临床定量分析校准的验证评价

实验室通常应用标准品或校准品对分析检测系统进行校准，以确定实际分析物的浓度或活性与分析检测系统之间信号的关系。但如何判断所建立的关系在可报告范围内是否准确或稳定？1992年和2003年，美国临床医学检验部门修正法规（CLIA′88，See．493．1255）提出可通过校准验证判断某检测项目在可报告范围内测定结果的准确性。1988年美国病理家学会（CAP）开展了校准验证的活动，2005年卫生部临床检验中心首次在全国开展了线性与校准验证活动。所提供的校准验证材料，其浓度或活性涵盖大多数分析物的可报告范围，分发给各参加实验室后，按患者样本方式进行分析，然后将各实验室测定结果与靶值进行比较，从而判断当前校准是否在可报告范围内保持稳定及测定结果的准确性，又称分析物测定范围的有效性。     

不同厂家校准品校准同一检测系统检验结果的实验研究

目的 观察不同厂家的校准品能否直接校准非配套的检测系统.方法 参考美国临床实验室标准化委员会的EP9-A2文件,以罗氏检测系统为目标检测系统(系统1),用罗氏C-fas、朗道校准品Level2和Level3分别与国内某一厂家生产的生化分析仪器、试剂和检测程序组成待评检测系统(系统2～4),然后用上述四个检测系统分别检测40份新鲜患者血清中的总胆红素(TBil)等10个项目,每个标本测定两次,结果取均值.计算待评检测系统(Y)与目标检测系统(X)之间的相对偏倚,以美国临床医学检验部门修正法规(CLIA'88)允许总误差的1/2为标准,判断检验结果的可比性.结果 系统2与系统1的TBil,DBil,ALP和CK具有可比性,其他项目不具有可比性.系统3与系统1的TBil和GGT具有可比性,其他项目不具可比性.系统4与系统1的Glu具有可比性,其他项目不具可比性.结论 不同厂家生产的校准品不能直接用于校准非配套检测系统,每一检测系统都必须具有自己的配套校准品.     

不同校准方法对血糖测定结果准确性分析

目的 探讨自建血糖检测系统使用不同方式校准后,与BECKMAN原装检测系统结果的一致性.方法 校准方法一、二均以RANDOX校准品对科美试剂进行校准,其校准值分别为说明书标示值、BECKMAN原装检测系统测定RANDOX校准品值;方法三以病人新鲜混合血清校准,并以其在BECKMAN原装检测系统测定值为校准值;方法四是以RANDOX校准品进行校准,其校准值为在方法三校准后科美试剂测定值.校准后,科美试剂与BECKMAN原装试剂同时测定20例高、中、低血糖含量不同的标本,比对分析检测结果.结果 方法一、二校准不能为临床所接受,而方法三、四校准后测定结果与原装试剂具有较好的一致性.结论 自建测定系统校准时,购买的非配套校准品标示值不可作为校准靶值,只有重新赋值、或以病人新鲜混合血清校准才能满足临床要求.     

干粉校准品复溶方法及校准次数对生化测量系统校准的影响

<正>正确实施测量系统的校准是保证生化指标检测准确性的前提。校准是在规定条件下确定测量仪器、测量系统的示值或实物量具所代表的值与相应被测量的已知值之间关系的一组操作[1]。校准的影响因素有校准品复溶、校准周期及实验室用水质量等[2],目前尚无规范性文件,因此探讨校准中的影响因素,制定规范性文件十分必要[3-5]。本科室为探讨建立相应的规范校准程序就干粉校准品复溶方式和校准次数进行了一些实验,现介绍如下。     

同一生化分析仪不同检测模块间的误差分析及溯源性的探讨

目的测定Hitachi7600-020全自动生化分析仪各模块间的误差,探讨用校准品校正仪器以减小误差的可行性,确保2个模块测定结果解释的一致性以及结果的可溯源性。方法用不同检测模块组成相应的系统测定质控血清6项生化指标的批内精密度并比较其差异,再分别用原装检测系统对新鲜混合血清进行定值后校准自建的不同模块间的检测系统,经校准验证有效后对日常校准品进行定值,再用新的校准值校准不同模块检测系统,经校准验证后,与原装试剂检测系统进行检测结果的比对分析,以评估偏倚是否在可接受的范围之内、误差是否明显减小以及结果是否可比。结果 Hitachi7600-020的P1、P2模块间精密度均较好,变异系数为0.51%～4.28%,但6个测定项目中,4个项目测定结果的差异有统计学意义(P<0.01),经多次校准和重新定值后,误差明显减小,两模块具有较好的一致性。结论 Hitachi7600-020的2个模块测定不同项目时,部分项目可产生明显的系统误差或比例误差,采用校准和校准验证后,可增加其量值的溯源性和可比性,达到结果的一致性。     

