贲门癌患者外周血T淋巴细胞亚群及细胞因子表达的变化

目的 观察贲门癌手术患者机体免疫状态的变化.方法 采用流式细胞术检测97例贲门癌患者T淋巴细胞亚群(Th1、Th2、CD3+、CD4+、CD8+细胞),采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验( ELISA)检测血清中白细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-γ、IL-4、IL-10、可溶性白细胞介素-2受体R(sIL-2R)和肿瘤坏死因子(TNF)-β水平.结果 贲门癌患者术前外周血Th1/Th2细胞比值(0.43±0.13)较正常对照组(0.58±0.12)降低(P＜0.05),其Th1细胞表达的IL-2、IFN-γ等细胞因子水平低于正常对照组;Th2细胞表达的IL-4、IL-10细胞因子水平高于正常对照组(P＜0.05).T细胞介导的细胞免疫及血清sIL-2R和TNF-β水平与肿瘤TNM分期相关,其特征为:CD3+、CD4+细胞减少(P＜0.05),而CD8+细胞增加(P＜ 0.01);CD4 +/CD8+细胞比值下降(P＜0.01),血清sIL-2R和TNF-β水平升高(p＜0.05) 贲门癌根治术后1个月CD3+、CD4+细胞回升,CD8+细胞回降,同时血清sIL-2R和TNF-β水平降低(P＜0.01).结论 贲门癌患者外周血Th1/Th2细胞比值降低,细胞因子表达失衡,患者存在免疫功能抑制.     

结直肠癌患者外周血Th1和Th2细胞的检测与临床意义

目的 研究结直肠癌患者外周血CD4+T细胞亚群Th1和Th2细胞的比例以及相关特异性转录因子与细胞因子的表达水平,并观察其与临床分期之间的关系.方法 43名结直肠癌患者(肠癌组)与30名健康体检志愿者(对照组)作为研究对象.结直肠癌患者外周血Th1和Th2细胞占CD4+T细胞的比例运用流式细胞技术进行检测.采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative Real-time PCR),检测外周血Th1/Th2细胞亚群特异性转录因子的相对基因表达量.血浆细胞因子的表达水平使用液相芯片技术方法定量检测.结果 肠癌组外周血Th2细胞占CD4+T细胞的比例和Th2细胞特异性转录因子GATA-3的mRNA表达量均显著高于对照组(P<0.05).肠癌组外周血Th1细胞特异性转录因子T-bet的mRNA表达量显著低于对照组(P<0.05),但Th1细胞占外周血CD4+T细胞的比例与对照组差异无统计学意义(P>0.05).血浆TNF-α、IL-1β和IL-15表达水平组间无显著差异(P>0.05).结直肠癌患者血浆IFN-γ、IL-4和IL-6的表达水平与病程分期有关(P<0.05).结论 结直肠癌患者外周血中Th1细胞比例变化不明显而Th2细胞比例明显升高.结直肠癌患者血浆细胞因子的不平衡表达可作为机体免疫状态转换与病情判断的指标.     

晚期肺癌患者化疗前后细胞免疫功能及T细胞分泌细胞因子的变化

目的:探讨晚期肺癌患者化疗前后外周血中T细胞免疫功能及其分泌细胞因子水平的变化.方法:通过流式细胞仪检测57例晚期肺癌患者和22例健康体检者CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞在外周血单核细胞(PBMC)中所占比例以及外周血CD4+T细胞分泌细胞因子水平的变化.结果:晚期肺癌患者化疗前CD4+T细胞在PBMC中所占比例、CD4+T细胞与CD8+T细胞比值均低于健康人(P＜0.001),化疗后均较化疗前明显升高(P＜0.01或P＜0.001):化疗前CD8+T细胞在PBMC中所占比例高于健康人(P＜0.001),而于化疗后较化疗前明显下降(P＜0.05).治疗前后患者血清中CD4+T细胞分泌Th1细胞因子(IFN-y、TNF-α、IL-2)和Th2细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10)水平均无明显变化(P＞0.05).结论:化疗能够增加肺癌患者外周血中CD4+T细胞所占比例,但对Th1、Th2所分泌的相关细胞因子水平影响不大.     

