血管性血友病诊断与分型方法的建立和临床应用

目的 建立系列的血管性血友病（vWD）筛查、诊断和分型的方法。方法 以Ⅲ型胶原包被微孔板，以辣根过氧化物酶（HRP）-兔抗人血管性血友病因子（vWF）IgG为检测抗体，建立vWF胶原结合试验（vWF：CB）；通过垂直式琼脂糖电泳、电转印和化学发光法对vWF多聚体进行分析。对可疑vWD患者测定血小板、出血时间、活化部分凝血活酶时间（Am）、血小板聚集试验（RIPA）、FVⅢ：C、vWF：RCo、vWF：Ag、vWF：CB，并进行多聚体分析。结果 所建vWF：CB线性范围广，灵敏度高，重复性好；所建多聚体琼脂糖电泳分析方法安全、敏感、解像度高。10例可疑病例血小板均正常，大部分出血时间延长、APTY延长、RIPA反应低下、FVⅢ：C降低；vWF：RCo、vWF：Ag含量和vWF：CB均不同程度降低；部分患者vWF：Ag／vWF：CB比值〉2，中、高分子量vWF显著缺如。8例患者可明确诊断为vWD，其中1型2例、2A型4例和3型2例。结论 本研究建立的方法和推荐的组合实验适合于绝大多数vWD患者的诊断和分型需要。     

应用PCR和RFLP连锁分析对甲型血友病进行产前诊断

应用ＰＣＲ和ＲＦＬＰ连锁分析对甲型血友病进行产前诊断刘炜培张羽虹张履明周润甜（广东省佛山市第一人民医院，佛山５２８０００）甲型血友病是一种常见的伴性遗传病，是由于凝血因子Ⅷ（ＦⅧ）基因发生突变而导致凝血障碍。本病在男性中发生率约为１／５０００。目前对...     

轻型血友病假性肿瘤并股神经损伤(附1例报告)

为了探讨血友病假性肿瘤(hemophilic pseudotumor)的诊断与治疗，对临床误诊并手术治疗的1例血友病假性肿瘤患者进行临床观察与分析。结果表明：通过病史及家族史的补充询问、实验室检查结合影像学结果确诊为①血友病A(轻型)；②血友病假性肿瘤并股神经损伤。手术后通过积极的凝血因子补充，伤口愈合良好。结论：详细询问病史、重视实验室检查结果可减少血友病假性肿瘤误诊和误治；重视术前准备可减少术中出血危险性，并能促进术后伤口的早期愈合。     

获得性血友病的临床研究

非血友病患者产生抗因子Ⅷ抑制物,临床又名获得性血友病。此病罕见,国内仅有个例报道,国外文献报道已逾３００例。患者出血症状严重,常危及生命。我们报道８例获得性血友病的临床及实验室诊断以及使用小剂量凝血酶原复合物（ＰＣＣ）和长疗程泼尼松治疗后长期随访的结...     

血友病性关节病康复治疗1例报道

血友病的社会人群发病率约5～10／10万。随着凝血因子Ⅷ替代疗法的成熟及广泛应用，绝大多数血友病患者可获得长期生存，但同时伴发的血友病性关节病却导致不同程度的残疾和功能障碍。我科对1例血友病性关节病患者进行综合康复治疗，现报道如下：     

各国血友病登记管理工作的现状

血友病属X连锁隐性遗传性出血性疾病,在遗传性出血性疾病中最为常见.近年来,随着诊断治疗水平的提高和患者寿命的延长,其发病率有所上升.建立和完善血友病登记管理制度具有重要的社会意义和临床意义.本文对国内外血友病登记管理工作的进展及现状作一综述.     

血管性血友病因子的研究进展

血管性血友病因子（von Willebrand Factor,vWF）在止血和血栓形成过程中起重要作用，并与心、脑血管疾病及血管新生密切相关，因此研究vWF的生物学特性和功能具有重要的意义。本文就vWF的生物合成、结构特点有生物学功能的研究进展作一综述。     

月经过多患者血浆血管性血友病因子水平分析

目的观察不明原因月经过多(HMB)患者血浆血管性血友病因子(vWF)的水平。方法选择不明原因HMB患者126例及健康女性73例,比较血浆凝血酶原时间(PT)、国际标准化比值(INR)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、FⅧ凝血活性(FⅧ:C)、血管性血友病因子抗原(vWF:Ag)及瑞斯托霉素辅因子活性(vWF:RCo)及vWF:RCo/vWF:Ag比值的差异;按HMB类型分成周期规则HMB组、周期不规则HMB组、青春期HMB组,按Hb值分成轻度贫血组、中重度贫血组,分别比较各组间vWF水平的差异。结果 HMB组、不同类型HMB组血浆PT、INR、APTT、FⅧ:C、vWF:Ag、vWF:RCo及vWF:RCo/vWF:Ag水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P均0.05)。Hb正常组、轻度贫血组、中重度贫血组与对照组血浆vWF:Ag、vWF:RCo及vWF:RCo/vWF:Ag水平差异均有统计学意义(P均0.05);中重度贫血组血浆vWF:Ag、vWF:Rco水平及vWF:RCo/vWF:Ag比值与对照组比较差异均有统计学意义(P均0.01)。结论不明原因HMB伴中重度贫血女性人群血浆vWF水平与健康人差异明显,针对该人群血浆vWF的检测有助于检出血管性血友病(vWD)。     

