结直肠癌肿瘤干细胞研究进展

结直肠癌是消化道常见的恶性肿瘤,在我国其发病率和死亡率呈明显上升趋势。肿瘤干细胞是指肿瘤内具有自我更新能力和形成异质性肿瘤的细胞亚群．是肿瘤耐药、复发、转移的根源。肿瘤干细胞的研究对结直肠癌的诊断、预防及治疗具有重要意义。本文就结直肠癌干细胞的研究热点和最新进展简要综述肿瘤干细胞的定义和起源、肿瘤干细胞表面标志物、维持肿瘤干细胞通路研究进展和肿瘤干细胞的治疗策略以及当前研究面临问题的思考。     

人结直肠癌干细胞休眠与增殖阶段细胞形态学的研究

目的初步研究人结直肠癌干细胞休眠与增殖阶段细胞形态的变化。方法流式细胞仪从新鲜人结直肠癌组织中分选EpCAMhigh／CD44＋／CD133＋细胞亚群,并通过裸鼠（NOD／SCID）成瘤实验鉴定其干细胞特性：采用三维培养,WST．1绘制人结直肠癌干细胞的生长曲线;流式细胞仪测定P27及Ki一67的表达水平,区分人结直肠癌干细胞休眠和增殖时相;细胞免疫荧光显示休眠期与增殖期人结直肠癌干细胞形态的变化。结果EpCAMhigh／CD44＋／CDl33‘细胞亚群在人结直肠癌组织中占1．6％．经NOD／SCID成瘤实验证实为人结直肠癌干细胞。人结直肠癌干细胞生长曲线呈“S”型;前3d生长缓慢,细胞为静止阶段（休眠期）,P27表达水平逐渐增加,Ki．67表达偏低;从第4d开始,细胞进入增殖期,Ki-67表达逐渐增加,P27表达降低。细胞免疫荧光染色显示：休眠期人结直肠癌干细胞圆而大,伪足少;而增殖期细胞伪足增多,呈现增殖和侵袭的状态。结论肿瘤的复发、转移可能与肿瘤干细胞的生长状态发生改变有一定关系;人结直肠癌干细胞增殖期与休眠期相比。呈现出明显增殖和侵袭能力：这为治疗人结直肠癌及其他肿瘤的复发和转移提供了新的切人点。     

结直肠癌转移相关基因的研究现状

结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤,其转移是结直肠癌患者死亡的主要原因。结直肠癌转移机制尚未完全阐明,目前研究表明,转移过程涉及多个相关基因的变化。文中就结直肠癌转移过程中癌基因C—myc、Ras、Her一2,抑癌基因p53、结肠癌中缺失基因（deletedincolorectalcarcinoma,DDC）、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因（phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10, PTEN）、肿瘤转移抑制基因nm23以及其他编码基因,如CD44、基质金属蛋白酶（matrix metalloprofeinases,MMPs）、黏蛋白（mucins,MUC）的研究现状作一综述。     

肿瘤干细胞和肿瘤

肿瘤于细胞（ cancer stem cell,CSC）近几年来成为肿瘤研究的新的热点,尽管越来越多的肿瘤干细胞亚群被鉴定出来,但是肿瘤干细胞的细胞表面标记物并不唯一,这可能是因为肿瘤干细胞的来源不一造成的。肿瘤干细胞在肿瘤迁移中扮演着重要角色。肿瘤干细胞发生上皮细胞间质转化（epithelial -mesenchymal - transition, EMT）后获取较强的迁移能力,随着血液循环在转移灶停留,并与组织细胞和骨髓源间质细胞一同形成适应肿瘤转移灶形成的微环境,最终形成肿瘤转移。     

直肠癌淋巴管生成与转移的研究进展

结直肠癌是胃肠道常见的恶性肿瘤之一,预后较差.大多数结直肠癌在早期即发生淋巴转移,在具备手术条件的患者中淋巴结转移率达50%.因而对直肠癌淋巴转移的机制进行研究是提高结直肠癌治疗效果的关键所在.以往由于缺乏特异性淋巴管标记物使得肿瘤淋巴转移的研究相对滞后,目前肿瘤淋巴管生成是肿瘤转移播散的研究热点,有关肿瘤中是否存在新生淋巴管以及淋巴管生成在肿瘤转移播散中的作用机制已经进行了大量研究,而对有关结直肠癌中淋巴管生成的研究也进行了有益的探索.本文旨在对特异性淋巴管内皮标记物、淋巴管生成因子、与结直肠癌中淋巴管生成有关的研究进展以及结直肠癌抗淋巴管生成治疗的可能前景与治疗策略进行综述.     

