婴幼儿血管瘤中livin和caspase-3表达及其与细胞凋亡的关系

目的:研究凋亡调控基因livin和caspase-3在婴幼儿血管瘤组织中的表达及与细胞凋亡的关系,探讨其变化对血管瘤病程演化的影响。方法:采用免疫组织化学SABC法检测血管瘤组织标本中livin和caspase-3的表达,同时采用末端转移酶介导的原位缺口末端标记染色(TUNEL)技术检测血管瘤细胞的凋亡情况。应用SPSS17.O软件包对结果进行统计学分析。结果:Caspase-3阳性表达率在增殖期和消退期血管瘤分别为42.31%和81.82%,2组之间差异显著(P<0.01);Caspase-3在血管畸形和正常皮肤组织不表达或低表达。Livin阳性表达率在增殖期和消退期血管瘤分别为88.46%和31.82%,2组之间差异显著(P<0.01);Livin在血管畸形和正常皮肤组织不表达或低表达。Livin与caspase-3的表达呈负相关(r=-0.539,P<0.01)。血管瘤消退期细胞凋亡显著高于增殖期,在血管瘤内皮细胞中,Livin与凋亡呈负相关(r=-0.640,P=0.004),而caspase-3与凋亡呈正相关(r=0.471,P=0.042)。结论:Livin和caspase-3与血管瘤的发生、发展密切相关。     

VEGF和c-Myc在血管瘤不同时期的表达

目的:探讨血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和c-Myc在血管瘤不同时期的作用。方法:采用免疫组织化学SP法检测56例血管瘤标本(增殖期30例,消退期26例)中VEGF和c-Myc的表达。统计学分析采用SPSS11.0统计软件。结果:VEGF在增殖期血管瘤组织中均呈阳性表达,阳性率为100%;而在消退期血管瘤中阳性率为61.54%;两组之间的差异有显著性(P<0.05)。c-Myc在增殖期血管瘤中阳性率为76.67%,在消退期血管瘤组织中的阳性率为100%,两组之间的差异有显著性(P<0.05)。结论:VEGF在增殖期血管瘤血管内皮细胞上高表达,促进血管瘤增殖;在消退期血管瘤血管内皮细胞上低表达,有利于血管瘤消退。c-Myc在增殖期血管瘤血管内皮细胞上低表达,有利于血管瘤增殖;在消退期血管瘤的血管内皮细胞上高表达,促进血管瘤消退。增殖期血管瘤中c-Myc和VEGF协同作用,可能促进血管瘤的增殖;血管瘤消退期中,VEGF低表达时,高表达的c-Myc可能加速血管瘤消退。     

不同时期血管瘤内皮细胞黏附分子和HLA-DR的表达

目的:探讨黏附分子对血管瘤增殖退化病理生理演变过程的影响及作用机制。方法:应用SABC免疫组化法,检测增殖期血管瘤及退化期血管瘤的细胞间黏附分子-3(Intercellularadhesionmolecule-3,ICAM-3)、CD34和有核细胞表面的组织相容性抗原DR型(Histocompatibilityantigens-DR,HLA-DR)在血管内皮细胞上的表达情况,将2个时期进行比较;同时以血管畸形及正常皮肤为对照。采用行×列表卡方检验进行统计学分析。结果:ICAM-3和CD34均在增殖期血管瘤高表达(分别为26/28和28/28),而退化期低表达或不表达(分别为20/22和20/22),2个时期差异有显著性(P<0.001);而血管畸形和正常皮肤几乎不表达,这与不同时期血管瘤相比差异有显著性(P<0.001);HLA-DR则与血管内皮细胞的高分化阶段密切相关,增殖期基本不表达(4/28),在分化好的退化期高表达(17/22),2个时期差异有显著性(P<0.001)。结论:ICAM-3、CD34可能在血管形成早期发挥作用,介导内皮细胞间黏附,参与血管瘤发病和消退的病理过程。HLA-DR可能与内皮细胞成熟表型的获得及活化状态有关。     

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目的探讨不同时期婴幼儿口腔颌面部血管瘤TRAIL受体DR4、DR5 m RNA的表达及意义。方法本研究于2013年3—10月在中国医科大学中心实验室完成。收集婴幼儿口腔颌面部血管瘤组织标本40例(增殖期血管瘤26例、退化期血管瘤14例),以及正常皮肤组织标本12例,应用RT-PCR检测TRAIL的2个受体DR4和DR5m RNA在其中的分布情况。结果增殖期血管瘤组织中DR4和DR5 m RNA的表达强度显著低于退化期血管瘤和正常皮肤组织,差异有统计学意义(P<0.01)。退化期血管瘤和正常皮肤组织中DR4、DR5 m RNA的表达强度较高,但二者之间差异无统计学意义。结论退化期血管瘤组织DR4和DR5 m RNA表达程度高,与增殖期血管瘤相比,退化期血管瘤可以更多的结合TRAIL,细胞凋亡增多,引发血管瘤消退。     

