下颌骨牵引成骨过程中VEGF及其受体的表达

目的:通过建立兔下颌骨牵引成骨实验动物模型,研究下颌骨牵引成骨过程中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体的表达及意义。方法:选用新西兰白兔30只,随机选取6只动物作空白对照组,24只动物右侧下颌骨植入外置式颌骨牵引器。经7d延迟期后,按1mm/d速率延长下颌骨7d,固定期8周。在延迟期第7d,牵引期第2、4、7d,固定期第1、3、6、8周分别处死3只动物,采用免疫组化方法,检测VEGF及其受体FLT-1(fms-like tyrosine kinase-1)、FLK-1(fetal liver kinese-1)的表达变化。结果:VEGF及其受体FLT-1、FLK-1的表达贯穿下颌骨牵引成骨全过程。下颌骨牵引成骨过程中不同时相多种组织细胞参与表达VEGF及其受体FLT-1、FLK-1,但在表达的变化上存在一定的差异。结论:VEGF通过与其受体特异性结合,在下颌骨牵引成骨血运重建及新骨生成过程中发挥重要作用。     

下颌牵张成骨过程中血管生成和血供重建的立体形态构筑

目的: 观察下颌牵张成骨过程中血管生成和血供重建的立体形态构筑。方法: 用自行研制的牵张器将12只成年雄性山羊双侧下颌骨以1mm/d的速率延长10mm,在牵张开始当天、牵张第5天、牵张结束当天、固定第10天、第20天和第30天分别处死2只动物,另选取2只山羊不实施手术作为正常对照组。采用树脂灌注微血管铸型技术,酸蚀后用扫描电镜观察牵张区血管的立体形态构筑。结果: 在牵张期,骨断端骨膜血管和骨髓内血管密度明显增加,以向牵张间隙中央增生为主,并开始相互连接形成血管网;在固定早期,在间隙中央仍可见少量血管增生,膨大的静脉窦排列方向与牵张方向趋于一致;随着固定时间的延长,牵张区的血管连接更加广泛,血管新生现象逐渐消失,血管系统变得更加成熟。结论:牵张区的血管新生与新骨的生成和矿化之间存在紧密的时空联系;牵张间隙的新骨组织同时接受来源于骨膜和骨髓的血供。     

文摘

45.延迟期对兔下颌骨牵张成骨术的影响眼英演/AidaT…∥IntJOralMaxillofacSurg.-2003熏32穴1雪.-54-62近年来牵张成骨术(distractionosteogenesis熏DO)已广泛用于颅面骨的延长,下颌骨牵张成骨术的延迟期为0～14d。本研究通过观察兔下颌骨牵张成骨术初期不同延迟期的组织学改变,探讨下颌骨牵张成骨术的最佳延迟期。材料和方法16只日本成年白兔,重3.0～3.5kg,全麻下在下颌第一前磨牙前行双侧下颌骨皮质下截骨术,放置口外固定牵张器,按延迟期0d、2d、5d、和10d将动物分成4组,牵引速度0.25mm/12h,牵引10d处死所有动物,测量牵张间隙长度。一…     

骨膜及下齿槽血管束对下颌骨牵张延长的作用

目的:确定下颌骨较差血运状态下进行牵张延长术的参数。方法:成年家兔16只,体质量2. 4~2. 6kg,随机等分为4组,每组4只;行双侧下颌骨骨切开术,采用内置式牵张器(西安中邦公司研制)对双侧下颌骨同时进行牵引;手术时破坏左侧下颌骨膜及下齿槽血管,而保护右侧。延迟期分别为1、7d;牵引速率分别为0. 5、1. 0mm/d, 2次/d;牵引距离均为10mm;保持期为4周。拍摄X线片,测量新骨抗弯强度,并脱钙组织切片观察。结果:骨膜及下齿槽血管破坏侧,延迟期7d组,牵张区新骨形成良好;延迟期1d组成骨质量较差或导致骨不连。结论:兔下颌骨骨膜及下齿槽血管破坏之后,也能进行牵张成骨修复,但要适当延长延迟期,对临床上早期应用牵张成骨技术修复创伤性下颌骨缺损有一定提示作用。     

