口腔扁平苔藓外周血中辅助性T细胞/调节性T细胞平衡与临床特征相关性分析

目的 了解口腔扁平苔藓（OLP）患者外周血中辅助性T细胞17（Th17）与调节性T细胞（Treg）的平衡变化,探讨它们在OLP发病机制中的作用及意义。方法 选取17例正常组和33例OLP患者（网纹型15例,糜烂型18例）的外周血,应用流式细胞术（FCM）检测Th17、Treg细胞的表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测它们的转录因子维甲酸相关孤核受体γt（RORγt）和叉头状转录因子3（Foxp3）mRNA的表达。结果 OLP外周血中Th17、Treg细胞及RORγt、Foxp3 mRNA表达均升高（P<0.05）,但Treg细胞和Foxp3 mRNA表达在OLP两型间差异无统计学意义。Th17/Treg比值在OLP中升高（P<0.05）,其中糜烂型OLP显著高于正常组及网纹型OLP（P<0.01）,但网纹型OLP与正常组相比差异无统计学意义。Spearman相关分析显示Th17细胞和Th17/Treg比值与体征计分、RAE计分存在正相关关系（r=0.66,P=0.00;r=0.66,P=0.00;r=0.52,P=0.00;r=0.50,P=0.00）;同时Th17细胞与Treg细胞也存在正相关关系（r=0.39,P=0.03）。结论 OLP外周血中Th17和Treg细胞以及它们的比例均增高,Th17/Treg失衡在糜烂型OLP的发病过程中起了一定作用。     

口腔扁平苔藓患者外周血调节性T细胞水平的变化

目的:研究口腔扁平苔藓(OLP)患者外周血调节性T细胞(Treg)水平的改变.方法:收集口腔扁平苔藓(普通型)患者和健康人外周血.采用流式细胞术分析其中CD4+ CD25+T细胞、CD4+ CD25highT细胞、CD4+ Foxp3+ T细胞、CD4+CD25+ Foxp3+ T细胞比例的改变.结果:OLP患者外周血中CD4+ CD25high T 细胞、CD4+ Foxp3+ T细胞水平较正常对照组明显升高(P<0.05);CD4+ CD25hight细胞与CD4+ Foxp3+ T细胞水平存在正相关性(r=0.349,P<0.05),CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞与CD4+ Foxp3+ T细胞水平存在明显正相关性(r:0.802,P<0.01).结论:OLP患者外周血调节性T细胞水平发生了改变.     

实验性牙周炎大鼠体内外周血及牙周组织中Th17/Treg的检测

目的初步探讨实验性牙周炎大鼠外周血及炎症牙周组织中辅助性T细胞17（Th17）和调节性T细胞（Treg）的表达。 方法采用丝线结扎并牙龈卟啉单胞菌菌液涂抹法建立SD大鼠牙周炎模型,采集外周血、龈沟液以及颌骨样本。体视显微镜及苏木精-伊红染色法观察牙周组织病理改变,流式细胞术检测外周血Th17细胞与Treg细胞的比例,酶联免疫吸附法检测外周血及龈沟液中白细胞介素17（IL-17）、IL-10、转化生长因子β（TGF-β）表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）法检测牙周组织中RORγt、Foxp3 mRNA的表达。应用SPSS 22.0软件独立样本t检验及方差分析对数据进行统计学分析。 结果实验大鼠牙周组织病理改变符合牙周炎病理改变特征,牙槽骨吸收明显。实验组外周血Th17（F=30.88,P=0.00）、Treg细胞（F=147.03,P=0.00）比例以及Th17/Treg比率较对照组均显著上升（F=219.53,P=0.00）;实验组牙周组织中RORγt（F=35.61,P=0.04）和Foxp3 mRNA（F=216.60,P=0.01）表达较对照组表达显著上升;RORγt/Foxp3 mRNA比率较对照组升高,但差异无统计学意义（F=0.63,P=0.44）;实验组外周血血清中IL-10浓度较对照组显著上升（F=6.41,P=0.02）,而IL-17（F=0.08,P=0.78）、TGF-β（F=3.48,P=0.06）浓度与对照组差异无统计学意义;实验组龈沟液中IL-17（F=9.03,P=0.01）较对照组显著上升;IL-10（F=5.85,P=0.08）及TGF-β含量（F=9.28,P=0.06）含量较对照组升高,但差异无统计学意义。 结论实验性牙周炎大鼠外周血及牙周炎症组织中Th17与Treg表达均显著上调,可能与牙周炎症组织病理改变以及相关全身系统性疾病存在相关性。     

