血管生成素样蛋白2对糖尿病肾病足细胞损伤的影响及雷公藤甲素干预研究

目的：通过观察血管生成素样蛋白2（ANGPTL2）在2型糖尿病大鼠肾脏中的表达,探讨其对足细胞损伤的影响及雷公藤甲素的干预机制。方法50只SD雄性大鼠随机分为正常对照组（NC,10只）和实验组（40只）,实验组予高糖高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素（STZ 30 mg/kg）建立2型糖尿病大鼠模型,成功建立模型（32只）再随机分为2组：糖尿病对照组（DM,16只）及雷公藤甲素组（DT,16只）。雷公藤甲素干预8周后,测体重、血压、肾重、血糖、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）,24 h尿蛋白（UAL）的排泄量;镜下观察肾组织病理改变;免疫组化染色技术、实时定量PCR及Western blot法检测肾组织ANGPTL2、Nephrin及Podocin mRNA及蛋白表达的变化。结果 DM组24 h UAL排泄量明显高于NC组（9.07±0.13,0.73±0.03,P＜0.01）,同时ANGPTL2 mRNA及蛋白表达量明显升高（P均＜0.01）, Nephrin及Podocin 的mRNA及蛋白表达量明显降低（P＜0.01）,DT组较DM组24 h UAL排泄量降低（5.51±0.07,9.07±0.13,P＜0.01）,足细胞损伤改善,ANGPTL2 mRNA及蛋白表达量降低（P＜0.01）, Nephrin及Podocin的mRNA及蛋白表达量升高（P＜0.01）,且ANGPTL2 mRNA及蛋白表达量与尿白蛋白呈正相关（r＝0.768,r＝0.989,P＜0.01）,其与 Nephrin及 Podocin的 mRNA及蛋白表达量呈负相关（r＝-0.711,r＝-0.700;＝-0.983,r＝-0.945;P均＜0.01）。结论 ANGPTL2可能通过下调Nephrin及Podocin表达参与足细胞损伤机制,雷公藤甲素可下调ANGPTL2在肾脏的表达,保护足细胞。     

厄贝沙坦联合金水宝对糖尿病肾病大鼠蛋白尿发生机制影响的研究

目的研究厄贝沙坦联合金水宝对糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞裂孔隔膜Podocin的表达影响,探讨DN蛋白尿的发生机制。方法建立糖尿病肾病大鼠动物模型。将动物随机分为厄贝组、金水宝组、联合组、糖尿病肾病组,另设正常对照组。12周后观察尿蛋白,用免疫组化、RT-PCR检测Podocin的表达,并观察Podocin与24尿蛋白的相关性。结果 1联合用药组较单用药组24 h尿蛋白量明显下降(P0.05)。2联合用药组较单用药组Podocin蛋白表达、Podocin mRNA有明显升高(P0.05)。3Podocin蛋白表达量和24 h尿蛋量具有显著负相关性(r=-0.889,P0.001);而Podocin mRNA和24 h尿蛋白量具有显著正相关关系(r=0.933,P0.001)。结论厄贝沙坦联合金水宝较单用药显著减轻糖尿病肾病大鼠早期蛋白尿,通过上调足细胞Podocin的表达,更好地保护肾小球滤过屏障。     

电针对STZ-DM大鼠胰腺组织CHOP、PERK、ATF6、IREmRNA表达和蛋白含量的影响

目的:探讨电针对STZ-DM大鼠机体胰腺组织CHOP、PERK、ATF6、IREmRNA表达和蛋白含量的影响。方法:通过高糖高脂饲料喂养并腹腔注射低剂量STZ制备DM大鼠模型,按RGB分层将造模成功的大鼠随机分为模型组、电针组和药物组,与空白组对照。干预治疗后监测大鼠RBG、检测胰腺组织CHOP、PERK、ATF6、IRE1mRNA表达及蛋白含量。结果:治疗前后进行对比,电针组和药物组大鼠RBG较前明显降低;干预治疗结束后,电针组和药物组大鼠RBG仍高于空白组,虽仍低于模型组,但无统计学差异。模型组CHOP、PERK、ATF6、IRE1mRNA表达与空白组相比均显著升高,蛋白含量也明显升高;电针组CHOP、PERK、ATF6、IRE1mRNA表达明显低于模型组,高于空白组,蛋白含量明显低于模型组,高于空白组;电针组CHOP、PERK、ATF6、IRE1mRNA表达和蛋白含量与药物组无统计学差异。结论:电针可通过下调内质网应激PERK、ATF6、IRE1mRNA表达和蛋白含量,进而减少CHOP激活,进而缓解STZ-DM大鼠胰腺组织ERS。     

