谷氨酸转运体和γ-氨基丁酸转运体脑缺血模型中的表达意义

目的 探讨谷氨酸转运体和γ-氨基丁酸转运体在脑缺血模型中的表达意义.方法 在体内缺血、体外缺氧2种模型中利用免疫荧光、Westen-blot、RT-PCR等技术定性定量的检测主要的谷氨酸转运体-1(EAAC-1)和γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1)的表达情况.结果 在局灶性脑缺血模型(大鼠脑中动脉缺血模型)和缺氧条件下培养的原代神经元中均发现,EAAC1表达下降,GAT1表达上升.结论 在脑缺血缺氧状态下EAAC1表达下降,GAT1表达上调.     

谷氨酸转运体和γ-氨基丁酸转运体在脑缺血模型中的表达意义

目的探讨谷氨酸转运体和γ-氨基丁酸转运体在脑缺血模型中的表达意义。方法在体内缺血、体外缺氧2种模型中利用免疫荧光、Westen-blot、RT-PCR等技术定性定量的检测主要的谷氨酸转运体-1(EAAC-1)和γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1)的表达情况。结果在局灶性脑缺血模型(大鼠脑中动脉缺血模型)和缺氧条件下培养的原代神经元中均发现,EAAC1表达下降,GAT1表达上升。结论在脑缺血缺氧状态下EAAC1表达下降,GAT1表达上调。     

谷氨酸转运体mRNA在糖尿病大鼠脑损伤中的表达

目的探讨谷氨酸转运体(EAAT)在糖尿病脑损伤时表达情况及作用机制。方法 Wistar大鼠28只,随机分成2组(每组14只):对照组(常规饲料喂养)、模型组(高糖高脂饲料喂养+STZ注射诱导胰岛素抵抗),均自由进食进水,12h光照周期。饲养1个月后,测定血糖。6个月后以RT-PCR检测大鼠脑皮质EAAT-1、EAAT-2、EAAT-3的mRNA表达情况。结果糖尿病模型组血糖[(20.016±1.984)mmol/L]明显高于正常值(P<0.01)及对照组[(3.82±0.123)mmol/L,P<0.01]。对照组胰腺组织中可见大量胰岛细胞,而糖尿病模型组胰腺组织中胰岛细胞显著减少。模型组EAAT-3mRNA表达与对照组相比明显增加(P<0.01)。结论 EAAT-3高表达可能是糖尿病脑细胞损伤的主要机制。     

代谢型谷氨酸受体、谷氨酸转运体的基因表达与糖尿病脑损伤的相关性分析

目的研究代谢型谷氨酸受体、谷氨酸转运体在糖尿病脑损伤时的基因表达情况及作用机制。方法 Wis-tar大鼠28只,随机分成A（常规饲料喂养组,n=14）、B（高糖高脂饲料喂养＋STZ注射诱导胰岛素抵抗,即模型组,n=14）二组,自由进食水,12h光照周期。饲养一个月后,测定血糖。6个月后以RT-PCR检测糖尿病鼠脑皮质EAAT-1、mGluR-4、mGluR-6的mRNA表达情况。结果 B组mGluR-6 mRNA表达与A组相比明显增强（P〈0.05）,而EAAT-1、mGluR-4 mRNA表达与A组相比略有增强。结论 mGluR-6增高可能参与糖尿病脑组织细胞损伤。     

TBOA 抑制谷氨酸转运体功能对戊四氮点燃癫痫模型的影响

目的:研究新型谷氨酸转运体抑制剂TBOA对戊四氮点燃癫痫的发生及神经病理作用,寻找治疗戊四氮点燃癫痫的新方法.方法:戊四氮慢性点燃方法进行造模,分为癫痫组和TBOA治疗组.TBOA治疗组造模前3d大鼠侧脑室注射TBOA,癫痫组侧脑室注射生理盐水.2周后处死大鼠,研究两组癫痫的发生率、海马及皮质的病理改变、神经元计数.结果:1d的癫痫发生率在癫痫组为87.5%,TBOA治疗组为40.6%,光镜显示TBOA治疗组的损害程度轻于癫痫组.l、3d时海马CAI区神经元计数癫痫组与TBOA治疗组比较差异有显著性(P＜0.01);5、7d时,癫痫组神经元计数少于TBOA治疗组(均P＜0.05).皮质区变化规律同海马CAI区.结论:早期应用谷氨酸转运体抑制剂TBOA能降低癫痫的发生率,并改善癫痫后神经病理损害.     

