肺腺癌miR-195的表达及靶基因筛选

目的研究miR-195在肺腺癌中的表达差异,筛选miR-195靶基因,分析靶基因作用网络及其对患者生存预后的影响。方法利用TCGA数据库,比较miR-195在肺腺癌癌组织与癌旁正常组织间的表达差异;采用实时荧光定量PCR检测miR-195在临床标本中的相对表达水平。设计miR-195的Hybrid PCR引物,扩增出靶基因的mRNA 3′-非翻译区(3′UTR),菌落PCR筛选靶基因的3′UTR片段进行测序。美国国家生物信息中心网站比对测序结果,得到靶基因的基因注释和全长序列,构建靶基因作用网络并进行生存分析。结果miR-195在肺腺癌癌组织中的相对表达水平低于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.01)。Hybrid PCR筛选miR-195候选靶基因显示多个条带。miR-195与靶基因的结合位点在基因3′UTR上有19个。靶基因GCLC、NOB1的低表达与肺腺癌患者的良好预后相关。结论肺腺癌癌组织中miR-195呈低表达。miR-195可能通过直接抑制靶基因GCLC、NOB1的功能,进而影响肺腺癌的发生、发展。     

基于数据挖掘分析GPX4在胃癌中的表达及临床意义

目的探索谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）在胃癌中的表达及临床意义。 方法检索收集Oncomine和基因表达谱动态分析（GEPIA）数据库中GPX4 mRNA在常见肿瘤中的表达情况，并分析其在胃癌中的表达及与患者预后的关系。利用cBioPortal在线分析癌症基因图谱（TCGA）数据库中1178例胃癌样本中的RNA测序数据，分析GPX4基因的突变情况及其与预后的关系。利用String数据库预测与GPX4相互作用的蛋白。 结果Oncomine数据库中共收集了459项关于GPX4基因在常见肿瘤及正常组织中的对照研究，其中22项表达差异具有统计学意义（P<0.0001）。GEPIA数据库分析结果显示GPX4 mRNA在胃癌组织中高表达（P<0.01），且与不良的总体生存期及无进展生存期明显相关（P<0.05），但与胃癌的TNM分期无明显相关性（P>0.05）。对TCGA数据库的RNA测序结果分析发现，在1178例胃癌样本中有25例发生GPX4基因变异，总变异率为2.1%。Kaplan-Meier生存曲线分析显示，GPX4基因变异与否，与总体生存期及无进展生存期无明显相关性（P>0.05）。GSR、GSS、GGT1/5/6/7，GSTO2，GRSF1，SOD1/2等蛋白与GPX4有明显的相互作用（P=1.94×10^-7）。 结论利用多种肿瘤基因数据库分析表明，GPX4基因在胃癌组织中变异率低，其mRNA水平高表达与患者不良预后相关，为进一步探究GPX4在胃癌的发生发展中的作用提供了重要理论依据。     

miR-181b在慢性淋巴细胞白血病患者中的表达及其靶基因的预测

目的:探讨miR-181b在慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者CD19+B淋巴细胞中的表达水平,分析其表达与CLL预后关系,并利用生物信息学预测miR-181b在CLL中的潜在靶基因。方法:选取2013年6月至2018年6月在新疆自治区人民医院诊治的CLL患者84例、并选取健康者20例为对照组。应用磁珠分选CLL患者和对照组外周血CD19+B淋巴细胞后进行RNA提取,检测miR-181b的表达水平,分析其在不同IPI分组中表达差异,探讨miR-181b表达水平与CLL患者PFS相关性。使用网上数据库及文献预测miR-181b靶基因,对候选靶基因进行基因注释分析及相关信号通路分析。结果:miR-181b在CLL患者中表达显著低于对照组(P0.01)。miR-181b在低危组的表达水平高于高危组和极高危组(P0.05),但在低危组与中危组间表达无差异(P=1.00),中危组中miR-181b的表达水平高于高危组和极高危组(P0.05),但在高危组与极高危组间表达无差异。ROC曲线结果显示,曲线下面积(AUC)为0.792(P0.01),由此显示,miR-181b表达水平处于分界值0.279时,具有较好的敏感性(62.9%)和特异性(91.8%)。生存分析结果提示,与高表达组相比,miR-181b低表达CLL患者具有较差的PFS(log-rank:P=0.047)。使用starBase、Targetscan和PicTar数据库进行靶基因预测,结合文献报道,与血液疾病相关的靶基因有CARD11、ZFP36L1、RUNX1、NR4A3、ATP1B1、PUM1和PLAG1,其中上调的CARD11、ZFP36L1通过促进细胞增殖、抑制细胞衰老参与淋巴系统肿瘤形成。结论:miR-181b在CLL患者中的表达水平明显低于健康对照组,且miR-181b低表达与CLL不良预后有关。通过生物信息学预测并结合文献报道,推测CARD11及ZFP36L1可能作为miR-181b的靶基因参与CLL疾病发生发展,该结果还需要进一步实验进行验证。     

