microRNA-21调节宫颈鳞癌SiHa细胞中PDCD4的表达研究

目的探讨microRNA(miR)-21-反义寡核苷酸(ASODN)对宫颈鳞癌SiHa细胞中PDCD4基因表达、细胞增殖与凋亡的影响。方法宫颈鳞癌SiHa细胞分3组,采用LipofectamineTM2000转染试剂,miR-21调控组转染miR-21抑制剂的ASODN,miR-21抑制剂阴性对照的ASODN,空白对照组不转染。Cell Titer和荧光TUNEL分别检测转染前后SiHa细胞增殖和凋亡的变化,流式细胞仪分析细胞周期,实时RT-PCR检测miR-21和PDCD4mRNA水平表达,Western blot检测靶蛋白PDCD4表达。结果 AS-miR-21组与阴性、空白对照组相比,SiHa细胞生长明显抑制,而阴性和空白对照组比较无明显差异;细胞凋亡率分别为(9.7±0.52)%、(3.6±0.17)%和(3.4±0.36)%;细胞周期结果显示AS-miR-21组G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少,与对照组间差异显著(P<0.05);实时RT-PCR结果显示,miR-21表达下降而PDCD4表达升高。Western blot检测结果显示,PDCD4表达AS-miR-21组明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。结论 AS-miR-21可有效抑制miR-21在宫颈鳞癌SiHa细胞中的表达并上调PDCD4基因表达,发挥抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。     

反义miR-21抑制宫颈鳞状细胞癌CaSki细胞系生长体外研究

目的探讨敲低miR-21表达对宫颈鳞状细胞癌细胞系CaSki增殖活性与凋亡的影响。方法实时荧光定量RT-PCR法检测正常宫颈组织、CaSki细胞转染前后miR-21的表达水平,采用MTT法、流式细胞术等技术检测转染后CaSki细胞增殖活性与凋亡的变化。结果 miR-21在CaSki细胞中表达水平为正常宫颈组织的3.25倍。CaSki细胞中转染反义miR-21(AS-miR-21)可显著抑制其表达。转染后24h、48h、72h、96h,MTT检测提示10nmol与20nmolAS-miR-21转染组中细胞增殖率较对照组明显降低(P<0.05),自48h抑制作用显现,且随着转染浓度增加,抑制作用增强,呈现剂量依赖性。细胞周期检测结果显示AS-miR-21转染组的G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少(P<0.05)。AnnexinⅤ联合PI技术检测细胞凋亡,结果显示AS-miR-21转染组早期凋亡细胞率[(23.40±2.16)%]明显高于空白对照组[(5.1±2.16)%]、阴性对照组[(6.87±0.55)%](P=0.000)。结论 AS-miR-21转染可敲低CaSki细胞中miR-21表达,并有效抑制细胞增殖活性,促进细胞凋亡。     

survivin基因RNA干涉对宫颈癌裸鼠移植瘤生长及凋亡和顺铂化疗敏感性的影响

目的观察survivin基因RNAi对宫颈癌裸鼠移植瘤生长、凋亡和化疗敏感性的影响。方法随机选择雌性BALB/C-nu/nu裸小鼠24只,细胞接种法建立4组人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,每天观察裸鼠一般状况及肿瘤生长情况,通过绘制肿瘤生长曲线并计算肿瘤生长抑制率,观察survivin基因RNAi对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响;通过免疫组化SP法检测各组移植瘤组织中survivin蛋白表达情况,TUNEL染色观察survivin基因RNAi对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤凋亡的影响;当肿瘤体积达0.2cm3时给予顺铂化疗以观察survivin基因RNAi对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤化疗敏感性的影响。结果成功建立4组人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤体积在每个检测点均明显小于接种HeLa组;观察结束时,接种HeLa-s2组裸鼠瘤重明显小于接种HeLa组,分别为：（0.369±0.043）g和（1.150±0.136）g（P〈0.05）;接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤生长抑制率为67.9%。免疫组化结果显示：接种HeLa-s2组裸鼠survivin蛋白表达显著下降;TUNEL染色结果显示：接种HeLa-s2组裸鼠细胞凋亡明显增多,凋亡指数（AI）值达（22.73±1.37）%。顺铂化疗后不同检测点接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤体积明显小于接种HeLa组,肿瘤生长明显受抑;观察结束后,接种HeLa-s2组裸鼠瘤重明显小于接种HeLa组,分别为：（0.323±0.058）g和（1.347±0.173）g（P〈0.05）;接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤细胞凋亡明显增多,与接种HeLa组AI比较,接种HeLa-S2组AI明显升高,分别为：（37.38±1.01）%和（5.19±0.61）%（P〈0.05）。结论 survivin基因RNAi可通过下调移植瘤组织survivin蛋白表达抑制移植瘤生长并促进其凋亡,并通过增加顺铂化疗诱导的细胞凋亡,增强顺铂化疗对移植瘤的生长抑制,进而提高移植瘤对顺铂化疗的敏感性。     

