考马民斯亮蓝显以法测定精浆蛋白水解酶

用酪蛋白作底物，考马斯亮蓝显色，建立了精浆蛋白水解酶的测定方法。本法以０．０５ｍｍｏｌ／Ｌ ｐＨ７．６Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ作缓冲液，底物浓度为１ｍｇ／ｍｌ，线性范围在５３５￣４２８０Ｕ／Ｌ，批内ＣＶ为２．６％，批间ＣＶ３．３％。健康人精浆蛋白水解酶活力为１４２０￣２８７０Ｕ／Ｌ，不育患者（精液液化正常，ｎ＝４０）精浆蛋白水解酶活力为１３２６￣２６２８Ｕ／Ｌ，液化异常或粘稠度增高的不育患者精浆蛋白水解酶     

3，5－二氯邻羟基苯磺酸钠的合成及其临床应用

目的制备３，５－二氯邻羟基苯磺酸钠（ＤＣＨＢＳ）以取代Ｔｒｉｎｄｅｒ′ｓ反应中所用的苯酚及四氯酚。方法２，４－二氯苯酚和浓硫酸在１００℃进行磺化反应，制得ＤＣＨＢＳ；将其和过氧化物酶、尿酸酶、４－氨基氨替比林等组成尿酸检测试液，进行灵敏度、精确度、回收率、干扰试验、稳定性考查，并与苯酚和四氯酚法及与进口试剂进行对比，作相关试验。结果ＤＣＨＢＳ使用浓度为６．０ｍｍｏｌ／Ｌ，检测波长为５１０ｎｍ，尿酸浓度在２４０ｍｇ／Ｌ范围内线性关系良好，检测极限５ｍｇ／Ｌ，高、中、低浓度的质控血清，其批内变异系数分别为１．１０％，１．６８％和２．３０％；批间变异系数分别为３．２０％，１．２０％和２．０７％。回收率为９９．８％～１００．７％，检测范围５～２４０ｍｇ／Ｌ，当血清中胆红素含量小于６１．８ｍｇ／Ｌ，维生素Ｃ小于１５ｍｇ／Ｌ时，用该试剂测定尿酸含量误差小于５％；该试剂与进口试剂相关试验γ＝０．９９４５。结论合成的ＤＣＨＢＳ试剂，完全可以替代苯酚和四氯酚，用于尿酸、胆固醇、甘油三酯等多种临床生化项目检测中     

血浆血红蛋白的分光光度法直接测定

用分光光度计直接测定血浆血红蛋白浓度，操作简单，试剂单一稳定，具有较好的精密度和准确度，批内变异为ＣＶ１．８％（Ｘ＝７８．６ｍｇ／Ｌ），ＣＶ０．７９％（Ｘ＝７７４．６ｍｇ／Ｌ），批间变异为ＣＶ５．０８％（Ｘ＝６７．７５ｍｇ／Ｌ），ＣＶ３．３７％（Ｘ＝４０４．９ｍｇ／Ｌ），线性范围至少可达２０００ｍｇ／Ｌ。本法与ＨＩＣＮ法及Ｃｒｏｓｂｙ法平行对比测定，显示三者结果具有良好的一致性。     

流动注射与原子发射光谱法联用测定血清锂

采取流动注射分析技术的优点，将流动注射分析技术与原子发射光谱法联合应用，建立了测定正常人体血清中锂的方法，既可测定正常人体锂含量，又可测定碳酸锂治疗病人血清中锂的含量。该法灵敏度高，最小检出限为０．００６ｍｇ／Ｌ。精密度高，重复性好，批内ＣＶ＝０％，批间ＣＶ＝０．５％。平均回收率为１００．６％。线性范围为０－０．１ｍｇ／Ｌ。     

有机磷农药中毒患者血清C反应蛋白变化：附56例蛋白变化

目的：探讨有机碗农药中毒患者血清Ｃ反应蛋白水平的变化。方法：采用比浊法检测５６例轻度、中度和重度有机磷农药中毒患者血清Ｃ反应蛋白含量，并设正常人对照组，进行检测观察分析Ｃ反应蛋平均含量分别为２６ｍｇ／Ｌ、３２ｍｇ／Ｌ、５９ｍｇ／Ｌ，均较对照的５ｍｇ／Ｌ升高，均有显著性差异（Ｐ〈０．０１）。治疗后不９６％患者务 Ｃ反应蛋白浓度降至正常。结论：血清Ｃ反应蛋白的检测可作有机磷农药中毒患者的诊断参考指标之     