P16蛋白在人血管瘤不同时期的表达及意义

目的探讨P16蛋白在人血管瘤发生、发展及消退过程中的表达状况及其生物学意义。方法 采用免疫组织化学方法（SABC法）检测人血管瘤增生期、消退期及正常组织中P16蛋白的表达水平。结果增生期血管瘤内皮细胞P16蛋白的表达水平低于消退期,消退期血管瘤内皮细胞P16蛋白的表达水平低于正常组织,各组之间差异均有显著性（P〈0.05）。结论①P16蛋白的表达水平与血管瘤的发生、发展及消退有关。②P16蛋白通过抑制血管瘤内皮细胞的增殖和血管生成在血管瘤的消退过程中起重要作用。     

APOJ在血管瘤退化过程中的表达及其生物学意义

目的:探讨载脂蛋白J(APOJ)在血管瘤中的表达及其生物学意义.方法:颌面部血管瘤标本68例,按mulliken分类法将血管瘤分为3期,增殖期32例,退化期24例,退化完成期12例,选取5例唇裂患者唇部皮肤作为正常对照.将每个标本连续切片4张,分别行HE染色和APOJ免疫组织化学染色,计算APOJ阳性率.结果:APOJ位于内皮细胞周围纤维脂肪组织中,呈棕黄色.各期血管瘤中APOJ计数分别为:增殖期2.3±1.2SD/HPF:退化期7.6±2.3SD/HPF:退化完成期8.7±2.5SD/HPF,正常皮肤中APOJ无表达,增殖期与退化期及退化完成期相比较,APOJ的表达差异有统计学意义(P＜0.01).结论:APOJ参与皮肤血管瘤的退化,并在退化过程中起重要作用.     

MC、bFGF在皮肤血管瘤中的表达及意义

目的 :研究皮肤血管瘤中肥大细胞 (MC)、碱性成纤维细胞生长因子 (BasicFibroblastGrowthbFGF)之间的关系 ,以及它们在血管瘤形成中的作用。方法 :颌面部血管瘤标本 68例 ,按Mulliken[1] 分类法将血管瘤病程分为三期 :增殖期 3 2例、退化期 2 4例、退化完成期 12例。选取 5例唇裂患者的唇部皮肤做正常对照。将每个标本连续切片 4张 ,分别行HE染色和免疫组织化学染色 ,并计算肥大细胞数和bFGF阳性率。结果 :①肥大细胞的胞浆内抗胰蛋白酶抗体显色为棕褐色 ,胞核为蓝色 ,多位于小血管管壁及其周围。各期血管瘤中肥大细胞计数分别为 :增殖期 2 1.3± 3 .0SD/HPF ,退化期 8.4± 2 .6SD/HPF ,退化完成期 3 .2± 2 .0SD/HPF。正常皮肤组织中肥大细胞计数 3 .1± 1.3SD/HPF。增殖期与退化期、退化完成相比有高度显著性差异 (P <0 .0 1)。②血管瘤中bFGF位于肥大细胞内或胞外基质中 ,增殖期bFGF染色深 ,棕褐色 ,呈阳性连续片状分布。退化期呈不连续片状分布、染色浅。退化完成期染色更浅 ,呈点状分布 ,阳性反应物少。增殖期bFGF阳性表达率 93 .75 % ,退化期 5 4.16% ,退化完成期 3 3 .3 3 %。增殖期bFGF明显高于退化期、退化完成期 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。正常对照组中bFGF无表达。③bFGF与MC计数表达呈正     

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目的    探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）和环氧化酶-2（COX-2）在血管瘤中的表达。方法    收集2005—2007年中国医科大学盛京医院病理科皮肤血管瘤标本30例及同期的血管畸形标本26例（对照）,采用免疫组化SABC法分别检测其中VEGF和COX-2的表达。结果    VEGF在血管瘤标本中均呈阳性表达,阳性率为100%,而在血管畸形标本中阳性率为 46.15%,两组之间的差异有统计学意义（P < 0.05）。COX-2在血管瘤标本中阳性率为93.33%,在血管畸形标本中的阳性率为42.30%,两组之间的差异有统计学意义（P < 0.05）。结论         VEGF和COX-2在血管瘤血管内皮细胞上高表达,促进血管瘤增殖;在血管畸形的血管内皮细胞中低表达。其表达情况为临床治疗血管瘤提供了一种新思路。     