不同校准方法对血糖测定结果准确性分析

目的 探讨自建血糖检测系统使用不同方式校准后，与BECKMAN原装检测系统结果的一致性。方法 校准方法一、二均以RANDOX校准品对科美试剂进行校准，其校准值分别为说明书标示值、BECKMAN原装检测系统测定RANDOX校准品值；方法三以病人新鲜混合血清校准，并以其在BECK-MAN原装检测系统测定值为校准值；方法 四是以RANDOX校准品进行校准。其校准值为在方法三校准后科美试剂测定值。校准后，科美试剂与BECKMAN原装试剂同时测定20例高、中、低血糖含量不同的标本．比对分析检测结粜。结果 方法一、二校准不能为临床所接受．而方法三、四校准后测定结果与原装试剂具有较好的一致性。结论 自建测定系统校准时。购买的非配套校准品标示值不可作为校准靶值，只有重新赋值、或以病人新鲜混合血清校准才能满足临床要求。     

患者新鲜混合血清作为临时校准液校正非配套检测系统

目的患者新鲜混合血清作为校准液用于非配套检测系统7170A全自动生化分析仪的溯源性分析。方法以拜耳试剂及程序、校准品、质控品、拜耳2400全自动生化分析仪为标准检测系统,用罗氏cfas校准品的标准值直接校准日立7170A／N德曼试剂检测系统;然后以新鲜患者混合血清作为临时校准品,罗氏cfas校准品经标准系统准确度传递后,把罗氏cfas校准品的标示值转换为校正“日立7170A／利德曼试剂”测定系统的实际校正值,再用此值校正日立7170A／利德曼试剂系统,在上述两种检测系统上同时测定40份患者新鲜血清的尿素（UREA）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、肌酸激酶（cK）、糖（Glu）、清蛋白（ALB）、肌酐（Cr）、尿酸（UA）、总胆红素（TBIL）、总胆固醇（TC）,并对所得结果进行线性回归分析。结果罗氏cfas校准品的标示值经标准检测系统准确度传递后,直接校正日立7170A／利德曼试剂系统时,各指标的均值与标准系统的均值相对偏倚分别为1．65％、2．61％、3．11％、2．05％、1．30％、3．45％、2．02％、3．90％、2．94％。各指标均值相对偏倚均小于1／2CLIA’88,同时线性回归良好。结论患者新鲜混合血清作为临时校准品,经过标准系统准确度传递后可用于校正非配套检测系统。     

同一校准品不能直接用于校正非配套检测系统

目的：观察同一校准品能否直接用于校正非配套检测系统。方法：以罗氏试剂及程序、罗氏cfas校准品、日立7060全自动生化分析仪为标准检测系统，用Beckman校准品的标示值直接校正奥林帕斯AU2700／中生试剂检测系统和Beckman Delta CX7／Beckman试剂检测系统；然后以新鲜病人混合血清作为临时校准品，Beckman校准品经标准系统准确度传递后，把Beckman校准品的标示值转换为校正“奥林帕斯AU 2700／中生试剂”测定系统的实际校正值，再用此值校正AU2700／中生试剂系统，在上述四个检测系统上同时测定40份新鲜病人血清的尿素(UREA)、肌肝(Cr)、糖(GLU)、钙(Ca)、镁(Mg)、尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)，并对所得结果进行均值及线性回归分析。结果：Beckman校准品的标示值直接校正AU2700／中生试剂系统时，各指标的均值与标准系统的均值相对偏倚超过5％的有UREA、Cr、Ca、TG，分别为7．89％，11．70％，9．00％，16．80％。Beckman Delta CX7检测系统准确度传递后的AU2700／中生试剂系统与标准测试系统相比，各指标均值相对偏倚均小于5％，同时线性回归良好。结论：同一校准品不能直接用于校正非配套检测系统，但同一校准品经过标准系统准确度传递后可用于校正其它非配套检测系统。     

非配套检测系统的溯源性和可比性

目的 探讨实现非配套检测系统常规生化结果 的溯源性和可比性的方法 .方法 将cfas校准品中的定值转移至新鲜患者血清,并以该血清为临时校准品,校准非配套检测系统,在非配套检测系统上对cfas校准品进行赋值,将cfas校准品的标示值转化为校准非配套检测系统的实际校正值,再用此值校准非配套检洲系统,判断偏倚是否可以接受.结果 非配套检测系统与配套检测系统不具有可比性的六个项目包括总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、无机磷(P),经校准后与配套检测系统的偏倚均小于CLIA'88允许误差(TEa)的1/4,临床可以接受.结论 对校准品通过配套试剂检测系统量值传递后重新赋值是实现非配套检测系统可比性的有效途径.     