牵张成骨延长下颌骨过程中血管生成数量的定量检测

目的定量检测牵张成骨(DO)延长下颌骨过程中血管生成的数量,初步探讨DO过程中血管生成的时空模式。方法用自行研制的牵张器将12只成年雄性山羊双侧下颌骨以1 mm/d的速率延长10 mm,在牵张开始当天,牵张第5天,牵张结束当天,固定第102、0和30天分别处死2只动物,另选取2只山羊不实施手术作为正常对照组。获取牵张区骨组织标本并作相应的组织学处理后作JC70免疫组化染色,并用Chalkley血管计数法对血管生成数量进行定量检测。结果①在间隙期末已有大量血管生成,牵张至第5天时达到峰值,随后呈梯度递减的趋势。②牵张结束时,血管密度由骨小梁形成区带(MCF)向纤维区带(FIZ)递减;随着固定时间延长,各区带血管密度均呈梯度减弱;固定后期,MCF阳性染色基本消失,血管密度由FIZ向MCF递减。结论在牵张成骨延长下颌骨过程中,血管生成与新骨形成密切相关,两者具有空间联系性;牵张早期微血管的大量生成是向骨组织及周围软组织再生提供充足血供的组织结构基础。     

牵张成骨修复兔下颌骨缺损中血管生成素-1的表达及意义

目的探讨血管生成素(Ang)-1在牵张成骨修复兔下颌骨缺损中的时空表达及生物学意义。方法对24只大白兔行单侧下颌骨缺损牵张成骨术,分别在延迟期末、牵张中期、牵张期末、固定期第12、、35、、7周末各处死3只动物,取牵张区骨痂,采用组织学和免疫组化法观察微血管生成以及Ang-1的表达变化。结果下颌骨牵张区主要以膜内成骨方式成骨,在牵张区内有明显的血管生成及较明显的Ang-1的表达。在新生血管管周前成骨细胞和成骨细胞中可见Ang-1的表达。非应力区(缺损区)以软骨内成骨为主,在肥大的软骨细胞中存在Ang-1弱表达。结论牵张力所产生的机械刺激可以导致牵张区中微血管和骨组织的生成,而Ang-1可能在牵张区新生血管的形成及稳定和新骨形成中起重要作用。     

兔下颌骨放疗后牵张成骨动物模型的建立

目的探讨建立兔下颌骨放疗后牵张成骨动物模型的可行性。方法24只成年新西兰大白兔随机分为放疗组和未放疗组,每组12只。放疗组采用60Co放疗机照射兔下颌骨,5.4Gy/次,隔日1次,共5次。3个月后在2组兔下颌骨的双侧截骨处安装牵张器,经5d延迟期后开始牵张,速率为1mm/d,0.5mm/次,每日2次,连续7d,共延长下颌骨7mm。固定期的第0、4、6周摄下颌骨侧位X线片。固定期的第4、6周分别取出下颌骨行组织学观察。结果兔对放疗和牵张成骨术耐受良好,未见放疗引起的不良反应。X线片有新骨形成,未见死骨;组织学观察见放疗组较未放疗组有更多软骨形成。结论兔是一种用于建立放射损伤区牵张成骨模型的良好动物。     

rhBMP-2对兔下颌骨牵引成骨区骨保护素表达的影响

目的：通过动物实验,研究应用外源性rhBMP-2对兔下颌骨牵引成骨区骨保护素（osteoprotegerin,OPG）的影响。方法：在48只成年大耳白兔的一侧下颌骨前部行骨切开术,分别将空白胶原、rhBMP-2 1.5mg胶原复合物植入下颌骨切开处,用牵引器延长一侧下颌骨4mm,稳定期第1、3、7、14天,分别处死各组动物,取牵引区新生骨痂行组织学及OPG免疫组化染色。结果：下颌牵引延长后牵引间隙均有新骨形成,应用rhBMP-2 1.5mg效果好。免疫组化染色OPG主要定位于成骨细胞的胞浆中。在同一时间内,应用rhBMP-2组较对照组有显著性差异（P〈0.05）。结论：动物实验表明,rhBMP-2能促进兔下颌骨牵引成骨区新骨的生成。     

