梅毒螺旋体抗体检测的临床应用

目的：探讨构建一种合理检测梅毒螺旋体的实验室组合方法。方法对住院及门诊患者共42,448例用梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）筛查出阳性标本,阳性标本则进一步做梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）和快速血浆反应环状卡片试验（RPR）。结果用TP-ELISA法检测出阳性的745例标本,进一步做TPPA确证试验,TPPA阳性690例（其中RPR阳性212例）,两种方法阳性率差异具有统计学意义（χ2=57.11,P=0.000）。TP-ELISA法的假阳性率为55/745=7.3%,假阴性率2/41,703=0.005%。结论TP-ELISA二步法适合批量检测,但有一定数量假阳性和假阴性,TPPA的准确性较高但不适用批量检测,RPR是现症梅毒和疗效观察的指标。三者结合是一种比较合理的实验组合。     

TP-ELISA阳性献血者标本FTA-ABS检测分析

目的对比TP-ELISA(梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验)与FTA-ABS(荧光梅毒螺旋体抗体吸附试验)的实验结果,探讨TP-ELISA梅毒检测方法在献血者血液筛检中的应用价值。方法采用2种TP-ELISA试剂对42 994份献血者血液标本进行梅毒抗体检测,呈阳性反应的血液标本再使用FTA-ABS法进行确认。结果 42 994份无偿献血者标本,经2种TP-ELISA试剂检测呈阳性反应共167份,其中FTA-ABS确认为阳性130份,单试剂阳性标本FTA-ABS法均阴性。结论 TP-ELISA作为血站大规模血液筛检试验,在报告献血者梅毒阳性结果之前,应作确认检测,以避免假阳性结果给献血者造成压力。     

几种梅毒螺旋体检测方法在献血者血液筛查中的效果评价

目的比较快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、梅毒螺旋体抗体双抗原夹心酶联免疫吸附法(TP-ELISA)、梅毒螺旋体特异抗体颗粒凝集法(TPPA)、梅毒螺旋体特异抗体红细胞凝集法(TPHA)4种梅毒检测方法,选择一种适合血站献血者血液梅毒筛查的模式。方法以RPR和TP-ELISA法对献血者血液标本进行TP感染的初筛检测,再采用TPHA或TPPA微量血凝法进行复检确认,分析初复检试剂检测效果。结果RPR与TPHA检测58586份标本,结果显示二者的阳性符合率为81%(267/331),RPR法漏检64例,漏检率0.11%,出现假阳性22例,假阳性率0.04%,两种检测方法的阳性检出率差异有统计学意义;ELISA和TPPA检测18206份标本,二者的阳性检出符合率为98.2%(109/111),差异无统计学意义(P0.05);ELISA法有2例漏检,漏检率为0.01%,出现假阳性5例,假阳性率0.027%;TPHA和TPPA检测结果差异无统计学意义。结论采用ELISA初筛,TPHA或TPPA复检模式对血液TP感染进行筛查,效果明显,值得推广。     

梅毒螺旋体感染不同血清学诊断方法的临床评价

目的：使用酶联免疫吸附测试验（ELISA）方法替代快速血浆反应素试验（RPR）和甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）方法确定诊断梅毒螺旋体感染的必要性。方法：使用目前国内最为常用的梅毒螺旋体感染诊断RPR和TRUST试剂及ELISA试剂检测阴阳性献血员标本，同时与梅毒螺旋体明胶凝剂试验（TPPA）的检测结果进行比较，从而得到各种试剂的检测假阴性和假阳性率。结果：在对30份阳性和20份阴性标本的检测中，所用一种RPR试剂和两种TRUST试剂的假阳性率，分别为15．0％（3／20）、10．0％（2／20）和10．0％（2／20），假阴性率分别为30．0％（9／30）、23．3％（7／30）和43．3％（13／30）；而两种ELISA试剂均无假阳性，有一家试剂出现1例假阴性。ELISA试剂的假阳性和假阴性率均明显低于RPR和TRUST试剂（P＜0．01）。结论：在梅毒螺旋体抗体的临床检测中，有必要使用ELISA方法替代RPR和TRUST方法。     

