一氧化氮与唾液腺疾病

一氧化氮(nitric oxide,NO)是气体信号分子,体内合成NO的酶为一氧化氮合成酶(nitric oxide synthesase,NOS)。NO参与血压和血流调节,作为中枢和外周神经系统的神经介质,参与宿主防御反应和血管生成,并在许多炎性疾病和自身免疫性疾病中发挥重要作用。我们就NO在调节唾液腺分泌及在唾液腺疾病中的作用作一综述。 1.内源性NO对唾液腺分泌的正常调节作用 腺体内的NO有多种来源,可由腺周神经纤维或血管组织释放,或经β—肾上腺素受体刺激后由腺泡细胞合成。NO作为一种气体信号     

一氧化氮在肿瘤淋巴管生成中的作用

<正>一氧化氮(nitric oxide,NO)是体内一种信使分子,不仅调节淋巴系统生理功能,且参与肿瘤淋巴管生成及肿瘤淋巴转移的调控。深入研究NO与肿瘤淋     

白细胞介素1对髁突软骨细胞NO合成及诱导型NO合酶表达的影响

目的：观察IL－1对髁突软骨细胞一氧化氮（nitric oxide,NO)合成及诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响。方法：新生的日本大耳白兔,经机械分离及胰蛋白酶、胶原酶联合消化获得MCC细胞。取第2代软骨细胞,培养过程于培养液中加入不同浓度（0．1－100．0μg/L）的IL－1,采用Griess重氮化反应及原位杂交方法检测一氧化氮合成及一氧化氮合酶的表达。结果：IL－1在0．1－100．0μg/L浓度范围内,呈剂量－效应关系促进髁突软骨细胞合成NO,与对照组比较差异有显著性（P＜0．05）。原位杂交显示,正常软骨细胞仅有轻度iNOS表达,但在IL－1作用后各组细胞均出现不同程度地表达增强。结论：IL－1通过上调iNOS的表达,促进了NO的生成从而达到抑制髁突软骨细胞增殖,诱导细胞凋亡的发生。     

涎腺腺样囊性癌中NOS和VEGF的表达与血管生成及临床病理因素的关系

目的：研究血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、诱导型一氧化氮合酶（induciblenitric oxide synthase,iNOS）和内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）在涎腺腺样囊性癌（salivaryadenoid cystic carcinoma,SACC）中表达的相关性;探讨三者与SACC血管生成和临床病理特征的关系;研究一氧化氮（nitric oxide,NO）和VEGF的相互作用及NO在VEGF促肿瘤生长中的作用机制。方法：应用免疫组织化学方法检测32例SACC手术切除标本VEGF、iNOS和eNOS的表达,CD34血管内皮细胞特异性染色计数肿瘤微血管密度（microvesseldensity,MVD）。结果：①20例SACC组织表达VEGF,22例表达iNOS,25例表达eNOS;②VEGF与iNOS的表达正相关,与eNOS的表达无相关;③VEGF、iNOS的表达与涎腺腺样囊性癌MVD呈正相关,eNOS的表达与涎腺腺样囊性癌MVD的差异无显著性意义;④VEGF的表达与SACC病理类型、淋巴结转移、肿瘤部位及临床分期密切相关;iNOS的表达与病理类型、肿瘤部位及临床分期密切相关;与淋巴结转移未见相关。eNOS表达与以上因素均无关。结论：①iNOS对VEGF的生成和发挥作用的过程有重要影响;②MVD随着VEGF和iNOS表达的增强而增加,说明两者对SACC血管生成具有促进作用.     

L-硝基精氨酸对大鼠创伤性面瘫恢复的影响

目的 研究组成型一氧化氮合酶(constitutive nitric oxide synthase，cNOS)抑制剂L—硝基精氨酸(L—N^G nitro arginine，L—NNA)对大鼠创伤性面瘫恢复的影响及面神经核内cNOS、小胶质细胞标志物(OX42)表达的变化。方法 大鼠腹膜内给予L—NNA，在伤后各时间点观察面瘫的恢复，并观察面神经核内cNOS、OX42阳性神经元的变化。结果 L—NNA给药可显著延缓创伤性面瘫的恢复，其面神经核内cNOS免疫反应明显受到抑制；而OX42免疫反应明显提高。结论 内源性一氧化氮(nitric oxide，NO)介质在创伤性面瘫模型中具有重要的介质作用。     