NRG1β/JNK信号通路在大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制研究

目的探究神经调节素1β(NRG1β)/JNK信号通路在大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法选取40只6周龄SPF级SD大鼠,随机分为4组,空白对照组、模型组、神经调节素1β组、JNK信号通路抑制剂组。空白对照组不建模,其他三组采用改良线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。造模成功后神经调节素1β组按照2μg/kg的注射比例给大鼠注射NRG1β,JNK信号通路抑制剂组将抑制剂用10%DMSO溶解稀释,向大鼠血管内注入5μl浓度为4 mg/kg的JNK信号通路抑制剂-SP600125。模型组和空白组使用等量的生理盐水处理。采用HE将大鼠脑组织细胞染色,观察缺血脑组织病理改变;采用原位末端标记法(TUNEL)检测缺血后神经细胞凋亡情况;采用改良神经功能缺损评分评价大鼠神经行为功能;检测大鼠脑组织含水量;采用Western blot法检测脑组织JNK表达水平。结果 HE染色结果显示,相比空白对照组,模型组大鼠脑细胞列紊乱、细胞固缩且被染色加深,坏死细胞较多;相比模型组,神经调节素1β组和JNK信号通路抑制剂组大鼠脑细胞显著改善。相比空白对照组,模型组大鼠脑细胞凋亡指数、神经功能缺损评分、大鼠脑组织含水量、p-JNK蛋白表达水平显著升高,且差异有统计学意义(P 0. 01);大鼠脑组织JNK蛋白表达水平无显著变化(P 0. 05);相比模型组,神经调节素1β组和NK信号通路抑制剂组大鼠细胞凋亡指数、神经功能缺损评分、大鼠脑组织含水量、p-JNK蛋白表达水平显著降低,且差异有统计学意义(P 0. 01);大鼠脑组织JNK蛋白表达水平无显著变化(P 0. 05)。结论经NRG1β可以通过抑制JNK信号通路,从而缓解大鼠脑缺血再灌注损伤。     

氧乐果导致染毒大鼠内质网应激的研究

目的研究有机磷暴露接触对内质网的影响。方法大鼠持续60天氧乐果经口染毒,检测骨骼肌中的PERK,BiP,p-eIF2α,eIF2α,IRE1α的表达水平。结果染毒组的BiP,PERK和IRE1α的表达水平均高于Control组(P0.05)。染毒组中BiP,PERK和IRE1α的表达水平中剂量组(MD)和高剂量组(HD)均高于低剂量组(LD)(P0.05);与MD组相比,HD组中BiP,PERK和IRE1α的表达水平较高(P0.05)。染毒组p-eIF2α/eIF2α水平均高于Control组(P0.05)。与LD组和MD组相比,HD组中p-eIF2α/eIF2α的水平较高(P0.05);LD组与MD组的peIF2α/eIF2α水平的差异不具有统计学意义(P0.05)。结论氧乐果暴露接触能够引起大鼠体内产生内质网应激。     