不同速率牵张山羊下颌后下齿槽血管变化与血管生成的实验研究

目的:研究不同速率牵张延长山羊下颌骨后下齿槽动静脉的变化和新骨组织内血管生成情况。方法:8只成年山羊随机分为3组,A组(3只)以110 mm/d牵张,B组(3只)以210 mm/d牵张,C组(2只)为对照。A、B两组均牵张延长下颌10 mm,于牵张结束固定后第2周时处死动物,取牵张区下齿槽动静脉及新骨组织行组织学和定量组织学研究,观察下齿槽血管的管壁厚度和管径大小变化,以及新骨中微血管数量变化。结果:两种速率牵张后均未见下齿槽血管壁有病理性改变,但210 mm/d组的血管管径变小,管壁变薄,与对照组相比有显著差异(P<0105)。110 mm/d牵张后微血管密度较210 mm/d牵张后微血管密度高,且新生骨小梁更为成熟,其差异具有统计学意义(P< 0105)。结论:下颌骨牵张后下齿槽血管无明显变化,但快速牵张可能对牵张间隙内血管生成有不良影响。     

变速牵引提高牵引成骨效率的实验研究

目的:观察变换速度牵引兔下颌骨15mm后新骨生成的质量,探讨提高牵引成骨效率的方法。方法:新西兰白兔5只,单侧下颌骨截开。延迟5d后,以0.75mm/次、2次/d的速率牵引6d,共9mm;再以0.5mm/次、2次/d的速率牵引6d,共6mm;固定15周,新骨分别行大体、放射学和组织学观察。结果:牵引结束后新骨逐渐成熟,到固定15周时,牵引区新骨与正常骨接近。结论:变速牵引成骨能够保证新骨的良好生成,缩短牵引时间,提高应用效率。     

腺病毒介导的人骨形成蛋白2基因转染促进下颌牵张成骨的实验研究

目的探讨局部应用腺病毒介导的入骨形成蛋白2（adenovirus vectors containing human bone morphogenetic proteins 2, Ad-hBMP-2）对兔下颌骨牵张成骨的影响。方法24只新西兰大白兔随机分为实验组（12只）和对照组（12只），并建立下颌骨双侧牵张成骨模型。经过5d潜伏期后，以0．5mm／12h的速度牵张7d。固定期第1天，在实验组骨牵张区注射0．2ml滴度为10^12pfu／L的Ad-hBMP2，对照组骨牵张区注射0．2ml滴度为10^12pfu／L的腺病毒介导的增强型绿色荧光蛋白。在固定期第7、14、28天对下颌骨牵张区进行骨密度及新生骨量比较。结果Ad-hBMP-2治疗组牵张区骨密度及新生骨量明显高于对照组。结论腺病毒介导的人骨形成蛋白2具有促进兔下颌牵张成骨的作用。     

Development of distraction osteogenesis model of the inferior mandibular border and alveolar bone

The aims of this study were to establish an experimental rat model for distraction osteogenesis of the mandible and alveolar bone for the investigation of histologic and radiographic analysis and to develop the device for various distraction models. For osteotomy location and distraction device design, micro-computed tomographic analysis of the structure of rat mandible was performed. Twenty mandibles of Sprawl-Dawley rats were osteotomized based on the analysis, and newly developed custom-made devices were applied with bone screws. After a 5-day latency period, a distraction of 0.2 mm at a single session, and a 4-week consolidation period, animals were killed for histologic samples. The rat distraction osteogenesis model for the inferior mandibular border and alveolar bone was successfully established based on the protocols used in this study. New bone formation occurred at both body and alveolar bones of the mandible by the combination of 2 modes: intramembranous ossification was predominant at the end of distraction period, whereas endochondral ossification was observed at the center of the distraction gap at the end of the 4-week consolidation period. This model can be applied to various conditions related to distraction osteogenesis and provide information for the development of improvements in clinical treatments using distraction osteogenesis.     