婴幼儿毛细血管瘤的高频率凋亡

婴幼儿毛细血管瘤(ICH)常在出生后不久发生,生长迅速,数年后常自然消退。其自然消退的原因尚不清楚。为阐明ICH自然消退的原因,作者研究了7例ICH的凋亡活性及增殖活性,并与5例叶状毛细血管瘤(LCH,又称化脓性肉芽肿)进行了对比研究。后者在病理形态上与ICH相似,但不发生自然消退。 材料和方法 采用福尔马林固定的石蜡包埋块。研究方法为:①光镜检测细胞凋亡(Apop Tag染色)。②免疫组化染色:检测Ki-67,P53蛋白,bcl-2蛋白及Le~y抗原的表达。③凋亡指数及增殖指数:对凋亡的检测采用两种方法。a.检测50个高倍视野(HPF,×400)     

PCNA在颌面部血管瘤组织中表达的意义

目的：通过细胞增殖核抗原PCNA的表达探讨颌面部血管瘤血管内皮细胞增生机制。方法：采用免疫组化SP法对54例颌面部血管瘤组织PCNA的表达进行检测，分析其与血管瘤分型、分期的关系。结果：PCNA仅表达于毛细血管瘤中，且在它的三个不同发展阶段表达有所不同，增殖期表达最高，退化期次之，退化完成期表达最低，三者之间差异有显著性（P＜0．01）。结论：毛细血管瘤以血管内皮细胞增殖为特征，PCNA可作为划分毛细血管瘤不同发展阶段的可靠指标。     

转化生长因子TGF-β在不同时期血管瘤中的表达与肥大细胞的相关性

目的：探讨转化生长因子TGF-β在血管瘤自然消退过程中的表达变化及其与肥大细胞的相关性。方法：收集血管瘤标本56例,按发病年龄,结合血管瘤组织学特征,将其分为增生早期、中期、晚期和退化早期、中期、晚期。分别采用甲苯胺蓝染色和免疫组织化学SABC法,检测肥大细胞数量和转化生长因子TGF-β的表达;采用显微图像分析软件测定TGF-β在不同时期血管瘤中免疫组织化学染色的平均阳性面积率,同时测定各期肥大细胞的平均计数值;采用SPSS11.0软件包对结果进行单因素方差分析及Pearson相关分析。结果：随着血管瘤的自然演变过程,肥大细胞数目从增生早期至增生晚期逐渐增多,从退化早期至退化晚期又逐渐减少;增生晚期肥大细胞计数与增生早、中期相比有显著差异（P〈0.01）,退化早期肥大细胞计数与退化中、晚期相比有显著差异（P〈0.01）;TGF-β从增生早期至增生晚期的表达逐渐增强,从退化早期至退化晚期的表达又逐渐减弱,并且在增生晚期的表达与增生早、中期相比有显著差异（P〈0.01）,在退化早期的表达与退化中、晚期相比有显著差异（P〈0.01）;不同时期血管瘤中TGF-β表达的平均阳性面积率与肥大细胞数目呈显著正相关（P〈0.01）。结论：肥大细胞随着血管瘤的自然消退,其数量呈规律性变化,肥大细胞可能对血管瘤的消退进程起促进作用;TGF-β可能具有促进血管内皮细胞凋亡,从而发挥促血管瘤消退的作用;肥大细胞可能通过分泌TGF-β而发挥促血管瘤自然消退的作用。     

MIC-1在婴幼儿血管瘤中的表达及其与VEGF、p53表达的相关性

目的 研究巨噬细胞抑制因子1（macrophage inhibitory cytokine-1,MIC-1）与血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）以及p53在婴幼儿血管瘤中的表达及其关系,探讨MIC-1在血管瘤发病过程中的作用。方法：采用免疫组织化学SABC法检测血管瘤组织标本中MIC-1和VEGF、p53的表达情况,分析MIC-1与VEGF、p53在不同时期婴幼儿血管瘤中表达的相关性。采用SPSS17.0软件包进行χ²检验、Spearman等级相关分析。结果：MIC-1在增殖期和消退期血管瘤中的阳性表达率分别为85.19%和34.78%,2组之间差异显著(P<0.01);VEGF在增殖期和消退期血管瘤中的阳性表达率分别为96.30%和43.48%,2组之间差异显著(P<0.01);p53在增殖期和消退期血管瘤中的阳性表达率分别为81.48%和30.43%,2组之间差异显著(P<0.01);MIC-1在血管畸形和正常皮肤组织中不表达或低表达。MIC-1与VEGF的表达呈正相关 (r=0.613,P<0.01),与p53的表达也呈正相关(r=0.753,P<0.01)。结论：MIC-1可能与血管瘤的发病及发展有密切关系。     