TNF-α基因多态性与慢性乙型肝炎患者干扰素治疗前后Th1/Th2细胞因子水平变化相关性研究

目的 研究TNF-α-238、308基因多态性与慢性乙型肝炎患者干扰素治疗6个月前后Th1/Th2细胞因子水平变化的相关性,探讨乙型肝炎发病机制和治疗策略.方法 以接受α干扰素正规治疗的77例慢性乙型肝炎患者作为研究对象,运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测77例慢性乙型肝炎患者TNF-α-238、-308位点基因多态性,并用ELISA检测干扰素治疗前后血清细胞因子水平,最后根据患者不同应答水平及基因型分组分别进行统计分析.结果 (1)应答组治疗前血清IL-2、IFN-γ水平较无应答组高(P<0.05),IL-10水平较无应答组低(P<0.05),IL-4水平在应答组和无应答组间无显著性差异(P>0.05);(2)干扰素治疗6个月后应答组、无应答组IL-2、IFN-γ水平均升高(P<0.01),IL-4、IL-10水平均降低(P<0.01),应答组IL-2、IFN-γ水平平均升高浓度高于无应答组(P<0.05),IL-4、IL-10水平平均降低浓度也高于无应答组(P<0.05);(3)治疗前TNF-α-308G/A基因型患者血清IFN-γ水平较G/G型高(P<0.05),IL-2、IL-4、IL-10水平在两种基因型间无显著性差异(P>0.05).TNF -α-238G/G、G/A基因型患者血清IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10水平均无显著性差异(P>0.05);(4)TNF-α-238G/G、G/A基因型, TNF-α-308G/G、G/A基因型各组间在干扰素治疗后IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10平均浓度变化无显著差异(P>0.05);(5)TNF-α-238、TNF-α-308位点各基因型在α干扰素治疗应答组和无应答组的分布差异无显著性意义(P>0.05).结论 (1)干扰素治疗不同应答水平与血清Th1/Th2细胞因子水平有关;(2)干扰素治疗后不同应答水平与治疗前后Th1/Th2细胞因子变化水平有关;(3)TNF-α-308 G/A基因型可能与慢性乙型肝炎患者外周血高IFN-γ水平有关;(4) TNF-α-238、-308位点基因多态性可能与干扰素治疗后IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10水平变化无关;(5)TNF-α-238、-308基因多态性与干扰素治疗不同应答水平无相关性.     

食管癌手术患者单肺通气时血清炎性细胞因子与氧自由基的检测及意义

目的 探讨食管癌手术患者单肺通气(OLV)时血清炎性细胞因子与氧自由基的检测及其意义.方法 拟行食管癌手术患者36例,分别在麻醉诱导后OLV前(T1)、OLV 45min(T2)、90min(T3)及双肺通气后30min(T4)采取外周静脉血,分别测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-8、丙二醛(MDA)的浓度及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 与T1时比较,T2时患者血清TNF-α、IL-6、IL-8水平和MDA浓度均明显上升(P<0.05),SOD活性显著降低(P<0.05);与T3时比较,T4时患者血清TNF-α、IL-6、IL-8水平和MDA浓度均明显降低(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.05).结论 单肺通气期间血清中炎性细胞因子的释放和氧自由基的生成显著增加,提示引起急性肺损伤.     