葡萄糖对INS-1细胞线粒体谷氨酸转运体1基因表达的影响

目的观察葡萄糖对小鼠胰腺β瘤细胞INS-1线粒体谷氨酸转运体1(MGC1)基因表达的影响。方法分别采用半定量RT-PCR和Western blot,检测葡萄糖对INS-1细胞MGC1基因mRNA和蛋白表达的影响。结果葡萄糖浓度的提高对INS-1细胞MGC1基因mRNA和蛋白的表达有明显的增强作用(P<0.05)。结论高浓度葡萄糖能增强INS-1细胞MGC1基因表达。     

神经元谷氨酸转运体反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤大鼠的神经保护作用

目的:测定神经元谷氨酸转运体(excitaforyaminoacidcarrierl,EAAC1)反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤大鼠的神经功能缺损评分、梗死体积和海马数密度值的影响,探讨脑缺血神经保护新方法。方法:将大鼠分为假手术组、模型组、反义寡核苷酸组(简称反义组)和正义寡核苷酸组(简称正义组),用插线法建立大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO)。运用Westernblot法、神经功能缺损评分、TTC染色、尼氏染色观察缺血区EAAC1表达和EAAC1反义寡核苷酸对缺血大鼠神经功能缺损评分、梗死体积和海马数密度值的影响。结果:模型组缺血区EAAC1表达(0.61±0.03)明显高于假手术组(0.20±0.01),差异有显著性意义(F=49.49,P<0.01),而反义组表达(0.31±0.01)低于模型组,差异有显著性意义(F=49.33,P<0.05)。反义组大鼠梗死体积(101.33±15.08)mm3显著小于模型组(140.5±20.27)mm3,差异有显著性意义(F=6.66,P<0.01),反义组大鼠神经功能缺损评分(3.33±0.41)分,显著高于模型组(1.42±0.34)分,差异有显著性意义(F=48.51,P<0.01),海马各区数密度值均高于模型组(P<0.01和P<0.05)。结论:EAAC1反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤有神经保护作用。     

谷氨酸转运体GLT-1的TM8区段在底物转运过程中的功能分析

目的:探讨TM8区段在谷氨酸转运体GLT-1转运底物过程中所负功能。方法:将GLT-1的TM8区段的氨基酸残基(Thr460-Val483)分别突变为半胱氨酸,然后应用生物化学的方法检测突变体转运活性,巯基试剂MTSET对突变体转运活性的影响以及底物、抑制剂对MTSET抑制效应的影响。结果:I463C、V467C及A468C对MTSET非常敏感;L465C、L466、V469C及W471C对MTSET敏感性稍弱。底物L-glu及KCl对MTSET作用于V467C、A468C的抑制效应具有保护作用,而抑制剂TBOA则增强了MTSET的抑制效应;L-glu及KCl对MTSET作用于V469C、W471C的抑制效应具有保护作用,但TBOA对MTSET的抑制效应没有影响。结论:在GLT-1转运底物的过程中,TM8参与了底物转运通道的组成,TM8对底物的结合与转运发挥着重要的作用。     

局部亚低温对脑缺血再灌注损伤大鼠谷氨酸转运体功能的影响

目的:观察病变侧缺血至再灌期亚低温(32～33℃)对局灶脑缺血再灌注后梗死体积、水肿程度、谷氨酸转运体功能及谷氨酸含量的影响。方法:实验于2005-08/11在新乡医学院第一附属医院中心实验室完成。①80只大鼠随机分为假手术组16只、常温脑缺血组32只和亚低温脑缺血组32只。3组再均分为缺血再灌注后2h,1,3,7d4个时间点,假手术组每个时间点4只,另两组每个时间点8只。②采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血即刻应用采用可调控半导体制冷仪对大鼠病变侧给予亚低温治疗,并持续至再灌期。③采用TTC染色测梗死体积,物理方法测水肿程度,利用脑组织突触膜颗粒对3H-L-谷氨酸摄入量的测定及分光光度法观察皮层谷氨酸转运体功能及高效液相色谱仪测定谷氨酸含量。结果:80只大鼠均进入结果分析。①同常温脑缺血组相比,亚低温脑缺血组梗死体积明显减少(梗死体积减少56.3%～66.0%)。②同常温脑缺血组相比,亚低温脑缺血组水肿程度明显减少(减少2.8%～6.5%)。③同常温脑缺血组相比,亚低温脑缺血组谷氨酸转运体功能增强(P<0.05)。④同常温脑缺血组相比,亚低温脑缺血组谷氨酸含量降低(P<0.05)。结论:病变侧亚低温能显著减小脑梗死体积和脑水肿,其机制可能为通过谷氨酸转运体降低谷氨酸的含量。     

