细胞因子E-cadherin、CD34在肝细胞肝癌患者预后评价中的价值

目的研究肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）组织中上皮钙黏蛋白（E-cadherin）和血管内皮因子CD34的表达情况,探讨二者之间及与临床病理之间的关系及其对HCC患者预后的评价.方法应用免疫组织化学PV-6000两步法检测41例HCC组织标本中E-cadherin和CD34的表达,并与临床病理学指标和术后生存期进行比较分析.结果41例HCC组织中E-cadherin和CD34表达阳性率分别为48.8%和100%.E-cadherin蛋白的表达在大肝癌、侵袭性高危组和癌组织Edmondson分级Ⅲ、Ⅳ级的HCC患者中明显降低（x^2=4.1881、4.8118、6.2695;P均＜0.05）.E-cadherin表达阴性的患者肝切除术后2年复发率较阳性表达组明显增加,5年生存率明显降低.CD34的表达与HCC患者年龄、侵袭性呈显著负相关（t=1.9371、1.9010;P＜0.05）,CD34阳性表达[微血管密度（MVD）≤40]组的2年复发率和5年生存率与MVD＞40组相比,差异无统计学意义.E-cadherin与CD34的表达不相关.结论HCC组织中E-cadherin表达阴性的患者预示着较差的预后,CD34的阳性表达与肿瘤复发和患者生存率无相关关系,HCC组织中E-cadherin和CD34的共同表达无相关性.     

异黏蛋白、上皮钙黏蛋白、β链蛋白在肝细胞癌中的表达及预后研究

目的 研究异黏蛋白(metadherin,MTDH)、上皮钙黏蛋白(epithelial cadherin,E-cadherin)、β链蛋白(β-catenin)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达,比较三者与HCC临床病理指标的关系及其预后价值.方法 应用免疫组织化学法检测MTDH、E-cadherin及β-catenin在107例HCC中的表达情况,并与相关临床病理指标以及术后无瘤生存期、复发率进行比较分析.结果 MTDH、β-catenin阳性表达与Edmondson分级相关(P＜0.05),E-cadherin低表达与术前血清甲胎蛋白(AFP)水平相关(P＜0.05),均提示短中位无瘤生存期和高复发率(P＜0.05).MTDH阳性表达与E-cadherin胞膜低表达、β-catenin核聚集呈一致性(P＜0.05).MTDH是HCC切除术后复发的独立风险因子(RR=3.431,CI=1.254～7.318).结论 MTDH阳性表达、E-cadherin低表达、β-catenin核聚预示肝癌切除术后有较高的复发率.MTDH可作为复发的独立危险因素.     

CK19评估肝细胞肝癌淋巴结转移预后的价值

目的：探讨伴淋巴结转移（lymph node metastasis,LNM）的肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的病理分类及临床治疗意义。方法：应用组织芯片和免疫组化等方法,分析HCC组织中胆管细胞表型指标CK19的表达情况及其与临床病理因素、LNM发生及总体预后的关系。结果：47例伴LNM的HCC癌组织中,CK19表达显著高于125例不伴LNM的HCC癌组织,分别为27.7%和5.6%（P〈0.001）。Logistic回归分析发现CK19和LCSGJ（LiverCancerStudyGroupofJapan）肿瘤分期均是影响LNM发生的独立危险因素（OR：5.106,95%CI：1.789～14.568,P=0.002;OR：2.293,95%CI：1.474～3.566,P〈0.001）。CK19阳性和阴性表达组病人的中位生存期分别为7.7个月和21.7个月（P=0.013）,生存分析发现CK19是影响伴LNM的HCC病人总体生存率的独立危险因素。结论：CK19表达和LCSGJ肿瘤分期是HCC病人出现LNM的独立危险因素,CK19表达是影响伴LNM的HCC病人术后总体生存的独立危险因素。伴LNM的HCC可分为不同病理类型及预后的伴肝内胆管细胞癌（intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC）分化特征的HCC（CK19阳性）和高肿瘤分期的HCC（CK19阴性）,此分类可指导临床治疗。     