多种梅毒抗体检测方法的比较

目的利用梅毒酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)、梅毒螺旋体抗体快速血浆反应素试验(RPR)、梅毒螺旋体胶凝试验(TPPA)和梅毒螺旋体抗体胶体金试纸(金标法)4种不同的方法进行梅毒抗体检测,以探讨方法学的敏感性和特异性。方法用目前常用的TP-ELISA、RPR、TPPA和金标法对67例阳性标本及80例阴性标本分别进行检测。结果 TP-ELISA、RPR、TPPA和金标法的灵敏度分别为95.5%、80.6%、98.5%、91.0%,特异性分别为91.3%、88.8%、97.5%、100.0%,阳性预期值分别为90.1%、85.7%、97.1%、100.0%,阴性预期值分别为96.1%、84.5%、98.7%、93.0%。结论 TP-ELISA是目前筛查梅毒的理想方法。RPR检测梅毒非特异性抗体用于疗效观察及过筛试验。金标法快速方便,很适合应用于急诊标本。TPPA不适合大规模的血液筛查,适用于对筛查后的阳性标本进行梅毒抗体的确证试验。     

梅毒螺旋体3种检测方法结果分析

目的通过对梅毒螺旋体3种实验室检测方法的结果分析,为相关临床和实验室工作者合理应用实验室的检测方法、合理解释其检测结果提供依据。方法 7826例患者标本同时用酶联免疫法吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体抗体明胶凝集试验(TP-PA)及梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)方法进行检测,并对检测结果进行统计分析。结果 7826例标本,结合临床诊断确诊为梅毒患者的阳性标本为256例,阴性标本7570例。采用ELISA方法检测,252例阳性,假阳性6例,假阴性10例,其中真阳性率96.1%,假阳性率0.08%,假阴性率3.9%;采用TPPA方法检测,250例阳性,假阳性0例,假阴性6例,其中真阳性率97.7%,假阳性率0.0%,假阴性率2.3%;采用TRUST方法检测,116例阳性,假阳性5例,假阴性145例,其中真阳性率43.4%,假阳性率0.07%,假阴性率56.6%。TRUST方法真阳性率较低,假阴性较多,但对一期梅毒的检出率却相对较高,与ELISA方法的检测结果有互补性。结论 ELISA和TRUST这两种方法有互补性,同时用其检测梅毒,可提高阳性率;为排除假阳性结果,再用TPPA方法进行确证。     

不同血清学诊断方法检测梅毒螺旋体的结果分析

目的通过对梅毒螺旋体检测的3种不同试剂的敏感性及特异性进行比较,建立更可靠更安全的检测方法学选择及检测试剂的选择。方法使用目前国内最为常用的梅毒螺旋体感染诊断快速血浆反应素试验（RPR）和甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）试剂及酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂检测阴阳性体检人员标本,同时与梅毒螺旋体明胶凝剂试验（TPPA）的检测结果进行比较,从而得到各种试剂的检测假阴性和假阳性率。结果在对20份阳性和30份阴性标本的检测中,所用RPR试剂和TRUST试剂的假阳性率,分别为13．3％（4／30）、10．0％（3／30）,假阴性率分别为25．0％（5／20）、20．0％（4／20）;ELISA试剂的假阳性率为3．3％（1／30）,无假阴性。ELISA试剂的假阳性和假阴性率均明显低于RPR和TRUST试剂（P〈0．01）。结论在梅毒螺旋体抗体的检测中,ELISA法可直接在酶标仪上获得客观的实验结果数据,减少人为操作和判断的失误,资料易于保存,是体检人员梅毒筛查的理想方法。     

检测梅毒四种方法的比较

目前国内检测血清梅毒螺旋体的方法较多。甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)法虽可快速检出结果,但特异性差;胶体金试纸法可快速检测血清/血浆中的梅毒抗体,但也存在假阳性及假阴性;而梅毒螺旋体酶联免疫试验(TP-ELISA)为双抗原夹心一步法,可减少假阳性的产生和避免弱阳性的漏检;梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPHA)为目前公认的梅毒确诊试验。笔者采用TP-ELISA与TRUST及胶体金试纸法进行对照试验,最后用TPHA进行确诊。现报告如下:1材料与方法1.1标本来源我院2005年1～12月门诊及输血前患者1306例。1.2试剂TRUST由上海荣盛生物公司生…     

TP-ELISA二步法检测梅毒螺旋体抗体产生钩状效应分析

目的通过分析梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)双抗原夹心二步法检测梅毒螺旋体抗体中出现的钩状效应,探讨其对检测结果的影响及避免措施。方法 TP-ELISA双抗原夹心二步法检测结果为阴性,但快速血浆反应素试验(RPR)阳性的4例标本,用稀释法进一步检测。结果 4例标本TP-ELISA结果均为阳性。结论 TP-ELISA二步法在检测梅毒螺旋体抗体特异性抗体时也会出现钩状效应,用稀释法可避免。     