调节性T细胞和Th17细胞在OLP中的表达

目的：通过观察调节性T细胞（regulatory Tcells,Treg）和Thl7细胞（helper Tcells17,Th17）在口腔扁平苔藓（OLP）组织中的表达情况,探讨其在OLP发生发展过程中的变化。方法：应用免疫组织化学双标记技术检测35例OLP患者和19例对照组口腔黏膜组织中CD25＋Foxp3＋、CD4＋IL-17＋细胞的表达。结果：OLP组病损组织中有大量CD25＋Foxp3＋细胞浸润,较对照组显著增多,两者差异非常显著（P〈0．01）。CD4＋IL-17＋细胞在OLP组织中的表达较正常口腔黏膜组织有增加趋势,但差异无统计学意义（P〉0．05）。经进一步统计学分析,CD25＋Foxp3＋细胞和CD4＋IL-17＋细胞数量改变在OLP组织中表达呈正相关（P〈0．05）。结论：Treg细胞的数量在OLP组织中增多,Thl7细胞可能协同Treg细胞,在OLP发生发展过程中发挥了一定的作用。     

牙周炎不同阶段Th17/Treg细胞平衡变化初探

目的 建立实验性大鼠牙周炎模型,观察外周血及牙周组织Th17/Treg细胞平衡在牙周炎不同阶段的变化以及牙槽骨高度变化,为探寻用于研究牙周炎正畸牙齿移动的动物模型提供参考。方法 32只SD雄性大鼠随机分为3个实验组(牙周炎A组、牙周炎B组和牙周炎C组,每组8只)和1个对照组(8只)。实验组采用牙颈部丝线结扎并局部注射LPS的方法建立实验性牙周炎模型后,牙周炎A组处死,采用流式细胞仪检测外周血Th17细胞、Treg细胞比例变化。免疫组化检测牙周组织ROR-γt、Foxp3表达。实时定量PCR检测牙龈组织ROR-γt mRNA、Foxp3 mRNA的表达。牙周炎B组和C组去除局部刺激并行牙周洁治,分别于术后第7、14天进行牙周检查,并行上述流式细胞等检测。结果 牙周炎A、B及C组外周血Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg细胞比例及牙龈组织ROR-γt mRNA、Foxp3 mRNA的表达均较对照组明显升高( P <0.05)。牙周炎B组和C组Th17细胞、Th17/Treg细胞比例及牙龈组织ROR-γt mRNA的表达较牙周炎A组明显降低( P <0.05),但Treg细胞及Foxp3 mRNA表达较牙周炎A组明显升高( P <0.05)。牙周炎B组和C组相比,Th17细胞、Treg细胞及Th17/Treg细胞比例差异无统计学意义( P >0.05)。牙周炎A组、B组、C组牙槽嵴顶距釉牙骨质界距离均较对照组明显增加( P <0.05),但三组间差异无统计学意义( P >0.05)。结论 Th17、Treg细胞及Th17/Treg细胞平衡参与不同阶段牙周炎的免疫调控。局部炎症因素去除后,大鼠牙周炎病变稳定,可以尝试作为研究牙周炎正畸牙齿移动的动物模型。     

