超声空化联合恩度抑制大鼠Walker-256肿瘤血管新生

目的 观察微泡增强超声空化毁损肿瘤微血管联合恩度对肿瘤血管新生的抑制作用。方法 对健康雄性SD大鼠40只于单侧大腿内侧皮下种植Walker-256肿瘤，随机均分为超声空化联合恩度组（A组）、恩度组（B组）、超声空化组（C组）和超声假照组（D组），每组10只，每天1次、连续给予相应干预3天；干预前、干预后1天和4天分别行二维超声及超声造影（CEUS）检查。之后获取肿瘤组织，行血管内皮生长因子A（VEGFA）免疫组织化学染色，测定微血管密度（MVD）。比较各组造影峰值强度（PI）、曲线下面积（AUC）、肿瘤体积及MVD。结果 干预后1天，CEUS中A组PI和AUC值明显低于其余各组（P均<0.05），B组和C组则低于D组（P均<0.05）；干预后4天，各组中A组PI和AUC值仍最低（P均<0.05），B组仍显著低于D组（P<0.05）。干预后1天，A组肿瘤体积（1.94±0.64）cm³最低，B组、C组均低于D组（P均<0.05）。干预后4天，A组肿瘤体积（5.25±1.74）cm³仍为各组中最低（P均<0.05）。各组MVD存在差异（F=30.121，P<0.001）。A组（18.33±3.10）、B组（24.17±2.16）MVD明显低于C组（30.43±4.17）和D组（31.57±1.74）（P均<0.05）。结论 微泡超声空化联合恩度治疗可显著减少肿瘤血流灌注，从而抑制大鼠Walker-256肿瘤新生血管生成及肿瘤生长。     

常规超声联合超声造影诊断脉络膜良恶性肿瘤

目的 观察常规超声联合超声造影（CEUS）诊断脉络膜良恶性肿瘤的价值。方法 回顾性分析60例脉络膜肿瘤患者，根据肿瘤性质分为良性组37例和恶性组23例。观察肿瘤常规超声、CEUS表现，定量分析相关参数。结果 常规超声联合CEUS诊断良恶性肿瘤的符合率为91.67%（55/60）。恶性组CEUS上升时间（RT）、达峰时间（TTP）、平均通过时间（MTT）及峰值强度（PI）均明显低于良性组（P<0.05）。结论 常规超声联合CEUS诊断脉络膜良恶性肿瘤准确率较高。     

微泡增强的超声空化阻断肿瘤微循环的病理观察

目的 探讨微泡增强的超声空化阻断肿瘤微循环的病理机制。方法 建立兔肝VX2转移瘤模型18只,随机分为超声微泡组(n=6)、单纯超声组(n=6)及假照组(n=6)。对超声微泡组经耳缘静脉注射微泡,并进行超声辐照;对单纯超声组以生理盐水代替微泡,并进行超声辐照;对假照组注射生理盐水,并进行超声假照。观察辐照后各组病理变化。结果 大体解剖观察,超声微泡组辐照面可见较多出血点;单纯超声组及假照组辐照后肿瘤组织均未见明显改变。光镜下观察,超声微泡组肿瘤组织可见大片出血,血管内皮细胞损伤、连续性中断,红细胞外溢;单纯超声组可见局灶性小片状出血,血管内皮尚完整;假照组肿瘤组织未见明显出血,血管内皮完整。电镜下观察,超声微泡组肿瘤血管内皮破损严重,可见大量红细胞渗出,线粒体肿胀及吞饮小泡;单纯超声组及假照组仅见内质网略水肿。结论 微泡增强的超声空化阻断兔VX2肝脏肿瘤微循环的机制可能为血管机械性损伤。     