两种麻醉方法对直肠癌患者术后免疫功能的影响

目的:观察两种麻醉方法下直肠癌患者术后免疫功能的变化.方法:选择40例直肠癌手术病人,随机分为两组,每组20例:A组采用静脉麻醉;B组采用硬膜外阻滞复合静脉全麻.分别于麻醉前(T0)、切皮后2h(T1),术后6h(T2)、术后48 h(T3)测定CD4+%、CD8+%、血清白介素-2(IL-2)和可溶性白介素-2受体(sIL-2R).结果两组CD4+%、CD4+/CD8+比值JL-2水平下降(P＜0.05),T1至T3时B组CD4+%明显高于A组(P＜0.05),T2至T3时B组CD4+/CD8+比值、IL-2水平明显高于A组(P＜0.05);两组sIL-2R水平A组T1时显著高于T0,T2达最高峰;而B组各时间点与T0比较差异无统计学意义(P＞0.05);两组间比较,T1至T3时A组sIL-2R水平明显高于B组(P＜0.05).结论:硬膜外阻滞配合全麻可减轻围手术期直肠癌患者的细胞免疫功能抑制.     

尖锐湿疣复发患者的细胞因子及淋巴细胞亚群的变化规律研究

目的探讨尖锐湿疣复发患者的细胞因子及免疫功能的变化规律。方法选取我院皮肤科收治的87例尖锐湿疣患者。将患者分为初发组与复发组。初发组48例,复发组39例,选取同期体检的42名健康者作为对照组。对3组人员的血清细胞因子IL-2、IL-4、IL-6及外周血T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+、CD4+/CD8+分布水平进行检测及统计分析。结果 3组患者的IL-2、IL-4、IL-6、CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+/CD8+水平之间比较差异均具有显著性(P0.05)。两两比较后发现,复发组患者的血清IL-2、IL-6、CD4+细胞、CD4+/CD8+水平均显著低于初发组与对照组(P0.05),血清IL-4、CD8+细胞水平均显著高于初发组与对照组(P0.05);初发组患者的血清IL-2、IL-4、IL-6、CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+/CD8+水平与对照组比较差异均无显著性(P0.05)。结论尖锐湿疣复发患者存细胞免疫功能的失衡,细胞免疫功能低下可能是导致其反复发作的一个原因。     

肠源性内毒素血症对慢性乙型肝炎患者细胞免疫功能影响的研究

目的 探讨慢性乙型肝炎患者肠源性内毒素与细胞免疫功能的关系,以寻找控制慢性乙型肝炎进展的有效途径.方法 选取慢性乙型肝炎患者106例,健康对照组45例,检测血清内毒素、IL-2、TNF-α、CD4+、CD8+细胞因子水平,运用统计学方法分析. 结果 慢性乙型肝炎组ET、TNF-α水平明显升高,IL-2水平明显降低,CD4+亚群明显降低,CD8+亚群明显升高,CD4+/CD8+比值明显降低(P＜0.01).结论 慢性乙型肝炎患者血清内毒素水平明显升高,同时细胞免疫功能低下且紊乱.     

CD4+T淋巴细胞在IgA肾病中致病作用机制研究

目的探讨CD4~+ T淋巴细胞在IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)中致病作用机制。方法选取2017年8月至2018年8月于复旦大学附属闵行医院肾脏科住院治疗且经首次肾活检证实为IgAN患者作为IgAN组(45例),另外纳入我院体检中心体检健康者作为健康对照组(49例),采集健康对照组和IgAN组患者治疗前后的外周血液样本,分离制备外周血淋巴细胞、单核细胞及血清。采用ELISA检测外周血清CD4~+ T淋巴细胞因子,包括γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白介素(interleukin,IL)-4、IL-17、IL-21、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)。采用流式细胞仪检测CD4~+ T细胞的分布比例。采用RT-qPCR及Western blot检测JAK/STAT信号通路各信号分子的表达水平。结果 IgAN组血清IL-4、IL-17、TGF-β1、IL-21水平高于健康对照组(P0.05);而IFN-γ水平与健康对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。使用激素治疗1月后,IgAN组外周血清IL-4、IL-17、TGF-β1、IL-21水平均显著低于治疗前(P0.01)。与健康对照组比较,治疗前IgAN组患者Th2及Treg细胞在T细胞中占比显著升高(P0.05),而Th1的占比在两组受试者之中差异无统计学意义(P0.05)。RT-qPCR及Western blot结果表明,治疗前IgAN组JAK1、JAK3、STAT3和STAT6表达水平显著高于正常对照组(P0.05),而STAT5表达水平显著低于正常对照组(P0.05),两组JAK2、TYK2、STAT1和STAT4表达水平比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 CD4~+ T细胞亚群失调可能参与IgAN患者的发病机制,与JAK/STAT信号通路表达失衡有关。因此,CD4~+ T细胞因子(IL-4、IL-17、TGF-β1和IL-21)可能成为治疗IgAN的新靶点和监测IgAN病情的无创生物标志物。     

