6种不同加样量对酶联免疫吸附测定法检测乙型肝炎病毒核心抗体结果的影响

目的探讨采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）时，不同加样量对检测结果的影响。方法收集乙型肝炎病毒标志物HBcAb阳性标本93例，HBcAb阴性标本93例。共采取6种（A～G）加样方式。加样方式A：按说明书将待测血清作1：30倍稀释；加样方式B～G分别为直接加入血清10、20、30、40、50μL。然后，用ELISA法进行HB-cab的检测。结果93例阳性样本中，各种加样方式检测结果一致，未造成结果的假阴性。93份阴性样本中，加样方式B组与A比较，差异无统计学意义（P〉0．05），其余4种方式与方式A比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论用ELISA法检测大批号标本的HBcAb时．可肯辖加入10μL血清．以减少加样环节。提高检测质量．     

日立7150型生化自动分析仪中携带污染的实验观察

我科新近购进的日立7150型全自动生化分析仪，在使用过程中发现个别项目的结果不稳定，是否存在着携带污染的情况。为了弄清携带污染的环节和程度，我们从仪器加样，加试剂及反应杯等的携带污染进行试验。现报告如下：1材料和方法1．1仪器日立7150全自动生化分析仪，200μl半自动加样枪。1．2试剂上海长征试剂，台湾元生试剂。1．3血清采用每日常观测定中病人低值和高值血清．日立7150随机的混和血清（批号109054）。1．4测定参数按各试剂盒说明书而设定的常规检测参数。1．5携带污染率计算公式假设取一份标本．连续测定三次（if，iZ，i3）…     

STAR超细加样尖在抗-HCV ELISA检测中的应用

目的探讨分析STAR超细加样尖（300μl SLIM Tips）在抗-HCVELISA检测中加样的可靠性。方法全自动加样器利用STARSLIM超细加样尖吸取混合浆10μl，称重并计算精密度和偏差范围；分配1NCU／ml抗-HCV血清1份为16孔（A组），用正常样本血浆倍比稀释1NCU／ml抗一HCV血清为1；2、1：4及1：8各1份并均分配为16孔（A1-A3组）；1份抗-HCV可疑样本分配为16孔（B组）及1份抗-HCV阴性样本分配为8孔（C组），然后用FAME24／20全自动酶免分析仪进行检测并分析。结果加样的精密度和偏倚范围均可满足检测要求，所有样本符合率100％，重复性和均一性满足试验要求。结论STAR全自动加样仪可以使用300μl超细加样尖进行抗-HCVELISA检测。     

用C-反应蛋白检测鉴别感染性与非感染性腹水

本文对30树胶水进行C─反应蛋白（CRP）含量的检测，现报告如下：1检测对象本院收治病人，根据已掌握的临床资料常规分析判断，分为漏出液和渗出波二组．漏出液组，心力衰竭4例，肝硬化8例；渗出液组，腹膜炎12例，肺结核3例，肝癌2例，胆囊癌1例。2检测方法采用乳胶凝集法，用上海医学化验所试剂（操作按说明书）。3结果与讨论12例漏出液组，除8例CRP含量＜10mg／L外，心力衰竭1例，肝硬化3例和18例渗出液组的CRP含量均为不同倍数的升高，升高范围10～160mg／L，平均值40．43mg／L．以上结果提示，检测腹水中CRP能反映出胶水感染的…     

化学发光法检测HCG的最佳稀释倍数

目的：确定检测绒毛膜促性腺激素的最可靠的稀释倍数，出具准确的检测结果为临床诊断提供依据。方法：采用增敏化学发光法，对382例人绒毛膜促性腺激素（HcG）血清样本，进行原液、10倍、50倍、100倍、200倍五中不同浓度样本的检测，观察HOOK效应对检测结果的影响程度，确定每次实验最好的稀释倍数。结果：通过对各浓度的变异系数和回收比率比较，确定100倍的稀释为我们平时实验时的最佳稀释倍数。结论：对血清作100倍的稀释所得出的实验结果，克服了HOOK效应对检测结果的影响，又不影响绒毛膜促性腺激素轻度增高的学清检测，是实验人员检测绒毛膜促性腺激素时的首选稀释倍数。     

吸样量与吸样针携带量关系

为了解日立7170型全自动生化分析仪的吸样针携带性能,编写分析参数时考虑携带特性,尽可能减小携带。并希望用本文提供的思路针对自己的仪器调查吸样针携带,量化吸样量与吸样针携带的关系,采取措施尽可能减小携带。1材料和方法1.1仪器日立7170生化分析仪。1.2试剂中山丽珠表面抗体ELISA试剂盒酶标记物、底物A、底物B、终止液。1.3分析参数非显色项目参数:样本量(酶标记物)2μl,试剂量(蒸馏水)270μl,450nm,10分钟比色;显色项目参数:样本量(蒸馏水)2μl,试剂1(底物A)100μl,试剂2(底物B)100μl,试剂4(终止液)100μl,加入试剂4后450nm比色…     