离心作用下人牙周膜细胞内诱导型一氧化氮合酶和胱硫醚分解酶的表达

目的研究在离心力作用下人牙周膜细胞内的诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）和硫化氢合酶胱硫醚分解酶（cystathionine-γ-lyase,CSE）的表达变化。方法采用组织块一酶消化联合法培养人牙周膜细胞,对细胞施加离心力（167g）,SABC法染色及胞浆透光度检测iNOS和CSE在10、30、60、90、120和240min不同加力时间点的表达变化。结果正常人牙周膜细胞内几乎无iNOS和CSE表达;加力10min,iNOS和CSE有表达（Pd0．01）;之后两种酶表达逐渐加强,加力60min,iNOS和CSE表达达到高峰（P〈0．01）;之后逐渐减弱,加力240min,iNOS和CSE恢复到基础水平。结论离心力可诱导人牙周膜细胞内iNOS和CSE的表达短暂性升高,提示一氧化氮（NO）和硫化氢（Hzs）可能参与了牙周组织改建中的力学信号转导过程。     

涎腺腺样囊性癌COX-2表达与肿瘤血管生成的研究

目的：探讨环氧化酶-2（Cycloxygenase-2,COX-2）表达与涎腺腺样囊性癌（salivary adenoid cystic carcino-ma,SACC）血管生成的关系。方法：免疫组化法检测SACC中COX-2、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达,并测定肿瘤微血管密度（microvessel density,MVD）。结果：SACC中COX-2表达与VEGF、iNOS表达密切相关（P〈0.05,P〈0.01）。SACC中COX-2表达阳性组和阴性组MVD有显著差异（P〈0.01）.结论：SACC中COX-2表达和肿瘤血管生成有关,iNOS和VEGF可能参与COX-2对肿瘤血管生成的促进作用。     

金黄地鼠颊囊黏膜癌变过程中iNOS的表达与Bcl-2的关系

目的：观察金黄地鼠颊囊黏膜癌变过程中诱导性一氧化氮（inducible nitric oxide synthase，iNOS）的表达与凋亡相关蛋白Bcl-2的关系。方法：6—8周龄金黄地鼠72只，随机分为实验组（60只）和空白对照组（12只），空白对照组地鼠不做任何处理．实验组地鼠用0．5％的二甲基苯丙蒽（dimethyl-benzanthrance，DMBA）丙酮溶液诱导生成颊囊黏膜癌．并在黏膜癌变的不同阶段检测组织中iNOS和Bcl-2的表达。结果：正常地鼠颊囊黏膜组织中未见iNOS阳性表达．组织中iNOS、Bcl-2的表达强度在颊囊黏膜癌变过程中均呈上升趋势。鳞癌组织中iNOS的表达较单纯增生组织显著增强（P〈0．011；鳞癌组织中Bcl-2的表达强度明显高于轻度上皮异常增生组（P〈0．05），但与重度和中度上皮异常增生组之间无显著性差异（P〉0．05）；Bcl-2的表达强度随iNOS表达强度的增强呈现先升后降的复杂变化。结论：一氧化氮参与了颊囊黏膜鳞癌的发生、发展，并可能通过Bcl-2途径调节肿瘤细胞的凋亡。     

偏侧咀嚼对大鼠TMJ滑膜iNOS表达影响的研究

目的：研究偏侧咀嚼对大鼠颞下颌关节（TMJ）滑膜诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）表达的影响。方法：30只大白鼠随机分为6组,实验1.2.3组,对照1.2.3组,每组5只。实验组间断磨除右侧上、下颌磨牙牙冠至龈下,对照组不做处理,饲养条件相同。分别于实验后4周、10周、16周末各处死实验组与对照组各1组动物,取其双侧TMJ切片免疫组化实验,与对照组比较。结果：实验1、2、3组双侧颞下颌关节滑膜iNOS表达增强。结论：偏侧咀嚼可引起颞下颌关节滑膜损伤,iNOS参与了其病理过程。     

硫化氢在正畸牙牙周组织改建中作用的大鼠实验研究

目的 观察硫化氢（hydrogen sulfide,H2S）对大鼠正畸牙牙周组织改建的影响,并与一氧化氮（nitric oxide,NO）对比,初步探讨其在改建过程中的作用及机制.方法 利用45只雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠建立正畸牙移动模型,动物随机分为三组：阴性对照组（A组）局部注射无菌磷酸缓冲盐溶液（phosphate-buffered saline,PBS）;实验组（B组）局部注射40 mg/ml DL-炔丙基甘氨酸（DL-propargylglycine,PPG）;阳性对照组（C组）注射相同浓度NG-硝基精氨酸甲酯（NG-Nitro-L-arginineMethylEster,L-NAME）.于加力第7,14,21天分批处死大鼠,制作切片.应用抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase,TRAP）染色计数破骨细胞数,链霉亲和素-生物素复合物（strept avidin-biotin complex,SABC）染色检测胱硫醚-γ-裂解酶（eystathionine γ-lyase,CSE）及诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthases,iNOS）阳性表达的平均光密度值.结果 加力第7天,B组破骨细胞数明显少于其余两组（P＜0.01）,CSE表达量在C组中最高.加力14,21天B组破骨细胞数呈先增加后减少趋势,A、C两组则呈递减趋势;CSE和iNOS表达量均逐渐减少,但21天时CSE基本呈阴性表达,而iNOS表达量仍较高（P＜0.01）.结论 应用40 mg/ml PPG可减少正畸牙早期H2S的生成,抑制破骨细胞募集;在正畸牙移动牙周组织改建过程中,NO/iNOS与H2 S/CSE体系间可能存在负性调节作用.     