脓毒症大鼠调节性T细胞凋亡对效应T细胞增殖和分泌功能的影响及血必净注射液的干预作用

目的 探讨血必净注射液对脓毒症大鼠CD+4CD+25调节性T细胞(Treg)凋亡的影响及与效应T细胞(Teff)增殖及分泌功能的关系.方法 Wister大鼠随机分为对照组、假于术组、肓肠结扎穿孔(CLP)组和血必净治疗组,每组8只;于第3天采用免疫磁珠法分选大鼠脾脏CD+4CD25+Treg和CD+4CD25-T细胞.CD+4CD25+Treg培养12 h后检测凋亡率、叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)和T淋巴细胞毒性相关抗原4(CTLA-4)表达及门细胞介素(IL)-10的分泌.将Treg与CD+4CD25-T细胞共培养,并以刀豆素A刺激后观察Treg对Teff增殖活性和细胞培养上清IL-2/可溶性IL-2受体α(slL-2Rα)含量的影响.结果 CLP组CD+4CD25+Treg细胞凋亡率<对照组和假于术组(P<0.01),而血必净治疗组明显>CLP组(P<0.01).与CLP组比较,血必净治疗组CD+4CD25+Treg细胞Foxp3、CTLA-4表达和IL-10分泌显著下降(P<0.01).同时,CLP组Teff增殖反应抑制率明显>对照组,而血必净组其抑制率CLP组,sll-2Rα低于CLP组(P<0.01).结论 脓毒症病理过程中CD+4CD25+Treg细胞对Teff抑制效应明显增强,而血必净注射液能诱导Treg细胞凋亡,减轻Treg对Teff的抑制作用.     

不同剂量L-精氨酸对严重烧伤患者辅助性T淋巴细胞型细胞因子的影响

目的 了解不同剂量L-精氨酸对严重烧伤患者血清辅助性T淋巴细胞1(Th1)/Th2型细胞因子水平的影响.方法 选择笔者单位收治的伤后20 h内入院、烧伤总面积为50%～80%TBSA的患者29例,按随机数字表法分为对照组[10例,经鼻肠管给予葡萄糖盐水500 mL(含50 g/L葡萄糖及9 g/L氯化钠,下同)]、L-精氨酸200 mg组(10例,经鼻肠管给予L-精氨酸200 mg/kg+葡萄糖盐水500 mL)、L-精氨酸400 mg组(9例,经鼻肠管给予L-精氨酸400 mg/kg+葡萄糖盐水500mL).于伤后1 d(行肠内营养前)及3、5、7 d,取各组患者空腹静脉血,用放射免疫法及酶联免疫吸附测定法检测血清Th1型细胞因子TNF-α、IL-1β和Th2型细胞因子TGF-β_1、IL-4含量.结果 各组患者血清TNF-α及IL-1β含量伤后均呈快速上升趋势,L-精氨酸200 mg组血清TNF-α及IL-1β含量伤后5 d达高峰[(318±57)ng/mL、(218±47)pg/mL],但仍显著低于同时相点对照组[(389±34)ng/mL、(272±40)pg/mL,P<0.05],伤后7 d此2种细胞因子含量下降;L-精氨酸400 mg组各时相点血清TNF-α及IL-1β含量与对照组相近(P>0.05).各组患者血清TGF-β_1及IL-4含量伤后呈较缓慢上升趋势;伤后5 d,L-精氨酸200 mg组血清TGF-β_1含量为(110±16)pg/mL,显著高于对照组[(83±20)pg/mL,P<0.05],L-精氨酸400mg组各时相点血清TGF-β_1含量与对照组相近(P>0.05).结论 在严重烧伤患者感染期,相对于400 mg/kg的用量,200 mg/kg的L-精氨酸通过调节血清Th1/Th2型细胞因子释放,能更有效地保持两者之间的比例,从而产生更好的免疫调理作用.     

