金童颗粒治疗抽动秽语综合征模型小鼠的药效学研究

目的观察金童颗粒治疗实验性抽动秽语小鼠模型的药效学作用。方法采用苯丙胺腹腔注射及阿朴吗啡皮下注射方法建立拟抽动小鼠模型，将动物随机分为正常对照组、模型组、金童颗粒大、小剂量组和氟哌啶醇对照组，观察动物的自主活动和攀爬行为，检测动物脑纹状体内多巴胺及其代谢产物的含量。结果在苯丙胺模型中，金童颗粒组小鼠的自主活动和纹状体内多巴胺含量低于模型组（P〈0．05）；在阿朴吗啡模型中，金童颗粒组小鼠异常攀爬时间较模型组缩短（P〈0．05）。结论金童颗粒能够改善拟抽动模型小鼠异常增高的自主活动，降低其纹状体内多巴胺含量。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对MPTP致多巴胺能神经元损伤的保护作用

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法32只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组：假手术组腹腔注射等量生理盐水,模型组腹腔注射4次MPTP(16 mg/kg,间隔2 h),EGCG治疗组为MPTP+EGCG(5 mg/kg)组,EGCG正常给药组不做任何处理,每日给予5 mg/kg EGCG。连续给药3周后检测行为学指标,黑质酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化染色及高效液相色谱-电化学法测定纹状体内多巴胺及其代谢产物浓度。结果模型组5 min内的自发运动次数(71.4±14.0)下降,而EGCG治疗组自发运动次数(87.9±10.7)提高(P<0.05)。与模型组转杆停留时间(73.5±24.9) s相比,EGCG治疗组转杆停留时间(118.6±31.2) s延长(P<0.05)。形态学结果显示,EGCG治疗组黑质TH阳性神经元与模型组相比,数量明显增多。模型组纹状体内多巴胺(DA)及其代谢产物3,4-双羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)浓度显著降低,而EGCG治疗组DA、DOPAC和HVA浓度虽有一定程度升高,但无统计学差异。结论EGCG改善MPTP致帕金森病模型小鼠的运动能力下降,对黑质多巴胺神经元有保护作用。     

哌替啶类衍生物造模帕金森病小鼠的最佳剂量

目的:比较不同剂量哌替啶类衍生物1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyrindine,MPTP)建立的帕金森病小鼠模型对小鼠纹状体多巴胺含量的影响。方法:实验于2003-11/2004-07在北京宣武医院神经生物学实验室完成。选择C57BL/6L小鼠60只,采用不同剂量MPTP建立帕金森病小鼠模型,随机分6组,MPTP40mg/kg皮下注射1次组10只;MPTP20mg/kg腹腔注射,每2h1次,注射3次组10只;MPTP25mg/kg腹腔注射,每2h1次,注射3次组10只;MPTP45mg/kg皮下注射1次组10只;MPTP35mg/kg皮下注射1次组10只;正常对照组10只。采用Lowry法测定纹状体组织中多巴胺含量/蛋白质含量。结果:纳入动物60只,52只进入结果分析,其中8只均在处死前死亡。MPTP使小鼠纹状体多巴胺含量显著性下降。正常对照组多巴胺含量为(136.39±41.61)μg/g;MPTP35,40,45mg/kg皮下注射1次组分别为(107.97±26.92),(85.91±24.60),(74.13±12.49)μg/g,分别是正常对照组的79.16%,62.99%,54.35%;MPTP20,25mg/kg腹腔注射每2h1次,注射3次组分别为(44.90±18.41),(44.30±29.44)μg/g,分别是正常对照组的32.92%,32.48%。5个模型组与正常对照组比较差异均显著(P<0.01)。结论:MPTP20mg/kg腹腔注射每2h1次,注射3次和MPTP40mg/kg皮下注射1次两种模型是对帕金森病不同研究方向的理想模型。     

肌苷对帕金森病模型小鼠行为学及纹状体多巴胺水平的影响

目的:观察肌苷对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)致帕金森病模型小鼠行为学及多巴胺水平的影响。方法:实验在解放军第四军医大学实验动物中心实验室和基础部神经生物教研室实验室进行。取雄性C57BL小鼠20只,腹腔注射MPTP建立C57BL小鼠帕金森病模型,随机分为生理盐水组和肌苷组各10只,通过行为学检测、免疫组织化学和荧光分光光度法,观察肌苷对小鼠帕金森病模型的行为学表现、黑质多巴胺神经元和纹状体酪氨酸羟化酶免疫反应阳性(tyrosinehydroxylase-immunoreactive,TH-ir)神经纤维以及纹状体多巴胺水平的影响。结果:给予肌苷后帕金森病小鼠行为学计数和黑质多巴胺神经元数目与生理盐水组相比差异无显著性意义,但纹状体TH-ir神经纤维密度和纹状体多巴胺水平升高,给予肌苷后纹状体多巴胺水平是生理盐水组的2.08倍。结论:肌苷对MPTP所致的帕金森病模型小鼠具有改善自主活动的能力,并且对纹状体内多巴胺水平也产生干预效应。     