血清新喋呤的酶联免疫吸附法测定

目的建立血清新喋呤的酶免疫测定方法，并确定血清新喋呤的正常范围。方法通过碳二亚胺将新喋呤分别与牛血清白蛋白、鸡白蛋白连接制成新喋呤蛋白质交联物，用新喋呤牛血清白蛋白交联物免疫Ｂａｌｂ／ｃ鼠，通过细胞融合筛选出产生抗新喋呤的单克隆抗体，并采用该单克隆抗体建立了血清新喋呤的酶联免疫吸附竞争抑制法。结果４１２例献血员（正常组）血清新喋呤为５２±２２μｇ／Ｌ（ｘ±ｓ），４９例消化道恶性肿瘤为１４８±１０５μｇ／Ｌ（ｘ±ｓ），２１例皮肌炎为１６３±１１４μｇ／Ｌ（ｘ±ｓ）。ｔ检验表明，采用酶联免疫吸附法测定，消化道恶性肿瘤组、皮肌炎组的血清新喋呤与正常组比较Ｐ值均＜０．００１。本方法检测的批内变异系数（ＣＶ）为００３６３，批间ＣＶ为００９１７。结论本法操作简便、方法敏感、正常值范围明确、重复性好，可用于临床研究     

As2O3对K562细胞BCR/ABL蛋白酪氨酸磷酸化的影响

目的　进一步阐明Ａｓ２Ｏ３ 诱导Ｋ５６２ 细胞凋亡和抑制其生长的可能机制,为Ａｓ２Ｏ３ 在临床上的应用提供理论依据。方法　采用免疫沉淀、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ、生物化学及免疫荧光等方法研究了Ａｓ２Ｏ３对ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸磷酸化及其所介导的信号途径和某些凋亡相关蛋白表达的影响。结果　１μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 使细胞内多种蛋白酪氨酸磷酸化减少,而且ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白自身酪氨酸磷酸化亦减少,但０ ．１ μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 对蛋白酪氨酸磷酸化的影响不明显;Ａｓ２Ｏ３ 对蛋白酪氨酸磷酸酶（ＰＴＰ） 活性未见明显影响;Ａｓ２Ｏ３ 下调ＪＡＫ２ 蛋白的表达,但对ＳＴＡＴ１ 和ＳＴＡＴ２ 蛋白的表达以及ＳＴＡＴ１ 蛋白酪氨酸磷酸化无影响;Ａｓ２Ｏ３ 亦不影响凋亡相关蛋白Ｂｃｌ２、ＢｃｌｘＬ／Ｓ、Ｂａｘ、ＩＣＨ１Ｌ、ｐ５３、ＰＡＲＰ的表达,Ａｓ２Ｏ３ 亦使Ｋ５６２ 细胞的ＰＭＬ蛋白降解。结论　Ａｓ２Ｏ３ 可能通过减少细胞内某些蛋白,尤其是ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸磷酸化和（ 或）下调ＪＡＫ２ 蛋白的表达而干扰ＢＣＲ／ＡＢＬ致癌信号的传导,引起Ｋ５６２ 细胞凋亡和抑制其生长。     