波形蛋白、E-钙黏蛋白在原发性肝癌上皮间质转化过程中的表达及其意义

目的 探讨波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)在原发性肝癌(HCC)的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学的方法(SP法)分别检测55例HCC癌组织、癌旁组织和20例非肿瘤性正常肝组织中Vimentin及E-cadherin的表达情况,分析它们与HCC临床病理学特征的关系及对患者预后的影响.结果 Vimentin在癌组织中阳性表达率为69.1％,较癌旁组织及正常肝组织表达明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).E-cadherin在癌组织中阳性表达率为27.3％,较癌旁组织及正常肝组织表达明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).Vimentin、E-cadherin二者表达呈负相关关系(r=-0.653,P＜0.05).Vimentin在TNMⅢ～Ⅳ期组、低分化组、肿瘤结节多个组、转移复发组的表达分别高于TNM Ⅰ～Ⅱ期组(x2=7.267,P＜0.05)、中高分化组(x2=4.045,P＜0.05)、肿瘤结节单个组(x2=12.143,P＜0.05)、无转移复发组(x2=7.267,P＜0.05).E-cadherin的表达在肿瘤结节单个组高于肿瘤结节多个组,差异具有统计学意义(x2=6.878,P＜0.05).随访患者表明,Vimenfin阳性表达组患者无病生存率明显低于Vimentin阴性表达组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 Vimentin、E-cadherin参与HCC上皮间质转化过程,Vimentin的高表达、E-cadherin的低表达与HCC的发生、发展密切相关.检测HCC患者Vimentin及E-cadherin的表达水平可协助HCC的诊断及判断预后.     

原发性肝癌中Numb和VEGF的表达及临床意义

目的：探讨Numb和VEGF在原发性肝细胞癌（HCC）中的表达及其意义。
　　方法：免疫组化法检测60例HCC患者癌组织与癌旁组织,以及27例肝外伤与肝血管瘤患者正常肝组织中Numb与VEGF的表达,分析两者表达与HCC患者临床病理因素以及预后的关系。
　　结果：与正常肝组织及癌旁组织比较,HCC组织中Numb阳性表达率明显降低,而VEGF的阳性表达率明显升高（均P<0.05）,且在HCC组织中两者表达呈负相关（r=-0.5248,P=0.01）;Numb与VEGF的表达均与患者TNM分期、Edmondson分级、门脉癌栓及包膜有无有关（均P<0.05）;Numb阴性表达患者的总的生存期明显短于阳性表达者,而VEGF情况则相反（均P<0.05）。
　　结论：在HCC组织中,Numb表达下调,而VEGF表达上调,且两者之间的消长可能与HCC的侵袭性及不良预后密切相关。     

SOCS1与c-myc在人肝细胞癌组织中的表达及相互关系

目的：研究细胞因子信号转导抑制因子1（SOCS1）和原癌基因c-myc在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及二者在HCC中的相互作用。方法：应用免疫组织化学技术检测SOCS1蛋白和c-myc蛋白在41例HCC癌组织、癌旁组织和11例正常肝组织中的表达;采用RT-PCR技术检测上述组织中SOCS1mRNA的表达水平;分析临床、病理资料。结果：HCC癌组织中SOCS1蛋白阳性率和SOCS1mRNA的表达水平明显低于癌旁组织和正常肝组织（P〈0.01）,SOCS1蛋白在低分化HCC癌组织中的阳性率较高分化HCC癌组织明显减低（P〈0.01）。HCC转移组SOCS1蛋白表达阳性率较未转移组低（P〈0.05）。HCC癌组织中c-myc蛋白明显高于癌旁组织和正常肝组织;在HCC癌组织中SOCS1蛋白表达强度与c-myc蛋白表达强度呈负相关（P〈0.01）。结论：SOCS1在HCC癌组织中表达下调,可能通过一系列途径造成c-myc的激活,从而造成肿瘤的发生。     

