PCR-SSCP快速鉴别结核、非结核分枝杆菌临床分离株的研究

目的：应用分子生物学方法快速鉴别结核、非结核分枝杆菌临床分离株。方法：通过设计两对引物分别扩增16S rDNA两条片段，根据SSCP电泳图谱与结核分枝杆菌标准株的相似性鉴别结核、非结核分枝杆菌。结果：98株临床分离株中，经细胞学鉴定93株为结核分枝杆菌复合群，5株非结核分枝杆菌。用引物I、Ⅱ对结核分枝杆菌复合群进行PCR－SSCP析，有81株与标准株有相似图谱。用引物Ⅲ、Ⅳ对非结核分枝杆菌进行PCR－SSCP分析，均显示出与结核分枝杆菌标准株不同的电泳图谱。结论：PCR－SSCP可快速鉴别结核、非结核分枝杆菌。     

聚合酶链反应-测序技术快速检测耐异烟肼结核分枝杆菌KatG基因突变的研究

目的应用PCR-DNA测序技术快速检测耐异烟肼结核分枝杆菌分离株KatG基因突变,评价其在检测结核分枝杆菌异烟肼耐药性方面的应用价值。方法47株耐异烟肼结核分枝杆菌临床分离株及30株结核分枝杆菌敏感分离株用PCR-DNA测序技术检测KatG基因突变。结果47株耐异烟肼结核分枝杆菌分离株中,有31株KatG基因检出有突变,突变检出率为66.0%(31/47);30株结核分枝杆菌敏感株检出1株KatG基因突变。结论PCR-DNA测序技术方法敏感、准确、特异,可快速检测结核分枝杆菌KatG耐药基因突变,有利于耐异烟肼结核分枝杆菌耐药性的快速检测。     

儿童非结核分支杆菌脑膜炎1例误诊分析

<正>非结核性分枝杆菌(NTM)是指在分枝杆菌属中,除了结核分枝杆菌复合群(人型、牛型、非洲型和田鼠型结核分枝杆菌)和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。非结核分支杆菌脑膜炎是由NTM引起。由于非结核分支杆菌与结核分支杆菌同为分支杆菌属,故非结核分支杆菌脑膜炎与结核分支杆菌脑膜炎的临床症状、X线胸片特点极为相似,单纯靠胸片和痰液结核分枝杆菌抗酸染色涂片是无法区分的。临床上往往在没有进行抗酸杆菌菌型鉴定的情     

聚合酶链反应-测序技术快速检测耐异烟肼结核分枝杆菌KatG基因突变的研究

目的 应用PCR-DNA测序技术快速检测耐异烟肼结核分枝杆菌分离株KatG基因突变,评价其在检测结核分枝杆菌异烟肼耐药性方面的应用价值.方法 47株耐异烟肼结核分枝杆菌临床分离株及30株结核分枝杆菌敏感分离株用PCR-DNA测序技术检测KatG基因突变.结果 47株耐异烟肼结核分枝杆菌分离株中,有31株KatG基因检出有突变,突变检出率为66.0%(31/47);30株结核分枝杆菌敏感株检出1株KatG基因突变.结论 PCR-DNA测序技术方法敏感、准确、特异,可快速检测结核分枝杆菌KatG耐药基因突变,有利于耐异烟肼结核分枝杆菌耐药性的快速检测.     

金胺O荧光染色检测石蜡切片中偶发分枝杆菌的体会

非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)是指结核分枝杆菌、牛分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌,多存在于环境中,为条件致病菌,可引起结核样病变.目前已知100余种致病性非结核分枝杆菌,常见的有20种左右,如胞内分枝杆菌、鸟分枝杆菌、戈登分枝杆菌等.近年来,随着NTM病的增多使其日益受到重视.     

分枝杆菌菌种鉴定结果分析

目的分析临床标本非结核分枝杆菌在分枝杆菌中所占比率。方法以中性改良罗氏培养基为基础培养基,以PNB和TCH为鉴定培养基．用绝对浓度间接法进行分枝杆菌的菌种初步鉴定。结果5351株分枝杆菌中非结核分枝杆菌255株,占4．77％。结论近年来非结核分枝杆菌发现率有增高趋势,结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌在治疗和预后方面是完全不同的,开展分枝杆菌的培养和鉴定有极其重要的意义。     