低强度超声诱导微泡空化联合凝血酶增强肝肿瘤激光消融作用的实验研究

目的探讨利用低强度超声诱导微泡空化联合凝血酶降低"热沉降"效应,采用低能量的消融方法,提高风险部位肿瘤热消融治疗的安全性和有效性。方法 120只肝脏种植肿瘤(VX2)的新西兰大白兔随机分为对照组(肿瘤组)、激光组、凝血酶+激光组、低强度超声诱导微泡空化+激光组、低强度超声诱导微泡空化+凝血酶+激光组。利用软件定量分析术前及术后肿瘤微血管灌注。光镜及透射电镜观察消融区及周边区超微结构。结果低强度超声诱导微泡空化+凝血酶+激光组在术后即刻及14 d消融区坏死体积较激光组明显增大(P0.05)。低强度超声诱导微泡空化+凝血酶+激光组消融区术后即刻及7 d的时间强度曲线峰值、局部血流容积以及曲线下面积均显著低于激光组(P0.05)。结论低强度超声诱导微泡空化联合凝血酶可降低"热沉降"效应,可提高激光消融对于风险位置肿瘤治疗的安全性和有效性。     

携带凝血酶原复合物的阴离子脂膜微泡造影剂联合超声治疗对兔肾创伤性出血模型的止血效果

目的 探讨携带凝血酶原复合物的阴离子脂膜微泡（PCCMB）造影剂联合超声治疗对兔肾创伤性出血模型的止血效果。方法 对24只健康新西兰大白兔建立兔肾创伤性出血模型,并随机分为3组,即单纯超声治疗组（US组）、单纯PCCMB注射组（SHAM组）及PCCMB注射联合超声治疗组（PCCMB+US组）,每组各8只。对各组均通过10 min出血量及视觉评分评价止血效果。并对SHAM组及PCCMB+US组于超声治疗前和治疗后即刻、治疗后60 min行CEUS检查,对US组于超声治疗后即刻及治疗后60 min行CEUS检查,测量兔肾造影峰值强度（PI）。结果 所有实验兔均顺利完成实验。治疗后PCCMB+US组10 min出血量低于SHAM组及US组（P均<0.05）;PCCMB+US组视觉评分明显低于SHAM组及US组（P均<0.05）。PCCMB+US组超声治疗后即刻及治疗后60 min的PI均高于超声治疗前（P均<0.05）。SHAM组及US组超声治疗前与治疗后即刻及治疗后60 min PI差异均无统计学意义（P均>0.05）。结论 PCCMB造影剂联合超声治疗对兔肾脏创伤性出血可起到快速、有效止血的效果。     

微泡诱导超声空化联合血凝酶对兔VX2肝癌微血管阻断作用的实验研究

目的探讨微泡诱导超声空化联合血凝酶对兔VX2肝癌微血管损毁及阻断的作用。方法 32只VX2荷瘤兔随机分为4组:生理盐水组、血凝酶组、空化组和联合组,每组均为8只。4组均经相应的空化假辐照或空化治疗,于实验前后分别行超声造影检查,使用定量图像分析软件分析实验前后CEUS的峰值灰阶值(Peak)变化,通过光镜(HE)观察及透射电镜超微结构显示比较4组的治疗效果。结果实验前后,生理盐水组和血凝酶组超声造影图像视觉分析及定量分析Peak值比较均无明显变化(P0.05)。空化组和联合组视觉观察可见造影灌注缺损,联合组缺损更为明显。HE染色显示:空化组内偶见局灶片状出血;联合组可见大片状出血及明显的细胞水肿。透射电镜显示:空化组和联合组的微血管壁破坏,基底膜不完整。结论微泡诱导超声空化联合血凝酶能促进内皮损伤并导致更广泛的血栓形成,同时验证了血凝酶可选择性针对肿瘤组织局部损伤的血管,引起快速血栓形成及血流阻塞,并有增强热消融的作用。     