RNA干扰内源性一氧化氮合酶基因对舌鳞状细胞癌细胞增殖活性影响的实验研究

目的研究内源性一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）对肿瘤细胞凋亡和增殖活性的影响。方法采用RNA干扰技术，将含有iNOS基因的特异性短发夹状RNA（short hairpin RNA，shRNA）片断的质粒载体转染人Tca8113细胞，免疫组化检测细胞中iNOS的蛋白表达改变情况；流式细胞仪及甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）法检测细胞凋亡率和生长曲线的变化情况。结果质粒转染人Tca8113细胞后，实验组细胞中iNOS蛋白表达显著低于两对照组（P〈0．01）；而凋亡率明显高于两对照组（P〈0．01）；生长曲线显示实验组细胞增殖活性受到一定抑制。结论RNA干扰技术沉默iNOS基因可提高Tca8113细胞的凋亡，并降低细胞的增殖活性。     

RNA干扰诱导型一氧化氮合酶基因抑制舌鳞癌细胞血管内皮生长因子表达的实验研究

目的探讨诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）基因对舌鳞癌细胞株Tca8113细胞中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表达调控情况。方法以RNA干扰技术将含有iNOS基因的特异性（short hairpin RNA，shRNA）片断的质粒表达载体转染入Tca8113细胞中，RT-PCR和Western blot法分别检测iNOS、VEGF的mRNA、蛋白表达改变情况。结果Tca8113细胞的iNOS对VEGF基因的PCR产物，在转染后24、48h实验组和对照组之间比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；iNOS基因的蛋白产物在转染后36、48h差异均有统计学意义（P〈0．05）。VEGF基因的蛋白产物在转染后48h差异有统计学意义（P〈0．05）。结论以RNA干扰技术沉默Tca8113细胞中iNOS基因，可以降低细胞中VEGF的表达水平，iNOS基因可能成为肿瘤防治的新靶点。     

一氧化氮在牙髓组织中的生物学作用

一氧化氮（ＮＯ）是左旋精氨酸在一氧化氮合成酶作用下生成胍氨酸的过程中所产生的无机小分子物质。它参与机体多种生理及病理过程，其中在牙髓血管紧张性调节，牙髓痛觉传递及牙髓炎症反应等过程中均起一定作用。     

一氧化氮对小鼠原代成骨细胞的增殖及分化调控

探讨一氧化氮（nitric oxide，NO）对小鼠原代成骨细胞的矿化调控作用。方法：分离培养小鼠原代成骨细胞，给予外源性NO供体S-亚硝基N-乙酰基青霉胺（SNAP）2周，检测成骨细胞增殖活性和碱性磷酸酶活性。Von Kossa方法检测成骨细胞矿化结节形成情况，免疫组化方法检测骨唾液酸蛋白（BSP）表达。结果：NO对成骨细胞增殖具有双向作用：在β-甘油磷酸钠加抗坏血酸存在下，72h内在一个比较宽的浓度范围（10^-2μmol／L～10^-1μmol／L）NO供体SNAP呈剂量依赖性地刺激成骨细胞样细胞生长，高于10^-2μmol／LSNAP则产生抑制作用。和β-甘油磷酸钠加Ascorbic acid作用组相比，SNAP可明显增加碱性磷酸酶活性，Von Kossa检测可观察到细胞间钙盐沉积，两组药物都能促使成骨样细胞骨唾液酸蛋白表达，而SNAP单独应用无明显矿化作用。结论：适量浓度一氧化氮，以β-甘油磷酸钠和抗坏血酸为介质，可加速小鼠原代成骨细胞增殖分化，并可能通过调控骨唾液酸蛋白表达刺激骨钙化。     

核因子κB配体受体激活子及诱导型一氧化氮合酶在慢性根尖周炎组织中的表达及相关性研究

临床上某些顽固的慢性根尖周炎病例虽然经过完善的根管治疗，但牙槽骨的吸收性破坏却并未停止。我们通过免疫组化方法，研究慢性根尖周炎组织中核因子κB配体受体激活子(receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand，RANKL)及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)的表达及相关性，旨在探讨其骨吸收的可能机制，为临床治疗顽固性根尖周炎提供方向。     

eNOS在大鼠正畸牙移动中的表达

目的:观察内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)在大鼠正畸牙移动中的表达分布,探讨eNOS在正畸牙牙周组织改建中的意义.方法:通过正畸力牵引大鼠左上颌第一磨牙近中移动,建立大鼠正畸牙移动模型.随机分为9组,每组5只,分别为:实验加力0、3、6、12、24 h和...     