TRITURS全自动酶免分析仪测定血清梅毒抗体应用评价

目的应用TRITURS全自动酶免分析仪测定梅毒螺旋体抗体并与传统手工方法进行比较评价。方法 14例梅毒抗体阳性标本经倍比稀释后,分别用梅毒螺旋体抗体双抗原夹心法(TP-ELISA)、梅毒螺旋体抗体胶体金试剂(SYP)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)三种方法进行测定比较,其中TP-ELISA用手工和酶免分析仪两种方法进行检测。结果 14例阳性标本在酶免分析仪上用TP-ELISA法检出阳性率为92.86%,TRUST法阳性仅为7.14%。三种方法中以TP-ELISA敏感度为最高,其稀释度为1∶16,而TRUST仅为1∶4。酶免分析仪两种不同孵育时间检测吸光度具有较好的相关性(r2=0.9728,P0.01),其对梅毒定性结果无显著性影响。结论 TP-ELISA法作为梅毒筛查手段具有较好的特异性和敏感性,可取代传统血清学实验;结合酶免分析系统优化模式,适合与其他输血筛查项目同步上机检测,与传统手工法相比更为高效和规范。     

变性梅毒重组抗原免疫印迹技术的建立及其在鉴别梅毒血清学假阳性实验的应用

目的 为了评估临床梅毒抗体筛查中出现假阳性实验结果的真实性,建立了变性梅毒重组抗原免疫印迹技术,并应用于对临床非高危人群梅毒抗体筛查阳性血清进行验证确认,分析出现假阳性的可能性。方法 采用梅毒TP47,TP45,TP17和TP15重组抗原,将变性后的抗原与非变性的抗原配对包被在硝酸纤维膜载体上,建立梅毒免疫印迹抗体谱检测方法。收集临床经电化学发光免疫分析仪及配套试剂检测的梅毒螺旋体抗体假阳性的非性病高危人群门诊和住院患者血清样本56例、临床确认梅毒患者血清样本25例和健康体检人员样本30例进行方法学验证。并用该方法对1例特殊的“梅毒患者”进行了鉴别。结果 根据建立的变性与非变性抗原配对梅毒免疫印迹抗体谱检测结果判定模式,56例临床梅毒螺旋体抗体筛查假阳性样本,对四种变性重组抗原均不发生反应,无阳性条带。但是对二种以上非变性抗原发生弱阳性反应,出现阳性条带;25例梅毒患者对照样本,对四种非变性和变性重组抗原均有反应,出现强阳性条带;30例健康体检人员样本,对四种非变性和变性重组抗原均无反应。梅毒螺旋体特异性抗体阳性特殊“梅毒患者”血清样本,对四种变性重组抗原均为阴性反应,但对四种非变性重...     

HBsAg/TP抗体/HIV抗体胶体金联合检测试剂在献血者筛查中的应用评价

目的 评价乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、梅毒螺旋体抗体(TP抗体)和人类免疫缺陷病毒抗体(HIV抗体)胶体金联合检测试剂的检测灵敏性、特异性和重复性,以及应用于献血筛查的意义.方法 采用胶体金联合检测试剂分别对2 250份正常献血者血液标本、85份HBsAg阳性标本,78份TP抗体阳性标本和62份HIV抗体阳性标本进行检测,并与参比试剂检测结果进行比较.结果 胶体金联合检测试剂与TP抗体参比试剂的总符合率、灵敏度(阳性符合率)和特异性(阴性符合率)分别为99.87%,100%和99.87%;与HBsAg参比试剂的总符合率、灵敏度和特异性分别为99.82%,94.74%和99.87%,与HIV抗体参比试剂的总符合率和特异性为100%,各项检测结果差异均无统计学意义(χ2=0.36,P>0.05;χ2=0.09,P>0.05;χ2=0.08,P>0.05).胶体金联合检测试剂实验重复性阳性符合率为100%.结论 胶体金联合检测试剂具有反应速度快,操作更加简单和快捷、灵敏度高、特异性和重复性好,适用于献血前血液筛查.     