多份定值新鲜血校准不同血液检测系统的实验研究

目的 校准不同血液检测系统,提高血液分析的准确度.方法 用参考方法为3份新鲜血标本定值,以定值的新鲜血标本作为校准品,同时校准不同的检测系统.结果 校准前6个血液分析检测系统9台仪器有68.15%的参数偏差结果超出规定范围,需要校准;校准后只有9.63%的参数需要校准.结论 用定值新鲜血校准血液分析检测系统切实可行,经济实用;3份标本同时校准可以减少随机误差,提高准确度.     

化学发光检测系统参加CAP校准验证活动结果的分析

目的:总结化学发光检测系统参加美国病理家学会(CAP)校准验证结果,分析不合格原因,寻求解决方法,为检验质量的持续改进提供依据.方法:通过分析A实验室2007年化学发光检测系统参加CAP校准验证活动两次的数据及初步评价报告,总结校准验证结果,比较不同检验项目间的差异.结果:3个化学发光检测系统共16个项目各两次的校准验证结果,其中3个项目各有一次线性评价为不精密,其余均为线性,7个项目各有一次校准验证为差异1,2个项目各一次为差异2,其余均为验证.结论:校准验证可以反映化学发光检测系统校准过程存在的不足,帮助实验室发现问题,查找原因,提高检验质量.     

定值新鲜血与校准物应用于XE5000的校准方法评价

[目的]用定值新鲜血与校准物以不同方法分别校准XE5000血液分析仪，保证两台XE5000（编号分别为A1255和A1256）检测结果的一致性和可比性。[方法]2008年12月2日和2009年7月3日2次以校准物对两台仪器进行校准；2009年2月26日以卫生部临床检验中心的定值新鲜血对两台分析仪进行校准，分别计算两台血细胞分析仪各参数的偏差，根据判断标准决定是否需要对两台仪器进行校准，各参数均符合规定后对两台仪器进行比对。[结果]新购进的两台XE5000在2008年12月2日和2009年7月3日以校准物校准后判断标准均在范围内；2009年2月26日用定值新鲜血校准前两台仪器超出判断标准的参数分别为A1255的RBC1．1％，A1256的RBC1．4％，PLT5．0％，校准后均在判断标准内。[结论]以定值新鲜血和校准物校准两台XE5000均能保证结果的准确性和可比性。     

酶法测定二氧化碳的校准物制备与应用

目的制备酶法测定二氧化碳的校准物,并用该校准物校准生化分析仪二氧化碳检测系统来检测临床标本。方法用校准过的血气分析仪检测一份新鲜静脉血标本得到该标本的二氧化碳值,用该定值标本作为校准物立即校准生化分析仪二氧化碳检测系统。结果用血气分析仪和校准后的生化分析仪,平行随机检测20份临床静脉血标本的二氧化碳,经配对资料t检验,t值为0.1787,P值为0.86,P大于0.05,差异无显著性,r值为0.998,表明相关良好。结论用该法制备的二氧化碳的校准物可用来校准生化分析仪二氧化碳检测系统。     

以控制品为校准品的尝试

目的以稳定的液体控制品为碳酸氢盐测定的应用校准品,观察对病人标本测定的可靠性。方法固定的检测系统,校准品校准确认为准,对拟采用的控制品作长期测定,确定其稳定性。原检测系统的仪器、试剂、操作程序不变的条件下,试用该控制品为校准品替代原校准品,以长期测定的均值为校准值校准检测系统,在测定病人标本时,又和以原校准品校准的检测系统作对比。结果在1个月内,2种校准方法的病人标本碳酸氢盐测定结果具极好的可比性,回归式Y=0.994X-0.137,相关系数r=0.966。结论始终以病人测定结果为准,做好校准确认,可以将重定值稳定的控制品为校准品。     