Treg与IL-17在复发性口腔溃疡中表达的相关性研究

目的:探讨Treg细胞和IL-17在复发性口腔溃疡(RAU)发病机制中的作用。方法:采用流式细胞术检测复发性口腔溃疡(n=21)和健康人(n=21)外周血中调节性T细胞比例的变化,采用流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+Treg在T淋巴细胞中的比例,ELISA检测外周血IL-17水平的变化。结果:复发性口腔溃疡的溃疡期CD4+CD25+Foxp3+Treg水平低于对照组,而IL-17的表达则高于对照组,CD4+CD25+Foxp3+Treg的比例和IL-17的表达呈负相关(r=-0.582,P0.05)。结论:调节性T细胞和IL-17在RAU患者的外周血中的表达异常,可能在RAU的发生发展中发挥了一定的作用。     

调节性T细胞和白介素15在口腔扁平苔藓中的表达及意义

目的:研究外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg细胞)和白介素15 (IL-15)的表达在口腔扁平苔藓(OLP)发病机制中的作用.方法:采用免疫荧光染色技术,经流式细胞仪检测36例口腔扁平苔藓患者和20例正常人外周血Treg表达水平.应用ELISA技术检测外周血IL-15的表达水平,采用SPSS16.0软件包对其表达差异进行统计学分析.结果:口腔扁平苔藓患者外周血CD4+CD25+Foxp3+ Treg细胞数量较正常组显著上升,IL-15表达水平也显著高于正常组,但是口腔扁平苔藓糜烂型与非糜烂型之间的差异无显著性.Treg的表达与IL-15的水平呈正相关(P＜0.05).结论:Treg和IL-15的表达上升可能是OLP的发病机制之一.     

口腔扁平苔藓中T淋巴细胞亚群的研究进展

口腔扁平苔藓(OLP)是一种发生于口腔黏膜的慢性自身免疫性疾病,可伴有皮肤、生殖道黏膜,指甲以及毛发的病损。其组织病理学特征是上皮下淋巴细胞浸润带的形成、基膜的断裂和基底细胞液化变性。本文就CD4+/CD8+T细胞与OLP,记忆T细胞/原始T细胞与OLP,Th1、Th2、Th9、Th17细胞与OLP,调节性T细胞与OL...     

转化生长因子β受体在口腔扁平苔藓CD8+T细胞中的表达

目的 研究转化生长因子β受体(transforming growth factor-β receptor,TGF-βR)在口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)组织中CD8+T细胞中的表达,探讨TGF-βR在OLP发病中的作用.方法 采用免疫组化双标记法检测28例OLP组织中CD8+T细胞TGF-βR Ⅰ和TGF-βR Ⅱ蛋白的表达.以10例临床正常口腔黏膜(normal oral mucosa,NOM)为对照组.结果 OLP组织中CD8+及TGF-βR Ⅰ、CD8+及TGF-βR Ⅱ双标记细胞的阳性率分别为(8.82±9.98)%、(1.11±2.94)%.NOM组织中双标记细胞均为零.OLP组CD8+T细胞中TGF-βRⅡ表达与NOM组相比差异无统计学意义(P＞0.05),TGF-βR Ⅰ与NOM组相比表达增强.结论 提示OLP组织CD8+T细胞存在TGF-β信号传导异常.这可能是CD8+T细胞缺乏有效抑制、致使OLP慢性炎性反应长期持续的因素之一.     

转录因子RORγτ和FOXP3在口腔扁平苔藓病损组织中的表达及意义

目的:口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)是一种发生于口腔黏膜的T淋巴细胞介导的自身免疫性疾病。辅助性T细胞(helper T lymphocytes, Th)在OLP的发病过程中具有重要作用,本研究旨在进一步探索OLP患者局部病损组织中辅助性T细胞亚群Th17细胞和Treg细胞的作用。方法:纳入43例OLP患者和13例健康志愿者。采用实时定量PCR法检测局部病损组织中Th17和Treg细胞的特征性转录因子RORγτ和FOXP3的表达,采用GraphPad Prism 5 软件对其表达差异进行统计学分析。结果:OLP局部病损组织中转录因子RORγτ和FOXP3的表达显著高于正常黏膜组织,而且均与OLP的临床分型密切相关。萎缩糜烂型OLP组病损组织中RORγτ/FOXP3比值显著高于网状型OLP组和健康对照组,而网状型OLP组的RORγτ/FOXP3比值虽然高于对照组,但差异无显著性。结论:Th17细胞和Treg细胞均参与OLP的局部免疫反应;同时,Th17/Treg失衡也参与了重症型OLP的致病过程,且表现为Th17细胞优势。     