miR-92b在神经胶质瘤裸鼠移植瘤模型中的作用

目的建立U251胶质瘤裸鼠皮下移植瘤模型,观察沉默miR-92b对U251神经胶质瘤裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法采用神经胶质瘤U251细胞株建立神经胶质瘤的裸鼠皮下移植瘤动物模型,将shRNA-miR-92b表达的质粒稳定转染U251细胞,筛选稳转细胞采取多点注射的方法注入裸鼠皮下,以阴性质粒和PBS为阴性对照组(shRNA-miR-92b NC组)和空白对照(PBS组);检测裸鼠成瘤体积和重量;real-time PCR检测移植瘤中miR-92b、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)的表达水平;western blot检测移植瘤中的IGFBP-3、β-链蛋白(β-catenin)和钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白水平;免疫组织化学技术检测移植瘤中IGFBP-3、β-catenin和E-cadherin表达水平。结果移植瘤形成过程中裸鼠未出现死亡,全部裸鼠均皮下成瘤,肿瘤体积检测后发现shRNA-miR-92b转入后显著抑制移植瘤的生长(P0.05);转入shRNA-miR-92b后,移植瘤中的miR-92b表达水平降低,IGFBP-3的表达水平增加(P0.05);western blot结果显示IGFBP-3和E-cadherin蛋白表达升高,β-catenin蛋白表达降低(P0.05);免疫组化结果也显示IGFBP-3蛋白表达升高,β-catenin蛋白表达降低(P0.05)。结论沉默miR-92b表达后可能通过上调IGFBP3、E-cadherin蛋白表达,下调β-catenin蛋白表达,从而抑制神经胶质瘤裸鼠皮下移植瘤的生长。     

反义miRNA-21/rAV-Tumstatin病毒载体对裸鼠膀胱癌生物学行为的影响

目的探讨反义miRNA-21/rAV-Tumstatin病毒载体对裸鼠膀胱癌生长及转移的影响。方法通过构建裸鼠原位膀胱癌移植瘤模型并灌注携带基因的腺病毒载体,观察肿瘤生长及盆腔淋巴结转移情况,同时采用免疫组化法检测肿瘤细胞增殖和凋亡指数。结果肿瘤大小:治疗组为(14.60±5.31)mm2,对照组为(58.92±7.16)mm2,两组比较P<0.01;肿瘤细胞增殖率:治疗组为41.30%,对照组94.70%,两组相比P<0.05;凋亡指数治疗组和对照组分别是30.18和9.53,两者比较P<0.05;治疗组5只中无一只发生盆腔淋巴结转移,而对照组3只出现转移(60.0%),两组比较P<0.01。上述各项组间差异均有统计学意义。结论反义miRNA-21/rAV-Tumstatin病毒载体对人膀胱癌裸鼠原位移植瘤具有良好的靶向性,能够通过抑制肿瘤细胞增殖和加速肿瘤细胞凋亡,遏制实验性裸鼠膀胱移植癌模型的生长转移,从而为该载体用于人类膀胱癌的治疗提供了一定的实验依据。     