免疫比浊法测定D-二聚体假阳性病例干扰分析

摘要：目的 筛选 Ｄ－二聚体测试中出现假阳性的人群并进行干扰分析。 方法 采用不含有任何有效阻断成分的 Ｄ－二聚体试 剂（测试试剂，上海交通大学医学院附属苏州九龙医院检验科和苏州希肯公司合作制备）和含有阻断成分的 Ｄ－二聚体试剂 （苏州希肯公司市售试剂）对 ２０２０ 年 ４ 月至 ２０２０ 年 ８ 月间的临床凝血样本进行盲测，筛选出检测结果不一致的样本。 再用西 门子公司试剂（免疫比浊法）作为第三方试剂进行复测验证，对疑似假阳性样本倍比稀释后检测以确认干扰，并对其年龄、临 床症状等数据进行综合分析。 结果 共测试患者样本数为 ６ ４３６ 例，其中剔除 １３５ 例重复样本后，结果不一致样本经稀释试 验共筛选出干扰样本 ５９ 例。 其中，年龄在 ６０ 岁以上的患者 ３８ 例，占 ６４．４％；炎症的样本 ３０ 例，占 ５０．８％；类风湿因子（ＲＦ）阳 性样本 １０ 例，占 １６．９％。 结论 免疫比浊法测定 Ｄ－二聚体出现假阳性的情况多发生于 ６０ 岁以上、炎症相关疾病患者，建议 采用特异性较好的试剂盒以减少假阳性的发生。     

两种倍量稀释法批量检测孕妇IgG抗A（B）效价的比较分析

目的探讨微量板倍量稀释法在实验室大批量检测O型孕妇IgG抗A（B）效价的可行性。方法孕妇血清用2巯基乙醇（2-Me）处理后,用试管和微量板平行倍量稀释,再用微柱凝胶抗人球蛋白卡平行检测IgG抗A（B）效价,以2＋为判定终点。全部样本由同一操作者重新用上述试剂再操作1次,以观察重复性。结果试管倍量稀释法与微量板倍量稀释法平行检测0型孕妇血清IgG抗A（B）效价,其中抗体效价〈1：256者,试管倍量稀释法为44．21％,微量板倍量稀释法为46．81％;抗体效价≥1：256者,试管倍量稀释法和微量板倍量稀释法各占55．32％和53．19％,两者结果差异无统计学意义（P〉0．05）。重复性试验效价一致率,试管倍量稀释法90．4％,微量板倍量稀释法97．8％,微量板倍量稀释法的重复性好于试管倍量稀释法（P〈0．05）。结论微量板倍量稀释法检测0型孕妇IgG抗A（B）效价与试管倍量稀释法结果相符,其不仅缩短了试验时间,减轻操作者劳动强度,而且重复性好,易于标准化,更适宜于实验室大批量样本检测。     

加样时差对不同试剂检测乙肝病毒标志物的影响

目的探讨加样时差对不同ELISA一步法试剂检测乙肝病毒标志物的影响。方法用上海科华及厦门新创公司生产的试剂盒测定患者及质控样本。样本加入反应孔后分别于0、30和60s后加入酶标记物（新创HBeAb还要同步加HBeAg中和试剂）．余下步骤均按说明书严格操作。结果对于HBsAg、HBsAb、HBeAg测定，加样时差对较高浓度样本的吸光度A值影响较小，而较低浓度样本的吸光度A值均随加样时间的延长而增高。两种试剂检测HBeAb的吸光度A值均随加样时间的延长而下降。科华试剂检测HBeAb时吸光度A值随加样时闯的延长而下降。新创试剂检测HBeAb时由于酶标试剂及中和试剂同时加入，故受影响较小。结论加样时差导致的不公平竞争可对ELISA一步法检测试剂的结果产生影响。实验室应尽可能实现自动化，或在手工加样时对不同项目尽可能分别加样以减少时差的影响。     

CRP(胶乳法)检测应注意前带现象

CRP胶乳试剂是纯化的抗人CRP抗体致敏的胶乳颗粒，它能与血清中CRP发生特异性结合出现清晰的凝集颗粒。实际操作时是将病人灭能血清6倍稀释后进行检测；有清晰凝集者为CRP＞10mg／L．需进一步稀释以测出CRP含量；无凝集者为CRP＜10mg／L可直接报告CRP阴性。我们采用上海医化所CRP胶乳试剂，按操作步骤对血清中CRP进行常规方法的检测发现：CRP本该增高的疾病如急、慢性感染、活动性炎症中的个别病列的血清标本在1：6低稀释度时不产生凝集颗粒，被纳入CRP阴性或CRP＜10mg／L报告之，与临床相悻。为此本人对“CRP阴性”血清作…     

