中的表达及其调控ADCY1表达对肝癌细胞侵袭及增殖的影响

背景与目的 研究表明多种microRNA（miRNA）可能在肝癌的发生发展中发挥重要作用,其作用机制仍值得进一步研究和探讨。因此,本研究从已报道的肝癌差异表达miRNA中进一步筛选关键miRNA,并验证和探讨其作用机制。方法 从已发表的研究中筛选出肝癌组织及肝癌患者血清/血浆中与正常肝组织及正常血清/血浆中共同的差异表达miRNA;用qRT-PCR在正常肝细胞与肝癌细胞中对筛选出的目标miRNA表达情况进行验证;用过表达和抑制的方法观察目标miRNA对肝癌细胞侵袭能力（Transwell实验）与增殖能力（MTT实验）的影响,以及在30例临床标本中检测目标miRNA的表达并通过KM plotter网站分析其对肝癌患者生存的影响;通过miRDB和GEPIA数据库预测和分析目标miRNA的靶基因,并用逆转实验和双荧光素酶报告实验进一步验证。结果 在肝癌组织（vs.正常肝组织）及肝癌患者血清/血浆（vs.正常人血清/血浆）中共同高表达的miRNA有4个（miR-18a-3p、miR-221-3p、miR-222-3p、miR-224-3p）,共同低表达的miRNA有2个（miR-26a-3p、miR-125b-3p）。qRT-PCR实验证实,与正常肝细胞比较,miR-18a在肝癌细胞中高表达,miR-26a在肝癌细胞中低表达（均P<0.05）。过表达/抑制miR-18a-3p表达能促进/降低肝癌细胞的侵袭及生长能力（均P<0.05）,而过表达/抑制miR-26a-3p对肝癌细胞的侵袭及生长能力影响无不法确定。分析结果显示,ADCY1是miR-18a-3p的靶基因,过表达ADCY1能部分逆转miR-18a-3p对肝癌细胞的上述作用,同时,表达上调的miR-18a-3p能通过结合到ADCY1 mRNA 3''UTR抑制ADCY1的表达。结论 miR-18a-3p可能在肝癌的发生发展中起了关键作用,其在肝癌中表达上调,并能通过抑制下游靶基因ADCY1的表达增强进肝癌细胞的侵袭和增殖能力。     

miR-543靶向TCF7L2调控BMSCs成脂分化的实验研究

目的 探讨微小RNA-543（miR-543）靶向调控转录因子7类似物2（TCF7L2）对大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）成脂分化的影响。方法 分离并鉴定大鼠BMSCs,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测BMSCs成脂分化诱导过程中miR-543的表达变化;体外培养BMSCs细胞,对BMSCs细胞进行干预,过表达miR-543、抑制TCF7L2表达或同时过表达miR-543与TCF7L2,使用成脂分化诱导培养基培养,油红O染色检测BMSCs成脂分化;免疫印迹法检测BMSCs细胞TCF7L2、脂肪细胞蛋白2（aP2）、CCAAT/增强子结合蛋白α（C/EBPα）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-543与TCF7L2的靶向关系。结果 成功分离大鼠BMSCs;BMSCs成脂分化诱导处理1、2、3、4、5 d后miR-543表达水平降低;双荧光素酶报告基因实验证实miR-543与TCF7L2存在靶向关系;过表达miR-543或抑制TCF7L2表达,BMSCs油红O染色后OD值、aP2、PPAR-γ、C/EBPα蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）;过表达TCF7L2可部分逆转过表达miR-543对BMSCs细胞成脂分化的抑制作用（P＜0.05）。结论 miR-543在大鼠BMSCs细胞成脂分化过程中下调表达,过表达miR-543可通过靶向抑制TCF7L2表达而抑制BMSCs细胞成脂分化。     