基于内源性竞争性网络的Ⅰ型、Ⅱ型子宫内膜癌关键长非编码RNA和微小RNA分析

目的基于内源性竞争性网络分析可用于子宫内膜癌(EC)分型及诊治的潜在生物标志物。方法从TCGA数据库中总结EC差异表达的基因,筛选出32个基因来构建内源性竞争性网络。采用基因本体论(GO)和京都基因与基因组数据库(KEGG)富集分析、相关性分析、生存分析及GEO数据集验证,进一步筛选关键基因。结果Ⅰ型EC和Ⅱ型EC之间存在59个差异表达的长非编码RNA(lncRNA)、51个差异表达的微小RNA(miRNA)和843个差异表达的mRNA。在此基础上,建立了内源性竞争性网络,进一步筛选出与EC分型及预后相关的关键基因。在TCGA数据库中,LINC00667、miR-34c、miR-449a、miR-449b和TMCC3均与EC患者生存率相关,LINC00667和TMCC3表达越高,患者生存率越低,而miR-34c、miR-449a、miR-449b表达越高,患者生存率越高。Pearson相关分析结果显示,LINC00667与TMCC3呈正相关(P0.001)。EC患者中LINC00667高表达与EC的病理分型、分化程度和国际妇产科联盟(FIGO)分期有关(P0.05),与年龄无关(P0.05)。TMCC3高表达与EC的病理分型、年龄和分化程度有关(P0.05),与FIGO分期无关(P0.05)。miR-34c、miR-449a、miR-449b低表达与EC的病理分型、分化程度和FIGO分期有关(P0.05),与年龄无关(P0.05)。结论 LINC00667-miR-34c/miR-449a/miR-449b-TMCC3是Ⅰ型和Ⅱ型EC内源性竞争性网络中的关键基因,且均具有良好的预后评估价值。     

血清外泌体miR-125b,miR-21及miR-122对肝细胞癌诊断价值

目的 评估血清外泌体中miR-125b、miR-21、miR-122及miR-375诊断肝细胞癌（HCC）的效能，预测miR-125b潜在调控的靶基因。方法 以体检健康者（健康人对照组）50例、HCC患者组46例和慢性乙型肝炎（CHB）患者组11例为研究对象。收集各研究对象的临床资料，包括年龄、性别、甲胎蛋白（AFP）、α-L-岩藻糖苷酶（AFU）等指标。采集各组血液标本，分离纯化血清外泌体并鉴定，应用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测各组血清外泌体miR-125b、miR-21、miR-122及miR-375的表达水平。ROC曲线评估各指标单独及联合检测对肝癌的诊断效能。基于miRTarBase.V8、TarBase.V8、miRecords数据库预测miR-125b潜在靶基因，通过clusterProfiler软件分析，间接推测其可能参与的信号转导通路。结果 提取纯化的血清样本中含有大量外泌体颗粒。RT-qPCR检测结果表明，与健康人对照组及CHB组相比，HCC组miR-125b、miR-21和miR-122的表达水平显著上调（P<0.05）。ROC曲线分析结果表...     