Cyclin D1在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨Cyclin D1在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测50例HCC组织、20例正常肝组织中Cyclin D1蛋白的表达情况。结果Cyclin D1蛋白在肝癌组织中的阳性率为44．0％,极显著高于正常肝组织（均为阴性表达）（P〈0．01）;阳性表达与肝癌的肝内转移和肝癌的分化程度有关（P〈0．05,P〈0．05）。Cyclin D1的过表达均与病人术后〈3年生存期有关（P〈0．05）。结论Cyclin D1在HCC的发生、发展过程中起着不同程度的作用,检测Cyclin D1对判定HCC预后可提供一定的依据。     

SIPA1基因在肝癌中的表达及其与肝癌预后的关系

目的研究SIPAI（signal-induced proliferation-associated gene 1）基因在肝细胞癌（HCC）中的表达情况及其临床意义。方法采用实时定量PCR检测30例新鲜HCC标本中SIPA1 mRNA相对含量。用免疫组织化学S-P法检测86例石蜡HCC标本和8例正常肝组织中SIPA1的表达情况,研究其与HCC临床病理学资料及预后的关系。结果与癌旁组织比较,在癌组织中SIPA1 mRNA表达下调（t=2.216,P=0.045）。86例HCC中,SIPA1在癌组织的阳性表达率和癌旁组织中阳性表达率分别为43.0%（37/86）和87.2%（75/86）（χ^2=36.96,P〈0.01）。有静脉侵袭的肝癌标本中癌旁组织SIPA1呈低表达（U=647.50,P=0.019）。SIPA1蛋白在癌旁组织中表达存在个体差异,低表达组术后复发率较高（P=0.000）,生存期较短（P=0.006）。结论SIPA1在HCC中可能发挥肿瘤抑制基因的作用,且对抑制HCC的复发转移有重要作用。     

肝细胞癌Period1 表达与预后的关系

目的：探讨Period1在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及意义。 方法：用RT-PCR与Western blot法检测30例HCC组织与其癌旁肝组织及5例正常肝组织中Period1 mRNA与蛋白表达;甲基化特异性PCR检测HCC组织与癌旁肝组织中Period1启动子甲基化水平;免疫组化检测67例HCC组织及其癌旁肝组织石蜡切片中Period1蛋白的表达;分析Period1的表达与HCC患者临床病理特征及预后的关系。 结果：HCC组织Period1 mRNA和蛋白的表达水平均较癌旁肝组织与正常肝组织明显降低（均P<0.05）,而两者在癌旁肝组织与正常肝组织间差异无统计学意义（均P>0.05）;HCC组织Period1启动子甲基化水平较其癌旁肝组织明显增高（均P<0.05）。HCC组织石蜡切片中Period1阳性表达率为47.8%,而癌旁肝组织阳性表达率为83.6%,差异有统计学意义（P<0.05）;Period1表达与HCC分化程度、结节数目、有无静脉浸润有关（均P<0.05）;Period1阳性表达HCC患者中位复时间与中位生存时间均明显短于阳性者（均P<0.05）。 结论：Period1在肝癌中表达下调可能与HCC的发生发展和侵袭转移密切相关;启动子甲基化可能是Period1表达下调的重要机制。     