环状RNA-7靶向微小RNA-7促进食管鳞癌细胞放疗抵抗的实验研究

目的:探讨环状RNA-7(circularRNA, ciRS)-7在食管鳞癌细胞放疗抵抗中的作用及生物学机制。方法:采用慢病毒转染食管鳞癌细胞系KYSE410和KYSE510构建ciRS-7敲降细胞系(分为正常对照组和sh#1组、sh#2组)。不同剂量射线(2 Gy组、4 Gy组、8 Gy组)照射上述细胞,收集各组细胞...     

miR-7-5p抑制胰腺癌细胞放疗后加速再增殖的体外实验研究

目的 研究放疗后濒死胰腺癌细胞（PANC-1）释放的微小RNA-7-5p（miR-7-5p）对存活PANC-1加速再增殖效应的相关机制。方法 通过慢病毒感染,建立荧光素酶标记的PANC-1-LUC胰腺癌细胞放疗后加速再增殖模型。通过RT-qPCR检测miRNA-7-5p的表达水平,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,双荧光素酶法验证miR-7-5p靶基因,Western blotting检测γH2A.X与DDIT4 蛋白的表达情况。结果 miR-7-5p在受辐照PANC-1（10 Gy）濒死细胞上清中表达下调,受辐照PANC-1细胞与存活PANC-1-LUC细胞共培养,可促进放疗后存活PANC-1-LUC细胞加速再增殖及其DNA损伤修复,而上调miR-7-5p可抑制放疗后胰腺癌细胞PANC-1-LUC再增殖。进一步研究表明,miR-7-5p在胰腺癌细胞中通过靶向下调DDIT4通路促进凋亡信号。结论 受辐照胰腺癌细胞可通过下调miR-7-5p促进DDIT4表达,从而抑制细胞凋亡及调控细胞周期再分布来加速再增殖,表明提高miR-7-5p的水平能够提高胰腺癌细胞的放疗敏感性,这将为改善胰腺癌放疗抵抗提供了一种新的思路和方法。     

Role and mechanism of Circ-PDE7B in the formation of keloid

The excessive proliferation of keloid fibroblasts is one of the important reasons leading to the formation of keloids. Circular RNA (circRNA) is an important regulator that regulates the biological functions of cells. However, the role and mechanism of circ-PDE7B in keloid formation have not been studied yet. QRT-PCR was used to detect the circ-PDE7B, miR-331-3p and cyclin-dependent kinase 6 (CDK6) expression. The biological functions of keloid fibroblasts were determined by MTT assay, flow cytometry, transwell assay and wound healing assay. Western blot analysis was used to measure the protein levels of extracellular matrix (ECM) markers and CDK6. The interaction between miR-331-3p and circ-PDE7B or CDK6 was confirmed by dual-luciferase reporter assay and RIP assay. Circ-PDE7B was found to be upregulated in keloid tissues and fibroblasts. Downregulation of circ-PDE7B could suppress the proliferation, invasion, migration, ECM accumulation and accelerate the apoptosis of keloid fibroblasts. Circ-PDE7B could serve as a sponge of miR-331-3p, and the regulation of silenced circ-PDE7B on the biological functions of keloid fibroblasts could be abolished by miR-331-3p inhibitor. Additionally, CDK6 was a target of miR-331-3p, and its overexpression could reverse the negative regulation of miR-331-3p on the biological functions of keloid fibroblasts. Circ-PDE7B sponged miR-331-3p to positively regulate CDK6 expression. Taken together, circ-PDE7B promoted the proliferation, invasion, migration and ECM accumulation of keloid fibroblasts by regulating the miR-331-3p/CDK6 axis, suggesting that circ-PDE7B might be a potential target for keloid treatment.     