神经元谷氨酸转运体反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤大鼠的神经保护作用

目的：测定神经元谷氨酸转运体(excitafory amino acid cartier 1，EAAC1)反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤大鼠的神经功能缺损评分、梗死体积和海马数密度值的影响，探讨脑缺血神经保护新方法。方法：将大鼠分为假手术组、模型组、反义寡核苷酸组(简称反义组)和正义寡核苷酸组(简称正义组)，用插线法建立大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO)。运用Western blot法、神经功能缺损评分、TYC染色、尼氏染色观察缺血区EAAC1表达和EAAC1反义寡核苷酸对缺血大鼠神经功能缺损评分、梗死体积和海马数密度值的影响。结果：模型组缺血区EAAC1表达(0．61&;#177;0．03)明显高于假手术组(0．20&;#177;0．01)，差异有显著性意义(F=49．49，P&;lt;0．01)，而反义组表达(0．31&;#177;0．01)低于模型组，差异有显著性意义(F=49．33，P&;lt;0．05)。反义组大鼠梗死体积(101．33&;#177;15．08)mm^3显著小于模型组(140．5&;#177;20．27)mm^3，差异有显著性意义(F=6．66，P&;lt;0．01)，反义组大鼠神经功能缺损评分(3．33&;#177;0．41)分，显著高于模型组(1．42&;#177;0．34)分，差异有显著性意义(F=48．51，P&;lt;0．01)，海马各区数密度值均高于模型组(P&;lt;0．01和P&;lt;0．05)。结论：EAAC1反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤有神经保护作用。     

局部亚低温对脑缺血再灌注损伤大鼠谷氨酸转运体功能的影响

目的：观察病变侧缺血至再灌期亚低温（32-33℃）对局灶脑缺血再灌注后梗死体积、水肿程度、谷氨酸转运体功能及谷氨酸含量的影响。 方法：实验于2005-08／11在新乡医学院第一附属医院中心实验室完成。①80只大鼠随机分为假手术组16只、常温脑缺血组32只和亚低温脑缺血组32只。3组再均分为缺血再灌注后2h，1，3，7d4个时间点，假手术组每个时间点4只，另两组每个时间点8只。②采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，缺血即刻应用采用可调控半导体制冷仪对大鼠病变侧给予亚低温治疗，并持续至再灌期。③采用TTC染色测梗死体积，物理方法测水肿程度，利用脑组织突触膜颗粒对^3H—L-谷氨酸摄人量的测定及分光光度法观察皮层谷氨酸转运体功能及高效液相色谱仪测定谷氨酸含量。 结果：80只大鼠均进入结果分析。①同常温脑缺血组相比，亚低温脑缺血组梗死体积明显减少（梗死体积减少56．3％-66．0％）。②同常温脑缺血组相比，亚低温脑缺血组水肿程度明显减少（减少2．8％-6．5％）。③同常温脑缺血组相比，亚低温脑缺血组谷氨酸转运体功能增强（P〈0．05）。④同常温脑缺血组相比，亚低温脑缺血组谷氨酸含量降低（P〈0．05）。 结论：病变侧亚低温能显著减小脑梗死体积和脑水肿，其机制可能为通过谷氨酸转运体降低谷氨酸的含量。     

蛛网膜下腔出血大鼠脑干组织谷氨酸转运体的表达及尼莫地平的影响

目的探讨谷氨酸转运体（EAATs）在蛛网膜下腔出血（ShH）大鼠脑干表达的动态变化。方法采用枕大池二次注血法建立Wistar大鼠SAH模型。应用颅多普勒超声检测和RT-PCR方法,分别观察蛛网膜下腔出血大鼠基底动脉血流速度和谷氨酸转运体在脑干的变化。结果①超声检测显示与对照组相比,枕大池注血大鼠第1天基底动脉血流加快,第7天达到高峰,第14天血流速度下降,第21天未见明显变化,表明大鼠出现了脑血管痉挛（CVS）。尼莫地平给药组大鼠的基底动脉血流速度均比SAH组血流速度慢。②RT-PCR结果显示在第1天和7天SAH模型组脑干EAAT-1、EAAT-2和EAAT-3mRNA的表达下降,第14天上升,其对应的尼莫地平治疗组EAAT1—3mRNA的表达均高于SAH组;而在第21天SAH模型组与其对应的尼莫地平治疗组均上升,但两者相比未见明显差异。结论尼莫地平可以明显的减轻SAH发生后CVS的程度,并使EAAT-1、EAAT-2和EAAT-3mRNA的表达水平增高,提示EAAT-1、EAAT-2和EAAT-3可能参与了大鼠CVS的形成。     