超声介导载sPD-1和miR-206基因纳米微泡协同抑制小鼠H22肝癌皮下移植瘤

目的 探讨超声介导载可溶性程序性死亡因子1（sPD-1）联合miR-206纳米微泡对小鼠H22肝癌皮下移植瘤的干预效果。方法 自制载sPD-1和miR-206基因的纳米微泡,构建H22肝细胞癌皮下移植瘤小鼠模型,并将模型小鼠随机分为模型组、空微泡组、miR-206微泡组、sPD-1微泡组、联合组（给予miR-206微泡组及sPD-1微泡）,分别每2天经尾静脉给予生理盐水及相应的微泡,每次注射后给予超声辐照瘤体治疗1次。5次治疗后取小鼠肿瘤组织,测量肿瘤质量及体积,计算肿瘤体积及质量抑瘤率,HE染色观察肿瘤组织病理变化,免疫组织化学法检测小鼠肿瘤组织Bax、Bcl-2蛋白表达,半定量PCR检测Bax、Bcl-2、c-met、γ干扰素（IFN-γ）、程序性死亡因子-1配体（PD-L1）mRNA表达,实时荧光定量PCR检测miR-206表达。结果 制备的纳米微泡呈球形,分布均一。与模型组比较,各组肿瘤体积、肿瘤质量均降低,体积抑瘤率及质量抑瘤率均升高（P均<0.05）;上述变化以联合组为著（P均<0.05）。与模型组比较,其余各组Bax蛋白和mRNA均高表达、Bcl-2蛋白和mRNA均低表达,以联合组为著（P均<0.01）。各组小鼠肿瘤组织Bax、Bcl-2、c-met、PD-L1、IFN-γ、miR-206 mRNA表达差异均有统计学意义（P均<0.01）。结论 超声介导载sPD-1和miR-206纳米微泡可协同抑制小鼠H22肝癌皮下移植瘤生长。     

超声造影评价小鼠三阴性乳腺癌模型特征及EGFR靶向治疗效果

目的 以超声造影（CEUS）动态观察小鼠三阴性乳腺癌（TNBC）病灶及新生血管变化,评价表皮生长因子受体（EGFR）通路靶向治疗TNBC的价值。方法 建立30只TNBC小鼠模型,分为靶向组（靶向阻断EGFR通路）及对照组各15只。分别于建模后第5、10、15、20天行常规超声及CEUS检查,测量相关参数;每次检查结束后随机处死3~4只小鼠,以免疫组织化学检测肿瘤标本中EGFR及血管内皮生长因子（VEGF）表达。采用Spearman相关性分析评价CEUS参数与EGFR及VEGF的关系。结果 建模后第5天,靶向组与对照组肿瘤体积无明显差异（P>0.05）;建模后第10~20天,靶向组肿瘤体积均明显小于对照组（P均<0.05）。各时间点靶向组峰值强度（PI）均显著低于对照组（P均<0.05）;组间上升时间（RT）及峰值时间（TTP）差异均无统计学意义（P均>0.05）。建模后第10~20天靶向组EGFR均显著低于对照组（P均<0.05）;建模后第5~20天靶向组VEGF均显著低于对照组（P均<0.05）。EGFR与VEGF相关（r=0.629,P<0.001）;PI与EGFR及VEGF均相关（r=0.679、0.839,P均<0.001）。结论 CEUS可评估小鼠TNBC病灶及新生血管变化;靶向阻断EGFR通路可有效缩小小鼠TNBC模型肿瘤体积,降低其CEUS PI及EGFR、VEGF表达水平。     

实时三维诊断超声激励瘤内注射微泡增强兔VX2移植瘤化疗效果

目的 探讨实时三维诊断超声激励瘤内注射微泡增强VX2移植瘤化疗效果的价值。方法 将24个兔VX2移植瘤模型随机分为4组,每组6只,分别为空白对照组(A组)、单纯多柔比星(Dox)组(B组)、实时三维诊断超声+微泡组(C组)、实时三维诊断超声+微泡+Dox组(D组)。对实验兔静脉注射Dox 1.2 ml/kg,瘤内注射微泡、约为肿瘤体积的1/2,辐照时间为20 min,机械指数(MI)1.3。于第1、3、5、8天对每组肿瘤进行治疗,共治疗4次。治疗后第10天剥离肿瘤,计算各组肿瘤体积总体生长率。结果 治疗后第10天,D组肿瘤体积明显小于其余3组(P<0.05);4组肿瘤体积总体生长率分别为A组100%,B组15.11%,C组118.22%,D组-30.81%。D组肿瘤体积在治疗后1~3天内略有增大,之后明显下降。结论 实时三维诊断超声激励瘤内注射微泡联合静脉注射Dox能够明显抑制兔VX2移植瘤的生长。     