肌苷对帕金森病模型小鼠行为学及纹状体多巴胺水平的影响

目的：观察肌苷对1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1，2，3，6-tetrahydropyfidine，MPTP)致帕金森病模型小鼠行为学及多巴胺水平的影响。方法：实验在解放军第四军医大学实验动物中心实验室和基础部神经生物教研室实验室进行。取雄性C57BL小鼠20只，腹腔注射MPTP建立C57BL小鼠帕金森病模型，随机分为生理盐水组和肌苷组各10只，通过行为学检测、免疫组织化学和荧光分光光度法，观察肌苷对小鼠帕金森病模型的行为学表现、黑质多巴胺神经元和纹状体酪氨酸羟化酶免疫反应阳性(tyrosine hydroxylase-immunoreactive，TH-ir)神经纤维以及纹状体多巴胺水平的影响。结果：给予肌苷后帕金森病小鼠行为学计数和黑质多巴胺神经元数目与生理盐水组相比差异无显著性意义，但纹状体TH-ir神经纤维密度和纹状体多巴胺水平升高，给予肌苷后纹状体多巴胺水平是生理盐水组的2．08倍。结论：肌苷对MPTP所致的帕金森病模型小鼠具有改善自主活动的能力．并且对纹状体内多巴胺水平也产生干预效应。     

MPTP诱导多巴胺能神经元凋亡规律和尼古丁神经保护作用的研究

目的:探讨1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导小鼠多巴胺能神经元凋亡的规律以及尼古丁对其的保护作用。方法:取28只小鼠(PD组)腹腔注射MPTP 30 mg/(kg·d),共7 d,建立小鼠帕金森病模型;取4只小鼠(Nic组)腹腔注射尼古丁(2 mg/kg,每天5次,共17 d);取4只小鼠(Nic+MPTP组)给予尼古丁预处理和MPTP;取4只小鼠(对照组)仅给予等量生理盐水。应用酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学染色和TUNEL染色,观察各组黑质多巴胺能神经元数目改变和凋亡细胞的变化规律。结果:慢性MPTP处理过程中,小鼠黑质TH阳性细胞数逐渐减少,于MPTP注射第3天开始出现TUNEL阳性细胞,并于第8天达到高峰。与PD组相比,Nic+MPTP组TH阳性细胞丢失和TUNEL阳性细胞增多的程度显著降低(P<0.05)。结论:采用慢性MPTP处理的模式,可诱导小鼠黑质多巴胺能神经元凋亡;尼古丁对这类神经元具有明显保护作用。     

低剂量γ射线照射对小鼠多巴胺能神经元的保护作用

目的研究低剂量γ射线照射对多巴胺能神经元可能的保护作用。方法在小鼠MPTP损伤模型中,进行低剂量γ射线全身照射,高效液相色谱测定纹状体内DA及代谢产物含量变化,免疫组化计数多巴胺能神经元,活化小胶质细胞和星形胶质细胞。结果3．5Gy照射组与未照射组比较,MPTP造成的DA及其代谢产物损失明显减轻。结论低剂量γ射线照射对多巴胺能神经元有一定保护作用。     