结直肠癌腹膜种植转移的危险因素分析

目的 探讨结直肠癌腹膜种植转移的危险因素.方法 回顾性分析2003年1月至2008年12月南方医院普通外科收治的873例结直肠癌患者的临床病理资料,研究结直肠癌腹膜种植转移与临床和病理因素的关系.结果 873例患者中,腹膜种植转移97例（11.1%）.单因素分析显示,患者的年龄（P=0.032）、肿瘤大小（P=0.001）、肿瘤分化程度（P=0.008）、肠壁浸润深度（P=0.000）、淋巴结转移（P=0.000）、术前CEA（P=0.003）和血清糖链抗原19-9（CA19-9）水平（P=0.009）与结直肠癌腹膜种植转移有关.Logistic多因素回归分析显示,肠壁浸润深度、淋巴结转移以及术前CEA和CA19-9水平与结直肠癌腹膜种植转移有关（均P＜0.05）.结论 肠壁浸润深度、淋巴结转移、术前CEA及CA19-9水平是影响结直肠癌腹膜种植转移的独立危险因素.     

结直肠癌血清CEA和CA19-9的表达及临床意义

癌胚抗原（carcino-embryanic antigen,CEA）作为结直肠癌肿瘤标记物,已经被广泛应用于结直肠癌的诊断、治疗及预后监测。糖类抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9,CA19-9）又称为胃肠癌相关抗原。本研究分析血清CEA、CA19-9水平与临床病理特点的关系,为临床应用提供依据。     

COX-2及CCR7的表达与结直肠癌临床病理因素的关系

笔者采用免疫组织化学方法检测80例结直肠癌组织及其40例癌旁组织的COX-2和CCR7的表达，分析其与临床病理学参数的关系，并对癌组织中COX-2与CCR7表达进行相关性分析。结果示，在结直肠癌组织中，COX-2和CCR7在结直肠癌组织中表达率分别为72.5 %和67.5 %，COX-2与CCR7的表达呈正相关（rho=0.571,P<0.05）。两者的表达均与肿瘤的浸润深度、TNM分期、淋巴转移、肿瘤大小有关（均P< 0.05）；CCR7的表达与肿瘤的病理分化、肿瘤部位有关（P<0.05和<0.01）。但两者均与结直肠癌患者的年龄、性别等因素无关（P>0.05）。提示临床上联合检测COX-2和CCR7对结直肠癌转移的预测可能会有所帮助。     

结直肠癌肿瘤标记物的筛选及其表达变化

目的筛选结直肠癌肿瘤标记物,探讨其在术前、术后患者血清中的表达变化。方法用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）技术检测87例结直肠癌、68例结直肠良性病、56例正常人血清中的差异蛋白,进而检测87例结直肠癌术前及术后15d内血清中的差异蛋白,从而筛选出结直肠癌肿瘤标记物。结果筛选出质荷比为5955Da、5972Da的2种蛋白,与结直肠良性病组和正常人组比较,其在结直肠癌患者血清中高表达（P〈0．01）;与结直肠癌术前组比较,术后1d其表达水平明显增高（P〈0．01）,术后4d已经降至术前水平（P〉0．05）;与术后1d组比较,术后4d至15d其表达水平基本处于下降趋势（P〈0．01）,但术后15d仍未降至正常水平（P〈0．01）。结论质荷比为5955Da、5972Da的2种蛋白可作为结直肠癌肿瘤标记物,其在术前、术后15d内血清中的表达有一定的变化规律。     