不同麻醉方式对肝切除术术后患者免疫功能的影响分析

目的探讨不同麻醉方式对肝切除术术后患者免疫功能的影响。方法选取2013年11月到2015年11月在我科进行开腹左肝手术的患者60例,ASA分级为Ⅰ~Ⅱ级,使用随机数字表法把患者分为静-吸复合麻醉组、全凭静脉麻醉组,每组各30例,使用流式细胞仪对两组的B淋巴细胞、NK细胞、T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD8+)进行检测,使用ELISA法检测血清中INF-γ、INF-2、INF-2R的含量,分别在麻醉前0.5h(TO)、手术结束时(T1)、术后24 h(T2)时刻进行各项指标检测,并对检测结果进行分析。结果①两组T1、T2时刻的B淋巴细胞数目和T0时刻没有明显变化;②T0时刻,两组的NK细胞、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD8+均无统计学差异(P0.05)。和T0时刻比较,两组的NK细胞、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD8+在T1时刻均明显降低(P0.05),全凭静脉组的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+在T2时刻仍明显降低(P0.05)。组间比较,T2时刻静-吸复合组的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+则明显高于全凭静脉组(P0.05);③T0时刻,静-吸复合组、全凭静脉组的INF-γ、IL-2、sIL-2R均无统计学差异(P0.05)。T1时刻,两组的INF-γ水平均明显小于TO时刻(PO.05),T2时刻基本恢复(P0.05)。T1时刻两组的sIL-2R水平均明显小于T0时刻(P0.05),T2时刻稍有恢复(P0.05)。T1、T2时刻,两组的IL-2水平均没有明显变化(P0.05)。结论静-吸复合麻醉在肝切除术术后患者的细胞免疫恢复上较全凭静脉麻醉快,对免疫功能的影响较小。     

宫颈上皮内病变患者人乳头状瘤病毒感染与Th17细胞、Treg细胞及相关细胞因子表达的相关性

目的探讨宫颈上皮内病变（CIN）患者人乳头状瘤病毒（HPV）感染与Th17细胞、Treg细胞及相关细胞因子表达的相关性。 方法选择2017年2月至2018年9月于新疆自治区人民医院就诊的CIN患者共140例进行回顾性分析,根据是否感染HPV分为感染组（86例）和非感染组（54例）,采用免疫组织化学方法比较两组患者T细胞CD3、CD4及CD8水平以及Treg和Th17的表达水平,采用流式细胞技术比较两组患者的外周血T细胞亚群含量（CD3⁺ T细胞、CD4⁺ T细胞、CD8⁺ T细胞的百分比）、Treg细胞和Th17细胞百分含量（CD4⁺CD25⁺ Treg、CD8⁺CD25⁺CD127^-Treg、CD4⁺Foxp3⁺ Treg、CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg和CD4⁺IL17⁺Th17以及Th17/Treg比值）以及相关细胞因子[肿瘤坏死因子（TGF）-β、白细胞介素（IL）-10、IL-17和干扰素（IFN）-γ]含量的差异,应用多因素Logistic回归模型分析CIN患者感染HPV的危险因素。 结果免疫组织化学结果显示,两组患者CIN组织中T细胞CD3、CD4和CD8的表达水平差异无统计学意义,感染组患者CIN组织中T细胞抗-FOX3（Treg）和Th17表达水平显著高于非感染组。流式细胞术检测结果显示两组患者CD3⁺ T细胞、CD4⁺ T细胞、CD8⁺ T细胞百分比差异无统计学意义（t = 0.870、1.509、0.236;P = 0.385、0.133、0.813）,感染组患者CD4⁺CD25⁺ Treg、CD8⁺CD25⁺CD127^—Treg、CD4⁺Foxp3⁺ Treg、CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg、CD4⁺IL17⁺ Th17以及Th17/Treg比值均显著高于非感染组（P均< 0.05）。感染组患者外周血TGF-β、IL-10和L-17均高于非感染组（t =－11.601、－42.251、－40.31,P均< 0.001）,而IFN-γ低于非感染组（t = 10.316、P < 0.001）。多因素Logistic回归分析显示,CD4⁺CD25⁺ Treg（OR = 3.673、P = 0.031）、CD4⁺IL17⁺Th17（OR = 1.974、P = 0.021）和Th17/Treg（OR = 3.585、P = 0.024）均为CIN患者感染HPV的危险因素,IFN-γ（OR = 0.612、P = 0.028）为CIN患者感染HPV的保护因素。 结论CIN患者HPV感染与Treg细胞、Th17细胞及IFN-γ因子存在相关性,HPV感染的CIN患者Treg和Th17细胞增高,IFN-γ降低。     