常规超声和超声造影鉴别诊断眼眶淋巴瘤与炎性假瘤

目的 评价常规超声和超声造影（CEUS）鉴别诊断眼眶淋巴瘤与炎性假瘤的价值。方法 纳入18例单侧眼眶淋巴瘤（淋巴瘤组）和25例单侧炎性假瘤患者（炎性假瘤组），观察2组病灶常规超声特征及CDFI血流信号特点，比较其CEUS动态血管模式曲线（DVPC）和时间-强度曲线（TIC）特点及相关定量参数差异。以病理结果为金标准，评价常规超声及CEUS鉴别诊断准确率。结果 常规超声诊断淋巴瘤、炎性假瘤准确率分别为38.89%（7/18）和36.00%（9/25）。淋巴瘤组DVPC多呈正负两相波形，TIC多呈快进快出模式；而炎性假瘤组DVPC多呈正向波形，TIC多呈快进慢出模式。CEUS诊断淋巴瘤和炎性假瘤准确率分别为55.56%（10/18）和52.00%（13/25）；淋巴瘤组峰值强度（IMAX）明显高于炎性假瘤组（P<0.05），上升时间（RT）及平均通过时间（MTT）均明显低于炎性假瘤组（P均<0.05）。常规超声联合CEUS诊断淋巴瘤、炎性假瘤准确率分别为72.22%（13/18）和68.00%（17/25）。结论 常规超声联合CEUS鉴别诊断眼眶淋巴瘤和炎性假瘤具有重要临床价值。     

低能量脉冲式超声联合微泡对兔VX2肿瘤微循环的阻断作用

目的探讨低能量脉冲式超声联合微泡对兔VX2肿瘤微循环的阻断作用及其病理机制。方法将36只皮下VX2荷瘤兔随机平均分成3组:超声微泡组注入0.2ml/kg体质量微泡5ml,并辅以超声辐照10min;单纯超声组注入生理盐水5ml,辐照10min;单纯微泡组仅注入0.2ml/kg体质量微泡5ml,不进行超声辐照。CEUS观察各组治疗前、治疗后0、30min、60min时血流灌注情况,比较各时间点的灌注面积。治疗后即刻随机选取各组6只荷瘤兔处死,完整切取肿瘤,行病理学检查。结果超声微泡组治疗后即刻肿瘤血流灌注完全消失,灌注面积为0,但30min及60min后灌注有所恢复,各时间点治疗后灌注面积显著大于治疗前(均P<0.05);大体病理检查见肿瘤微血管扩张、管壁结构崩解,弥漫性充血、出血和肿瘤组织水肿,局部血肿,形成血栓等。单纯超声组及单纯微泡组治疗前、后造影剂灌注面积无差异,肿瘤内部未见出血、水肿等。结论低能量超声联合微泡能够阻断肿瘤微循环,可能是由于空化效应导致血管壁损伤,组织水肿对局部肿瘤血液循环产生阻力,从而阻断肿瘤血液循环。     