结直肠癌中CXCL17、CXCL8表达与临床病理特征的关系

探讨结直肠癌组织中趋化因子17(CXCL17)、趋化因子8(CXCL8)表达与临床病理特征的关系。回顾性分析经病理学证实的76例结直肠癌患者的临床资料，收集癌组织和癌旁正常组织标本，采用免疫组化法检测标本中CXCL17、CXCL8蛋白表达。分析结直肠癌患者癌组织中CXCL17、CXCL8蛋白表达与临床病理特征的关系，采用Kendall相关分析CXCL17、CXCL8表达关系。结果显示，结直肠癌组织中CXCL17、CXCL8蛋白阳性表达均高于癌旁正常组织（P<0.05）。结直肠癌组织中CXCL17、CXCL8蛋白表达均与性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤部位等无关（P>0.05），与分化程度、浸润程度、TNM分期、淋巴结转移、远处转移等有关（P<0.05）。Kendall相关分析显示，结直肠癌组织中CXCL17蛋白与CXCL8蛋白表达呈显著正相关（P<0.01）。结果表明结直肠癌组织中CXCL17、CXCL8过表达，且与肿瘤细胞分化程度、浸润程度、TNM分期、淋巴结转移、远处转移相关，CXCL17、CXCL8有望成为结直肠癌靶向治疗新靶点。     

结肠癌干细胞研究进展

随着肿瘤干细胞学说的提出,人们陆续从白血病、乳腺癌、脑肿瘤、肺癌、前列腺癌等多种恶性肿瘤组织中分离出肿瘤干细胞.有学者研究发现CD133+可能为结肠癌干细胞的表面特异性标志,这一观点的提出引起人们对结肠癌干细胞的研究热潮.本文通过结肠癌干细胞在临床耐药、转移及应用中的作用对近年结肠癌干细胞研究进展进行综述.     

右半结肠癌淋巴结转移的相关病理因素分析

目的探讨影响右半结肠癌淋巴结转移的相关病理因素。方法回顾性分析广西医科大学第一附属医院结直肠外科2008年9月至2011年10月行根治性切除的168例右半结肠癌患者病理资料,采用单因素分析和Logistic多因素回归分析方法,研究右半结肠癌淋巴结转移与临床病理因素之间的关系。结果单因素分析显示右半结肠癌淋巴结转移与年龄、性别、肿瘤部位、大体类型、肿瘤直径等因素无关(P>0.05);肿瘤病理类型、分化程度、浸润深度与淋巴结转移有关(P<0.05);Logistic多因素回归分析显示,肿瘤分化程度、浸润深度是影响右半结肠癌淋巴结转移的独立因素(P<0.05)。结论右半结肠癌淋巴结转移与肿瘤病理类型、分化程度、肠壁浸润深度有关,其中肠壁浸润深度是影响淋巴结转移的最重要因素。     

The Colon Cancer Stem Cell Microenvironment Holds Keys to Future Cancer Therapy

Background

Colorectal cancer remains the most common gastrointestinal cancer. While screening combined with effective surgical treatment has reduced its mortality, we still do not have effective means to prevent recurrence nor to treat metastatic disease. What we know about cancer biology has gone through revolutionary changes in recent decades. The advent of the cancer stem cell theory has accelerated our understanding of the cancer cell. However, there is increasing evidence that cancer cells are influenced by their surrounding microenvironment.

Purpose

This review divides the tumor microenvironment into four functional components—the stem cell niche, cancer stroma, immune cells, and vascular endothelia—and examines their individual and collective influence on the growth and metastasis of the colon cancer stem cell. The discussion will highlight the need to fully exploit the tumor microenvironment when designing future prognostic tools and therapies.     

The impact of Aldehyde dehydrogenase 1 expression on prognosis for metastatic colon cancer

Background

Cancer stem cells may be associated with tumor progression and prognosis for colon cancer. We hypothesized that expression of Aldehyde dehydrogenase 1 (ALDH1) would increase with tumor progression and be associated with survival.

Methods

Tissue was obtained from resection specimens for isolation of cancer stem cells. In addition, paraffin blocks from resected colon cancers with normal colon, primary tumor, and lymph node and liver metastasis from 2000 to 2010 were identified and stained with ALDH1.

