310株革兰阴性杆菌β—内酰胺酶检测及药敏结果分析

目的 分析６种常见革兰阴性杆菌的β－内酰胺酶类型，分布及耐药状况。方法 酸法检测青霉素酶和头孢菌素酶；头孢他啶、头孢他啶／克拉维酸和头孢噻肟、头孢噻肟／克拉维酸双纸片检测超广谱β－内酰胺酶；Ｋ－Ｂ法做药敏试验。结果 总产酶率４０．７％，阴沟肠杆菌产酶率最高，同时产青霉素酶和头孢菌素酶的菌株占产酶株的３４．９％，６种革兰阴性杆菌不产酶株对三代头孢均较敏感。鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌对用舒     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测

目的 选择和适用于检测产超广谱β－内酰安酶（ＥＳＢＬｓ）临床大肠埃希菌、肺炎克雷伯耐药菌株的最佳方案。方法 临床分离的１１０株大肠埃希菌和８４株肺炎克雷伯菌经初筛试验,用浓度梯度法（Ｅｔｅｓｔ）、单纸片加抑制剂舒巴坦扩散法、阿莫西林及氨苄西林双纸片协同试验,比较５种方法的检出率极度其差异。结果 Ｅｔｅｓｔ法对产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出存在明显的差异（Ｐ〈０．０１）,肺炎克雷伯菌的检出率（４／２０）有显低于大肠埃希菌（１６／２６）;单纸片扩散法加克拉维酸对两种菌的检出均较高（１６／２６、１２／２０）。检测产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌时,除氨 苄西林双纸片协同法（８／２６）检出率低以外,其他４种方法的检出率无明显差异（Ｐ〉０．０５）,５种方法有较好的一致性。检测产ＥＳＢＬｓ肺炎克雷伯菌时,单纤片扩散法加克     

三种方法检测超广谱β-内酰胺酶敏感性比较

目的　比较３ 种方法检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株所产的超广谱β内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ） 的敏感性。方法　首先用纸片扩散初筛法从７３ 株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中筛选出２０ 株可疑产ＥＳＢＬｓ 的菌株,同时用纸片扩散确证法、浓度梯度法（Ｅｔｅｓｔ） 法和双纸片协同法进行测定比较。结果　对可疑产生ＥＳＢＬｓ 的１４ 株大肠埃希菌和６ 株肺炎克雷伯菌,用纸片扩散确证法头孢噻肟和头孢噻肟克拉维酸组检测,此２０ 株全部为ＥＳＢＬｓ 株,而头孢他啶和头孢他啶克拉维酸组的１３ 株初筛株有１２ 株ＥＳＢＬｓ 阳性。Ｅｔｅｓｔ 法用头孢他啶和头孢他啶克拉维酸检测,有１２ 株ＥＳＢＬｓ 阳性。双纸片协同法用头孢噻肟检测此２０ 株全部为ＥＳＢＬｓ 阳性,用头孢他啶检出１４ 株ＥＳＢＬｓ 阳性。结论　头孢噻肟及头孢他啶双药检测ＥＳＢＬｓ 的３ 种方法证明,头孢噻肟检出ＥＳＢＬｓ 的敏感性明显高于头孢他啶。     

鲍曼不动杆菌的β—内酰胺酶与耐药表型分析

分析鲍曼不动杆菌的β－内酰胺酶与对β－内酰胺类抗生素耐药表型的关系。用青霉素及头孢唑啉做底物，分别检测从各种临床样品分离到的８４株鲍曼不动杆菌的青霉素酶和头孢菌素酶；并用Ｋ－Ｂ法，微量肉汤稀释法进行了７种β－内酰胺类抗生素及两种加酶抑制剂的三代头孢药敏试验，其中产酶株对７种抗生素基本耐药，不产酶株对头孢他啶 ，哌拉西林较敏感；８４株对头孢哌酮／舍巴坦均敏感，舒巴坦对酶的抑制作用远优于棒酸，用头孢他     