卵巢癌患者血清miR-200家族和miR-100检测的临床价值

目的 探讨血清microRNA的表达差异在卵巢癌诊断和治疗中的临床价值.方法 收集149例卵巢肿瘤患者和30例健康体检者,采用qRT-PCR检测受检者血清miR-200a、miR-200b、miR-200c和miR-100的表达情况,对检测结果进行统计学分析.结果 miR-200a、miR-200b和miR-200c在卵巢癌患者血清中表达水平均高于正常对照者,而miR-100在卵巢癌患者血清中表达水平低于对照组,且差异均有统计学意义（P均＜ 0.001）.miR-200a、miR-200b、miR-200c及miR-100在良性肿瘤患者与正常对照者血清中表达水平差异均无统计学意义（P均＞ 0.05）.miR-200a、miR-200b和miR-200c在透明细胞癌的表达水平明显高于浆液性和黏液性癌,且差异均有统计学意义（P均＜ 0.05）.miR-200b在浆液性癌中的表达水平高于黏液性癌,miR-200c在透明细胞癌中的表达水平高于子宫内膜癌,且差异均有统计学意义（P均＜ 0.05）.结论 血清miR-200家族的表达可用于卵巢癌的诊断、疗效监测及预后评估.     

基于TCGA 和GEO 数据库建立了肝内胆管癌的预后风险模型及验证分析

目的 基于TCGA（ the cancer genome atlas）和GEO（gene expression omnibus）数据库构建肝内胆管癌（intrahepaticcholangiocarcinoma, ICCA）预后风险模型,筛选ICCA 预后相关基因。方法 TCGA 数据库31 例ICCA 组织及9 例癌旁组织数据作为训练集,GEO 数据库30 例ICCA 组织及27 例癌旁组织数据作为验证集,R 软件“DESeq2”包过滤表达有差异的基因,过滤条件:差异倍数绝对值＞ 2,校正P 值＜ 0.05。单因素COX 回归分析筛选两组数据预后差异均有统计学意义的基因,通过LASSO 回归分析构建ICCA 的预后风险模型。计算训练集及验证集风险分数,并根据中值分为高、低风险组,绘制Kaplan-Meier 生存曲线图和时间依赖性受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线。将风险分数与临床病理信息进行单、多因素COX 回归分析,并绘制列线图展示,综合评价及验证模型效能。利用基因本体论（gene ontology, GO）、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG) 、基因集富集分析（Gene Set Enrichment Analysis, GSEA）和单样本基因集富集分析（Single Sample Gene SetEnrichment Analysis, ssGSEA）分析造成高低风险组预后差异的原因。结果 TCGA 数据共筛选出2 922 个差异表达基因,GEO 数据共筛选出3 075 个（均P<0.05）。经单因素COX 回归分析,TCGA 筛选出68 个基因（HR=0.13 ～ 7.2,均P<0.05）,GEO 筛选出413 个基因（HR=0.17 ～ 215.1,均P ＜ 0.05）,两组数据预后差异均有统计学意义的有9个基因:GOLGA7B,MTFR2,TPM2,PIWIL4,EPHX4,PRICKLE1,DIO2,FUT4 和COL4A3（其中TCGA 数据库HR=0.506 ～ 2.760, GEO 数据库HR=0.428 ～ 1.992,均P<0.05）。LASSO 回归成功构建6 基因预后风险模型,模型风险分数=0.464× 表达量MTFR2 ＋ 0.550× 表达量TPM2-0.511× 表达量PIWIL4-0.097× 表达量PRICKLE1 ＋ 0.215× 表达量DIO2-0.313× 表达量COL4A3,训练集中风险分数中值为1.43。Kaplan-Meier 生存分析表明在总生存率上,高风险组低于低风险组（P<0.001）。ROC 曲线提示,1,3,5 年AUC 分别为0.971（cutoff=0.22）,0.921（cutoff=2.33）和0.701（cutoff=1.52）,模型预测能力良好。单因素COX 回归风险分数HR=5.18(95%CI:2.15 ～ 12.49), P<0.001,多因素COX 回归风险分数HR=72.5(95%CI:4.52 ～ 1 162.9), P=0.002。验证集中模型风险分数中值为2.48。Kaplan-Meier 生存分析表明,高风险组生存率低于低风险组（P=0.004）。ROC 结果显示1,3,5 年AUC 分别为0.908（cutoff=3.23）,0.851（cutoff=1.02）和0.752（cutoff=2.70）,单因素COX 回归风险分数HR=2.76(95%CI:1.65 ～ 4.60), P<0.001,多因素COX 回归风险分数HR=4.68(95%CI:2.13 ～ 10.3),P<0.001,风险模型效能得到验证。GO,KEGG,GSEA 和ssGSEA 分析结果表明造成高低风险组预后差异的原因可能与机体免疫反应的抑制有关( 均P<0.05)。结论 此次构建的预后风险模型在评估ICCA患者预后上具有一定的价值,为临床诊疗提供参考。     