Results

In in vitro models (adherent and tumor spheres) ALHD1+ cells grew more efficiently than ALDH1− cells. ALDH1 expression was highest in peritumoral crypt cells (0.137 μm², 95% confidence interval [CI] 0.125–0.356) and normal crypts (median 0.091 μm², 95% CI 0.064–0.299) followed by lymph node metastasis (median 0.025 μm², 95% CI 0–0.131) and the primary cancers (median 0.014 μm², 95% CI 0.0123–0.154). Samples were divided into high and low ALDH1 expression. Survival was associated with expression in the primary tumor (9 versus 23 mo, P = 0.0016) expression but not peritumoral tissue (21 versus 20.5 mo, P = 0.32), normal colon (19 versus 27 mo, P = 0.289), or lymph node metastasis (23 versus 21 mo, P = 0.69). On univariate analysis, ALDH1 expression and grade were associated with survival but ages, number of lymph node metastasis, race, or grade were not associated. On multivariate analysis, only ALDH1 status continued to be associated with survival, odds ratio 4.4, and P = 0.011.

Conclusions

ALDH1 is indicative of stemness and is a biomarker marker in colon cancer. Expression did not increase with progression from normal colon to primary tumors and metastasis.     

Inhibition of Liver Metastasis from Orthotopically Implanted Colon Cancer in Nude Mice by Transfection of the TIMP-1 Gene into KM12SM Cells

To determine whether the tissue inhibitor of metalloproteinases 1 (TIMP-1) can modulate in vivo tumor growth and metastasis, we transfected TIMP-1 cDNA into KM12SM human colon carcinoma cells and determined the implanted tumor volume and incidence of liver metastasis in orthotopically implanted colon cancer in nude mice. We also treated the implanted tumors with repeated intraperitoneal injections of recombinant human TIMP-1 (rTIMP-1), and compared the inhibitory efficacy on liver metastasis with that achieved by the TIMP-1 transfectants. The TIMP-1 transfectants had a significantly greater inhibitory effect, in association with TIMP-1 expression, on the growth of the primary tumor and on liver metastasis as compared with the controls. However, the intraperitoneal administration of rTIMP-1 did not decrease the rate of liver metastasis. In situ hybridization demonstrated that TIMP-1 mRNA in the cecal tumors implanted with the highly produced KM12SMT-2 cells with TIMP-1 was mainly expressed by the tumor cells. These results suggest that the increased expression of TIMP-1 in KM12SM cells was responsible for their decreased metastatic potential, and that the endogenous increase in TIMP-1 production by the tumor cells might be more effective for counteracting the matrix metalloproteinases (MMPs) in tumor tissue and for inhibiting liver metastasis from colon cancer than the exogenous administration of TIMPs. Received: May 8, 2000 / Accepted: March 6, 2001     

结肠癌根治术后早期复发转移的相关因素分析及治疗

目的：探讨结肠癌术后复发转移的相关因素及治疗。方法：回顾分析1998年1月—2005年12月收治的54例行结肠癌根治术后复发转移患者的临床病理资料。结果：单因素分析显示,年龄、性别、肿瘤大体分型、肿瘤部位、浸润深度、淋巴转移、Dukes分期、手术及术后是否化疗与早期复发转移相关（P〈0.05）;多因素分析发现,年龄、Dukes分期、分化程度、肿瘤组织类型、淋巴结转移、术后化疗是影响结肠癌根治术后早期复发转移的重要因素（P〈0.05）。结论：年龄、组织学类型、分化程度、肿瘤分期、淋巴结转移及术后化疗是影响结肠癌术后早期复发的重要危险因素;对于复发转移的结肠癌患者,再次手术联合术后化疗能获得良好效果。     

水通道蛋白8对结肠癌细胞侵袭转移的影响

目的探讨水通道蛋白8(aquaporin 8,AQP8)与结肠癌细胞侵袭转移的关系。方法应用免疫组组织化学链霉卵白素-过氧化物酶连结(SP)法检查18例发生转移的结肠癌、15例未发生转移的结肠癌原发肿瘤组织中AQP8的表达水平差异;结肠癌细胞系Caco-2细胞中过表达AQP8后聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测上皮细胞间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关蛋白(钙黏蛋白和波形蛋白);Transwell侵袭实验检测过表达AQP8后细胞的侵袭能力,定量分析穿膜细胞数量。结果 AQP8在发生转移的结肠癌组织中高表达;AQP8能促进EMT的发生,细胞表型由上皮细胞向间质细胞转化;Transwell实验显示,过表达AQP8后肿瘤细胞穿膜数为88.0±7.2,显著高于对照组(51.6±4.0;P0.01)。结论 AQP8通过促进EMT的发生,促进结肠癌细胞侵袭转移。     