荧光信号引物PCR定量测定血清HCV—RNA的实验室评价

目的对Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ荧光标记ＨＣＶ定量ＰＣＲ方法进行实验室考核。方法２８例抗ＨＣＶ（＋）、定性ＰＣＲ（＋）的血清标本，用于重复性测定；２０例健康人血清用于正常值测定；５例定性ＰＣＲ（＋）和５例定性ＰＣＲ（－）标本用于Ａｍｐｌｉｓｅｍｓｏｒ和ｂｒａｎｃｈ－ＤＮＡ两种方法的比较。结果孔间变异系数（ＣＶ）为 ２０．６％，操作者间ＣＶ为 ４３．８％，批内 ＣＶ为 ６１．９％，批间ＣＶ为８５．１％。２０例健康人血清测定值均小于最小检测浓度，即１０２拷贝／ｍｌ。用Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ和ｂｒａｎｃｈ－ＤＮＡ两种方法对５ 例定性ＰＣＲ（－）标本测定，Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ和ｂｒａｎｃｈ－ＤＮＡ均为阴性；对５ Ｎ定性ＰＣＲ（＋）标本测定，Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ均为阳性，ＨＣＶ－ＲＮＡ的浓度为 ２． ５ × １０５拷贝 ／ｍｌ～ １． ７ ×１０６拷贝 ／ｍｌ， ｂｒａｎｃｈ－ＤＮＡ方法有 ２例未能检出。结论 Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ ＨＣＶ定量 ＰＣＲ方法特异性和灵敏度均好，可用于临床疾病的研究和抗病毒药物疗效的评估。由于批内、批间变异系数较大，试验与操作均应严格规范。     

心肌肌钙蛋白Ⅰ检测方法的性能评价

摘要：目的 评价高敏心肌肌钙蛋白Ⅰ（ｈｓ ｃＴｎＩ）的分析性能，建立 ｈｓ ｃＴｎＩ 第 ９９ 百分位数参考上限（９９ｔｈ ＵＲＬ）。方法 收集 急性心肌梗死（ＡＭＩ）患者 ６０ 例及表观健康人 ３５０ 例的血清，评价 ｈｓ ｃＴｎＩ 检测的功能灵敏度、精密度（以 ＣＶ 表示）及线性范 围，评估 ｈｓ ｃＴｎＩ 短期及长期生物学变异；并建立本实验室 ｈｓ ｃＴｎＩ 的 ９９ｔｈ ＵＲＬ。结果 ｈｓ ｃＴｎＩ 的空白限、检出限、定量检出限 及功能灵敏度分别为 ０．４５ ｎｇ ／ Ｌ、１．４５ ｎｇ ／ Ｌ、１．９０ ｎｇ ／ Ｌ 和 １．９３ ｎｇ ／ Ｌ。高浓度（１５ １００．０ ｎｇ ／ Ｌ）批内、批间 ＣＶ 为１．５２％和３．５４％； 中浓度（１９０．０ ｎｇ ／ Ｌ）批内、批间 ＣＶ 为２．９０％和３．８３％；低浓度（２０．０ ｎｇ ／ Ｌ）批内、批间 ＣＶ 为０．８２％和７．６０％。ｈｓ ｃＴｎＩ 检测的线 性范围评价良好（Ｒ２ ＝ ０．９９７ ７）。ｈｓ ｃＴｎＩ 的短期生物学变异中，个体内变异（ＣＶｉ）为 ７．１％，个体间变异（ＣＶｇ ）为 ５３．４１％，总变 异（ＣＶｔ）为 ５３．８８％；长期生物学变异中，ＣＶｉ 为 １５．１６％，ＣＶｇ 为 ５９．１７％，ＣＶｔ 为 ６１．０８％。本实验室建立 ｈｓ ｃＴｎＩ 的 ９９ｔｈ ＵＲＬ 为 ８．２５ ｎｇ ／ Ｌ，男性 ９．５２ ｎｇ ／ Ｌ，女性 ８．２８ ｎｇ ／ Ｌ，女性低于男性（Ｐ＜０．０５），且均低于厂商说明书提供的 ９９ｔｈ ＵＲＬ。结论 ｈｓ ｃＴｎＩ 检 测方法的分析性能达到厂商说明书要求，可以满足临床诊疗的需求；本实验室建立 ｈｓ ｃＴｎＩ 的 ９９ｔｈ ＵＲＬ 初步为本地区 ＡＭＩ 的 临床诊断提供了实验室依据。     