哌替啶类衍生物造模帕金森病小鼠的最佳剂量

目的：比较不同剂量哌替啶类衍生物1-甲基-4-苯基-1,2，3，6-四氧吡啶（1-methy-4-phenyl—1，2，3，6-tetrahydropyfindine，MPTP）建立的帕金森病小鼠模型对小鼠纹状体多巴胺含量的影响。 方法：实验于2003-11／2004-07在北京宣武医院神经生物学实验室完成。选择C57BL/6L。小鼠60只，采用不同剂量MPTP建立帕余森病小鼠模型，随机分6组，MPTP40mg／kg皮下注射1次组10只；MPTP20mg／kg腹腔注射，每2h1次，注射3次组10只；MPTP25mg／kg腹腔注射，每2h1次，注射3次组10只；MPTP45mg／kg皮下注射1次组10只；MPTP35mg／kg皮下注射1次组10只；正常对照组10只。采用Lowry法测定纹状体组织中多巴胺含量／蛋白质含量。 结果：纳入动物60只，52只进入结果分析，其中8只均在处死前死亡。MPTP使小鼠纹状体多巴胺含量显著性下降。正常埘照组多巴胺含量为（136．39&;#177;41．61）μg/g；MPTP35，40，45mg／kg皮下注射1次组分别为（107．97&;#177;26．92），（85．91&;#177;24．60），（74．13&;#177;12．49）μg/g，分别是正常对照组的79．16％，62．99％，54．35％；MPTPP20，25mg／kg腹腔注射每2h1次，注射3次组分别为（44．90&;#177;18.41），（44．30&;#177;29．44）μg／g，分别是正常对照组的32．92％，32．48％。5个模型组与正常对照组比较差异均显著（P〈0．01）。 结论：MPTP20mg／kg腹腔注射每2h1次，注射3次和MPTP40mg／kg皮下注射1次两种模型是对帕金森病不同研究方向的理想模型。     

不同周龄组的C57BL小鼠多巴胺神经元对MPTP敏感性的对比及其机制探讨

目的：观察不同周龄的C57BL小鼠多巴胺神经元对1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶（MPTP）的药物敏感性差异，探讨其差异的机制是否与热休克蛋白70（HSP70）不同表达相关。方法：将4。6周龄及15。17周龄的C57BL小鼠给予MPTP造成帕金森病模型，同时设立对照组。采用高效液相法检测纹状体内多巴胺（DA）、3，4-二羟苯乙酸（DOPAC）、高香草酸（HVA）的含量。免疫组化法观察黑质中酪胺酸羟化酶（TH）阳性细胞及HSP70的表达。结果：15-17周龄小鼠在MPTP造模后纹状体中DA、DOPAC、HVA的含量，黑质中的TH阳性细胞数和HSP70的表达含量均明显低于4—6周龄模型组（P〈0．05），而两个周龄的对照组的各项指标均无明显差异。结论：15-17周龄的C57BL小鼠对于MPTP的敏感性明显高于4—6周龄小鼠。HSP70的表达量不同可能是造成敏感性差异的原因之一。     

茶多酚对帕金森病模型小鼠多巴胺神经元保护作用的实验研究

目的探讨茶多酚对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法70只C57BL/6小鼠分为4组,A组为生理盐水(NS)+NS组,B组为NS+茶多酚(GTPs)组,C组(模型组)为NS+MPTP组,D组为GTPs+MPTP组,其中D组又分为D1组(10mg/kg)及D2(50mg/kg)组,在注射GTPs后0.5h腹腔注射MPTP3次,制作帕金森病模型。腹腔注射茶多酚后,应用高效液相色普-电化学分析法(HPLC-ECD)测定多巴胺及其代谢产物浓度。结果A组多巴胺及代谢产物含量最高,B组与A组无显著性差异,C组与A组比较有显著性差异(P<0.05),D组与C组相比浓度升高(P<0.05)。结论茶多酚对MPTP诱发的帕金森病模型小鼠黑质多巴胺神经元有保护作用。     

Nonmuscarinic neurotoxicity of oxotremorine

The ability of various treatments to prevent peripheral parasympathetic actions, central effects and lethality of the muscarinic agonist oxotremorine was studied in rats. The percentage of animals exhibiting effects of oxotremorine was dose and time dependent. The ED50 for producing lacrimation, salivation, tremor, convulsions and death was 2.5, 1.3, 1.6, 3.2 and 8.3 mg/kg i.p., respectively. Pretreatment with 5 mg/kg of atropine completely prevented all observable effects of oxotremorine at doses of 5 mg/kg and below. Doses of oxotremorine in excess of 5 mg/kg produced tremor, generalized clonic convulsions and death that could not be prevented by atropine when given at up to 160 mg/kg; lacrimation and salivation were not present in atropine-treated rats. In the presence of 40 mg/kg of atropine, ED50 values for oxotremorine were shifted more than 12-fold for lacrimation, salivation and tremor, whereas convulsions and death were maximally altered by a factor of 2. Scopolamine, benactyzine and benztropine were also incapable of completely preventing tremor, convulsions and death induced by 10 or 15 mg/kg of oxotremorine. Atropine methyl nitrate had effects comparable to atropine sulfate on lacrimation, salivation and lethality induced by oxotremorine (10 or 15 mg/kg) but had no effect on tremor or convulsions. A similar profile of atropine-insensitive effects was produced by pilocarpine and arecoline. Doses of diazepam 4 times higher (4 mg/kg) than necessary to prevent tonic-clonic convulsions induced by pentylenetetrazol were ineffective against tremor, convulsions or death produced by oxotremorine (10 or 15 mg/kg) unless given in conjunction with atropine.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