产酸克雷伯菌超广谱β内酰胺酶与AmpC酶耐药表型及基因型分析

目的了解呼吸道感染患儿产酸克雷伯菌超广谱β内酰胺酶（ESBLs）与AmpC酶的耐药表型和基因型。方法采用API及VITEK32鉴定菌株；琼脂稀释法检测MIC值；CLSI纸片确认实验检测ESBLs，3-氨基苯酚硼酸（APB）纸片增强法检测AmpC酶；基因芯片技术检测ESBLs与AmpC酶的基因型；并进行肠杆菌基因间共有重复序列（Enterobacterial repetitive intergenic consensus，ERIC）分型。结果165株产酸克雷伯菌ESBLs阳性129株（78．2％），ESBLs与AmpC酶同时阳性16株（9．7％），表型及基因型均未检出AmpC单独阳性株；CTX-M型是其主要基因型（89／109），产AmpC酶株的基因型仅见DHA型；ERIC分型显示多数耐药产酸克雷伯菌具有相同的分子型。产酸克雷伯菌的产酶株及非产酶株对碳青霉烯类100％敏感，但产酶株（尤其是同时产ESBLs与AmpC酶）比非产酶株耐药率高，多重耐药性更常见。结论儿童患者中产酸克雷伯菌产ESBLs分离率较高；ESBLs与AmpC酶的耐药基因型分别主要是CTX-M型和DHA型。     

产超广谱β内酰胺酶和高产AmpC酶革兰阴性杆菌耐药性检测

目的了解铜陵地区产ESBLs和高产AmpC酶革兰阴性杆菌的耐药性.方法2003年10月至2004年9月铜陵地区临床分离的革兰阴性杆菌270株,用Kirby-Bauer法进行药敏试验,根据NCCLS 2002年判断标准分析结果.结果270株革兰阴性杆菌中检出产ESBLs或（和）高产AmpC酶68株,检出率25.2%,其中单产ESBLs 49株,以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌中检出率最高,分别为31.6%和31.0%：单产AmpC酶3株,均为阴沟肠杆菌,同时产AmpC酶和ESBLs16株,其中鲍曼不动杆菌8株.产酶株对头孢菌素耐药率明显高于非产酶株,产ESBLs菌株对替卡西林-克拉维酸、头孢哌酮-舒巴坦等含酶抑制剂的抗菌药物耐药率在50%以上,对亚胺培南敏感性好.结论ESBLs和高产AmpC酶是导致革兰阴性杆菌耐药的主要两类酶,产酶株对多种抗菌药物耐药,仅对亚胺培南敏感.     

医院感染的主要革兰氏阴性杆菌耐药性的监测

目的 检测院内感染革兰阴性杆菌对１２种抗生素的耐药率，以指导临床用药。方法 采用Ｅｔｅｓｔ药敏试验测定２６０株细胞的耐药性。结果 受检的细菌株中耐药率最低是对亚胺培南（１０％），头孢哌酮／舒巴组（７％），派拉西林／他唑巴坦（２０％），１０５株大肠埃氏菌和克雷伯氏菌属中，超广谱β－内酰胺酶发生率为１５％；大肠埃希菌、克雷伯氏菌属、不动杆菌对亚胺培南耐药率为０％，对嗜麦芽窄食单胞菌，对包孢哌酮／舒巴坦     

多重耐药鲍曼不动杆菌表型及耐药基因型的研究

目的 对我院临床分离的31株多重耐药鲍曼不动杆菌表型和耐药基因进行分析。方法 用纸片扩散法检测鲍曼不动杆菌的药敏结果，用三维试验检测超广谱β-内酰胺酶（ESBL）、头孢菌素酶（AmpC酶），用协同法检测金属β-内酰胺酶（MBL），用聚合酶链反应（PCR）检测耐药基因。结果 31株多重耐药鲍曼不动杆菌中，90％对亚胺培南敏感；22％对头孢哌酮-舒巴坦耐药，74％中介；其他抗菌药物的敏感率均在6％以下。2株菌（6％）单产ESBL；93％菌株高产AmpC酶，其中19％菌株同时产ESBL。所有菌株blaTEM、aacA4和gyrA基因均为阳性；96％菌株ampC基因为阳性；2株菌同时携带blaFER和blaOXA-23，型基因，另有1株菌blaOXA-23，基因阳性。结论 同时携带blaTEM、ampC、aacA4和gyrA突变以及blaFEM、blaOA-23等多种耐药基因是鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因。     