应用单克隆抗体的脂蛋白(a)免疫比浊测定

目的建立血清脂蛋白（ａ）［Ｌｐ（ａ）］单克隆抗体免疫比浊测定法。方法应用四株载脂蛋白（ａ）［ａｐｏ（ａ）］单克隆抗体，配制成全液体、双试剂，于自动分析仪二点反应法检测Ｌｐ（ａ）。结果检测试剂与纤维蛋白溶酶原和ａｐｏＢ无交叉反应，甘油三酯（１５ｍｍｏｌ／Ｌ）、胆红素（１５０μｍｏｌ／Ｌ）、血红蛋白（５００ｍｇ／Ｌ）对测定无干扰，检测范围０～１０００ｍｇ／Ｌ。该法与ＥＬＩＳＡ对照，结果无显著差异，ｒ＝０．９９。批内ＣＶ分别为２．５％［脂蛋白（ａ）７８５ｍｇ／Ｌ］和３．５％［脂蛋白（ａ）３００ｍｇ／Ｌ］，批间ＣＶ分别为３．９％和５．５％。结论ａｐｏ（ａ）单克隆抗体免疫比浊测定血清Ｌｐ（ａ）具有特异、灵敏、简便、快速和适用于自动分析等优点。     

As2O3诱导K562细胞凋亡过程中酪氨酸蛋白激酶活性的变化

目的：阐明Ａｓ２Ｏ３诱导Ｋ５６２细胞凋亡的可能机制，为Ａｓ２Ｏ３治疗白血病的推广应用提供一定的理论基础。方法：采用免疫沉淀、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及生物化学等方法，观察在Ａｓ２Ｏ３诱导Ｋ５６２细胞凋亡过程中，细胞胞浆和胞膜蛋白及ＡＢＬ蛋白酪氨酸激酶（ＰＴＫ）活性及某些内源性蛋白酪氨酸磷酸化的变化。结果：在Ａｓ２Ｏ３诱导Ｋ５６２细胞凋亡过程中，细胞胞浆和胞膜蛋白及ＡＢＬ蛋白ＰＴＫ活性降低，分子量为１８万和１２．５万的蛋白酪氨酸磷酸化减少。结论：Ａｓ２Ｏ３可能通过降低细胞内某些蛋白，尤其ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白的ＰＴＫ活性，减少蛋白酪氨酸磷酸化，从而阻断ＢＣＲ／ＡＢＬ抗凋亡信号的传导，诱导Ｋ５６２细胞凋亡     

ELISA法检测补体C3d片段及荷C3d的免疫复合物

为了更好地测定人血清中补体Ｃ３ｄ片及荷Ｃ３ｄ的免疫复合物，采用酶免疫吸附技术建立了测定Ｃ３ｄ及荷Ｃ３ｄＩＣ的方法，其敏感度为０．０５ｍｇ／Ｌ，工作范围为０．１１－５０ｍｇ／Ｌ，批内，批间ＣＶ分别为６．３％和８．８％，上率为９７％。     

精子顶体素ELISA检测法的建立与临床应用

从人精子中提取顶体素，制备兔抗人精子顶体素抗体，建立了定量检测顶体素的ＥＬＩＳＡ方法，本法线性范围为０．３５－３．０ｍｇ／Ｌ，批内，批间ＣＶ分别为７．８５－９．６％和８．４－１０．８％。临床结果表明，精子密度为５０×１０＾９／Ｌ，生育组顶体素含量为１．０４±０．１０ｍｇ／Ｌ，不育组顶体素含量为０．８１±０．１８／ｍｇ／Ｌ，两组之间有显著性差异，顶体素含量与精子密度，精子顶体完整率之间呈在。     

自制尿微量白蛋白试剂盒在生化分析仪上的临床应用

采用自制的羊抗人白蛋白血清，以免疫透射比浊法的原理，用双试剂多点定标法在全自动生化分析信我上建立检测尿微量白蛋白的方法学。方法反应稳定；特异性强；重复性好；无明显干扰因素。白蛋白浓度在０－２００－ｍｇ／Ｌ范围内线性良好。批内误差ＣＶ＝１．９９％－２．３７％；批间误差ＣＶ＝２．６１％－３．４６％；平均在收率９８．７％，灵敏度为１２．５ｍｇ／Ｌ。分别检测３８７例健康者，６８例糖尿病患者，３４例肾病患者     