缬沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞相关蛋白Nephrin和TRPC6表达的研究

目的观察足细胞相关蛋白Nephrin、TRPC6在糖尿病肾病(DN)大鼠肾小球中的表达,探讨缬沙坦对其干预的可能机制,为DN的防治提供理论依据。方法雄性SD大鼠40只按体重随机分为正常对照组(NC组,n=7)、DN组(n=11)、缬沙坦干预组H0组、缬沙坦干预组H1组。干预8周后检测大鼠血糖、体重、24 h尿蛋白、血肌酐、尿肌酐,计算肌酐清除率(Ccr);免疫组化法观察肾组织Nephrin、TRPC6的蛋白表达;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测Nephrin、TRPC6的m RNA表达,并进行统计分析。结果 (1)与NC组相比,DN组大鼠Ccr明显减低、24 h尿蛋白定量增加(P<0.05);与DN组相比,H0组及H1组均出现Ccr增加、24 h尿蛋白定量减少(P<0.05),与H0组相比,H1组出现Ccr增加、24 h尿蛋白定量减少(P<0.05)。(2)与NC组比较,DN组大鼠肾脏Nephrin m RNA及蛋白表达均下调,TRPC6 m RNA及蛋白表达均上调(均P<0.05);与DN组比较,H0组及H1组Nephrin m RNA及蛋白表达均上调,TRPC6 m RNA及蛋白表达均下调(均P<0.05);H1组与H0组比较,Nephrin m RNA及蛋白表达均上调,TRPC6m RNA及蛋白表达均下调(均P<0.05)。(3)相关分析:采用直线相关分析后发现,24 h尿蛋白与肾脏Nephrin蛋白及基因表达呈负相关,与TRPC6蛋白及基因表达呈正相关;Ccr与肾脏Nephrin蛋白及基因表达呈正相关,与TRPC6蛋白及基因表达呈负相关。结论缬沙坦可通过上调Nephrin的表达及下调TRPC6表达维持足细胞裂孔膜的完整性,减轻足细胞裂孔膜的损伤,减少蛋白尿产生;在一定剂量范围内,缬沙坦的肾脏保护作用呈剂量依赖性。     

川芎嗪对糖尿病肾病大鼠肾组织GSK-3β、VEGF和ICAM-1表达的影响

目的探讨川芎嗪对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织糖原合成酶激酶(GSK-3β)、血管内皮生长因子(VEGF)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、模型组和川芎嗪组各10只,模型组和川芎嗪组饲喂高脂高糖饮食,腹腔注射小剂量链脲佐菌素(25 mg/kg)建立DN大鼠模型。川芎嗪组灌胃150 mg/(kg·d)的川芎嗪,1次/d,持续8周,模型组和对照组分别灌胃等量的生理盐水。于治疗前后,测定各组大鼠空腹血糖(FBG);治疗后,测定肾功能相关指标血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)的水平和24 h尿蛋白含量;采用Western Blot测定GSK-3β、VEGF和ICAM-1的蛋白表达水平; HE染色观察肾脏组织病理变化。结果与对照组相比,模型组和川芎嗪组大鼠FBG显著升高(P 0. 05),肾功能相关指标SCr、BUN和24 h尿蛋白含量显著升高(P 0. 05),GSK-3β、VEGF和ICAM-1的蛋白表达显著升高(P 0. 05);与模型组相比,川芎嗪组大鼠FBG显著降低(P 0. 05),肾功能相关指标SCr、BUN和24 h尿蛋白含量显著降低(P 0. 05),GSK-3β、VEGF和ICAM-1的蛋白表达显著下降(P 0. 05),HE染色显示肾脏病理变化明显减轻。结论川芎嗪可能通过抑制GSK-3β、VEGF和ICAM-1的表达,改善DN大鼠的肾脏功能。     

高血压大鼠肾脏ACE2的表达及其与内皮素的关系

目的探讨自发性高血压大鼠的肾脏中ACE2的表达情况并对其与血浆中内皮素水平做相关分析。方法实验分为对照组和自发高血压组,采用反转录．聚合酶链式反应（RT—PCR）法测定肾脏中ACE2mRNA表达水平,放射免疫法同批检测大鼠血浆中内皮素的含量。结果自发性高血压大鼠和正常对照大鼠相比,肾脏组织中ACE2蛋白的表达下降（P〈0．05）,血清中内皮素的水平升高（P〈0．05）,与ACE2蛋白的表达呈负相关（r=-0．632,P〈0．05）,与血压水平呈正相关（r=0．615,P〈0．05）。结论ACE2在肾脏的表达不同可能是引发高血压病发病的一个重要因素,且其影响血压的机制可能与缩血管物质有关。     