超声空化阻断对兔肝血流灌注的影响

目的观察微泡增强的超声空化效应在阻断兔肝血流实验中可能造成的不良反应。方法将21只健康新西兰大白兔随机均分为单纯超声组、一次超声空化组和两次超声空化组。超声空化处理采用经静脉注射脂质微泡(剂量0.1ml/kg体质量)联合峰值负压4.3MPa的脉冲式超声直接照射开腹暴露的肝脏5min。对一次超声空化组仅治疗1次;两次超声空化组治疗1次后间隔1h后重复治疗;单纯超声组用3ml生理盐水替代微泡。在治疗前及治疗后即刻、30、60min及48h对各组肝脏实施CEUS,计算各时间点峰值强度(PI)变化。实验结束后每组取一只动物,获取肝脏标本,行病理检查。结果一次超声空化治疗后即刻、30 min,靶区肝实质由此前的均匀增强变为无增强,其PI值由(-51.88±4.26)dB降至(-62.53±4.83)dB;48h后血流灌注恢复,PI值升至(-52.02±4.59)dB。两次超声空化治疗后治疗后即刻、30min,非增强缺损面积大于一次超声组,PI值变化与一次治疗组类似。单纯超声组治疗前、后CEUS无明显变化。病理发现一次超声空化组及两次超声空化组肝脏出现散在微小坏死灶。结论微泡超声空化阻断肝血流后,血流灌注可在48h后自行恢复,肝脏坏死范围较小。     

超声矢量血流成像联合奇异值分解滤波检测肝脏深部微血管内血流速度

目的 观察超声矢量流速成像（VFI）联合奇异值分解（SVD）滤波对检测肝脏深部微血管内血流速度的价值。方法 前瞻性对1例疑诊肝血管瘤患者采集肝脏灰阶超声、CDFI及超声造影（CEUS）图;对CEUS图行SVD滤波处理,以互相关算法分别获取基于灰阶超声、原始CEUS及经SVD滤波处理后CEUS的VFI,比较其检测肝脏微血管血流方向和速度的差异。结果 肝脏灰阶超声、原始CEUS及经SVD滤波处理后CEUS图的信噪比（SNR）分别为7.56、17.65及22.43 dB,对比组织比（CTR）分别为1.12、7.56及16.34 dB。相比基于灰阶超声和原始CEUS的VFI,经SVD滤波处理后CEUS的VFI可检出更高速、方向更均一的血流。SVD滤波处理前、后,VFI所测肝脏微血管内血流速度分别为1.91（0.81,4.11）及6.83（4.25,9.41）mm/s,差异有统计学意义（Z=-10.671,P<0.001）。结论 联合SVD滤波可显著提高VFI检测肝脏深部微血管内血流速度的效能。     

Hemocoagulase Combined with Microbubble-Enhanced Ultrasound Cavitation for Augmented Ablation of Microvasculature in Rabbit VX2 Liver Tumors

We investigated a new method for combining microbubble-enhanced ultrasound cavitation (MEUC) with hemocoagulase (HC) atrox. Our goal was to induce embolic effects in the vasculature and combine these with an anti-angiogenic treatment strategy. Fourteen days after being implanted with a single slice of the liver VX2 tumor, rabbits were randomly divided into five groups: (i) a control group injected intra-venously with saline using a micropump; (ii) a group given only an injection of HC; (iii) a group treated only with ultrasound cavitation; (iv) a group treated with MEUC; (v) a group treated with MEUC + HC. Contrast-enhanced ultrasound was performed before treatment and 1 h and 7 d post-treatment to measure tumor size, enhancement and necrosis range. QontraXt software was used to determine the time–intensity curve of tumor blood perfusion and microvascular changes. At 1 h and 7 d after treatment with MEUC + HC, the parameters of the time–intensity curve, which included peak value, regional blood volume, regional blood flow and area under the curve value and which were measured using contrast-enhanced ultrasound, were significantly lower than those of the other treatment groups. The MEUC + HC treatment group exhibited significant growth inhibition relative to the ultrasound cavitation only, HC and MEUC treatment groups. No damage was observed in the surrounding normal tissues. These results support the feasibility of reducing the blood perfusion of rabbit VX2 liver tumors using a new method that combines MEUC and HC.     