Circular RNA circ_0114876 regulates osteoarthritis through upregulating ADAM10 via targeting miR-1227-3p

BackgroundOsteoarthritis (OA) was a chronic degenerative joint disease. The dysregulation of circular RNAs (circRNAs) has been identified in OA progression. However, the function and regulation mechanism of circ_0114876 in OA remains largely unknown.MethodFirstly, we used LPS-treated C28/I2 cells as a cellular model of OA. Quantificational real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) was used to determine the expression levels of circ_0114876, miRNA-1227-3p, and ADAM10 in OA chondrocytes. Cell Counting Kit-8 (CCK8), 5-ethynyl-20-deoxyuridine (EdU) incorporation assays, flow cytometry, Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit, and western blot were applied to confirm cell proliferation, apoptosis, inflammation, and extracellular matrix.of circ_0114876 in vitro. The interaction between circ_0114876 and its downstream target (miR-1227-3p) and mRNA target ADAM metallopeptidase domain 10 (ADAM10), was evaluated by luciferase assay and RNA immunoprecipitation (RIP) assay.ResultCirc_0114876 and ADAM10 were upregulated and miR-1227-3p was decreased in OA tissues and LPS-treated chondrocytes. Low expression of circ_0114876 promoted proliferation and inhibited apoptosis, inflammation, and extracellular matrix of the LPS-treated chondrocytes. Mechanistically, circ_0114876 functioned in human chondrocytes through targeting miR-1227-3p and ADAM10. Furthermore, miRNA-1227-3p inhibitor reversed the effect of circ_0114876 knockdown on the OA chondrocytes, and ADAM10 overexpression reversed the effect of miR-1227-3p mimic on the OA chondrocytes.ConclusionCirc_0114876 was increased in OA tissues and cells. Circ_0114876 facilitated the progression in the LPS-induced OA cell model via regulating the miR-1227-3p/ADAM10 axis. This study would provide a potentially effective therapeutic strategy for OA progression.     

microRNA-451对人脑胶质瘤细胞株A172增殖和凋亡的影响

目的 观察microRNA-451(miR-451)对胶质瘤细胞株A172增殖和凋亡的影响.方法 合成寡核苷酸miR-451拟似物(miR-451 mimics)转染A172细胞,实时聚合酶链反应(Real-time PCR)检测转染后miR-451的表达,Western blot法检测蛋白表达,应用流式细胞术、噻唑蓝(MTT)比色法和Annexin Ⅴ法评价miR-451对A172细胞生长、增殖和凋亡的影响.结果 与对照组比较,miR-451 mimics转染组细胞miR-451表达升高＞6倍;Western blot法显示癌基因AKT1表达下降到(43.81±5.20)%、Cyclin D1(56.09±3.40)%和bcl-2(63.49±3.70)%,抑癌基因p27表达升高到(145.51±6.70)%;细胞周期G0/G1期细胞增多达17.4%,出现G0/G1期阻滞;MTT法分析显示细胞生长受抑＞35%;Annexin Ⅴ法检测显示细胞凋亡明显升高＞15%.结论 miR-451可抑制人脑胶质瘤细胞生长和增殖,诱导细胞凋亡,具有抑瘤作用.     

miRNA-21、miRNA-135b、miRNA-141在结肠癌中的表达及其意义

目的：探讨miRNA-21、miRNA-135b和miRNA-141在结肠癌中的表达及其意义。 方法：用荧光实时定量PCR检测3种miRNA在结肠癌组织与癌旁正常结肠黏膜组织中的表达,以及在结肠癌患者和健康对照人群血浆中的表达。分析3种miRNA与结肠癌患者临床病理因素的关系。 结果：3种miRNA的表达水平在结肠癌组织中均高于癌旁正常肠黏膜组织、在结肠癌患者血浆中均明显高于健康对照人群（均P<0.05）;miRNA-21的表达水平与肿瘤分期及浸润深度有关,miRNA-135b的表达水平与肿瘤的分期及淋巴结转移有关,miRNA-141的表达水平与肿瘤的分期、浸润深度及淋巴结转移有关（均P<0.05）;miRNA-21在结肠癌组织和患者血浆中的表达水平无明显相关性（r=0.459,P=0.072）,miRNA-135b、miRNA-141在结肠癌组织和患者血浆中的表达水平成正相关（r=0.686,P=0.042;r=0.742,P=0.026）。 结论：miRNA-21、miRNA-135b和miRNA-141在结肠癌患者中表达上调,均可能与结肠癌的发生发展密切相关,且均可能为潜在的肿瘤标记物以及治疗靶点。     