两种常见非结核分枝杆菌与结核分枝杆菌基因同源抗原、B细胞抗原表位和抗体交叉反应研究

目的 探讨我国常见两种非结核分枝杆菌与结核分枝杆菌蛋白抗原的交叉免疫反应状况，为以非结核分枝杆菌研制新型结核疫苗提供参考依据。方法 平均核酸一致性计算器计算胞内分枝杆菌、脓肿分枝杆菌和结核分枝杆菌的基因组同源性，OrthorFinder软件分析3种菌的同源基因，与结核分枝杆菌B细胞抗原表位编码基因进行比对。分别制备3种菌的灭活菌体抗原和全菌蛋白抗原，对新西兰大白兔进行皮下注射免疫。采用间接酶联免疫吸附试验技术，分别检测3种免疫兔血清抗体Ig G水平及交叉免疫的血清抗体Ig G水平。结果 脓肿分枝杆菌、胞内分枝杆菌与结核分枝杆菌同源基因分别为2 350个和2 740个，其同源基因中分别有479个和521个富含B细胞抗原表位。结核分枝杆菌、胞内分枝杆菌和脓肿分枝杆菌的蛋白抗原均能刺激兔产生较高水平的抗体滴度，分别达到1∶320 000、1∶160 000和1∶80 000。胞内分枝杆菌和脓肿分枝杆菌免疫兔血清均可与结核分枝杆菌抗原产生高水平的交叉反应，抗体滴度分别达到1∶40 000和1∶80 000。结论 胞内分枝杆菌、脓肿分枝杆菌与结核分枝杆菌之间均存在高水平的抗体交叉免疫反应，提示上...     

非结核分枝杆菌肺病的病原菌检出情况分析

目的分析我院1986—1997年及2000—2005年非结核分枝杆菌(NTM)的检出情况。方法对222株非结核分枝杆菌用传统方法进行菌种鉴定。结果按Runyon分类法,1986—1997年检出Ⅰ群非结核分枝杆菌15株(15．5%),Ⅱ群非结核分枝杆菌4株(4．2%),Ⅲ群非结核分枝杆菌23株(24．0%),Ⅳ群非结核分枝杆菌54株(56．3%);2000—2005年检出Ⅰ群非结核分枝杆菌30株(16．1%),Ⅱ群非结核分枝杆菌11株(5．9%),Ⅲ群非结核分枝杆菌51株(27．4%),Ⅳ群非结核分枝杆菌94株(50．6%)。两组比较差异无统计学意义(P均＜20．05)。1986—1997年共检出非结核分枝杆菌96株,分属于6个不同菌种;2000—2005年共检出非结核分枝杆菌186株,分属于14个不同菌种,非结核分枝杆菌检出的菌种种类较前增多,上升了133．3%,而且非结核分枝杆菌的绝对检出数量本世纪初5年间比上世纪111年间提高了93．8%。结论我院非结核分枝杆菌检出的绝对数和菌种的种类2000—2005年比1986—1997年均增多,提醒我们应进一步做好NTM肺病的临床流行病学研究工作,为全面防治该病提供科学依据。     

皮肤和软组织感染非结核分枝杆菌的分布和耐药性分析

目的 分析皮肤和软组织感染患者非结核分枝杆菌的分布特点及耐药性。方法 收集2017年2月至2019年2月期间在我院门诊及住院治疗的皮肤和软组织感染患者感染部位分泌物并进行鉴定,分析非结核分枝杆菌的分布;通过药敏试验检测非结核分枝杆菌对5种抗生素的敏感性。结果 1152例皮肤与软组织感染患者样本中共检出983株分枝杆菌(85.33%)。其中人型结核分枝杆菌614株(62.46%),牛型结核分枝杆菌307株(31.23%),非结核分枝杆菌62株(6.31%);62株非结核分枝杆菌中包括偶发分枝杆菌18株(29.03%)、龟分枝杆菌8株(12.90%)、溃疡分枝杆菌5株(8.07%)、海分枝杆菌7株(11.29%)、脓肿分枝杆菌10株(16.13%)和快速生长分枝杆菌14株(22.58%);药敏试验结果显示,偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌、溃疡分枝杆菌、海分枝杆菌、脓肿分枝杆菌和快速生长分枝杆菌对INH、SM、RFP和PAS的耐药率均在90%以上,对KM的耐药率在80%-95%之间。结论 非结核分枝杆菌在皮肤和软组织感染患者中以偶发分枝杆菌、脓肿分枝杆菌和快速生长分枝杆菌最为常见,且非结核分枝杆菌对多种抗生素均有较高的耐药性。     

体液结核分枝杆菌三种检测方法临床应用价值

目的比较体液结核分枝杆菌三种方法检测结果,探究其临床应用价值。方法应用EL ISA法检测结核分枝杆菌抗体、结核分枝杆菌噬菌体生物扩增法、直接涂片抗酸染色法分别对临床可疑结核感染体液标本进行检测。结果结核分枝杆菌噬菌体生物扩增法、结核抗体EL ISA法检测与直接涂片抗酸染色法有统计学差别(P<0.05),结核分枝杆菌噬菌体生物扩增法与结核抗体EL ISA法检测二者无显著性差异(P>0.05),噬菌体生物扩增法与结核抗体EL ISA法阳性符合率为80.3%,阴性符合率为97.2%。结论结核抗体EL ISA法检测和结核分枝杆菌噬菌体扩增法比直接涂片法阳性率高,具有一定的临床应用价值。     