温州地区嗜血杆菌的检出及耐药性分析

目的 了解本地区成人呼吸道嗜血杆菌的感染情况及其对常用抗生素的耐药性,为临床治疗提供参考。方法 用嗜血杆菌专用巧克力培养基（ＨＡＥ）进行分离培养,用ＮＨＩ鉴定卡和ＡＴＢＮＨ药敏检测条鉴定其生物种型及其对多种抗生素的耐药性,用Ｎｉｔｒｏｃｅｆｉｎ纸片法测定被试菌的β－内酰胺酶。结果 １１９０例呼吸道感染病人痰液和咽拭标本中检出１４７株嗜血杆菌,总检出率１２．３５％,其中流感嗜血杆菌３２株（２１．７７％）,副流感嗜血杆菌１１３株（７６．８７％）,杜克雷嗜血杆菌２株（１．３６％）。检测株对头孢噻肟、阿莫西林／克拉维酸、利福平的耐药率较低,分别为６．１２％、１０．８８％、１９．０５％。产β－内酰胺酶的共６４株,产酶率为４３．５４％。结论 本地区成人呼吸道嗜血杆菌感染中以副流感嗜血杆菌为主,产酶率较高,对嗜血杆菌引起的呼     

肺炎克雷伯菌中质粒介导的AmpC酶及相关表型研究

目的 证实临床分离的部分肺炎克雷伯菌（Kp）除产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）外，还同时产AmpC酶，并探讨了AmpC酶编码基因存在方式。方法 对临床分离的可疑同时产ESBLs和其他高活性广谱β内酰胺酶的8株Kp进行接合试验，并对供体菌和接合子同时采用三维试验、ESBLs试验、AmpC酶诱导试验和β内酰胺类抗生素最低抑菌浓度（MIC）试验测定，并进行AmpC基因携带状态、表达方式和酶活性分析。结果 8株Kp菌通过接合试验共得到10株接合子，其中有6株供体菌均只得到同时表达AmpC和ESBLs的1种接合子；另2株供体菌，各得2株接合子，1株同时表达AmpC和ESBLs，1株仅表达ESBLs；8株供体菌均未得到单独表达AmpC的接合子。表达AmpC接合子的耐药表型与受体菌非常接近，酶的活性也必须用克拉维酸（CA）和邻氯西林（CLO）两种酶抑制剂才能完全抑制，其中有5株可被头孢西丁（FOX）诱导使某些指示药出现截平现象。结论 在Kp中，已出现质粒携带的AmpC基因，有可能与编码ESBLs的基因存在于同一质粒上，并具有诱导型和非诱导型两种表达形式。     

3种克雷伯菌产β-内酰胺酶分析

目的研究3种克雷伯菌所产各种β内酰胺酶（plase）分布情况。方法采用多底物纸片法（协同法、拮抗法）、超广谱G-内酰胺酶（ESBLS）确认试验、AmpC酶检测法检测51株克雷伯菌属[产酸克雷伯菌（K．ox）23株，肺炎克雷伯菌臭鼻亚种（K．oz）18株，土生克雷伯菌（K．te）10株]所产各种β—lase。结果（1）51株克雷伯菌属β—lase总检出率为80．4％，其中单独产青霉素酶、广谱酶、ESBLs菌株分别为7、4、21株，产ESBLs菌株总数32株（62．8％），未检出头孢菌素酶和碳青霉烯酶：产复合酶11株（21．6％），均产AmpC酶＋ESBLs。（2）在4种产酶形式中，K．te检出率分别10．0％、10．0％、20．0％、20．0％；K．oz检出率分别5．6％、5．6％、33．33％、27．8％：K．ox检出率分别13．0％、8．7％、56．5％、17．4％。结论（1）本组51株克雷伯菌属产β-lase总检出率很高，其中K．ox最高；（2）4种产酶形式以AmpC酶、ESBI。S为主，未检出头孢菌素酶和碳青霉烯酶，各种克雷伯菌属菌所产各种酶的检出率不同。     

产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的检测

目的研究大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药谱。方法收集2002年8月至2003年6月间从嘉善县第一人民医院分离的167株大肠埃希菌、154株肺炎克雷伯菌和67株阴沟肠杆菌，用头孢噻肟或头孢他啶药敏纸片筛选产ESBLs可疑株；用头孢噻肟和头孢噻肟加克拉维酸或头孢他啶和头孢他啶加克拉维酸双纸片扩散法检测ESBLs；采用K-B法进行药敏试验。结果符合CTX筛选标准的有158株，符合CAZ筛选标准的有94株，两者都符合的有76株，共176株产ESBLs可疑株。CTX和CTV／CA双纸片检出115株阳性，CAZ和CAZ／CA双纸片检出62株阳性，两种双纸片法都为阳性的有51株，共检出126株产ESBLs菌株。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的ESBLs检出率分别为30%（50／167）、34％（52／156）和36％（24／67）。产ESBLs株对氨苄西林、阿齐霉素和克林霉素的耐药率近乎100％，对阿米卡星、环丙沙星和呋喃妥因的耐药相对较低，除2株产ESBLs肺炎克雷伯菌耐亚胺培南外，其余均为敏感。结论大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的产ESBLs率较高，耐药性严重。筛选产ESBLs可疑株的最佳纸片为CTX，表型确证产ESBLs菌株的最佳双纸片为CTX和CTX／CA，阴沟肠杆菌的产ESBLs率超过肺炎克伯菌成为主要产ESBLs菌。     