膀胱上皮癌ΔNp63、p53及ki-67基因表达与预后的相关性研究

目的探讨ΔNp63在膀胱移行细胞癌（transitional cell carcinoma of bladder,TCCB）中作用及联合检测ΔNp63、p53和ki-67与膀胱上皮癌预后的相关性。方法用免疫组化检测56例膀胱移行细胞癌组织ΔNp63、p53和ki-67的表达,分析免疫染色结果与病理分级、分期和预后的关系。结果膀胱移行细胞癌中ΔNp63、p53和ki-67阳性表达率明显高于正常膀胱黏膜,在高级别、浸润性癌组织中的阳性表达率明显高于低级别、浅表性癌组织,各组阳性表达率差异有统计学意义（P〈0.05）;ΔNp63与p53、Ki-67均呈正相关,rs′分别为0.298、0.316,相关性有统计学意义（P〈0.05）。结论ΔNp63可能是TCCB发生和发展的重要促进因素,与膀胱癌的预后密切相关,联合检测ΔNp63、p53和ki-67可以更好地判断TCCB的预后。     

E-钙黏蛋白和nm23-H1在肝细胞性肝癌中的表达及其临床意义

目的探讨E-钙黏蛋白(E-cadherin)和nm23-H1在肝细胞性肝癌(HCC)中的表达及其与肝癌浸润转移之间的关系。方法应用免疫组化S-P技术,检测50例肝癌组织中E-cadherin和nm23-H1的表达,分析与肝癌侵袭转移之间的关系。结果50例肝癌组织中E-cadherin和nm23-H1的表达与HCC的Edmondson分级、侵袭转移能力密切相关,而与患者性别、年龄、肿瘤大小无关。E-cadherin和nm23-H1的表达具有高度协同性。结论E-cadherin和nm23-H1的表达能反映HCC的侵袭转移能力。联合检测两种蛋白在肿瘤组织中的表达,可以更准确判断HCC的恶性程度和生物学行为。     

nm23及E-钙黏连素蛋白表达与原发性肝癌肝移植术后肿瘤复发转移的关系

目的探讨nm23及E-钙黏连素（E—cadherin）蛋白表达与原发性肝癌（肝癌）肝移植术后肿瘤复发转移的关系。方法选取2003年10月至2005年5月在中山大学附属第三医院行肝癌肝移植术的92例患者临床资料和术后病理标本。根据有否发生肿瘤复发（包括肝内复发和肝外转移）分为复发组（37例）和未复发组（55例）。病理标本为两组患者手术切除的肿瘤组织和癌旁肝组织。采用免疫组织化学（免疫组化）方法对组织标本进行检测。比较92例患者的肝癌组织和癌旁肝组织中nm23和E—cadherin的蛋白表达差异;分析nm23和E—cadherin蛋白表达与肝癌患者临床病理特征的关系;比较复发组和未复发组患者的肝癌组织中nm23和E—cadherin蛋白表达的差异。结果92例患者中,肝癌组织nm23蛋白阳性表达49例（53％）,癌旁肝组织则全部表达阳性（100％）,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）;肝癌组织E—cadherin蛋白表达缺失39例（42％）,而癌旁肝组织中有4例（4％）表达缺失,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。肝癌组织中,nm23蛋白表达阴性与肿瘤分化程度、有否门静脉癌栓显著相关（均为P〈0．05）;E—cadherin蛋白表达缺失与术前血清甲胎蛋白（AFP）水平、肿瘤大小及有否门静脉癌栓显著相关（均为P〈0．05）。复发组和未复发组的rim23蛋白表达阳性率分别为32％（12／37）和67％（37／55）,两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。复发组和未复发组的E—cadherin蛋白表达缺失率分别为62％（23／37）和29％（16／55）,两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论肝癌组织中nm23和E—cadherin蛋白的表达对预测肝癌肝移植术后肿瘤复发转移具有重要意义。     