eNOS在大鼠正畸牙移动中的表达

目的：观察内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）在大鼠正畸牙移动中的表达分布,探讨eNOS在正畸牙牙周组织改建中的意义。方法：通过正畸力牵引大鼠左上颌第一磨牙近中移动,建立大鼠正畸牙移动模型。随机分为9组,每组5只,分别为：实验加力0、3、6、12、24 h和3、5、7、14 d。大鼠右上颌第一磨牙不加力设为自身对照组。制备大鼠正畸牙移动不同时间牙周组织切片,免疫组化方法检测eNOS表达分布。结果：对照组有少量eNOS表达,实验组张力区eNOS阳性表达,且随牙齿移动时间不同表达分布发生变化。3 h组eNOS即开始表达增强,5 d组eNOS阳性表达达到最高峰值,7 d组及14 d组eNOS表达值开始减少。结论：eNOS参与正畸牙移动牙周组织改建。     

机械张力作用下新生大鼠颅骨缝组织中NOS三种同形异构体的表达

目的：观察体外培养的新生SD大鼠颅顶骨骨缝在牵张力作用下,一氧化氮合酶（Nitric Oxide Synthase,NOS）三种同形异构体（eNOS,nNOS,iNOS）的表达及分布;探讨一氧化氮（nitric oxide,NO）在机械应力调节骨缝组织改建过程中所起的作用。方法：取一周龄SD大鼠颅顶骨正中矢状缝组织块进行体外器官加力培养。实验组施加0.2g张力,对照组将弹簧固定不施力,两组分别于0、1、6、24、48h收获标本。标本用常规免疫组化的方法,分别检测NOS三种同形异构体在颅骨缝组织中的分布和表达变化情况。结果：正常新生SD大鼠颅骨缝组织中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）及神经元型一氧化氮合酶（nNOS）有轻微表达,而诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基本不表达;施加机械张力后,三种NOS在颅骨缝组织中的表达强度及位置随受力时间长短均有改变。eNOS在最初就有少量表达,6h表达开始增加,24h呈强阳性高表达,48h各种细胞表达强度均有所减弱。nNOS在不同时间点均有较弱表达,其结果无统计学意义（P〉0.05）。iNOS在对照组和加力0h基本未见表达;加力1h后偶有成骨细胞、成纤维细胞弱表达;加力6h组可见散在轻微表达;加力24h组各种骨缝细胞均显著表达;加力48h,骨缝组织各种细胞表达呈强阳性。结论：机械牵张力刺激可以导致内源性eNOS及iNOS生成的增加,NO可能在机械张力调节骨缝组织改建过程中发挥重要作用。     

体外牵张新生大鼠颅骨缝组织培养液一氧化氮的表达变化

目的：探讨一氧化氮（nitric oxide,NO）在机械力调节骨缝生长改建过程中早期表达变化的意义。方法：取实验组和对照组体外器官培养的培养液,用NO试剂盒,检测牵张实验组和对照组新生大鼠颅骨骨缝组织在1h、6h、24h、48h生成NO的表达变化。实验组和对照组标本进行常规HE染色和组织形态学观察。结果：实验组的骨缝被显著扩宽,缝细胞计数结果显著高于对照组。实验组在受力1h后,NO含量开始明显增加,到48h最为明显。生成的NO量明显高于对照组。结论：NO在机械力促进颅骨缝组织改建中具有重要的作用。     

修复性牙本质形成过程中一氧化氮的功能——Ⅰ:一氧化氮合成酶的表达

目的：观察大白鼠磨牙窝洞制备后，修复性牙本质形成过程中一氧化氮合酶NOS的表达。方法：大白鼠磨牙窝洞制备后制作冰冻切片，免疫组化染色观察成牙本质细胞与牙髓细胞中一氧化氮合酶的表达。结果：正常大白鼠磨牙中，内皮型一氧化氮合酶（eNOS）呈阳性反应，而诱导型一氧化氮合酶（iNOS）呈阴性反应。牙体制备后即刻，损伤的成牙本质细胞中两种一氧化氮合酶均呈弱阳性反应；制备1d后，在牙髓牙本质界中浸润的中性粒细胞中表现为诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的强阳性反应，并在制备3d后，扩展至全部牙髓细胞；同阶段，内皮型一氧化氮合酶（eNOS）在上述细胞中，均呈弱阳性反应。制备7d后，修复性牙本质深部成牙本质细胞中，诱导型一氧化氮合酶（iNOS）呈阴性反应，而内皮型一氧化氮合酶（eNOS）呈阳性反应。结论：一氧化氮参与了修复性牙本质形成过程中成牙本质细胞的分化与功能调节。