结核分枝杆菌与巨噬细胞相互作用的研究

探讨结核分枝杆菌与巨噬细胞的相互关系。从健康人全血中诱导活化的巨噬细胞和从结核病人痰液中培养出来的结核分枝杆菌以及卡介苗菌株(BCG)进行实验,利用流式细胞技术检测结核分枝杆菌感染巨噬细胞的凋亡及其时相性变化。巨噬细胞感染结核分枝杆菌后凋亡率升高,病人结核杆菌感染组和BCG感染组比较,差异具有统计学意义P<0.05。结核分枝杆菌与巨噬细胞的凋亡存在着相互作用关系,病人结核菌的毒力比BCG的毒力强。     

中药结核丸对结核分枝杆菌体内外抗菌效果的观察

目的检测中药结核丸的体内外抗结核分枝杆菌效果。方法建立结核分枝杆菌H37RV株小鼠感染模型。以乙胺丁醇为对照药,采用二倍试管稀释法测定中药结核丸对结核分枝杆菌H37RV株、牛分枝杆菌bovis株、草分枝杆菌phlie株的体外最低抑菌浓度(MIC);以半数存活时间(ST50)为指标,检测各药物对结核分枝杆菌H37RV株感染小鼠的体内抗菌效果。结果中药结核丸对结核分枝杆菌H37RV株、牛分枝杆菌bovis株、草分枝杆菌phlie株的MIC分别为1024、1024和2048μg/ml,对照药乙胺丁醇MIC则均分别为1μg/ml。小鼠感染对照组ST50为13d。中药结核丸对结核分枝杆菌感染小鼠的ST50分别为16d(32mg/d/mouse)、15d(16或8mg/d/mouse)、14d(4mg/d/mouse)和13d(2或1mg/d/mouse),对照药乙胺丁醇对结核分枝杆菌感染小鼠的ST50分别为大于28d(1～4mg/d/mouse)、24d(0.5mg/d/mouse)和19d(0.25mg/d/mouse)。结论中药结核丸体外抑制结核分枝杆菌的作用较弱,但剂量≥4mg/只小鼠时有明显的体内抗结核分枝杆菌活性。     

中药结核丸对结核分枝杆菌体内外抗菌效果的观察

目的检测中药结核丸的体内外抗结核分枝杆菌效果.方法建立结核分枝杆菌H37Rv株小鼠感染模型.以乙胺丁醇为对照药,采用二倍试管稀释法测定中药结核丸对结核分枝杆菌H37Rv株、牛分枝杆菌bovis株、草分枝杆菌phlie株的体外最低抑菌浓度(MIC);以半数存活时间(ST50)为指标,检测各药物对结核分枝杆菌H37Rv株感染小鼠的体内抗菌效果.结果中药结核丸对结核分枝杆菌H37Rv株、牛分枝杆菌bovis株、草分枝杆菌phlie株的MIC分别为1024、1024和2048μg/ml,对照药乙胺丁醇MIC则均分别为1μg/ml.小鼠感染对照组ST50为13d.中药结核丸对结核分枝杆菌感染小鼠的ST50分别为16d(32mg/d/mouse)、15d(16或8mg/d/mouse)、14d(4mg/d/mouse)和13d(2或1mg/d/mouse),对照药乙胺丁醇对结核分枝杆菌感染小鼠的ST50分别为大于28d(1～4mg/d/mouse)、24d(0.5mg/d/mouse)和19d(0.25mg/d/mouse).结论中药结核丸体外抑制结核分枝杆菌的作用较弱,但剂量≥4mg/只小鼠时有明显的体内抗结核分枝杆菌活性.     

斑点杂交法检测结核分枝杆菌的初步报告

目的建立一种快速、准确、简便的检测结核分枝杆菌的方法。方法异硫氰酸胍裂解、酚-氯仿抽提、异丙醇沉淀法直接抽提结核分枝杆菌rRNA,地高辛标记探针斑点杂交,酶呈色观察结果检测结核分枝杆菌,用该法检测76例临床标本。结果该法至少可检测1.6×102/m l个结核分枝杆菌;20种其它分枝杆菌和9种非分枝杆菌检测结果均为阴性;两份强阳性和弱阳性标本抽提结核分枝杆菌rRNA重复杂交5次,结果完全一致;46例肺结核病人痰标本检出阳性26例,30例非结核病人痰标本检测结果均为阴性。结论斑点杂交法检测结核分枝杆菌方法简便,无需特殊仪器,有较高的敏感度、特异性和良好的重复性,适合在基层医院推广使用。     