悬液法与载体法检测消毒剂对HBsAg破坏效果的比较

对悬液法与载体法检测ＴＤ清洗消毒剂（主要成分为氯化磷酸三钠）破坏ＨＢｓＡｇ的效果进行比较。结果,在 ２０℃,对悬液中 ＨＢｓＡｇ,仅需含有效氯 ４００ ｍｇ／ Ｌ的该消毒剂溶液作用 ２ ｍｉｎ,或含有效氯３００ ｍｇ／Ｌ者作用３ ｍｉｎ,即可将ＨＢｓＡｇ抗原性破坏;对不锈钢表面ＨＢｓＡｇ,需含有效氯１０００ ｍｇ／Ｌ该液作用 １０ ｍｉｎ,或含有效氯 ５００ ｍｇ／ Ｌ者作用 １５ ｍｉｎ才可。说明破坏不锈钢表面 ＨＢｓＡｇ抗原性较悬液中者难。     

乌鲁木齐温泉水质分析与医疗作用

探讨乌鲁木齐温泉水对人体的医疗作用。方法测定矿泉水中ＨＣＯ３－、ＣＯ３２－、钠、氟、硼、硫化氢含量。结果ＨＣＯ３－８３９ｍｇ／Ｌ、ＣＯ３２－１３９６ｍｇ／Ｌ、钠２４１９ｍｇ／Ｌ、氟１４ｍｇ／Ｌ、硼（以ＨＢＯ２计）３９５ｍｇ／Ｌ、硫化氢５２ｍｇ／Ｌ。结论根据测定结果，该泉水可命名为氟—硼—硫化氢水，对多种疾病都有一定的疗效。     

高效液相色谱荧光检测法测定尿雌三醇

报告用高效液相色谱测定孕妇尿内总雌三醇的方法，尿标本在酸水解后用乙醚提取Ｅ３，蒸于乙醚，残留物用流动相重组，标本成分用Ｃ８柱分离，以２８５ｎｍ波长激发，在６１０ｎｍ测定Ｅ３的自然荧光。本法批内ＣＶ为１．２％－１．５％批间ＣＶ分别为２．３％和４．０％本法在４．３３－１３８．７１μｍｏｌ／Ｌ（１．２５－４０．００ｍｇ／Ｌ）间呈线性，最低检出１．８μｍｏｌ／Ｌ（０．５２ｍｇ／Ｌ，信号／噪声比为３）。     

执业医师、医师晋升、研究生入学考试辅导试题撷英(七)——药理学专题

题目Ａ型题（第１题至第２１题）请从Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ中选出一个最佳答案。１．某一室模型一级动力学消除的药物，静注５００ｍｇ（Ａ值）后３小时及７．５小时的血药浓度为１６ｍｇ／Ｌ及２ｍｇ／Ｌ，该药的表观分布容积Ｖｄ是：Ａ．６Ｌ；Ｂ．８Ｌ；Ｃ．１０Ｌ；Ｄ．１２Ｌ；Ｅ．１４Ｌ。２．以下哪项不是一级消除动力学的特点﹖Ａ．单位时间消除的药量与体内药量成正比；Ｂ．药物作用维持时间与给药剂量成正比；Ｃ．时量曲线下面积与给药剂量成正比；Ｄ．定时、定量多次给药的平均稳态浓度与给药剂量成正比；Ｅ．药物血浆半衰期（…     

连续监测法测定胆红素氧化酶

为了建立连续监测法测定胆红素氧化酶活性的方法。该文以Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ为缓冲体系，酶促反应的最适ｐＨ为８．２，底物浓度为３４μｍｏｌ／Ｌ，胆红素的最大吸收波长在４４０ｎｍ，摩尔吸光系数为５．６３×１０＾４Ｌ．ｍｏｌ＾－１．ｃｍ＾－１；在最佳条件下测定ＢＯＤ的线性范围是０－８０Ｕ／Ｌ，批内ＣＶ〈３．８１％，批间ＣＶ〈４．６７％。     

Biostim（必思添）对慢性阻塞性肺病患者免疫功能的影响及其…

目的：观察免疫调节剂Ｂｉｏｓｔｉｍ对慢性阻塞性肺病患者免疫功能的影响，方法：选择病情基本稳定的ＣＯＰＤ患者２３例，口服必思添１个疗程（２ｍｇ／ｄ，连续８月，停２１日；１ｍｇ／ｄ，连续８日，停２１日；１ｍｇ／ｄ，连续８日）。结论：Ｂｉｏｓｔｉｍ对ＣＯＰＤ患者细胞免疫和体液免疫均有增强和调节作用，对防治ＣＯＰＤ急性作有治疗意义。