三种方法检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β—内酰胺酶？…

目的 用纸片协同试验、纸片确证试验和克拉维酸纸片叠加法检测产ＥＳＢＬｓ的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,并调查了医院感染这两种菌产ＥＳＢＬｓ的流行现状。方法 采用头孢他啶、头孢曲松、头孢噻噻肟和氨曲南方底物,用上述三种试验对临床分离的９９株大肠埃希菌和４８株肺炎克雷伯菌检测ＥＳＢＬｓ的产生。结果 纸片确证试验和克拉维酸纸片叠加法检测结果没有显著差异,总检出率在大肠埃希菌中为３５．４％,在肺炎克雷伯菌中为     

肠杆菌科细菌去阻遏持续高产AmpC酶的检测与ampD基因突变的研究

目的：用三维试验方法对阴沟肠杆菌、枸橼酸杆菌、沙雷菌、摩根摩根菌进行AmPC酶的检测，并对ampD基因突变与持续高产AmpC酶的关系进行研究。方法：对53株细菌用三维试验方法检测AmPC酶，并对阳性菌株进行等电点测定和ampD基因扩增，部分菌株测定并分析核苷酸序列。结果：32株阴沟肠杆菌检出AmpC酶9株，检出率为28％，12株构播酸杆菌检出AmpC酶3株，检出率为25％，其余细菌没有检出。等电点测定及能被邻氯西林抑制的条带主要有7．96、8．7、8．8和8．9。有两株amPD基因扩增阴性。对两株亚胺培南中介其余抗生素耐药细菌ampD基因测序结果，突变主要发生在C’-末端。阴沟肠杆菌主要在101、149、155、166位氮基酸发生改变，构播酸杆菌主要在95、158、164位氮基酸发生改变。结论：amPD基因突变可导致AmpDC’一端发生氮基酸突变，从而使AmpC酶去阻遏持续高产，并导致细菌对?一内酰胺类抗生素耐药。因此有必要在临床常规检验中推广AmpC酶的检测。     

温州地区嗜血杆菌的检出及耐药性分析

目的了解本地区成人呼吸道嗜血杆菌的感染情况及其对常用抗生素的耐药性,为临床治疗提供参考.方法用嗜血杆菌专用巧克力培养基(HAE)进行分离培养,用NHI鉴定卡和ATB-NH药敏检测条鉴定其生物种型及其对多种抗生素的耐药性,用Nitrocefin纸片法测定被试菌的β-内酰胺酶.结果 1190例呼吸道感染病人痰液和咽拭标本中检出147株嗜血杆菌,总检出率12.35%,其中流感嗜血杆菌32株(21.77%),副流感嗜血杆菌113株(76.87%),杜克雷嗜血杆菌2株(1.36%).检测株对头孢噻肟、阿莫西林/克拉维酸、利福平的耐药率较低,分别为6.12%、10.88%、19.05%.产β-内酰胺酶的共64株,产酶率为43.54%.结论本地区成人呼吸道嗜血杆菌感染中以副流感嗜血杆菌为主,产酶率较高,对嗜血杆菌引起的呼吸道感染可选用头孢噻肟、阿莫西林/克拉维酸、利福平等药物进行治疗.     