七氟醚预处理中谷氨酸转运体的激活触发对脑缺血的保护作用

目的:观察谷氨酸转运体是否参与七氟醚预处理对大鼠海马脑片缺氧无糖损伤的保护作用。方法:实验于2006-01/06在徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室电生理研究室进行。清洁级SD幼年大鼠若干只,低温分离海马,沿矢状面切成300～400μm厚脑片。脑片分为8组,即缺氧无糖组、苏-羟天冬氨酸250,500,1000μmol/L苏-羟天冬氨酸组、40mL/L七氟醚预处理组、苏-羟天冬氨酸250,500,1000μmol/L分别 40mL/L七氟醚预处理组,每组8张脑片。将海马脑片放于34℃的正常的人工脑脊液中孵2h之后,平衡灌注,双脉冲方波刺激电极置于海马CA3区的Schaffer侧支,记录电极置于海马CA1区锥体细胞层。各组药物预处理30min,进行冲洗15min后,观察缺氧无糖14min、复氧供糖1h各组海马脑片顺向群峰电位的变化。实验结束后各组取海马脑片四五片用TTC染色,酶标仪测定A490值,分析脑片活性。结果:①40mL/L七氟醚预处理组较缺氧无糖组缺氧所致的诱发顺向群峰电位的消失时间明显延迟,顺向群峰电位恢复程度和顺向群峰电位恢复率显著改善,差异有统计学意义[(5.4±0.7),(2.5±0.6)min;65.6±18.4,8.4±18.2;0,75%;P<0.01]。苏-羟天冬氨酸250,500,1000μmol/L组顺向群峰电位消失时间和恢复率与缺氧无糖组差异无显著性意义(P>0.05)。②250μmol/L苏-羟天冬氨酸 七氟醚预处理组缺氧所致的诱发顺向群峰电位的消失时间明显延迟,顺向群峰电位恢复程度显著改善(P<0.01),恢复率与40mL/L七氟醚预处理组差异无显著性意义。而500μmol/L苏-羟天冬氨酸 七氟醚预处理组,1000μmol/L苏-羟天冬氨酸 七氟醚预处理组七氟醚预处理顺向群峰电位的消失时间明显加速,顺向群峰电位的恢复程度减弱(P<0.05,0.01),恢复率差异有显著性意义(P<0.05,0.01)。③海马脑片A490正常值是1.04±0.04。复氧供糖1h,缺氧无糖损伤会明显降低海马脑片TTC染色A490值(0.36±0.07),组织损伤率严重。40mL/L七氟醚预处理组、250μmol/L苏-羟天冬氨酸 七氟醚预处理组细胞损伤率低于缺氧无糖组(P<0.01,0.05);500μmol/L苏-羟天冬氨酸 七氟醚预处理组,1000μmol/L苏-羟天冬氨酸 七氟醚预处理组组织损伤百分率较40mL/L七氟醚预处理组严重(P<0.05,0.01)。结论:七氟醚预处理对海马脑片缺氧无糖损伤的保护作用有可能谷氨酸转运体参与,并与抑制剂成剂量依赖性。     

谷氨酸转运体-1在脑出血早期痫性发作大鼠海马组织的表达

目的:观察脑出血早期痫性发作大鼠海马组织谷氨酸转运体(GLT-1)的表达。方法:应用立体定向技术制备大鼠脑出血模型,同时监测脑电活动,35只大鼠根据是否造成脑出血和是否发生痫性放电分为假手术组(n=7)、脑出血组(n=21)及痫性发作组(n=7)。采用HE染色观察大鼠海马组织形态学变化,采用免疫组织化学法检测海马组织GLT-1阳性表达。结果:HE染色结果显示脑出血组、痫性发作组海马组织出现神经细胞变性、坏死或凋亡。假手术组、脑出血组及痫性发作组GLT-1阳性表达面积分别为(583.2±23.6)μm2、(419.6±29.3)μm2、(358.2±19.4)μm2,脑出血组、痫性发作组GLT-1阳性表达低于假手术组(P<0.05),痫性发作组GLT-1免疫阳性表达低于脑出血组(P<0.05)。结论:大鼠脑出血早期痫性发作与海马区GLT-1表达下调有关。     