Targeting the osteosarcoma cancer stem cell

Osteosarcoma is the most common type of solid bone cancer and the second leading cause of cancer-related death in pediatric patients. Many patients are not cured by the current osteosarcoma therapy consisting of combination chemotherapy along with surgery and thus new treatments are urgently needed. In the last decade, cancer stem cells have been identified in many tumors such as leukemia, brain, breast, head and neck, colon, skin, pancreatic, and prostate cancers and these cells are proposed to play major roles in drug resistance, tumor recurrence, and metastasis. Recent studies have shown evidence that osteosarcoma also possesses cancer stem cells. This review summarizes the current knowledge about the osteosarcoma cancer stem cell including the methods used for its isolation, its properties, and its potential as a new target for osteosarcoma treatment.     

Ⅱ-Ⅲ期结肠癌根治术后复发危险因素分析及其列线图预测模型的应用价值

目的探讨Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发危险因素及其列线图预测模型的应用价值。方法采用回顾性病例对照研究方法。收集2013年1月至2016年6月西安交通大学第一附属医院收治的228例行根治性切除术治疗Ⅱ~Ⅲ期结肠癌病人的临床病理资料;男118例,女110例;中位年龄为62岁,年龄范围为25~87岁。所有病人行开腹或腹腔镜辅助结肠癌根治性切除术。观察指标:(1)术后复发情况。(2)影响Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发的危险因素分析。(3)Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发列线图预测模型的构建及评价。采用门诊或电话方式进行随访,了解病人术后3年复发情况。随访时间截至2019年6月。偏态分布的计量资料以M(范围)表示。计数资料以绝对数表示,组间比较采用Pearsonχ2检验或Fisher确切概率法。多因素分析采用Logistic逐步回归分析。将独立危险因素引入R 3.6.1软件,构建列线图预测模型。绘制受试者工作特征曲线(ROC),以曲线下面积(AUC)评价列线图预测模型的区分度。使用R软件绘制校准度曲线图评价列线图预测模型的一致性。结果(1)术后复发情况:228例病人中,53例术后复发,其中局部复发19例,远处转移34例。34例远处转移病人中,肝转移14例、肺转移7例、脑转移4例、多发转移及其他部位单发转移9例。53例病人术后复发时间为12个月(6~19个月)。(2)影响Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发的危险因素分析:单因素分析结果为肠梗阻、术前癌胚抗原(CEA)、腹腔积液、血管侵犯是影响Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发的相关因素(χ²=4.463、13.622、10.914、5.911,P<0.05)。病理学N分期是影响Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发的相关因素(P<0.05)。多因素分析结果显示:术前CEA>5μg/L、腹腔积液、血管侵犯、病理学N分期为N1期或N2期是影响Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发的独立危险因素(优势比=3.129,3.071,7.634,3.439,15.467,95%可信区间为1.328~7.373,1.047~9.007,1.103~52.824,1.422~8.319,3.498~68.397,P<0.05)。(3)Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发列线图预测模型的构建及评价:根据多因素分析结果,将术前CEA、腹腔积液、血管侵犯及病理学N分期引入R 3.6.1软件,构建Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发的列线图预测模型。术前CEA>5μg/L的列线图评分为41.7分,腹腔积液为41.0分,血管侵犯为74.2分,病理学N分期N1期为45.1分、N2期为100.0分,各项危险因素不同取值得分总和对应术后复发概率。绘制ROC评价列线图预测Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发的能力,其AUC为0.805(95%可信区间为0.737~0.873,P<0.05)。校准曲线图显示Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后列线图模型预测复发概率与实际复发概率具有较好一致性。结论术前CEA>5μg/L、腹腔积液、血管侵犯、病理学N分期为N1或N2期是Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发的独立危险因素;以此构建列线图预测模型有助于预测Ⅱ~Ⅲ期结肠癌根治术后复发风险。