下颌骨缺损牵张成骨动物模型的建立

目的建立兔下颌骨缺损牵张成骨动物模型,为进一步研究牵张成骨奠定实验基础。方法25只健康成年兔随机分成6组,实验组5组,每组4只,对照组1组共5只。25只兔均行一侧下颌骨切开截骨术,实验组安置自行设计的下颌骨牵张器,经6 d间歇期后,以每天2次,每次0.4 mm的速度牵张8 d进入固定期,于牵张中期(牵张第4天)、牵张末期(牵张第8天),固定期第2、4、6周分别处死4只动物;对照组术后仅保持缺隙而不牵张,与实验组对应的每个时间点处死1只动物,取下颌骨观察骨愈合情况。结果牵张器牵张效率好,固位稳定,实验组动物的下颌骨被成功牵张,牵张区可见新骨形成。实验对照组表现为不同程度的骨不连及骨缺损。结论本研究建立的兔下颌骨缺损牵张成骨模型是较理想的动物模型。     

Expression of bone morphogenetic proteins during mandibular distraction osteogenesis in rabbits.

PURPOSE: We examined the expression pattern of bone morphogenetic proteins (BMPs) during mandibular distraction osteogenesis in rabbits and also investigated the mechanism of membranous bone distraction. MATERIALS AND METHODS: Twenty-three rabbits underwent mandibular distraction (protocol; no latency period, a 1-week distraction at 0.5 mm/d, and a 2-week consolidation period). Samples were collected at 3, 5, and 7 days of distraction and at 1-week and 2-week consolidation. We prepared undecalcified fresh-frozen sections and immunohistochemically evaluated the expression of BMPs 2 through 8. RESULTS: Both endochondral ossification and intramembranous ossification were observed. The expression of BMPs 2, 4, 5, and 6 was observed continuously from the beginning of distraction. BMP-7 was expressed weakly. The expression of BMP-3 was not observed conspicuously during distraction but was strongly expressed at 1- and 2-week consolidation. CONCLUSION: The expression pattern of BMPs during membranous bone distraction was similar to that during long bone distraction, but it differed from the expression pattern of long bone distraction in that the expression of BMPs was maintained for 2 weeks after the completion of distraction.     

变速牵引成骨对兔下牙槽神经的影响

目的　研究变速牵引兔下颌骨15mm对下牙槽神经的影响。方法　5只新西兰白兔单侧下颌骨截开。延迟5d ,以每天1 5mm ,每天2次牵引9mm ,然后继续以每天1mm ,每天2次牵引6mm ,完成牵引后固定15周,分别行肉眼及组织学观察和电生理学检查。结果　下颌骨延长15mm ,新骨生成良好。下牙槽神经牵长2 1. 99% ,牵引结束时神经变性明显,感觉神经动作电位波幅下降为术前的9. 70 % ,潜伏期较术前有所延长,随后出现恢复趋势,到固定15周时,波幅恢复到术前的33. 85 % ,潜伏期基本恢复正常。结论　下颌骨变速牵引15mm后,下牙槽神经受到明显的影响,到15周时,下牙槽神经的功能有恢复的趋势,但恢复尚不完全。     

Placement of implants in distraction osteogenesis: a pilot study in dogs

This study investigated the possibility of achieving osseointegration of implants placed in a distracted site during the consolidation period. Four healthy male mongrel dogs were used in this experiment. A subperiosteal corticotomy around the mandible was performed between the left mandibular premolar and first molar. After a 7-day latency period for soft tissue healing, the distraction was performed at the rate of 1 mm per day for 14 consecutive days to allow for 14 mm of elongation, using an extraoral distraction device. Three weeks after the completion of distraction, screw-type implants were placed in the distracted site. Twenty-four weeks after placement of the implants, they were stable, and osseointegration had been achieved physically, radiographically, and histologically. These results suggest the possibility of shortening the period of implant treatment by using the distraction osteogenesis technique.