小胶质细胞介导帕金森病模型小鼠的炎症损伤

背景:研究表明帕金森病的黑质纹状体存在小胶质细胞的激活,但其释放炎症因子在帕金森病发病过程中的作用尚不明确。目的:观察小胶质细胞激活所释放的两种炎症因子整合素α及肿瘤坏死因子α在小鼠黑质部位的蛋白表达及酪氨酸羟化酶的蛋白表达。方法:将C57BL/6小鼠经腹腔注射百草枯(10mg/kg),设为帕金森病模型组,并设置对照组,观察两组小鼠行为活动。用高效液相法测定小鼠黑质纹状体多巴胺的含量。采用免疫组织化学法检测黑质部位酪氨酸羟化酶、整合素α及肿瘤坏死因子α蛋白表达。结果与结论:百草枯可造成帕金森病模型组小鼠运动减少,并伴有运动迟缓、震颤、探嗅、竖毛及尾巴硬类似于帕金森病样的行为表现,并且脑内黑质纹状体多巴胺含量降低(P<0.05),酪氨酸羟化酶蛋白表达降低(P<0.05),整合素α和肿瘤坏死因子α蛋白表达增加(P<0.05),肿瘤坏死因子α在模型组小鼠黑质纹状体有阳性表达,且主要分布在小胶质细胞上。结果表明小胶质细胞介导的炎症损伤参与了帕金森多巴胺能神经元的损害过程。     

小胶质细胞介导帕金森病模型小鼠的炎症损伤术

背景：研究表明帕金森病的黑质纹状体存在小胶质细胞的激活,但其释放炎症因子在帕金森病发病过程中的作用尚不明确。目的：观察小胶质细胞激活所释放的两种炎症因子整合素a及肿瘤坏死因子a在小鼠黑质部位的蛋白表达及酪氨酸羟化酶的礞白表达。方法：将C57BL／6小鼠经腹腔注射百草枯（10mg／kg）,设为巾f{金森病模型组,并设置对照组,观察两组小鼠行为活动。用高效液相法测定小鼠黑质纹状体多巴胺的含量。采用免疫组织化学法检测黑质部位酪氰酸羟化酶、整合索a及肿瘤坏死因子a蛋白表达。结果与结论：百草枯可造成帕金森病模型组小鼠运动减少,并伴有运动迟缓、震颤、探嗅、峰毛及尾巴硬类似于帕金森病样的行为表现,并且脑内黑质纹状体多巴胺含量降低（P〈0．05）,酪氨酸羟化酶蛋白表达降低（P〈0．05）,整合索a和肿瘤坏死因子a蛋白表达增N（P〈O．05）,肿瘤坏死因子a在模型组小鼠黑质纹状体有阳性表达,且主要分布在小胶质细胞上。结果表明小胶质细胞介导的炎症损伤参与了帕金森多巴胺能神经元的损害过程。     