低浓度梅毒螺旋体抗体的调查与分析

目的 探讨改进梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)以检出酶联免疫吸附试验(ELⅠSA)检出的低浓度梅毒螺旋体抗体.方法 使用标准品和家兔免疫血清测试两种方法对低浓度梅毒螺旋体抗体的灵敏度,改进TPPA,从原倍稀释开始检测低浓度梅毒螺旋体抗体标本.结果 两种方法的灵敏度不一致,ELⅠSA初筛试验约可出现11%的低浓度样本,改进TPPA可检出这部分低浓度样本.结论 ELⅠSA检出的低浓度梅毒螺旋体抗体TPPA可通过改进稀释方法检出.     

干式荧光发光法快速检测梅毒螺旋体抗体的方法建立和初步应用与评价

目的　建立一种干式荧光发光法快速检测梅毒螺旋体(Treponema pallidum,TP)总抗体的检测技术,并评价其检测性能。方法　利用高活性优势表位嵌合TP抗原,基于免疫层析和荧光发光平台,采用双抗原夹心原理建立检测梅毒螺旋体总抗体的快速检测方法。应用该方法检测梅毒螺旋体抗体快速试剂国家参考品,并与酶联免疫法平行检测360例临床样本,比较评价该技术的检测性能。结果　建立了梅毒螺旋体总抗体干式荧光发光快速检测技术,检测国家参考品10份阳性参考品符合率为10/10,20份阴性参考品符合率为19/20,三批产品的批内重复性分别为12.00%,12.30%和9.10%,批间重复性为10.90%,最低检测限参考品L1和L2 检测为阳性,L3检测为阴性。在临床样本评价中,该检测技术诊断梅毒患者的AUC值为0.986,敏感度和特异度分别为99.08%和94.02%,阳性预测值和阴性预测值分别为87.80%和99.58%,阳性似然比和阴性似然比分别为16.569和0.009 8。与酶联免疫法检测试剂相比较,总体符合率为98.06% (Kappa=0.965),具有高度等效性。结论　本研究建立的梅毒螺旋体抗体干式荧光发光快速检测技术是一种敏感度和特异度均高的检测方法,能够满足临床检测需要。     

化学发光法检测梅毒螺旋体特异性抗体的实验评价

目的应用免疫印迹法（WB）比较临床常用的梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）与化学发光法（CLIA）检测血清梅毒螺旋体特异性抗体的符合率。方法收集7 805份临床检测的血清标本,分别用TPPA和CLIA进行梅毒螺旋体特异性抗体检测,对结果不一致的标本应用WB检测确证。结果 7 805份血清标本中,CLIA检测阳性310例,TPPA检测阳性262例。对结果不一致的48例标本应用WB检测验证,结果证实阳性36例,临界阳性8例,阴性4例,而TPPA的结果均为阴性。TPPA检测总符合率为99.44%,CLIA检测总符合率为99.95%。结论 CLIA敏感性优于临床常用的TPPA,且具有结果客观、易分析、重复性好等优点,但也存在个别假阳性和钩状效应,因此应结合TPPA及临床资料确诊。     

两种方法联合检测梅毒螺旋体抗体的临床应用

目的探讨甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)两种方法同时用于梅毒螺旋体抗体检测的重要性和必要性。方法采用TRUST和TPPA同时检测1 994例临床输血者、手术患者及皮肤科患者的血清梅毒螺旋体抗体,阳性者再进行滴度检查。结果 TRUST阳性22例,阳性率1.1%,TPPA阳性40例,阳性率为2.0%,两种方法同时阳性18例,阳性率为0.9%。结论为尽早查出病原体,防止梅毒进一步传播,同时避免不必要的医患纠纷,对输血前筛查及疑似梅毒患者宜采用TPPA,阳性者再做TRUST检测,既提高阳性检出率,又降低假阳性率。     

盐城市盐都区外来务工人员HIV、梅毒、HCV和HBV感染状况调查

目的调查了解盐城市盐都区外来务工人员中人类免疫缺陷病毒（HIV）、梅毒螺旋体（TP）、丙型肝炎病毒（HCV）和乙型肝炎病毒（HBV）感染状况,为在这类人群中开展相关传染病预防控制提供依据。方法采用ELISA法分别检测外来务工人员血清中HIV（1＋2）抗体、TP抗体、HCV抗体和HBsAg;HIV抗体阳性者按技术规范进行复检和确证;TP抗体阳性者用梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验（TPPA）进行复检,确认阳性者再作梅毒快速血浆反应素试验（RPR）;HCV抗体阳性者使用另一厂家试剂复检;HBsAg阳性者作乙肝五项血清标志物检测。结果共检测外来务工人员标本442例,发现HIV感染3例（0.68%）、TP感染10例（2.26%）、HCV感染1例（0.23%）、HBsAg阳性39例（8.82%）,其中HIV和HCV合并感染、TP和HBV合并感染各1例。TP感染者中RPR阳性6例（60.00%）,滴度1∶1-1∶4;HBsAg阳性者中出现6种乙肝＂两对半＂模式,其中以HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性为主[66.67%（26/39）]。结论盐都区外来务工人员中HIV、HBV、TP感染率均较高,应加大这类人群的监测和干预力度,有效控制相关传染病在人群中的流行。     