NF-κB参与低氧预适应对自体原位肝移植大鼠JNK通路的影响

背景：在肝脏缺血再灌注损伤中,NF-κB与JNK通路的串扰方式决定了细胞的死亡或存活。而将低氧预适应用于肝移植过程所导致的细胞凋亡现象,尚未见有报道。目的：探讨低氧预适应后NF-κB的表达对移植肝JNK通路的影响及保护作用。方法：采用经门静脉灌注法建立大鼠自体原位肝移植模型,SD大鼠随机分为正常对照组：不接受任何处理;自体移植组：行自体原位肝移植;低氧预适应组：移植前体积分数8%氮氧混合气体的低氧预处理90min,然后行自体原位肝移植。分别于移植后1,6,24h处死大鼠取肝脏标本检测肝组织丙二醛、超氧化物歧化酶水平,免疫组化方法测定大鼠肝组织p-JNK蛋白,RT-PCR检测肝脏NF-κB mRNA含量,透射电子显微镜下观察肝细胞的超微结构变化。结果与结论：与对照组比较,两移植组肝组织丙二醛水平升高,超氧化物歧化酶水平降低（P〈0.05）;与自体移植组比较,低氧预适应组丙二醛水平显著降低、超氧化物歧化酶水平显著升高（P〈0.05）。与正常对照组比较,两移植组各时相p-JNK蛋白的表达、NF-κB mRNA的转录水平显著升高（P〈0.05）;与自体移植组比较,低氧预适应组NF-κB mRNA转录水平显著增高（P〈0.05）,p-JNK蛋白的表达明显降低（P〈0.05）。透射电镜下自体移植组肝细胞出现典型的凋亡征象,而低氧预适应组肝细胞无明显凋亡形态。提示,肝移植大鼠低氧预适应后可能通过上调NF-κB的表达,减少活性氧释放,抑制JNK通路的持续激活,从而抑制肝细胞凋亡,减轻肝脏缺血再灌注。     

烟雾暴露对卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型肺组织激活素A mRNA和蛋白表达的影响

目的分析烟雾暴露对卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型肺组织激活素A mRNA和蛋白表达的影响。方法取28只健康成年雄性SD大鼠,按照随机分配原则,分为空白对照组(正常大鼠,不采取任何处理)、阴性对照组(正常大鼠+烟雾暴露)、模型组(制备卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型)、实验组(急性支气管哮喘大鼠+烟雾暴露),每组各7只。行苏木精-伊红染色,观察各组大鼠肺组织病理学改变;采用免疫印迹法检测大鼠肺组织中激活素A蛋白表达水平;根据实时荧光定量聚合酶链反应检测大鼠肺组织中激活素A mRNA相对表达量。结果经病理学染色结果可知,空白对照组肺组织病理学未见异常,而阴性对照组、模型组及实验组肺组织出现不同程度的病理学改变,且实验组更加明显。经免疫印迹法检测可知,阴性对照组、模型组及实验组肺组织中激活素A蛋白表达水平较空白对照组均明显升高(P <0. 05);模型组肺组织中激活素A蛋白表达水平较阴性对照组明显升高(P <0. 05);实验组肺组织中激活素A蛋白表达水平较阴性对照组和模型组明显升高(P <0. 05)。经实时荧光定量聚合酶链反应检测可知,相比空白对照组,阴性对照组、模型组及实验组肺组织中激活素A mRNA相对表达量均明显上调(P <0. 05);相比阴性对照组,模型组肺组织中激活素A mRNA相对表达量明显上调(P <0. 05);相比阴性对照组和模型组,实验组肺组织中激活素A mRNA相对表达量明显上调(P <0. 05)。结论在卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型中,经烟雾暴露可促进大鼠肺组织激活素A蛋白表达,提高激活素A mRNA表达量,并进一步导致气道炎症加重。     

电针对帕金森病模型大鼠内质网应激IRE1α-ASK1-JNK通路的影响

目的:探讨内质网应激介导的IRE1α-ASK1-JNK通路在鱼藤酮诱导的帕金森病(PD)模型大鼠中的作用及电针干预治疗对该通路的影响。方法:将120只健康雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、电针预治疗组、电针治疗7d组、电针治疗14d组、电针治疗21d组、电针治疗28d组,每组15只,采用颈背部皮下注射鱼藤酮法制备帕金森病模型,假手术组只注射不含鱼藤酮的等量葵花油乳化液。正常组、模型组、假手术组不做任何治疗;电针治疗组在造模完成后选取"风府"、"太冲"穴给予电针治疗;电针预治疗组电针治疗7d后再造模。采用旷场试验检测大鼠行为学改变,并用Western-blot法检测大鼠中脑黑质内IRE1α、ASK1、p-JNK蛋白表达的变化。结果:模型组大鼠表现出明显的PD症候群特征,电针干预后模型大鼠行为学评分改善明显(P0.01)。模型组大鼠黑质IRE1α、ASK1、p-JNK蛋白表达较正常组和假手术组显著增高(均P0.01);与模型组相比,电针预治疗组和电针治疗7d、14d、21d、28d组IRE1α、ASK1、p-JNK蛋白表达水平显著降低(均P0.01)。结论:电针防治帕金森病的机制可能与电针能明显抑制内质网应激通路IRE1α-ASK1-JNK的活性,保护多巴胺能神经元免于凋亡有关。     