Cosmc、T抗原和VEGFR／KDR在婴儿血管瘤不同分期的表达及意义

目的：检测Cosmc、T抗原和VEGFR/KDR在婴儿血管瘤不同分期中表达的变化，探讨其在婴儿血管瘤病程发展演化中的意义。方法：采用免疫组织化学法检测Cosmc和T抗原和VEGFR/KDR在45例手术切除的婴儿血管瘤与10例正常皮肤组织的表达情况。所有标本经术后病理报告证实为婴儿血管瘤，根据Mulliken标准分为增生组、消退组和消退完成组。结果：①Cosmc、T抗原和VEGFR/KDR在增生组中高表达，阳性表达率明显高于消退组，统计结果具有显著性差异（P＜0．05），且增生组与消退组的表达分别与对照组比较具有显著性差异（P＜0．05）。②Cosmc在婴儿血管瘤中的表达与T抗原的表达呈显著正相关（r＝0．50，P＜0．01）。③VEGFR/KDR在婴儿血管瘤中的表达与T抗原的表达呈显著正相关（r＝0．53，P＜0．01）。结论：Cosmc、T抗原和VEGFR/KDR可能在婴儿血管瘤增生、消退过程中起关键作用。     

p19在颌面部皮肤血管瘤不同时期的表达

目的：探讨p19在血管瘤发生、发展及退化过程中的表达状况及其意义.方法：采用免疫组织化学方法（SABC法）检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织中p19的表达水平.利用计算机图像分析技术测量不同时期血管瘤组织和正常皮肤组织p19表达的积分光密度和面积.结果：增生期血管瘤内皮细胞p19表达水平低于退化期,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：p19的表达水平与血管瘤的发生、发展与消退有关.     

Genistein对腺样囊性癌细胞SACC-83中细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的：研究酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein诱导人唾液腺腺样囊性癌细胞株SACC-83细胞凋亡的分子机制。方法：用Genistein处理体外培养的SACC-83细胞,采用Western印迹技术检测bax、bcl-2和survivin蛋白的表达,并利用电泳凝胶成像分析软件,对其结果进行量化分析,采用SPSS11.5软件包对结果进行方差分析。结果：随着Genistein作用时间的延长和浓度的增加,bax蛋白的表达明显增加,bcl-2和survivin蛋白的表达明显减少。SACC-83细胞经220μmol/LGenistein作用3d,其bax蛋白的表达量是对照组的3.43倍（P〈0.01）,而bcl-2和survivin蛋白的表达量分别是对照组的85%（P〈0.05）和35%（P〈0.01）。结论：Genistein诱导SACC-83细胞凋亡,与其上调bax蛋白的表达,以及下调bcl-2和survivin蛋白的表达有关。     

分化诱导剂对粘液表皮样癌增殖和凋亡相关基因表达的影响

目的 探讨分化诱导剂六亚甲基二乙酰胺(hexamethylene bisacetamide,HBMA)对人粘液表皮样癌细胞系MEC-1细胞增殖和凋亡相关基因表达的影响。方法 用0．002mol/L HMBA对培养的MEC－1细胞进行体外诱导72h后，分别采用光镜、免疫组化、原位杂交、图像分析等方法进行增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear,PCNA)，bax,bcl-2蛋白及mRNA表达水平的检测。结果 经HMBA诱导的MEC－1细胞中PCNA的表达较对照组明显下降（P＜0．01），同时MEC－1细胞的凋亡相关基因bax,bcl-2蛋白及mRNA表达均明显上升（P＜0．01）。结论 HMBA对MEC－1细胞的增殖基因PCNA有明显的负调控作用，从而可抑制其增殖；并且它能够特异性地上调bax和bcl-2基因的表达，发挥了促进凋亡的作用。     

肥大细胞及碱性成纤维细胞生长因子、载脂蛋白J表达与颌面部皮肤血管瘤的关系研究

目的探讨颌面部皮肤血管瘤中肥大细胞（mast cell,MC）、碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）、载脂蛋白J（Apolipoprotein J,ApoJ）的作用及三者的关系。方法颌面部血管瘤标本78例,增殖期36例、退化期28例、退化完成期14例。选取10例唇裂患者的唇部皮肤做正常对照。将每个标本连续切片4张,分别行HE染色和免疫组织化学染色,并计算MC数,bFGF和ApoJ阳性表达率。结果①血管瘤中增殖期与退化期、退化完成期MC计数相比差异有统计学意义（P〈0．01）。②血管瘤中增殖期bFGF阳性表达率,明显高于退化期和退化完成期,差异有统计学意义（P〈0．05）。正常对照组中bFGF表达率低。bFGF与MC计数表达呈正相关（r=0．35,P〈0．01）。③血管瘤中ApoJ阳性表达结果,增殖期与退化期及退化完成期相比较差异有统计学意义（P〈0．01）,正常皮肤中ApoJ元表达。结论在皮肤血管瘤中,MC、bFGF、ApoJ在血管瘤的形成发展和退化过程中起重要作用。