介入导入Ad-p53基因联合超声辐照治疗兔VX2肝癌

目的 探讨介入导向下联合超声辐照对兔VX2肝癌模型Ad-p53转染效率及该基因对VEGF、MMP2的影响.方法 青紫蓝兔42只,直视下手术,将VX2肿瘤细胞种植于肝左叶,以超声检测肿瘤生长情况.根据第14天超声检测结果,将建模成功的30只动物随机分为3组,每组各10只,分别给予介入导向肝动脉灌注Ad-p53(Ad-p53组)及介入导向联合超声辐照Ad-p53给药(Ad-p53+US组)或等量生理盐水(对照组).治疗后第4天超声检测肿瘤大小,之后处死动物,以ELISA法检测血清中VEGF含量,免疫组化法检测瘤组织内p53、MMP2、VEGF的表达水平,蛋白质印迹法检测Ad-p53不同给药方法对野生型p53表达水平的影响.结果 治疗前3组动物瘤体直径差异无统计学意义,治疗后各组瘤体均有增加,但Ad-p53+US组瘤体相对较小.治疗后第4天,野生型p53水平在Ad-p53组明显高于对照组,而Ad-p53+US组p53的表达水平明显高于Ad-p53组.Ad-p53+ US组血清中VEGF含量显著降低.Ad-p53组和Ad-p53+ US组肿瘤组织中VEGF及MMP2表达均减低,但以Ad-p53+US组更为明显.结论 Ad-p53基因对肝癌生长具有抑制作用.Ad-p53经载瘤动脉介入给药联合超声辐照的治疗作用优于单纯Ad-p53灌注.     

The role of quantitation of real-time 3-dimensional contrast-enhanced ultrasound in detecting microvascular invasion: an in vivo study

Purpose

This study was to evaluate the role of quantitative perfusion analysis of 3-dimensional (3D) contrast-enhanced ultrasound (CEUS) in detecting microvascular invasion (MVI) of liver tumor in vivo.

Methods

VX2 tumors were implanted in the livers of sixteen New Zealand rabbits. On day 10, real-time 3D CEUS was performed, and the real-time dynamic images were analyzed using online quantification software. The animals were sacrificed and sent for pathology examinations. According to the gold standard of pathology, the animals were divided into an MVI group and a group without MVI (non-MVI group). Time-intensity curves (TICs) were obtained for the VX2 tumors and the surrounding liver parenchyma, and the parameters peak intensity (PI), mean transit time (MTT), and time to peak (TTP) were compared within and between the MVI and non-MVI groups.

Results

The TTP and MTT of the VX2 tumors were significantly faster than those of the surrounding liver parenchyma in both MVI and non-MVI groups. The PI of the VX2 tumors was significantly lower than that of the surrounding liver parenchyma in the non-MVI group but not the MVI group. The TTP and MTT of the VX2 tumors and surrounding liver parenchyma were not significantly different in the MVI group compared with the non-MVI group, whereas the ΔPI (the PI ratio between the VX2 liver tumors and the reference liver parenchyma) of the VX2 tumors in the MVI group was larger than that in the non-MVI group. VX2 tumors with MVI present different hemodynamic parameters, with a larger ΔPI than tumors without MVI.

Conclusions

Our data suggest that quantitative perfusion analysis of 3D CEUS might be a promising method for predicting MVI in liver tumors.

     

容积超声造影对肝肿瘤射频消融效果的评估

目的探讨容积超声造影评估肝肿瘤射频消融效果的价值。方法对22只新西兰白兔肝脏VX2肿瘤和22例肝癌患者进行射频消融治疗,治疗前后分别进行二维及容积超声造影,所有患者治疗前后行增强CT检查,动物肝脏均做病理学检查。结果消融前所有病灶二维及容积超声造影均表现为早期动脉相病灶内均匀或不均匀高增强;消融后,动物实验中19个病灶的疗效判断二维超声造影与病理结果相同;22个病灶容积超声造影与病理结果相同;临床研究中20个病灶的疗效判断二维超声造影与增强CT相同,24个病灶容积超声造影结果与增强CT相同。结论容积超声造影有可能更好地评估肝脏肿瘤消融治疗效果。