一例2N型遗传性血管性血友病家系的表型诊断和基因型分析

目的：探讨1个遗传性血管性血友病（von Willebrand disease,vWD）2N型家系的表型诊断和基因型分析结果,明确患者的发病机制。方法：对该家系的先证者和家系成员进行出血时间、活化部分凝血活酶时间、瑞斯托霉素诱导的血小板聚集（ristocetin induced platelet aggregation,RIPA）试验、血管性血友病因子（von Willebrand factor,vWF）瑞斯托霉素辅因子、vWF抗原、vWF活性测定、vWF胶原结合试验、凝血因子Ⅷ（coagulation factor Ⅷ,FⅧ）活性、vWF与FⅧ结合试验检测,并作出表型诊断。提取先证者的外周血基因组DNA,用PCR法扩增VWF基因和F8基因的所有外显子及侧翼序列,通过直接测序分析VWF基因和F8基因变异。结果：vWD家系先证者的活化部分凝血活酶时间和出血时间明显延长,血浆瑞RIPA试验、vWF瑞斯托霉素辅因子、vWF抗原、vWF活性和vWF胶原结合试验检测结果均正常,FⅧ活性下降,vWF与FⅧ的结合能力降低。对先证者进行基因测序,发现其VWF基因19号外显子存在c.2446C>T（p.Arg816Trp）错义突变,其儿子在该位点为杂合突变,而先证者及家系成员的F8基因未发现突变。结论：c.2446C>T（p.Arg816Trp）错义突变是导致该家系先证者发生2N型遗传性vWD的原因。     

两个同源重组血友病家系的基因诊断

目的探讨特殊血友病家系的基因诊断。方法通过FⅧ基因内含子22倒位及内含子1倒位的直接检测与遗传连锁分析的间接诊断相结合对1个血友病A（HA）家系进行基因诊断；采用核酸直接测序法对FⅨ各外显子及其侧翼序列进行检测，并联合FⅨ基因相关的6个微卫星（STR）位点对1个血友病B（HB）家系进行基因诊断。结果HA家系先证者为FⅧ内含子1倒位阳性，家系中要求做携带者诊断的女性成员为内含子1倒位携带者；而FⅧ基因内外8个多态性位点遗传连锁分析证实该女性成员发生同源染色体重组。HB家系先证者除7号外显子测序未成功外，其余部分均未找到突变，家系中要求做携带者与产前诊断的女性，其羊水细胞经直接核酸测序未找到突变，利用FⅨ相关的6个STR位点进行遗传连锁分析发现该女性有染色体同源重组现象存在，胎儿为正常男性。结论在应用间接诊断方法进行HA和HB的携带者及产前基因诊断时，要考虑到染色体同源重组现象的发生可能导致误诊与漏诊的情况。在中国人群中应该开发更多的FⅧ和FⅨ分子中信息量大的多态性位点，以提高HA和HB的携带者及产前诊断的准确率。     

359例血友病A实验室诊断数据回顾分析

目的 调查分析本院血友病A患者的实验室诊断数据,了解医院就诊血友病A临床分型、抑制物存在情况及获得性血友病的诊断思路,为临床诊断和治疗提供证据.方法 对患者进行活化部分凝血活酶时间(APTT)和Ⅷ因子活性(FⅧ∶C)检测,抑制物筛查采用APTT纠正试验做定性判断,阳性者用Nijmegen定量检测抗体.结果 359名血友病A患者以重型和中型居多(共占81％),亚临床型仅14例.抑制物筛查22例阳性,FⅧ抗体定量检测平均抗体滴度35 BU.获得性血友病1例;2例患者同时存在FⅧ∶C、FⅨ∶C低下和抑制物阳性.结论 医院就诊的血友病A患者主要为重型和中型,亚临床型少见;FⅧ抑制物筛查及抗体滴度在临床治疗方案选择中及其重要;获得性血友病诊断思路应该为实验室数据结合临床、遗传学、自身免疫性检查等.     

血友病性假瘤

血友病性假瘤为血友病一种少见而严重的并发症.临床常因忽略患者易出血的病史,而误诊为骨肿瘤或肿瘤样病变.为提高对本病的认识,本文复习10例经实验室检查证实的假瘤.结合文献着重分析其X线表现.1 材料与方法10例均为男性,年龄4～31岁,其中20岁以下者8例.病程最短3个月,最长达19年.既往均有出血史和四肢关节的肿胀、疼痛.所有患者均摄常规X线平片,其中两例行CT扫描.     

血管性血友病的实验诊断

血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)是血管内皮细胞和骨髓巨核细胞合成的一种糖蛋白,正常情况下存在于血浆和血小板(占全血15%)中。vWF 可与血小板膜糖蛋白 GP Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ结合,激活 GPⅡb/Ⅲa 并桥接血小板与vWF,从而促使血小板聚集;vWF 还可介导血小板黏附到内皮细胞损伤后暴露出的胶原表面,使血小板聚集,形成血小板血栓,在一期止血中起重要作用。此外,血浆中的 vWF 还与 FⅧ形成复合物以稳定 FⅧ,在二期止血中发挥重要作用。vWF 缺乏将导致患者出现血管性血友病(von Willebrand     

血管性血友病因子研究进展

血管性血友病因子在止血和血栓形成过程中发挥重要作用,井与心、脑血管痍病及血管新生密切相关.研究血管性血友病因子的结构和功能,将为血管性血友病及其他相关疾病的诊断和治疗提供可靠理论基础.