胃癌患者血清miR-181b和PDCD4水平表达与幽门螺杆菌感染的关系

目的　探讨胃癌患者血清中miR-181b,程序性细胞死亡因子4（PDCD4）表达水平与幽门螺杆菌（helicobacter pylori,Hp）感染的关系。方法　选取2017年12月～2019年12月湖北省孝昌县第一人民医院收治的胃癌患者82例为胃癌组,同期选择该院健康体检者91例为对照组。采用13C呼气试验检测受试者Hp感染情况,采用实时荧光定量PCR法（qPT-PCR）测定受试者血清中miR-181b,PDCD4表达水平,根据光学显微镜下胃癌患者的胃黏膜中Hp感染密度将患者分为Hp感染轻、中、重组,Spearman法分析胃癌患者血清中miR-181b和PDCD4表达水平与Hp感染的相关性。结果　与对照组相比,胃癌组Hp感染阳性率显著增高（χ2=68.571,P<0.05）,胃癌组Hp阴性及Hp阳性患者血清中miR-181b表达水平均显著升高（t=13.799,8.158,均P<0.05）,PDCD4表达水平均显著降低（t=8.432,19.087,均P<0.05）,且胃癌组及对照组Hp阳性患者血清中miR-181b表达水平高于Hp阴性患者（t=3.469,4.163,P<0.05）,PDCD4表达水平低于Hp阴性患者（t=8.878,16.470,均P<0.05）。随着胃癌患者Hp感染密度的增加,Hp阳性患者血清中miR-181b表达水平呈依次升高趋势（t=5.476,7.479,2.227,均P<0.05）,PDCD4表达水平均呈依次降低趋势（t=10.216,14.014,9.199,均P<0.05）,差异有统计学意义。Spearman相关性分析结果显示血清中miR-181b与胃癌患者Hp感染呈正相关性（r=0.659,0.685,均P<0.05）,血清中PDCD4与胃癌患者Hp感染呈负相关性（r=-0.611,-0.702,均P<0.05）。结论　胃癌患者血清中miR-181b,PDCD4表达水平与Hp感染密切相关,对于临床Hp感染具有潜在鉴别价值。     

miR-218-5p在胃癌细胞和胃癌组织中表达的临床意义及生物信息学分析

目的分析miR-218-5p在胃癌细胞和胃癌组织中的表达,采用生物信息学方法,预测其靶基因并对其信号通路进行富集分析,并利用OncomiR数据库对miR-218-5p在胃癌中的表达与预后关系进行生存分析。方法通过实时荧光定量PCR检测miR-218-5p在不同分化程度的胃癌细胞和正常细胞、胃癌组织和癌旁组织中的表达,分析其临床意义。在miRecords网站数据库选择3个以上软件在线预测其靶基因,取其交集,运用DAVID6.7数据库,对其靶基因参与的信号通路进行富集分析。采用OncomiR数据库分析miR-218-5p在胃癌组织相对于癌旁组织中的表达,并利用OncomiR和cBioportal数据库分别进行miR-218-5p在胃癌组织中的表达与预后生存期的分析。结果miR-218-5p在不同分化程度的胃癌细胞中表达下调。相对于癌旁组织,miR-218-5p在胃癌组织中也明显下调,miR-218-5p的下调与胃癌淋巴结转移(P<0.001)及TNM分期(P<0.001)具有相关性。生物信息学分析显示,miR-218-5p的靶基因富集在与肿瘤相关的多个信号通路中,且其在胃癌中的表达与胃癌患者预后具有一定相关性(P=0.01632)。结论miR-218-5p在胃癌中表达下调,起到潜在的抑癌作用,可能成为新的治疗靶点和预后标志物。     