银杏叶制剂对恢复岗田酸损伤鼠脑谷氨酸转运体功能的作用

目的 :探讨岗田酸所致的氧化应激反应与谷氨酸转运体功能的关系及银杏叶制剂的影响。方法 :采用侧脑室注射岗田酸法测定假手术对照组、岗田酸注射组、岗田酸注射组加银杏叶制剂组皮层、海马谷氨酸转运体功能的变化及SOD活性 ,MDA含量的变化。结果 :岗田酸注射组谷氨酸转运体功能降低 (P <0 0 5 ) ,SOD活性降低(P <0 0 5 ) ,MDA含量升高 (P <0 0 5 ) ,岗田酸注射组加银杏叶制剂组 ,谷氨酸转运体功能较岗田酸注射组有明显恢复 (P <0 0 5 ) ,与对照物无明显差异。SOD活性回升 (P <0 0 5 ) ,MDA含量下降 (P <0 0 5 )。结论 :大鼠注射岗田酸后 ,皮层、海马谷氨酸转运体功能降低 ,可能与氧化应激产生的自由基有关 ,银杏叶制剂通过抗氧化应激反应 ,恢复谷氨酸转运体功能来发挥保护作用。     

7β-羟基胆固醇对创伤性癫痫大鼠海马谷氨酸转运体表达的影响及机制

目的：研究7β-羟基胆固醇（7β-OHCH）对创伤性癫痫大鼠谷氨酸转运体mRNA表达的影响及其机制。方法：105只大鼠脑内立体定向单侧杏仁体注射三氯化铁（FeCl3）建立创伤性癫痫模型，随机分成对照组（A组）、模型组（B组）和7β-OHCH治疗组（C组），动态观察各组大鼠行为学表现、脑电图变化、海马区域GFAP和谷氨酸转运体mRNA表达。结果：A组大鼠术后无明显行为学改变；术后30d时，B组94．2％大鼠出现癫痫样发作而C组为74．3％（P〈0．05）。A组在整个实验过程中各导联均以α和β波为主要节律的基础脑电图，B、C组出现与痫性发作一致的高幅棘波、棘慢波综合和尖波。注射侧海马组织各区B组均有大量胶质细胞增生而C组无（P〈0．01）。海马3种谷氨酸转运体mRNA的表达与A组比较，B、C组均呈先高后低的变化趋势。结论：7β-OHCH通过抑制海马区域胶质细胞增生、上调GLAST和GLT1的表达，发挥治疗创伤性癫痫的作用。     

谷氨酸与脑缺血

Half century ago, the relationship between some amino acids and neurological function has been researched, and especially when the micro dialysis technology in vivo was improved, the relationship was researched by new methods. In the paper, the relationship of glutamic acid (Glu) and cerebral ischemia will be reviewed.     

抗原处理相关转运体的研究进展

抗原处理相关转运体(TAP)属于ABC转运体超家族的B亚家族,是由TAP1(71KDa)和TAP2(75KDa)两个亚基形成的异源二聚体分子,位于内质网和顺式高尔基膜上,其功能是将胞浆内经过蛋白酶体降解后产生的肽段转运到内质网腔中,并在此与HLA-I分子结合,进一步被提呈到细胞表面引     

L-氨基酸转运体与肿瘤的关系

近年来,国外有许多关于L-氨基酸转运体(L-type amino acid transporter,LAT)与肿瘤关系的研究报道,认为LAT与肿瘤细胞的生长、增殖、血管生成相关,是预测肿瘤不良预后的病理因素.目前国内LAT与肿瘤关系的研究较少,本文将二者关系研究进展进行综述.     

骨组织谷氨酸信号转导的研究进展

谷氨酸是中枢神经系统(CNS)的一种兴奋性氨基酸,调节大多数兴奋性突触中的快速神经传递,参与神经发育及突触形成,并可调节包括记忆与学习等高级神经活动的长期增强可塑性。最近发现,谷氨酸信号转导也存在于骨组织