二氧化碳嗜纤维菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性分析及基因型检测

目的 通过检测二氧化碳嗜纤维菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性,了解其耐药机制.方法 收集3株二氧化碳嗜纤维菌,用纸片扩散法和Etest法检测二氧化碳嗜纤维菌对抗菌药物的敏感性,以Nitrocefin纸片法、三维法和PCR方法检测其β-内酰胺酶.结果 3株二氧化碳嗜纤维菌中有2株生痰二氧化碳嗜纤维菌,1株牙龈二氧化碳嗜纤维菌.3株菌对青霉素、氨苄西林、氨曲南、头孢噻肟、头孢他啶、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢吡肟、头孢哌酮耐药,但对哌拉西林、亚胺培南、美罗培南、头孢西丁、氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸、头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟/克拉维酸敏感.三维法试验结果显示3株二氧化碳嗜纤维菌所产的β-内酰胺酶能水解青霉素、氨苄西林、头孢噻肟、头孢他啶、头孢唑啉、头孢呋辛和头孢吡肟,但不能水解头孢西丁、亚胺培南和阿莫西林/克拉维酸.经PCR方法检测,3株二氧化碳嗜纤维菌的β-内酰胺酶和AmpC酶耐药基因均为阴性.结论 二氧化碳嗜纤维菌对常用抗菌药物尤其是β-内酰胺类抗生素均存在较高的耐药性,且其β-内酰胺酶可能存在新的基因型.     

三种方法检测超广谱β—内酰胺酶敏感性比较

目的 比较３种方法检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株所产的超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）的敏感性。方法 首先用纸片扩散初筛法从７３株大埃希菌和肺炎克雷伯菌中筛选中２０株可疑产ＥＳＢＬｓ的菌株,同时用纸片扩散确证法、浓度梯度法（Ｅｔｅｓｔ）法和双纸片协同法进行测定比较。结果 对可疑产生ＥＳＢＬｓ的１４株大肠埃希菌和６株肺炎克雷伯菌,用纸片扩散确证法头孢噻肟和头怨噻肟－克拉维酸组检测,此２０株全     

神经外科ICU脑膜炎败血黄杆菌的抗生素耐药分析

[目的]对神经外科重症监护病房（ICU）内脑膜炎败血黄杆菌的抗生素耐药性状况进行检测分析，指导临床合理使用抗生素。[方法]用Micro Scanauto SCAN4检测系统进行细菌学鉴定及药敏试验，并根据美国临床实验室标准化委员会（CLSI）的标准判定结果。[结果]脑膜炎败血黄杆菌对多种抗菌药物均耐药，对头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林／他唑巴坦、替卡西林／克拉维酸、复方新诺明的耐药率较低，分别为24．1％、14．3％、34．8％、49．1％。[结论]脑膜炎败血黄杆菌是一种高度耐药的细菌，头孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林／他唑巴坦、替卡西林／克拉维酸、复方新诺明是抗感染治疗的首选。     

多重耐药鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类药物耐药性及其耐药基因(ant)的研究

目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类药物修饰酶的耐药性及其耐药基因。方法用琼脂稀释法检测庆大霉素、阿米卡星、链霉素、卡那霉素、妥布霉素、奈替米星、新霉素7种药物对20株多重耐药性鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度（MIC）；用PCR法检测两种氨基糖苷类药物核苷转移酶基因，并使用DNA测序加以证实。结果庆大霉素、阿米卡星、链霉素、卡那霉素对20株鲍曼不动杆菌的MIC50和MIC90均大于1024mg／L，耐药率分别为95％、95％、100％和90％；而妥布霉素、奈替米星和新霉素的耐药率分别为85％、90％、40％。从20株菌中检出ant（2”）-I、ant（3”）-I两种修饰酶基因，阳性率分别为55％、80％，10株细菌两种基因同时阳性，占50％。结论鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类药物耐药与ant（2”）-I、ant（3”）-I基因有非常密切的关系。     

五种酶抑制剂复合制剂对产超广谱酶菌株的抗菌活性

由质粒介导的超广谱 β 内酰胺酶 (ＥＳＢＬｓ) ,对几乎所有β 内酰胺类抗生素均有较强的灭活能力 ,β 内酰胺类抗生素与 β 内酰胺酶抑制剂组成的复合制剂有抑酶抗菌的作用。我们测定了 5种 β 内酰胺酶抑制剂复合制剂对产ＥＳＢＬｓ菌株的抗菌活性。一、材料和方法1 试验菌株 :来源于我院 1999～ 2 0 0 0年检出的产ＥＳＢＬｓ菌株 15 4株。2 试剂 :阿莫西林 /克拉维酸 (ＡＯＡ)、替卡西林 /克拉维酸 (ＴＩＡ)、氨苄西林 /舒巴坦 (ＡＭＳ)由上海伊华医学科技有限公司生产 ;头孢哌酮 /舒巴坦 (ＳＰＺ)由美国ＢＢＬ公司生产 ;哌拉西林 /他唑…