慢性牙周炎伴冠心病患者Th17/Treg细胞平衡的临床意义

目的探讨慢性牙周炎伴冠心病患者外周血中辅助性T细胞17（Th17）、调节性T细胞（Treg）及Th17/Treg细胞平衡表达水平及临床意义。 方法本研究采用2 × 2析因设计,根据冠状动脉造影结果及牙周炎诊断标准,收集2019年3—12月就诊于新疆维吾尔自治区人民医院心内科及门诊口腔科患者113例研究对象,其中健康对照组28例、单纯慢性牙周炎组26例、单纯冠心病组27例和冠心病合并慢性牙周炎组32例。流式细胞术检测外周血Th17、Treg细胞比例,计算Th17/Treg细胞比值。采用方差分析比较各组细胞比例,2 × 2析因分析探讨牙周炎和冠心病对Th17/Treg细胞平衡的交互作用。 结果与健康对照组、慢性牙周炎组及冠心病组相比,冠心病合并慢性牙周炎组Th17细胞比例[（1.4 ± 0.6）%]显著升高,差异有统计学意义（F = 18.40,P<0.001）。与健康对照组[（8.73 ± 2.70）%]相比,冠心病合并慢性牙周炎组Treg细胞比例[（6.26 ± 2.51）%]显著降低,差异有统计学意义（F = 6.29,P = 0.001）。Th17/Treg比值在牙周炎伴冠心病组[0.221（0.317）]与健康对照组[0.055（0.054）]和慢性牙周炎组[0.119（0.115）]比较显著升高,差异有统计学意义（χ² = 40.25,P<0.001）,存在Th17/Treg失衡;析因分析表明,牙周炎与冠心病对Treg细胞水平存在交互效应（F = 3.91,P = 0.041）。 结论牙周炎伴冠心病患者存在Th17/Treg比例失衡,且向Th17细胞偏移,表明Th17/Treg细胞平衡可能参与牙周炎伴冠心病的发生、发展。     

RORγT在人根尖肉芽肿和根尖囊肿中的表达及意义

目的:通过免疫组织化学方法对Th17细胞的特异性标记维A酸相关孤核受体γT(RORγT)进行检测,以阐明Th17细胞在人慢性根尖周病损中的表达及意义。方法:收集安徽医科大学口腔医学院口腔颌面外科经根尖手术切除的根尖囊肿18例,根尖肉芽肿22例作为实验组。收集埋伏阻生智牙拔除时需凿骨患者的健康牙槽骨5例作为正常对照组。对样本中RORγT蛋白表达水平进行免疫组织化学检测,同时检测白细胞介素(interleukin,IL) 17的蛋白表达水平。根据病变类型 (根尖肉芽肿、根尖囊肿、正常对照组) 和炎症浸润程度(轻度、中度、重度、正常对照组),分析RORγT和IL-17的蛋白表达水平。采用SPSS 17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:RORγT表达于所有根尖周炎病损组织中,并显著高于正常对照组 (P<0.05),正常对照组中未检测到RORγT的表达;RORγT在轻度、中度和重度炎症细胞浸润中的表达水平均显著高于正常对照组 (P<0.05);RORγT和IL-17的蛋白表达水平在根尖肉芽肿(r=0.935,P<0.05)和根尖囊肿(r=0.803,P<0.05)中呈正相关。结论:RORγT在根尖肉芽肿和根尖囊肿中的表达量显著高于正常对照组,表明Th17细胞可能存在于根尖周病变中。     