系列测试参数法对循环酶法测量血清胆汁酸的上机参数探讨

目的采用系列测试参数法分析循环酶法测量血清胆汁酸的测量过程、结果精度和抑制交叉污染能力等情况,确立在本测试系统上最佳的上机参数。方法（1）对比实验在保持样试比和主副波长不变情况下,根据测定类型、试剂与加样时序、孵育时序以及空白测量时序等参数组合4种测试参数模式,统一校准后,对48例样本做对比实验。（2）交叉污染实验上述4种模式分别置污染试剂（总胆固醇、三酰甘油第一试剂）之后对48例样本进行交叉污染实验;（3）抑制污染实验在4种模式中引入20μmol／L胆汁酸（作定量污染源）对48例样本检测,分析污染环节和抗污染能力。结果（1）4种参数模式对48例样本测定结果进行两两配对t检验,模式1与模式3无统计学意义（P〉0．05）、模式2和模式4无统计学意义（P〉0．05）。（2）在抑制污染实验中,模式4结果与对照组进行配对t检验无统计学意义（P〉0．05）。结论在本测试系统中,（1）加样及搅拌系统是交叉污染主要来源。（2）模式4有明显抑制试剂污染能力,是最佳的上机参数。     

化学发光法检测HCG最佳稀释液及可靠稀释倍数

目的：确定检测绒毛膜促性腺激素（HCG）的最佳稀释液及其最可靠的稀释倍数，出具准确的检测结果为临床诊断提供依据。方法：用化学发光法，对164例HCG血清标本和高浓度样本，用零血清、生理盐水、蒸馏水进行10、50、100、200倍稀释，检测原液和各稀释标本，观察HOOK效应对检测结果的影响程度及偏差，确定最佳的稀释液及最可靠稀释倍数。结果：通过对测定结果偏差、变异系数比较，确定零血清为最佳稀释液，100倍为可靠稀释倍数。结论：零血清成分与标准品和标本血清基本相近，其测定结果偏差最小是首选稀释液；对血清作100倍稀释的结果，克服了HOOK效应的影响，又不影响HCG轻度增高的学清检测，是检测HCG的首选稀释倍数。     

Vitros350不同稀释液在线性评估中的比较

目的比较用不同稀释液稀释血清标本于强生Vitros350干式生化分析仪上做线性评价实验所得结果之间的差异。方法取尿素氮（BUN）、总胆红素（TBIL）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和肌酐（Cr）4个项目的高值血清，检测原倍结果及分别用低值血清、蒸馏水与生理盐水倍比稀释（最高稀释倍数为1：32）后的结果，然后进行线性评价和偏差分析。结果根据分析测量范围评价即线性评价，BUN、TBIL、ALT及Cr用3种稀释液稀释进行线性实验均符合AMR评价要求。在偏差分析中，BUN用低值血清稀释偏差值最小；TBIL、ALT和Cr在低稀释倍数时3种稀释液的偏差值无显著性差异，在较高稀释倍数时（〉1：16），低值血清比蒸馏水及生理盐水偏差值小。结论通过干式生化分析仪线性评价发现低值血清作为稀释液稀释标本比蒸馏水及生理盐水更为理想。     

动态浊度法白细胞滤器细菌内毒素检测的研究

目的探讨一次性白细胞滤器中细菌内毒素的检测方法。方法采用动态浊度法检测两种规格的一次性白细胞滤器中细菌内毒素的含量。结果滤器Ⅰ供试品阳性对照添加内毒素浓度5.0 EU/ml,样本用检查用水稀释2倍;滤器Ⅱ供试品阳性对照添加内毒素浓度0.5 EU/ml或5.0 EU/ml。样本用处理液稀释10、20、50、100倍不等。结论依据一次性白细胞滤器规格不同,供试品稀释倍数不同,加入内毒素浓度也不同,且需作干扰验证试验。     

多点校准曲线法测定血清免疫球蛋白的应用体会

免疫球蛋白（Ig）定量检测传统使用单向免疫扩散法，但费时费力，影响因素甚多[1]．自优质的免疫球蛋白抗血清问世以来，免疫透射比浊法的应用得到逐渐普及．我们自1993年起应用上海北海精细化学研究所生产的试剂，采用多点校难曲线法测定血清免疫球蛋白，取得满意效果．材料和方法一、试剂全液体IgG、A、M测定试剂盒（批号951101）上海北海精细化学试剂研究所产品．内含：IgG、A、M抗体液各一瓶，IgG、A、M参考液各一瓶，定值：IgG=11.0g／L，IgA=2．0g／L，IgM=1．22g／L．二、方法1.标本测定取1：11稀释血清，按IgG5μl，IgA2…     