艾滋病人结核菌培养与药敏结果分析

【目的】了解本市人类免疫缺陷病毒（HIV）／肺结核（TB）双重感染情况及分枝杆菌耐药状况。【方法】用生物梅里埃分枝杆菌快速培养仪对HIV阳性448例确诊病人进行培养与药敏试验。【结果】HIV确诊阳性者中分枝杆菌检出率为27．68％,其中结核分枝杆菌复合群阳性率17．86％,非结核分枝杆菌阳性率9．82％。结核分枝杆菌复合群耐药率为耐畀烟肼40％,耐链霉素20％,非结核分枝杆菌耐异烟肼,耐乙胺丁醇均为91％。【结论】艾滋病（AIDS）病人并发结核病,是最常见的机会性感染,其对异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、利福平四种药物的耐药率以异烟肼为最高。非结核分枝杆菌耐药率高于结核分枝杆菌复合群。     

分子杂交法快速鉴定结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的初步评价

目的评价结核分枝杆菌鉴定试剂盒(分子杂交法)进行分枝杆菌菌种初筛的准确性,并探讨如何快速准确地鉴定结核分枝杆菌复合群(MTC)和非结核分枝杆菌(NTM)混合感染标本。方法采用分子杂交法对200株结核分枝杆菌临床分离株进行菌种鉴定。人工制备结核分枝杆菌和胞内分枝杆菌、结核分枝杆菌和脓肿分枝杆菌、结核分枝杆菌和偶发分枝杆菌的混合感染模型,评价基因测序法、芯片法和Hain test在检测分枝杆菌混合感染中的准确性。结果以对硝基苯甲酸(PNB)分离鉴定结果为参照,分子杂交法的敏感性和特异性分别为65.12%(65/86)和98.25%(112/114)。对于人工制备的13种不同比例混合的H37Rv和NTM,芯片法和Hain test均可以准确鉴定出混合感染标本中的混合菌种,而基因测序结果表明,H37Rv:偶发分枝杆菌的比例在10%~90%范围内才能区分出混合感染的类型。结论分子杂交法对于结核分枝杆菌诊断有较高的特异性,一旦经该法鉴定为NTM,则具有很高的诊断意义。明确标本中存在混合感染后可以采用芯片法或Hain test对临床上高致病的分枝杆菌进行菌种水平的鉴定。     

氟喹诺酮类药物抗分枝杆菌作用的实验研究

摘要：目的 研究氟喹诺酮类药物抗分枝杆菌的作用。方法 分别测定9种氟喹诺酮类药物对23种分枝杆菌（包括结核、牛分枝杆菌和21种非结核分枝杆菌）的试管内最低抑菌浓度。结果 不同药物显示不同的试管内抗菌作用谱。结论 氟喹诺酮类药物是临床非结核分枝杆菌病治疗可选择的药物。     

为什么要对分枝杆菌进行鉴定?怎样快速从临床标本中直接鉴定结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌?

结核分枝杆菌（结核菌）和非结核分枝杆菌感染的临床表现、X线特征极其相似，两者形态学上难鉴别，但临床治疗差别大，许多非结核分枝杆菌对抗结核药物天然耐药，常规化疗效果不佳，因此，目前分枝杆菌的鉴定对结核病诊断、鉴别诊断和有效化疗有重要意义。     

深圳市临床分枝杆菌菌种鉴定分析

目的了解深圳地区分枝杆菌的感染、分布状况,为临床诊断和治疗提供科学依据。方法采用基因芯片,对1 096例临床疑似标本进行菌种鉴定。结果基因芯片鉴定结果阳性检出率为9.40%(103/1 096)。阳性患者中有87例为结核分枝杆菌感染,另有16例为非结核分枝杆菌感染,其中脓肿分枝杆菌5例、胞内分枝杆菌3例、鸟分枝杆菌3例、偶发分枝杆菌2例、堪萨斯分枝杆菌1例、海分枝杆菌1例、戈登分枝杆菌1例。结论深圳地区分枝杆菌感染,结核分枝杆菌占84.47%,为主要发病类型;非结核分枝杆菌分离率比例已达到15.53%,其感染菌株包括7个种类,因此开展分枝杆菌菌种鉴定,明确病因,对实现个体化治疗有着重要意义。     

审定名词与非规范名词对照(结核病学)

审定名词非规范名词审定名词非规范名词原发复合征贡氏复合征宫内感染结核病先天性结核病结核球结核瘤阿蒂斯现象阿图斯现象蓬塞病结核性风湿病加氏计数法盖氏计数法非结核性分枝杆菌病非典型分枝杆菌病鲁尼恩非结核性分枝杆菌分类法鲁尼恩非典型分枝杆菌分类法非结核性分枝杆菌非典型分枝杆菌老龄化增龄审定名词与非规范名词对照(结核病学)