miR-34a/b/c表达与老年急性髓系白血病患者治疗反应及生存预后的关联分析

目的:评估骨髓单个核细胞中miR-34a/b/c表达水平与老年急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者临床特征及生存预后的关联。方法:连续纳入91例接受化疗的老年AML初治患者,同时纳入21例非血液恶性疾病患者作为对照者。采用荧光定量PCR(Quantitative real time polymerase chain reaction,qPCR)检测患者和对照者骨髓单个核细胞miR-34a/b/c的相对表达量。所有老年AML患者均根据自身疾病状况以及危险分级,选择接受常规诱导治疗方案,而后评估患者治疗反应。记录患者无事件生存期(event-free survival,EFS)及总体生存期(overall survival,OS)。结果:老年AML患者组的miR-34a和miR-34b水平显著低于对照组(P值均<0.01),而miR-34c水平在两组间无差异(P>0.05)。miR-34a高表达与无FLT3-ITD突变(P<0.05)和较低的危险分级(P<0.05)相关,miR-34b高表达与正常核型(P<0.05)、伴CEBPA双突变(P<0.01)、伴NPM1突变(P<0.05)和WBC计数≤10×109/L(P<0.05)相关,而miR-34c表达水平与患者病理特征均无关联(均P>0.05)。此外,miR-34a高表达与老年AML患者高的CR率(P<0.05)、长的EFS(P<0.01)及好的OS(P<0.01)相关,而miR-34b/c表达水平与患者的CR率、EFS及OS期均无关联(均P>0.05)。结论:miR-34a/b在老年AML患者中低表达,且它们高表达与患者良好的表现临床相关,其中miR-34a高表达还可以在一定程度上预测老年AML患者生存预后。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

肇庆市居民颈椎病流行病学调查

目的 :调查肇庆市居民颈椎病发病情况及相关问题。方法 :通过分层随机抽样选择该市区18～70岁居民5000人为研究对象 ,入户或至单位询问调查。结果 :该市居民颈椎病发病率为8.11% ,男女差异无显著性 ,随着年龄的增长 ,发病率逐渐增加。经多因素分析 :体位姿势不正确、情绪紧张、潮湿、疲劳是发病的主要诱因。结论 :该病严重影响肇庆市居民的健康 ,做好防治应从早做起 ,综合防治。     

中国人四肢瘫日常生活能力评定量表的信度研究

目的研究四肢瘫日常生活能力评定量表评测四肢瘫患者的重测信度及观察者间信度。方法由1位评定者应用四肢瘫日常生活能力评定量表对20例四肢瘫患者进行评定,评定后1周内再次对该患者进行评定;另1位评定者在第1位评定者初次评定后2 d内对该患者进行评定。结果第1位评定者两次评定总分的组内相关系数为0.994(P<0.01);第1位评定者与第2位评定者评定总分的组内相关系数为0.971(P<0.01)。结论四肢瘫日常生活能力评定量表具有良好的重测信度及观察者间信度。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

护理干预对提高中风患者生活质量的效果观察

目的探讨提高中风患者生活质量的护理方法。方法将50例中风患者随机分为对照组23例和实验组27例,对照组给予针灸内科常规护理,实验组在此基础上给予心理护理和康复训练。结果两组患者治疗护理后日常生活活动(ADL)能力和贝克抑郁量表(BDI)评分均有好转,但实验组疗效明显优于对照组(P<0.05)。结论实施针对性心理护理和康复训练可明显提高中风患者的治疗效果。     

胰腺癌治疗的Cochrane系统评价证据

目的评价胰腺癌治疗的Cochrane系统评价证据,以及纳入系统评价的临床随机对照试验（RCT）的方法学质量。方法检索Cochrane Library数据库（2009年第4期）中有关胰腺癌治疗的系统评价,并运用RewMan5.0.21对所纳入研究的偏倚进行评估。结果共检索到胆道支架置入术姑息治疗梗阻型胰腺癌的系统评价、放化疗治疗不能手术的进展期胰腺癌的系统评价共2篇系统评价,共纳入79个RCT。依照Cochrane协作网推荐的质量评价方法,对所纳入RCT的偏倚进行评估,表明均存在不同程度的偏倚,方法学质量普遍较低。结论 Cochrane系统评价是公认的最高质量的研究证据,但目前缺少足够强度的证据来支持胆道支架置入术姑息治疗梗阻型胰腺癌的疗效。其他治疗手段的疗效如胰腺癌围手术期的营养支持治疗等还需要通过进一步的完成系统评价来评估。建议推行临床试验透明化,实施临床试验注册制度以及按照CONSORT声明严格规范RCT的报告,以便于总结胰腺癌治疗的临床证据。