miR-132调控SIRT1表达对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺损伤的影响

目的 探讨miR-132在慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中的表达及其对大鼠肺功能及肺损伤的影响。方法 根据随机数表法将30只SD大鼠分为3组,即对照组(Sham组)、COPD组和COPD+miR-132组,每组10只。COPD组和COPD+miR-132组大鼠气道内滴注脂多糖联合烟熏28 d构建COPD模型,Sham组大鼠滴加等剂量的生理盐水,COPD+miR-132组大鼠额外滴加miR-132转染复合物,每周一次,持续4周。COPD疾病造模成功后,检测大鼠肺组织中miR-132的表达、大鼠肺功能、肺组织形态结构、肺组织中促炎症细胞因子、氧化应激及凋亡水平。检测各组大鼠肺组织中沉默调节蛋白1(SIRT1)及乙酰化的叉头转录因子-1(Ac-FOXO-1)的蛋白表达水平。结果与Sham组相比,COPD组大鼠肺组织中miR-132表达水平明显降低(P 0. 05)、0. 3 s用力呼气量占用力肺活量比值(FEV0. 3/FVC)和呼气峰流速(PEF)升高(P 0. 05)、肺泡平均截距增宽(P 0. 05)、促炎症细胞因子IL-1β,TNF-α及MCP-1的mRNA表达水平增高(P 0. 05)、细胞凋亡和氧化应激水平升高(P 0. 05)、SIRT1及AcFOXO-1的蛋白表达水平明显降低(P 0. 05);与COPD组相比较,COPD+miR-132组大鼠肺组织的miR-132的表达水平明显升高(P 0. 05)、FEV0. 3/FVC和PEF升高(P 0. 05);苏木精-伊红(HE)染色结果显示,miR-132明显降低了COPD大鼠肺泡平均截距(P 0. 05); RT-PCR结果显示,miR-132表达增加可明显抑制大鼠肺组织中促炎症细胞因子IL-1β,TNF-α及MCP-1的mRNA表达水平(P 0. 05); TUNEL染色结果表明,COPD+miR-132组大鼠肺组织中细胞凋亡水平明显低于COPD组(P 0. 05);同时,miR-132预处理可明显抑制COPD大鼠肺组织的氧化应激水平(P 0. 05);机制上,miR-132过表达可上调COPD大鼠肺组织中SIRT1及Ac-FOXO-1的蛋白表达水平(P 0. 05)。结论 在COPD大鼠模型中,miR-132的表达水平明显降低,过表达miR-132可以降低肺泡腔扩大,抑制大鼠肺组织炎症、凋亡及氧化应激水平,其保护作用可能与SIRT1信号通路的激活有关。     

利拉鲁肽对动脉粥样硬化过程中糖尿病大鼠血管平滑肌KCa3.1表达的影响

目的探讨利拉鲁肽对动脉粥样硬化过程中糖尿病大鼠血管平滑肌KCa3. 1表达的影响。方法 SD大鼠24只,分为对照组6只,模型组9只,治疗组9只。模型组与治疗组大鼠给予高脂饲料喂养,空白对照组大鼠给予普通饲料,共4周;模型组与治疗组腹腔注射STZ 30 mg/kg,空白对照组注射等体积柠檬酸钠缓冲液;造模成功后治疗组使用利拉鲁肽0. 3 mg/kg 1次/d皮下注射,对照组、模型组大鼠皮下注射等容积生理盐水,共11周。处死大鼠后对大鼠主动脉血管进行HE染色、Massion三色染色,Real-time RT-PCR进行血管平滑肌KCa3. 1mRNA定量测定,Westernblotting测定血管平滑肌蛋白表达。结果模型组和治疗组均造糖尿病模型成功。HE染色提示模型组及治疗组有早期的动脉粥样硬化,HE可见治疗组及对照组血管平滑肌增殖及紊乱,Massion三色提示模型组及治疗组有胶原纤维增生。Realtime-PCR测定表明,模型组主动脉平滑肌细胞KCa3. 1mRNA表达比治疗组及对照组高(P 0. 05),治疗组及对照组无显著统计学差异(P 0. 05)。Western-blotting测定表明,模型组主动脉平滑肌细胞KCa3. 1蛋白表达比治疗组及对照组高(P 0. 05),治疗组及对照组无显著统计学差异(P 0. 05)。结论利拉鲁肽能够对抗早期动脉粥样硬化,减低糖尿病大鼠血管平滑肌KCa3. 1表达。     

罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏病理改变的影响

目的 观察罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏组织病理改变的影响并探讨其作用机制.方法 24只SD大鼠随机分成3组,糖尿病组:腹腔注射含链酶佐菌素(STZ)60 mg/kg;罗格列酮治疗组:先腹腔注射STZ 60 mg/kg,第4天起给予0.9%氯化钠溶液溶解的罗格列酮1 mg/(kg·d)灌胃.8周后,观察3组肾脏组织在光镜、电镜下的病理表现,用免疫组化法和逆转录-聚合酶链式反应法观察环氧化酶-2(COX-2)的蛋白表达和COX-2mRNA的表达.结果 正常对照组大鼠肾脏无明显病理变化.糖尿病组大鼠肾脏在光镜下显示肾小球细胞外基质增多,基底膜增厚,肾小管有炎症细胞浸润;在电镜下显示肾小球细胞基底膜不均匀,相邻足突大部分融合或缺失.罗格列酮治疗组病理改变较糖尿病组减轻.糖尿病组大鼠COX-2蛋白表达较正常对照组明显上调,罗格列酮组较糖尿病组明显下调.糖尿病组大鼠COX-2mRNA(0.474±0.012)在肾脏的表达较正常对照组(0.342±0.016)显著上调(P＜0.01),罗格列酮组(0.369±0.025)较糖尿病组显著下调(P＜0.01).结论 STZ诱导的糖尿病大鼠的肾脏具有COX-2介导的病理改变,罗格列酮可以抑制COX-2的表达,改善糖尿病大鼠肾脏的病理改变.     

黄芪甲苷对妊娠期高血压模型大鼠胎盘组织中HIF-1α、sFLT-1和PLGF表达水平的影响

目的探讨黄芪甲苷对妊娠期高血压(HDCP)模型大鼠胎盘组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFLT-1)和胎盘生长因子(PLGF)表达水平的影响。方法将30只SD孕鼠随机分为对照组、模型组和黄芪组各10只。于妊娠第12天,模型组和黄芪组灌胃亚硝基左旋精氨酸甲酯10 mg/kg,连续7 d,建立大鼠HDCP模型,对照组灌胃等量生理盐水。于妊娠第16天,黄芪组灌胃20 mg/kg黄芪甲苷溶液,模型组和对照组分别灌胃等量的生理盐水,1次/d,连续灌胃6 d。于妊娠第12天、16天、17天及21天测尾动脉血压和24 h尿蛋白含量;处死后,采用ELISA法测定血清中白介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western Blot胎盘组织中HIF-1α、sFLT-1和PLGF的表达。结果与对照组相比,模型组和黄芪组尾动脉血压、24 h尿蛋白含量、血清IL-6和TNF-α、HIF-1α和sFlt-1蛋白和mRNA表达水平均显著升高(P 0. 05),模型组PLGF的蛋白和mRNA表达水平显著下降(P 0. 05),黄芪组PLGF的蛋白和mRNA表达水平显著升高(P 0. 05);与模型组相比,黄芪组尾动脉血压、24 h尿蛋白含量、血清IL-6和TNF-α、HIF-1α和sFlt-1蛋白和mRNA表达水平均显著下降(P 0. 05),PLGF的蛋白和mRNA表达水平显著升高(P 0. 05)。结论黄芪甲苷可以使HDCP大鼠的HIF-1α和sFlt-1的表达下调,PLGF的表达上调,对HDCP具有一定的治疗作用。     