康威达消毒液对尿四项检测结果的影响

康威达消毒液作为一种消毒液，已广泛应用于医院检验科对试管、吸管、工作台及地面的消毒。但若清洗不净，对尿分析仪测定的有关项目如蛋白质（PRO）、尿糖（GLU）、血红蛋白（ERY）、亚硝酸（NTT）等产生干扰。1试剂和材料1．1康威达消毒液（杭州西子消毒液厂）。1．240g／L蛋白标准液（上海东菱科华诊断用品公司）。1．3生理盐水。1．4德国宝灵曼M－J型尿十项分析仪及试纸条（新启封，经检测无污染）。2方法将消毒液用生理盐水稀释成1：100、1：200、1：500、1：1000、1：5000）等浓度的溶液用尿分析仪及试条检测得GLU、ERY、Nff…     

血清CK-MB活力的免疫抑制速率法及临床应用

本文采用德国B．M生产的CK－MB试剂盒于VITALAB－半自动生化分析仪上自编程序参数，快速测定血清CK－MB活力，收到满意效果。该法具有灵敏、简便、快速、微量等优点，特别适合医院常规和急诊开展CK－MB活力的检测。1材料与方法1．1试剂①CK－MB（NAC－act）试剂盒（德国B．M产品）。②CK总活力测定试剂盒（TRACE产品）。1．2仗器VITALABMICRO半自动生化分析仪（荷兰）。1．3测定方法于半自动生化分析仪上预置参数。波长340urn，温度30C，延迟时间300s，测定时间60s。试剂量500UI．样本量20UI．混合进作量450UI．因数…     

流式微球检测超敏C反应蛋白方法学的建立及性能评价

目的建立流式微球分析技术（CBA）检测人血清中超敏C反应蛋白（hs—CRP）的方法并对其进行系统性评价。方法将hs—CRP鼠抗人单克隆抗体包被在已激活的羧基化聚苯乙烯微球上,用正交试验对试验条件进行优化选择,并应用美国临床实验室标准化协会的有关规则进行方法学评价。结果试验选择hs—CRP鼠抗人单克隆抗体的加入量为10μg,生物素标记的羊抗人单克隆抗体的稀释倍数为1：540,第一次反应时间为2h、洗涤2次,PE标记亲和素的稀释倍数为1：1000,第2次反应1h洗涤1次。方法学评价显示,CBA检测hs—CRP的分析灵敏度为0．03ng／mL,线性范围为0．03～333．33ng／mL,批内变异系数为2．70％～4．44％,批间变异系数为4．99％～9．52％,准确度相对偏倚为2．17％～4．39％,回收率为98．31％～104．60％。高浓度的三酰甘油、胆固醇和胆红素对3种因子有一定的干扰率,低浓度的三酰甘油、胆固醇和胆红素对3种因子干扰较小。分别与免疫荧光方法比较差异无统计学意义。结论自建的hs—CRP流式微球检测技术性能指标满足公认的质量指标,可拓展流式细胞分析技术,值得临床推广使用。     

联合进口与国产试剂检测献血者抗-HCV的必要性分析

目的　探讨5种不同厂家酶免疫试剂的灵敏度和联合应用的必要性。方法　将2 0份抗 HCV阳性标本按1∶10 0～1∶15 0 0不同倍数进行稀释,用5种进口与国产酶免疫试剂检测不同稀释倍数抗 HCV阳性标本。结果　2 0份阳性标本经5种不同厂家试剂检测,结果均为阳性,无一漏检。随着2 0份血样稀释倍数增加,阳性标本检出数和检出阳性标本的试剂数逐渐减少,当稀释倍数达到1∶110 0～1∶130 0时,国产与进口试剂在灵敏度上的差异有显著性(P <0 .0 1)。结论　献血者初复检宜分别选用灵敏度不同的国产和进口试剂联合检测,以确保检测结果的可靠性。     

新型乙肝定量PCR试剂检测性能验证

目的验证一种新型乙肝定量PCR试剂检测性能。方法参照ISO15189:2012要求,设计一系列实验对新型乙肝定量PCR试剂检测性能评价指标验证。结果 1正确度验证:比对实验显示新型试剂与传统试剂(上海科华)相关性较好(y=1.0259x+0.4857,R2=0.9534);新型试剂参加2014年卫生部室间质评正确率100%。2精密度验证:新型试剂检测高(106)、低(104)浓度样本的批内及批间CV值均小于10%。3可报告范围验证:新型试剂在102~108范围内具有较好线性(y=-0.951x+9.1937,R2=0.998920.99)。4定量检测限:新型试剂检测原倍(103)、2倍、4倍稀释血清的CV值均小于15%,定量检测限可达到500IU/ml左右。结论新型试剂各项评价指标与厂家声明一致,符合PCR检测要求,具有较好的检测性能。