酶校准品用于非配套检测系统的可行性

目的分析酶校准品用于非配套检测系统的可行性。方法用罗氏ModularP分析仪与配套试剂（A系统）、罗氏ModularP分析仪与朗道试剂（B系统）、罗氏ModularP分析仪与科华东菱试剂（C系统）、罗氏ModularP分析仪与中生北控试剂（D系统）、罗氏ModularP分析仪与伊利康试剂（E系统）测定50份新鲜血清、1份罗氏的cfas（calibrator for automated systems）、1份德灵、1份贝克曼、1份朗道校准品的ALT、AST、CK、LDH各2次，分别取均值。然后以各酶校准品标示值与测定值之比作为校正因子，校正50份新鲜血清的测定结果，并进行校正前后的结果比较和各酶校准品在各个检测系统中作互通性分析。结果罗氏、朗道的酶校准品能用于B、c、D、E系统的部分项目校准，而德灵、贝克曼的酶校准品不能用于B、c、D、E系统的ALT、AST、CK、LDH校准。结论经方法特异性分析和互通性证实后，选用适合检测系统的非配套校准品进行校准是可行的，并且与配套测定系统有良好的一致性。     

以控制品为校准品的尝试

目的：以稳定的液体控制品为碳酸氢盐测定的应用校准品,观察对病人标本测定的可靠性。方法：固定的检测系统,校准品校准确认为准,对拟采用的控制品作长期测定,确定其稳定性。原检测系统的仪器、试剂、操作程序不变的条件下,试用该控制品为校准品替代原校准品,以长期测定的均值为校准值校准检测系统,在测定病人标本时,又和以原校准品校准的检测系统作对比。结果：在1个月内,2种校准方法的病人标本碳酸氢盐测定结果具极好的可比性,回归式Y＝0．994X－0．137,相关系数r=0.966。结论：始终以病人测定结果为准,做好校准确认,可以将重定值稳定的控制品为校准品。     

自建系统谷草／谷丙转氨酶量值溯源性研究

目的确保患者标本在日立自建系统与罗氏配套检测系统上谷草／谷丙转氨酶的检测结果可溯源到同一测量基准。方法通过日立自建系统与罗氏配套系统对新鲜混合血清测定结果进行对比分析,找出日立自建系统存在的系统偏差,井对日立系统校准值进行修订,修订后对日立系统进行二次校准,然后进一步进行两系统对比分析。结果第一次对比两系统偏差超过1／2CLIA’88规定的最大允许误差范围,第二次两系统偏差小于1／4CLIA’88规定的最大允许误差范围。结论通过对比分析从而对自建系统校准血清的校准值重新赋值,是实现自建系统检测结果准确性和可溯源的有效途径。     

不同检测系统间ALT测定结果具可比性的尝试

目的探讨使不同检测系统间丙氨酸转氨酶(ALT)测定结果具可比性的方法. 方法分别使用混合血清和校准品对各检测系统作共同校准. 结果说明在日立7150和奥林巴斯AU1000型间无论使用混合血清或校准品进行共同校准后,在病人标本ALT测定上具良好的可比性. 结论通过校准,并且不断以病人标本结果做验证.才能使不同检测系统间常规ALT测定结果具有可比性.     

酶校准品在血清酶测定结果一致性中的应用

目的探讨在不同生化分析仪上检测常用血清酶[丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)]结果的可比性的方法。方法将自动化系统的校准物(cfas)中6个酶活性定值转移至新鲜混合血清,以该混合血清作为校准品,对同一批标本测定校准前后的6个酶活性。结果校准前,同一批标本在2台不同品牌仪器上测得的结果差异有极其显著性(P<0.001)。校准后,同一批标本在2台不同品牌仪器上测得的结果差异无显著性(P>0.05)。结论用cfas转移血清酶定值的新鲜混合血清作为校准品对不同检测系统进行校准,既保证了结果的可溯源性,又可以实现血清酶测定的一致性。     

开放生化检测系统校准限值的设置与应用

目的研究开放生化检测系统项目校准限值的设置,实现对开放生化检测系统检测过程的监控。方法分别测定水空白和校准品,获取各项目试剂空白及校准品校准限值初始值;回顾性分析过去12个月的校准结果,对所设校准限值进行修正和优化,同时分析相同项目校准限值在不同仪器间的差异。结果限值可用于对校准测得的吸光度批内、批间精密度,试剂空白和校准因子最大、最小值进行监控。30个项目中,校准因子最大允许相对偏差范围为2.12%~30.60%,29项小于18.00%、27项小于15.00%、10项小于5.00%。两台仪器共同测定的26个项目中,试剂空白吸光度、校准品吸光度和校准因子P值小于0.05的分别为19项(73.00%)、21项(81.00%)和22项(85.00%),证实两台仪器校准结果差异有统计学意义(P0.05)。结论通过在开放生化检测系统设置校准限值,实现对校准过程监控,减少由校准引入系统误差,进而监测整个分析检测系统。不同项目校准限值存在差异,应当根据试剂和分析仪器特点进行个性化设置、优化;同一项目校准限值在不同仪器亦存在差异,在进行设定应用时应当兼顾。