JNK通路在AngⅡ所致肾小球足细胞内质网应激性凋亡中的作用

目的研究内质网应激（ERS）在AngⅡ所致肾小球足细胞损伤中的作用及c-Jun氨基末端激酶（JNK）通路在AngⅡ所致肾小球足细胞凋亡中的促进作用及其特异性抑制剂SP600125的保护。方法足细胞诱导分化,随机分为对照组（N组）;AngⅡ组（A组）;AngⅡ＋SP600125组（A＋S组）,作用48h后,倒置显微镜下观察足细胞形态变化,并用流式细胞仪测定细胞凋亡率,实时定量PCR测定GRP78mRNA、p-JNK mRNA表达,Western blot测定GRP78蛋白、p-JNK蛋白的表达。结果经统计学分析后,A组与N组比较,细胞凋亡率增加,GRP78mRNA、p-JNK mRNA的表达增多,且GRP78蛋白、p-JNK蛋白的表达较N组增多,差异有统计学意义（P〈0.05）;A＋S组足细胞凋亡率、p-JNK mRNA、p-JNK蛋白的表达较A组均有减少,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论高AngⅡ可以在体外诱导足细胞发生凋亡。高AngⅡ诱导足细胞凋亡是由ERS途径所介导的,并通过了JNK途径引起细胞凋亡。JNK途径特异性抑制剂SP600125通过抑制c-Jun氨基末端激酶通路的激活抑制了足细胞的凋亡。     

鸢尾素在腺嘌呤诱导慢性肾病大鼠模型中的表达及意义

目的 探讨血清鸢尾素在腺嘌呤诱导的慢性肾病（chronic kidney disease, CKD）大鼠模型中的表达和变化,及鸢尾素与其相关通路在CKD肾纤维化中的作用。方法 采用简单随机法将20只雄性SD大鼠分为对照组和模型组（CKD组）,每组各10只。观察比较建模后第2、4周末两组大鼠的生化指标、血清鸢尾素和血清BMP7水平与肾脏病理改变及肾纤维化程度,并检测其肾脏组织的α-平滑肌肌动蛋白（alpha-smooth muscle actin,α-SMA）、Ⅰ型胶原（collagen type I, Col-Ⅰ）、骨形成蛋白7(bone morphogenetic protein 7, BMP7)、Smad1蛋白和信使RNA(messenger RNA, mRNA)表达水平。结果 与对照组比较,CKD组在建模后第2、4周末的血清肌酐、血清尿素氮和24 h蛋白尿定量均升高（P<0.05）,α-SMA、Col-Ⅰ蛋白及mRNA表达水平均增加（P<0.05）,血清鸢尾素和血清BMP7均降低（P<0.05）,BMP7、Smad1蛋白和mRNA表达水平均降低（P<0.0...     

NF-κB参与低氧预适应对自体原位肝移植大鼠JNK通路的影响

背景:在肝脏缺血再灌注损伤中,NF-κB与JNK通路的串扰方式决定了细胞的死亡或存活.而将低氧预适应用于肝移植过程所导致的细胞凋亡现象,尚未见有报道.目的:探讨低氧预适应后NF-κB的表达对移植肝JNK通路的影响及保护作用.方法:采用经门静脉灌注法建立大鼠自体原位肝移植模型,SD大鼠随机分为正常对照组:不接受任何处理;自体移植组:行自体原位肝移植;低氧预适应组:移植前体积分数8%氮氧混合气体的低氧预处理90 min,然后行自体原位肝移植.分别于移植后 1,6,24 h处死大鼠取肝脏标本检测肝组织丙二醛、超氧化物歧化酶水平,免疫组化方法测定大鼠肝组织p-JNK蛋白,RT-PCR检测肝脏 NF-κB mRNA含量,透射电子显微镜下观察肝细胞的超微结构变化.结果与结论:与对照组比较,两移植组肝组织丙二醛水平升高,超氧化物歧化酶水平降低(P < 0.05);与自体移植组比较,低氧预适应组丙二醛水平显著降低、超氧化物歧化酶水平显著升高(P < 0.05).与正常对照组比较,两移植组各时相p-JNK蛋白的表达、NF-κB mRNA的转录水平显著升高 (P <0.05);与自体移植组比较,低氧预适应组NF-κB mRNA转录水平显著增高(P < 0.05),p-JNK蛋白的表达明显降低(P < 0.05).透射电镜下自体移植组肝细胞出现典型的凋亡征象,而低氧预适应组肝细胞无明显凋亡形态.提示,肝移植大鼠低氧预适应后可能通过上调NF-κB的表达,减少活性氧释放,抑制JNK通路的持续激活,从而抑制肝细胞凋亡,减轻肝脏缺血再灌注.     