血栓痔病人外周血Th1／Th2分析

为探讨血栓痔发病与T淋巴细胞活化及释放的Th1／Th2细胞因子失衡状态的关系,对32例血栓痔（实验组）和30例健康人（对照组）的外周血单个核细胞（PBMC）,经PMA诱导培养后,用流式细胞术测定CD3^＋标记T细胞内自细胞介素-4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）含量和CD8^-标记T细胞内IL-4和IFN-γ的含量,进行比较分析,从而估计Th1／Th2细胞的漂移状态。结果显示,实验组的IL-4和IFN-γ含量均显著高于对照组（P〈0．001）;且实验组IL-4^＋含量高于IFN-γ含量（P〈0．05）。结果表明,血栓痔病人发病时,体内的T淋巴细胞免疫系统被激活,且以Th2细胞为主,这种Th1／Th2细胞因子失衡可能在血栓痔发病过程中起到重要作用。     

雷公藤甲素预处理诱导Tregs细胞减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤的实验研究

目的 探讨雷公藤甲素(TPT)预处理减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用及其机制.方法 将C57BL/6小鼠随机分为4组(15只/组):假手术对照组;假手术雷公藤甲素组;实验对照组;雷公藤甲素实验组.两个雷公藤甲素组小鼠术前1周每天给予雷公藤甲素0.1 mg/kg腹腔注射,术前1h加用一次,而两对照组同期仅给予等体积无菌生理盐水腹腔注射.肝脏缺血90 min再灌注24 h后分别采集各组小鼠的血液和肝组织,检测血清丙氨酸转移酶(ALT)、天冬氨酸转移酶(AST)水平.以及肝脏组织丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量.光镜下观察肝组织的病理学变化.采用流式细胞术检测肝组织中CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞占CD4+T细胞的百分比,采用实时聚合酶链反应检测肝组织中Foxp3 mRNA的表达.采用酶联免疫吸附试验检测血清中IL-10、IL-6、IL-1β和TNF-α细胞因子含量.结果 雷公藤甲素实验组和实验对照组小鼠血清ALT和AST明显升高,且雷公藤甲素实验组水平低于实验对照组(P＜0.05).假手术雷公藤甲素组和雷公藤甲素实验组与相应假手术和实验对照组相比MDA含量降低,SOD活性升高(P＜0.05).两假手术组肝组织结构正常,实验对照组可见明显的肝组织片状坏死,雷公藤甲素实验组肝小叶结构基本正常.假手术对照组、假手术雷公藤甲素组、实验对照组和雷公藤甲素实验组CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞占CD4+T细胞的百分比分别为(7.55±1.87)%、(12.59±3.87)%、(7.85±1.07)%和(12.02±3.16)%.假手术雷公藤甲素组和雷公藤甲素实验组Foxp3 mRNA相对表达量高于相应的对照组(P＜0.05).雷公藤甲素实验组较实验对照组相比有升高血清IL-10,降低IL-6、IL-1β和TNF-α细胞因子的含量的作用.结论 雷公藤甲素可减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤,其机制可能与雷公藤甲素诱导上调体内CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞比例及增加IL-10分泌,抑制IL-6、IL-1p和TNF-α炎症细胞因子有关.