辅助性T17细胞在牙周炎小鼠中的免疫状态研究

目的 研究辅助性T（Th）17细胞在牙周炎小鼠中的免疫状态。方法 将7周龄C57BL/6雌性小鼠随机分为牙周炎组和对照组,每组4只。牙周炎组采用口腔涂抹牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis）的方法建立牙周炎动物模型。对照组涂抹PBS液。在涂抹结束后的第4周取材,流式细胞仪检测CD4+维甲酸相关核孤儿受体（ROR）γτ+（Th17）细胞;酶联免疫吸附（ELISA）检测Th17细胞相关的细胞因子白细胞介素（IL）-17A的蛋白表达。结果 牙周炎小鼠牙龈组织、颈部淋巴结和外周血中CD4+ RORγτ+（Th17）细胞在总CD4+ T细胞中的比例和细胞数量显著高于对照组（P<0.01）。与对照组相比,牙周炎组IL-17A的表达增加（P<0.05）。结论 在牙周炎的发生发展中,Th17细胞介导的细胞免疫应答增强,牙龈组织、颈部淋巴结和外周血可能是Th17细胞介导免疫应答的主要场所。     

Role of distinct CD4+ T helper subset in pathogenesis of oral lichen planus

Oral lichen planus (OLP) is one of the most common chronic inflammatory oral mucosal diseases with T‐cell‐mediated immune pathogenesis. In subepithelial and lamina propria of OLP local lesions, the presence of CD4⁺ T helper (CD4⁺ Th) cells appeared as the major lymphocytes. These CD4⁺ T lymphocytes can differentiate into distinct Th cell types such as Th1, Th2, Treg, Th17, Th22, Th9, and Tfh within the context of certain cytokines environment. Growing evidence indicated that Th1/Th2 imbalance may greatly participate into the cytokine network of OLP immunopathology. In addition, Th1/Th2 imbalance can be regulated by the Treg subset and also greatly influenced by the emerging novel CD4⁺ Th subset Th17. Furthermore, the presence of novel subsets Th22, Th9 and Tfh in OLP patients is yet to be clarified. All these Th subsets and their specific cytokines may play a critical role in determining the character, extent and duration of immune responses in OLP pathogenesis. Therefore, we review the roles of distinct CD4⁺ Th subsets and their signature cytokines in determining disease severity and susceptibility of OLP and also reveal the novel therapeutic strategies based on T lymphocytes subsets in OLP treatment.     

口腔扁平苔藓固有层淋巴细胞中Fas及Fas配体的表达变化

目的 检测Fas及Fas配体(Fas ligand,FasL)在口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)固有层淋巴细胞中的蛋白表达,探讨Fas、FasL和活化诱导的细胞死亡(activation-induced cell death,AICD)与OLP发病的关系.方法 采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法检测31例OLP和10例正常口腔黏膜(normal oral mucosa,NOM)中淋巴细胞凋亡情况;分别使用免疫组化法检测组织总淋巴细胞及CD8~+、CD4~+T细胞Fas、FasL的表达.结果 OLP与NOM固有层淋巴细胞凋亡率[分别为(1.9±1.8)%、(11.5±9.0)%]差异有统计学意义(P=0.013).OLP淋巴细胞Fas、FasL表达与NOM组相比明显增强[阳性表达率分别为52%(16/31)、71%(22/31),P值分别为0.005、0.000].OLP中CD8~+与Fas~+细胞双阳性表达率为10%,与NOM组相比无明显升高(P=0.313),而CD8~+与FasL~+细胞双阳性表达率[58%(3/31)]显著升高(P=0.002).CD4~+与Fas~+细胞双阳性表达率为35%(11/31),较NOM组显著升高(P=0.031),其中网纹型的表达明显升高(阳性表达为8/19,P=0.019),但糜烂、萎缩型的表达无显著升高(阳性表达为3/12,P=0.097).CD4~+与FasL~+表达率为16%(5/31),与NOM组相比无明显增强(P=0.182).结论 OLP淋巴细胞凋亡低下;OLP中T细胞亚群Fas、FasL表达不均衡,CD8~+细胞和萎缩、糜烂型OLP中CD4~+细胞可能逃逸AICD,与炎症的持续和进展有关;网纹型OLP中部分CD4~+T细胞可能经历AICD.