厄贝沙坦联合普罗布考对糖尿病肾病大鼠肾组织MCP-1表达的影响

目的：探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达及厄贝沙坦联合普罗布考对其表达的影响。方法采用高糖高脂高胆固醇饮食并配合链脲佐菌素（STZ）腹腔注射的方法建立2型糖尿病肾病大鼠模型。将大鼠随机分为正常对照组（NC）、糖尿病肾病组（DN）、厄贝沙坦组（DI）,厄贝沙坦＋普罗布考组（DP）,检测各组大鼠体重、随机血糖、24h尿量、24h尿蛋白定量（24hUTP）、SCR、BUN,行HE染色观察大鼠肾脏一般结构;免疫组化观察MCP-1的表达;RT-PCR观察MCP-1mRNA的表达。结果与NC组比较,各组大鼠肾脏病理损伤加重,24h尿量、24hUTP、随机血糖、SCR、BUN、肾脏MCP-1mRNA及蛋白均明显增加,体重减轻（P＜0.05）;与DN组比较,DI组、DP组大鼠肾脏病理损伤减轻,24h尿量、24hUTP、肾脏MCP-1mRNA及蛋白下降,体重增加（P＜0.05）;与DI组比较,DP组大鼠肾脏病理损伤减轻,24h尿量、24hUTP、肾脏MCP-1mRNA及蛋白水平下降（P＜0.05）;其余指标无明显改善（P＞0.05）。结论 MCP-1参与了糖尿病肾病的发生发展;厄贝沙坦及普罗布考能够降低糖尿病肾病MCP-1的表达,缓解肾脏病理损伤,联合后效果更明显。     

七氟烷后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及与NCX1的相关性研究

目的研究七氟烷后处理(Sevo Po C)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用及与钠钙交换体1(NCX1)的相关性。方法取36只SD大鼠,构建离体心脏灌注模型,待血流动力学稳定0. 5 h后,缺血0. 5 h复灌1 h构建大鼠MIRI模型,随机分为对照组(离体心脏灌注KH液2 h)、模型组(离体心脏灌注KH液0. 5 h,停止灌注0. 5 h,接着恢复灌注1 h)和实验组(复灌即刻用3%的七氟烷持续灌注15 min,其他同模型组),三组各12只。比较三组大鼠平衡灌注期(T0)、再灌注0. 5 h(T1)和再灌注1 h(T2)各项心功能指标的变化情况,采用免疫印迹法检测三组大鼠NCX1、兰尼碱受体2(RyR2)及L型钙通道(LTCCs)蛋白的表达水平,并用实时荧光定量PCR法检测大鼠NCX1、RyR2及LTCCs mRNA的相对表达量。结果相比T0,模型组再灌注0. 5 h(T1)和再灌注1 h(T2)左心室舒张末期压力(LVEDP)显著增高(P 0. 05),而最大左心室发展压下降速率(-dp/dt)、最大左心室发展压上升速率(+p/dt)、心率与左心室发展压的乘积(RPP)显著下降(P 0. 05);相比对照组,模型组T1和T2时LVEDP显著增高(P 0. 05),而-dp/dt、+dp/dt和RPP显著下降(P 0. 05);相比T0,实验组T1和T2时LVEDP显著增高(P 0. 05),T1和T2时LVEDP较对照组明显增高,而较模型组显著下降(P 0. 05);实验组T1时-dp/dt较模型组显著增高(P 0. 05),T2时-dp/dt较T0显著下降,亦较对照组显著下降(P 0. 05);实验组T1和T2时+dp/dt和RPP较模型组显著增高(P 0. 05)。三组大鼠RyR2和LTCCs蛋白表达水平的比较,无显著差异(P 0. 05);模型组大鼠NCX1蛋白表达水平较对照组明显升高(P 0. 05),而实验组大鼠NCX1蛋白表达水平较模型组明显下降(P 0. 05)。三组大鼠NCX1、RyR2及LTCCs mRNA相对表达量的比较,无显著差异(P 0. 05)。结论 Sevo Po C可促进MIRI大鼠心功能恢复,其具有保护MIRI的作用,而这一保护作用可能与其具有抑制NCX1表达的作用密切相关。