Livin在膀胱移行细胞癌中的表达及其与ki-67的关系

目的研究凋亡抑制蛋白家族（IAP家族）新的凋亡抑制因子livin在膀胱移行细胞癌（BTCC）中的表达及其与肿瘤分级、分期的关系及livin和ki-67在BTCC中表达的关系。方法采用免疫组化SP法对36例BTCC和8例正常膀胱黏膜livin和ki-67的表达进行检测，分析两者在膀胱癌组织和非膀胱癌组织中的表达，livin的表达与BTCC病理学分级、临床分期及与ki-67表达的关系。结果Livin在8例正常膀胱组织中均不表达，而在36例BTCC组织中的阳性表达率为86．1％（P〈0．01）。livin的表达和BTCC的病理分级，临床分期、k-67的表达无明显相关（P〉0．05）。结论细胞凋亡抑制因子livin在BTCC组织中表达上调，提示livin可能通过抑制细胞凋亡，对BTCC的发生发展起重要作用；但是我们的实验表明livin与调控细胞周期，促进细胞增殖无明显相关。Livin在膀胱癌中的高表达，有望成为一种有效、敏感的瘤标，并为BTCC的基因治疗提供新靶点。     

肝细胞肝癌中uPA及vimentin蛋白的表达及意义

目的：探讨uPA及vimentin在肝细胞肝癌（HCC）组织中的表达及其临床病理意义。方法：应用免疫组化法检测HCC及其癌旁组织（88例）与正常肝组织（8例）中uPA及vimentin的表达情况,并分析两者与临床病理特征的关系及两者表达的相关性。结果：在HCC组织中uPA及vimentin蛋白阳性表达率分别为63.6%（56/88）和72.7%（64/88）,两者均明显高于癌旁组织（27.3%和15.9%）和正常肝组织（12.5%和12.5%）（均P<0.0125）;uPA和vimentin在HCC中的表达与门静脉癌栓及肝被膜浸润有关（P<0.05）,且两者在HCC中的表达互呈正相关（r=0.227,P=0.034）。结论：在HCC中,uPA和vimentin的表达呈正相关,且两者的阳性表达与患者不良临床特征有关。

     

β-catenin、E-cadherin和Ki67在小鼠大肠癌中的表达及其意义

目的 :探讨小鼠正常肠黏膜组织与大肠癌组织β-catenin、E-cadherin和Ki67表达情况及其关系。方法:采用氧化偶氮甲烷诱导建立小鼠大肠癌模型;运用SP免疫组织化学方法检测20只正常小鼠肠黏膜组织与20只小鼠大肠癌组织中β-catenin、E-cadherin和Ki67的表达情况,并分析三者表达的相关性。结果:β-catenin在小鼠大肠癌组织中的异常表达率(70%)较正常小鼠肠黏膜组织(5%)显著升高(P0.001);E-cadherin在小鼠大肠癌组织中的阳性率(45%)较正常小鼠肠黏膜组织(95%)显著降低(P0.001);Ki67在小鼠大肠癌组织中的阳性率(80%)较正常小鼠肠黏膜组织(15%)显著升高(P0.001)。小鼠大肠癌组织中Ki67的阳性表达与β-catenin的异常表达呈正相关(P0.001),与E-cadherin的阳性表达呈负相关(P0.001)。结论:E-cadherin低表达、Ki67高表达以及β-catenin异常表达可能在大肠癌的发生发展和转移过程中发挥着重要作用。     