使用化学发光法检测26707例血清抗梅毒螺旋体特异性抗体以及结果假阳性率分析

目的 用雅培I2000SR全自动化学发光微粒子免疫分析仪检测26 707例血清抗梅毒螺旋体特异性抗体,以梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验法(TPPA)作为检查抗梅毒螺旋体特异度抗体标准参考方法,分析判定雅培I2000SR全自动化学发光微粒子免疫分析仪检测的假阳性率。方法 收集内蒙古医科大学附属医院2013年9月1日～2014年3月5日的住院和门诊患者26 707人份血清,要求受检者空腹条件下采取静脉血3 ml,3 000 r/min离心10 min后分离血清,上机检测。使用化学发光微粒子免疫分析(CMIA)、明胶颗粒凝集试验法(TPPA)对血清梅毒螺旋体特异性抗体(Anti-TP)进行检测。运用统计学方法对检测结果进行分析。结果 雅培I2000SR全自动化学发光微粒子免疫分析仪检测的26 707例血清梅毒螺旋体特异性抗体S/CO值在1～的标本数52例,经TPPA验证阳性数9例,阳性率17.31%; S/CO值在2～的标本数26例,阳性数9例,阳性率34.62%; S/CO值在3～的标本数26例,阳性数9例,阳性率34.62%; S/CO值在5～的标本数25例,阳性数11例,阳性率44%; S/CO值在7～的标本数25例,阳性数17例,阳性率68%; S/CO值在10～的标本数28例,阳性数24例,阳性率85.71%; S/CO值在13～的标本数23例,阳性数20例,阳性率86.96%; S/CO值在17～的标本数24例,阳性数22例,阳性率91.67%; S/CO值在21～的标本数29例,阳性数28例,阳性率96.55%; S/CO值在26的标本数104例,阳性数104例,阳性率100%; 总初筛阳性例数364例,总真阳性例数254例,阳性率69.78%; 假阳性率0.42%,阳性预测值69.78%。结论 雅培I2000SR全自动化学发光微粒子免疫分析仪采用自动化检测、全封闭试剂,具有操作简单、检测速度快、结果更准确等特点。虽然其灵敏度高,但存在一定的假阳性,不可以仅凭其结果进行诊断,还需要TPPA方法进行补充检测确证。     

免疫印迹技术在老年人梅毒螺旋体抗体阳性标本中的临床应用

目的探讨免疫印迹技术在老年人梅毒螺旋体抗体阳性标本中的临床应用,减少假阳性,避免误诊。方法将ELISA法检测出的老年人梅毒螺旋体抗体阳性标本78例,用免疫印迹法（WB）和TPPA法进行确认实验。结果ELISA法检出阳性78例,WB法确认阳性68例,假阳性率12．82％;TPPA确认阳性69例,假阳性率11．53％;ELISA法假阳性的SCO值与真阳性的SCO值差别无统计学意义（P〉0．05）,WB法与TPPA法确认的阳性率差别无统计学意义（P〉0．05）。结论为提高老年人梅毒检测的准确性,对ELISA法检测的阳性标本,结合临床表现与病史,对有疑问的标本,用WB法进行确认,排除假阳性。     

酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体的应用评价

目的评价酶联免疫吸附试验（ELISA）在临床应用于梅毒患者诊断的效果。方法采用ELISA方法对住院患者血清进行梅毒抗体检测,收集阳性标本,同时随机收集部分ELISA法检测为阴性样本,使用TPPA试验作为确认试验,从而判断ELISA方法与TPPA检测方法的差异性。结果两种检测方法的一致率较高。ELISA的灵敏度为100%,假阴性率是0,特异性为89.83%,假阳性率是10.17%。假阳性结果主要出现在1≤S/CO〈3的区间内。结论 TP-ELISA能有效应用于梅毒的临床筛查,对于检测结果在1≤S/CO〈3时,应进行确认试验,以减少假阳性。