橙皮水提取物对昆明种小鼠睡眠和自发活动的影响

背景应用抖笼换能器法、阈上、阈下剂量戊巴比妥钠睡眠时间的实验法,探讨橙皮水提取物对昆明种小鼠睡眠和自发活动的影响.目的观察橙皮水提取物对昆明种小鼠睡眠和自发活动的影响.设计随机对照实验观察.单位赣南医学院病理教研室、生理学教研室及药理教研室.材料实验于2005-01/02在赣南医学院科研中心实验室完成.选择健康成年昆明种清洁级小鼠90只,每种实验方法30只,随机分为3组,对照组,小剂量给药组,大剂量给药组;每组10只.方法①采用抖笼换能器法记录小鼠自发活动情况,小波(波幅＜5 mm)为小鼠轻度活动(舐毛、瘙痒)的波形;中波(波幅5～10 mm)为小鼠中度活动(走动、立起、爬上、爬下)的波形;大波(波幅＞10 mm以上)为小鼠强度活动(跑动、上串下跳)的波形.小剂量给药组、大剂量给药组分别腹腔注射橙皮水提取物5 mg/g、10 mg/g和对照组注射等量生理盐水,15 min后放回吊笼中,稳定3 min后记录15s内小鼠活动波形.②橙皮水提取物对小鼠阈上或阈下剂量戊巴比妥钠睡眠时间的实验法小剂量给药组、大剂量给药组分别腹腔注射橙皮水提取物5 mg/g、10 mg/g,对照组注射等量生理盐水;15 min后,3组均腹腔注射阈上剂量的戊巴比妥钠(2.5g/L)0.02 mL/g,或阈下剂量的戊巴比妥钠(2.5 g/L)0.01 mL/g,比较给药组与对照组动物的入睡个数、入睡时间和睡眠持续时间.主要观察指标①小鼠自发活动次数.②阈上剂量戊巴比妥钠小鼠睡眠时间.③阈下剂量戊巴比妥钠小鼠睡眠时间.结果各实验组小鼠无脱失情况,全部进入结果分析.①橙皮水提取物小剂量给药组,大剂量给药组使中波、大波出现次数显著减少,对小鼠自发活动具有明显的抑制作用,[(90.5±14.7),(58.3±12.5),(45.6±10.1),t=2.341～3.215;P＜0.05或P＜0.01].②橙皮水提取物小剂量给药组,大剂量给药组能显著加速阈上剂量戊巴比妥钠的入睡时间和延长戊巴比妥钠的睡眠时间,差异有显著性意义.③橙皮水提取物小剂量给药组,大剂量给药组能显著加速阈下剂量戊巴比妥钠的入睡时间和延长戊巴比妥钠的睡眠时间,差异有非常显著性意义.结论橙皮水提取物具有明显的延长昆明种小鼠睡眠时间和抑制小鼠自发性活动.与戊巴比妥钠有协同的中枢抑制作用.     

人参二醇皂苷对小鼠颈椎稳定性异常致脑功能损伤的影响

目的观察人参二醇皂苷（PDS）对小鼠颈椎稳定性异常引起智力下降和脑组织损伤的影响。方法44只小鼠随机分为正常对照组、模型组、PDS高剂量组和低剂量组各11只，手术制备小鼠颈椎失稳模型，PDS腹腔注射（高剂量组：14mg/kg；低剂量组：7mg/kg）50d，采用水迷宫、跳台实验方法检测小鼠学习记忆能力；用试剂盒检测脑组织超氧化物岐化酶（SOD）、乳酸脱氢酶（LDH）活性和丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）含量。结果水迷宫实验：与模型组比较，PDS高剂量组小鼠游全程时间缩短、错误次数减少（P〈0.05）；跳台实验：与模型组比较，PDS高剂量组小鼠反应期明显缩短、错误次数明显减少（P〈0.01）；PDS组小鼠脑组织SOD、LDH活性明显增强（P〈0.01），MDA、NO含量降低（P〈0.01，P〈0.05）。结论人参二醇皂苷对小鼠颈椎稳定性异常引起的学习记忆能力下降和脑损伤具有一定的改善和保护作用。     

小胶质细胞介导帕金森病小鼠的氧化应激损伤

背景：研究证实,小胶质细胞诱导型一氧化氮合酶可增加多巴胺能神经元对百草枯的摄取。造成百草枯对多巴胺能神经元的特异性杀伤作用。帕金森病的黑质纹状体存在小胶质细胞的激活,但其产生氧化应激作用机制尚不明确。目的：建立帕金森病小鼠模型,观察小胶质细胞介导的氧化应激损伤在帕金森病中的作用。方法：36只C57BL／6小鼠随机分为帕金森病模型组和对照组,每组18只。以腹腔注射百草枯10mg／kg为模型组,等体积生理盐水为对照组,分别观察小鼠行为活动改变。采用高效液相法测定两组小鼠黑质纹状体多巴胺的含量及免疫组织化学方法检测两组小鼠黑质部位酪氨酸羟化酶、mac-1蛋白表达,同时应用化学比色法测定两组小鼠黑质部位超氧化物歧化酶、还原性谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛水平的变化。结果与结论：模型组小鼠自发行为活动较对照组减少（P〈0．05）。高效液相法检测模型组小鼠黑质纹状体多巴胺含量及酪氨酸羟化酶蛋白的表达均显著低于对照组（P〈0．05）,mac-1蛋白表达高于对照组（P〈0．05）。模型组超氧化物歧化酶、还原性谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶活性较对照组均显著下降（P〈0．05）,丙二醛水平较对照组显著升高（P〈0．05）。提示中脑黑质部位小胶质细胞的激活致使氧化应激反应增强及抗氧化保护作用减弱可能是引起帕金森病发病的重要机制。