MicroRNA-377 knockdown suppresses high glucose-induced proliferation and inflammation in human mesangial cells

Objective To investigate the effect and potential mechanism of microRNA (miRNA)-377 on high glucose-induced proliferation and inflammation in human mesangial cells. Methods Cells were randomly divided into six groups: control group (5.5 mmol/L glucose), high glucose group (30.0 mmol/L glucose), negtive miRNA inhibitor transfection+high glucose group, negtive miRNA mimic transfection+high glucose group, miRNA-377 inhibitor transfection+high glucose group (miR-377i+high glucose group), miRNA-377 mimic transfection+high glucose group (miR-377m+high glucose group). miRNA-377 expression was detected by real-time PCR. Cell proliferation and cell cycle were detected by BrdU assay and flow cytometry, respectively. The release of tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin (IL)-18, IL-6 and macrophages chemotaxis protein-1 (MCP-1) were evaluated by ELISA. The activations of NF-κB pathway, including the expressions of phosporylated (p)-IκBα, p-P65 and nuclear P65, were measured by Western blotting. Results Compared with those in control group, in high glucose group cell viability, miRNA-377 expression and cell proliferation rate increased (all P＜0.05), proportions of S phase cell and G2/M phase cell in cell cycle increased (all P＜0.05), the levels of TNF-α, IL-18, IL-6 and MCP-1 were higher (all P＜0.05), as well as the expressions of p-IκBα/IκBα, p-P65/P65 and nuclear P65 were increased (all P＜0.05). Compared with high glucose group, cell proliferation rate was restrained (P＜0.05), proportions of S phase cell and G2/M phase cell in cell cycle was descreased (all P＜0.05), the levels of TNF-α, IL-18, IL-6 and MCP-1 were lower (all P＜0.05), as well as the expressions of p-IκBα/IκBα, p-P65/P65 and nuclear P65 were reduced (all P＜0.05) in miR-377i+high glucose group. However, miR-377m+high glucose group presented opposite results (all P＜0.05). Conclusions miRNA-377 knockdown can partially suppress high glucose-induced human mesangial cell proliferation and cell cycle transition, and restrain inflammatory molecules release. Its mechanism may be related to the inhibition of NF-κB pathway.     

microRNA-107 functions as a candidate tumor suppressor gene in renal clear cell carcinoma involving multiple genes

BackgroundMicroRNAs (miRNAs) are small RNAs with oncogenic and tumor-suppressing functions in cancer. miRNAs not only regulate various target genes but also participate in vital signaling pathways.Methods and resultsThe tumor-suppressing function of miRNA-107 (miR-107) was confirmed in clear cell renal cell carcinoma in 52 paired clinical specimens and renal cell carcinoma cell lines. Significant correlations were noted between clinical features and miR-107 expression level. Lentiviral vector and biosynthesis mimics were used to overexpress pre-miR-107 or mimicked miR-107 to investigate further the tumorigenesis of miR-107 in vivo and in vitro. Cell proliferation and invasiveness were inhibited in the 786-O cell line after miR-107 was delivered. High miR-107 level expression can apparently induce cell cycle arrest at the G2/M phase and retard tumor growth in nude mice. In addition, eukaryotic translation initiation factor 5 was found to be a direct target of miR-107 and exhibited an inverse relationship with miR-107. It was seen that p53 and VHL genes, which are implicated in renal tumors, were associated with miR-107.ConclusionIn summary, our results showed that miR-107 can inhibit cell proliferation and invasiveness of renal cell carcinoma. Furthermore, this study may provide a potential therapeutic regimen for clear cell renal cell carcinoma treatment.