Abstract：

Objective To investigate the effect and related mechanism of triptolide pretreatment to prevent from ischemia/reperfusion (I/R) injury in mice liver. Methods Sixty male C57BL/6 mouse were randomized into four groups (15/group): A:sham group with saline , B: sham group with triptolide, C: saline I/R group, D: triptolide I/R group. The mice were pretreated with either saline or triptolide (0. 1 mg/kg/d) through intraperitoneal (ip) injection for one week. The mouse partial liver model of I/R injury was established, and samples were collected at 24 h after the I/R injury. Results Serum ALT and AST levels were significantly decreased and histological damage was significantly alleviated in the triptolide I/R group as compared with the saline I/R group (P＜0.05), the concentration of MDA in the triptolide groups was significantly decreased, while SOD activity was significantly increased compared with that of the saline I/R group (P＜0.05). The percentages of CD4+ CD25+ regulatory T cells (Tregs) cells among CD4+ T cells in groups A, B, C, and D were(7. 55 ± 1.87)%, (12. 59±3. 87)%,(7. 85±1.07)%, and(12. 02±3. 16)% in liver tissue, respectively. The expression levels of Foxp3 mRNA were significantly higher in the triptolide I/R group than those of saline I/R group (P＜0. 05). ELISA showed that triptolide could significantly inhibit the levels of IL-6, IL-Iβ and TNF-αand promoted the level of IL-10 in the serum (P＜0.05). Conclusion Pretreatment with triptolide could effectively prevent from liver I/R injury, which may be related to the induction of Treg cells by triptolide, the increase in the level of IL-10 in serum, and the inhibition of IL-6, IL-1β and TNF-α production in serum.     

共刺激后淋巴细胞产生Th1/Th2细胞因子的变化及免疫抑制剂的影响

目的 探讨CD28、CD40通路共刺激后淋巴细胞产生Th1(IL-2、IFN-γ、IL-12)及Th2细胞因子(IL-4、IL-10)的变化及免疫抑制剂环孢素(CsA)、雷帕霉素(RPM)及霉酚酸(MPA)对共刺激通路激活后淋巴细胞产生Th1及Th2细胞因子的影响.方法采用单克隆抗体(mAb)与淋巴细胞表面CD3、CD28及CD40L分子结合产生相应刺激信号,单刺激及共刺激组分为:a组,CD3 mAb单刺激;b组,CD3 mAb加CD28 mAb共刺激;c组,CD3 mAb加CD28 mAb加CD40 L mAb共刺激;d组,CD3 mAb加CD28 mAb加CTLA4 mAb共刺激.各mAb的终浓度均为100 ng/ml.干预组分别将终浓度为300 ng/ml的CsA、RPM、MPA加入上述4组.ELISA法测定上述细胞培养上清中的细胞因子值.结果 a、b、c 3组IFN-γ分别为(248.91±11.20)、(555.08±24.42)、(548.19±33.06)ng/ml,IL-2分别为(29.48±8.61)、(1100.82±99.29)、(842.23±29.31)ng/ml,IL-4分别为(32.29±6.76)、(116.02±15.03)、(147.28±18.07)ng/ml,IL-10分别为(147.01±10.47)、(291.79±12.47)、(302.52±35.18)ng/ml.b、c组与a组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);b、c组IL-2、IL-12、IL-4比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).d组IFN-γ、IL-2及IL-10分别为(497.42±29.03)、(739.77±18.58)及(120.33±13.21)ng/ml,与b组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05).CsA、RPM及MPA对共刺激后Th1/Th2细胞因子的产生均有抑制作用,CsA对4种细胞因子产生的抑制作用强于RPM和MPA,其中对IL-2及IL-4的抑制作用更为明显.CsA与CTLA4 mAb有协同作用.共刺激后IL-12产生升高,MPA可抑制单刺激和共刺激后IL-12的产生,CsA和RPM对IL-12的产生无明显抑制作用.结论 CD28、CD40共刺激通路在淋巴细胞活化中起关键作用.CsA、RPM、MPA及CTLA4 mAb对共刺激后Th1/Th2细胞因子的产生均有抑制作用,CsA的抑制作用更为明显.CD40 L mAb使Th1细胞因子及IL-12水平下降,又促进Th2细胞因子(以IL-4为主)产生,该作用可能是抗CD40 L抗体诱导移植物存活期延长的机制之一.     