肝癌组织、外周血细胞磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 mRNA表达的意义

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)mRNA表达对肝细胞肝癌(HCC)及其血液微转移的诊断价值。方法参照甲胎蛋白(AFP)mRNA,半定量与巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测41例HCC、41例癌旁组织、52例非瘤肝组织(41例远离癌灶组织与11例正常肝组织)及67例外周血的GPC3表达。结果半定量PCR显示组织与外周血细胞全部存在GPC3 mRNA表达,HCC、癌旁、非瘤肝组织的表达量分别为78.9±35.5、30.6±21.6、23.8±15.5;而AFP mRNA的表达量依次为61.2±32.6、31.5±23.6、21.2±15.9。各基因在HCC与其他组织中的表达量差异具有统计学意义(P<0.01),以各基因在非瘤肝的相对表达量上限(x-+1.96s)为界,HCC中GPC3 mRNA和AFP mRNA的高表达分别占80.5%与63.4%;至少一个基因高表达HCC达总数的92.7%,与AFPmRNA单独检测差异有统计学意义(P<0.01)。临床病理特征分析发现AFP mRNA与HCC分级及血清AFP浓度有关,GPC3 mRNA表达与HCC分级及侵袭性有关。67例外周血GPC3 mRNA的表达量为15.9±9.0,各类组织中GPC3 mRNA表达均强于相应的外周血表达(P<0.01)。外周血GPC3mRNA表达量在HCC组、非HCC组分别为16.1±8.3、15.6±10.2,组间差异无统计学意义;在HCC转移组、HCC无转移组的表达量各为16.0±9.0、16.3±7.7,组间差异无统计学意义。巢式PCR显示,AFP mRNA表达比率在HCC组与非HCC组各为56.1%、23.1%,组间差异有统计学意义(P=0.011);HCC转移组与无明显转移组各为80.9%、30.0%,组间差异有统计学意义(P=0.002)。结论GPC3 mRNA是潜在的HCC组织诊断指标,与AFP mRNA有明显的互补作用,两者联合检测可提高HCC的阳性检出率;外周血存在GPC3 mRNA的广泛表达,但其与HCC的转移复发无关,不能用于HCC微转移的检测。     

E钙粘蛋白、syndecan-1蛋白在肝细胞性肝癌中的表达与肝癌侵袭的关系

目的 探讨E钙粘蛋白与syndecan-1在肝细胞性肝癌中的表达及其与肝癌浸润侵袭之间的关系。方法 应用免疫组织化学ABC法研究了47例肝癌组织中E－钙粘蛋白一syndecan-1蛋白的表达，分析与肝癌浸润之间的关系。结果 肝癌中E－钙粘蛋白与syndecan-1蛋白表达，分别减低了55％，60％，直径大于3cm的肝癌E－钙粘蛋白与syndecan-1蛋白表达减低较小于3cm的肝癌更为显著（P＜0．05）。E－钙粘蛋白表达与肝癌的组织分级无相关性，而syndecan-1蛋白表达与肝癌的组织分级，癌栓有显著的相关性（P＜0．01）。结论 由E－钙粘蛋白与syndecan-1蛋白介导的细胞间粘附作用在肝癌发生发展过程中发挥重要作用，两者结合可以更准确判断肝吕的恶性程度及生物学行为。     

SFPQ在肝细胞癌的表达及其对细胞增殖与细胞周期的影响

目的:探讨脯氨酸、谷氨酰胺剪接因子(SFPQ)在肝细胞癌(HCC)中的表达及作用。方法:采用实时定量PCR及Western blot检测HCC患者的癌组织和对应癌旁组织SFPQ mRNA及蛋白表达。采用TCGA和GEO数据库分析正常肝组织及HCC组织中SFPQ的表达丰度差异;采用TCGA数据库分析SFPQ表达与HCC患者临床分期、病理分级以及患者生存期的关系以及与增殖基因PCNA、Ki-67和周期蛋白CCNE1、CDK2的相关性。观察敲低HCC细胞株HepG2及Hep3B中SFPQ的表达后增殖能力与细胞周期的变化。结果:组织标本分析结果显示,SFPQ mRNA及蛋白表达水平在HCC组织中明显高于癌旁组织(均P0.05)。数据库分析结果显示,HCC组织中SFPQ mRNA表达丰度明显高于正常肝组织,且患者临床分期及病理学分级越高,SFPQ mRNA水平越高,高表达SFPQ的患者的总生存率明显降低,SFPQ mRNA表达与PCNA、Ki-67、CCNE1、CDK2的表达均呈明显正相关(均P0.05)。敲低SFPQ表达后,HepG2及Hep3B细胞的增殖能力明显减弱,并出现明显G1期阻滞(均P0.05)。结论:SFPQ在HCC中表达升高,升高的SFPQ可通过调节HCC细胞周期,促进HCC细胞的增殖,加速肿瘤进展。