Th1/Th2 balance in childhood idiopathic nephrotic syndrome

AIMS: In view of the conflicting evidence of helper T cell type 1 (Th1) or type 2 (Th2) pattern of cytokine synthesis in childhood idiopathic nephrotic syndrome (INS) this study examined the balance of Th1 and Th2 which are characterized by intracellular cytokine production of interferon-gamma (IFNgamma) and interleukin-4 (IL-4), respectively. SUBJECTS AND METHODS: Sixteen children with steroid-sensitive INS (mean age 9.0 years) were included in this study, together with 15 healthy normal children (mean age 7.9 years) for the control group. Intracellular production of both IFNgamma and IL-4 in helper T cell (CD4+ cell) was investigated by a 3-color flow cytometry. RESULTS: The cross-sectional data showed no significant differences of percentages of Th0 (IFNgamma+ IL-4+ CD4+ cell), Th1 (IFNgamma+ lL-4- CD4+ cell) and Th2 (IFNgamma- IL-4+ CD4+ cell) in CD4+ cells (p > 0.05). The Th1/Th2 ratio during nephrotic relapse did not differ from those during nephrotic remission and in normal healthy children (p > 0.05). CONCLUSION: We conclude that there is no significant skew of Th1/Th2 balance in childhood INS and that the cardinal immunological abnormality does not lie in helper T cells but in other cells, such as suppressor/cytotoxic T cells, natural killer cells or monocytes/macrophage. To clarify the pathogenesis of INS, comprehensive studies for these cells would be worthwhile.     

联合腰-硬镇痛对分娩产妇IL-1β、IL-10及T细胞亚群的影响

Objective To investigate the effect of combined spinal-epidural analgesia(CSEA) on immunological function and Th1/Th2 balance by observing the levels of serum T-lymphocyte subsets,IL-1β and IL-10 during labor in maternity.Methods Fifty healthy primipara expecting spontaneous labor were randomly divided into two groups(n=25).CSEA was performed with 20 μg fentanyl for lumbar analgesia and with complex of ropivacaine(0.1%) and fentanyl(2 μg/ml) for epidural analgesia in group Ⅰ,and no labor analgesia was given in group Ⅱ.Serum cortisol,IL-1β,IL-10 and T lymphocyte subsets was detected at cervical dilation of 2 cm-3 cm (T1),fetal disengagement (T2) and 24 h after childbirth (T3).Labor progress,VAS and neonatal Apgar score were recorded.Results The active phase of the first labor stage significantly shortened in group Ⅰ compared to that in group Ⅱ (P＜0.05),without difference in neonatal Apgar score between two groups.Along with labor progress,the level of serum IL-1β markedly increased in two groups,and the levels of cortisol,IL-1β and IL-10 were obviously decreased at T2 in group Ⅰ compared to those in group Ⅱ(P＜0.05).The levels of serum CD3+,CD4+,and CD4+/CD8+ decreased in both groups,with significant reduction at T3 (P＜0.05) and more significant in group Ⅱ than in group Ⅰ (P＜0.05).Conclusion CSEA shortens the active delivery phase in the first stage of labor and alleviates pain stress-induced inhibition on immune function and may benefit the balance of Th1/Th2 in maternity.