苦参素联合顺铂对实验性肝癌miR-21、miR-122表达的影响

目的观察苦参素联合顺铂对人肝癌裸鼠皮下移植肝癌miR-21、miR-122表达的影响,探讨其可能的分子机制。方法成功构建BALB/c裸鼠人肝癌细胞株HepG2细胞移植瘤模型后,随机分为对照组、苦参素组、顺铂组及苦参素和顺铂联合用药组(每组12只裸鼠,共48只)。分别给药,对照组(生理盐水10mg/kg)、苦参素组(苦参素100mg/kg)、顺铂组(顺铂2mg/kg)、联合组(苦参素100mg/kg+顺铂2mg/kg)。每天1次,均为腹腔注射给药。分别记录对照组、顺铂组、苦参素组和联合用药组在4、7、9、11以及14天裸鼠的体重和肿瘤体积,并计算抑瘤率。同时,应用实时荧光定量RT-PCR法检测皮下移植瘤miR-21和miR-122的表达。结果第14天联合用药组裸鼠体重明显大于顺铂组(P0.01),第14天裸鼠肿瘤体积在联合用药组明显小于顺铂组(P0.01)。与正常对照组比较,三组miR-21表达下调,miR-122表达下调。三组miR-21的表达分别为53.45±12.89、6.92±3.12和0.66±0.02,差异具有统计学意义(P0.01)。三组miR-122表达分别为43.6±12.41,20.4±6.31以及0.22±0.09,差异具有统计学意义(P0.01)。结论苦参素和顺铂联合用药对裸鼠皮下肿瘤有明显抑癌作用,其机制可能是调节miR-21和miR-122的表达抑制肝癌细胞过度增殖,从而发挥抗肿瘤作用。     

上调及下调MicroRNA-195对人脑胶质瘤影响的初步研究

目的观察上调及下调microRNA-195(miR-195)对裸鼠皮下荷SHG-44人脑胶质瘤生长的影响并探讨其机制。方法使用脂质体瞬时转染法将miR-195 mimics和inhibitor分别转入人脑胶质瘤细胞系SHG-44,同时设立空白对照组和阴性对照组;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测转染前后miR-195的含量变化;流式细胞法检测各组细胞周期分布;裸鼠成瘤实验观察miR-195对体内胶质瘤增殖的影响;肿瘤组织HE染色观察病理学改变;Western blot、免疫组织化学染色检测肿瘤组织周期相关蛋白P21、Cyclin D1的表达变化。结果 qRT-PCR测得转染mimics后miR-195的表达水平提高19倍左右,而转染inhibitor后miR-195的表达水平降低为空白对照组的42%;与空白对照和阴性对照组相比,miR-195mimics组细胞阻滞于G0/G1期(P<0.05);而miR-195 inhibitor组则相反(P<0.05);裸鼠成瘤实验显示,miR-195 mimics组与空白对照组和阴性对照组相比,肿瘤生长速度减慢,体积减小(P<0.05),而miR-195 inhibitor组则结果相反(P<0.05);HE染色结果显示miR-195mimics组肿瘤组织异型性下降,新生血管数减少,而miR-195 inhibitor组则相反;Western blot检测示与空白对照组和阴性对照组比较,miR-195 mimics组P21表达上调,而Cyclin D1表达下调,miR-195inhibitor组结果相反(P均<0.05);免疫组化染色检测显示,与空白对照组和阴性对照组比较,miR-195mimics组中P21表达阳性率较高,而Cyclin D1的表达阳性率较低(P均<0.05),miR-195 inhibitor组情况则相反(P均<0.05)。结论 MiR-195可使P21表达升高,下调Cyclin D1的表达,阻滞G0/G1期向S期转换,从而抑制人脑胶质瘤细胞SHG-44的增殖能力。     

Twist 2在胃癌细胞中的表达及对上皮间质转化的影响

目的探讨Twist 2在胃癌细胞中的表达情况及对上皮间质转化的影响。方法采用免疫组织化学方法检测Twist 2在胃癌组织中的表达情况,流式细胞术检测Twist 2对胃癌细胞凋亡行为的影响,Western blot检测Twist 2对上皮间质转化过程的影响,胃癌细胞裸鼠成瘤实验检测Twist 2对胃癌细胞裸鼠成瘤的影响。结果在胃癌组织中Twist 2的表达阳性率为(48. 35±5. 31)%,高于癌旁正常组织中Twist 2的表达阳性率(11. 26±1. 62)%,差异有统计学意义(P 0. 05)。流式细胞术检测结果显示,与对照组细胞凋亡率(2. 43±0. 33)%比较,抑制Twist 2细胞株的实验组细胞周期呈现凋亡增强趋势,细胞凋亡率升高为(15. 04±1. 23)%,两组比较差异有统计学意义(P 0. 05)。Western blot检测显示,抑制Twist 2表达后,E-cadherin蛋白表达相对下调,显微镜下观察Twist 2分布于胃癌细胞的细胞核和细胞质中,在抑制Twist 2表达后,E-cadherin蛋白表达相对减弱。与空白对照组比较,miR-135b-inhibitor组抑制Twist 2表达后可以减弱裸鼠皮下异种移植瘤的生长情况,移植瘤的生长趋势降低,同时成瘤后肿瘤总体体积相应减小,质量相应降低,差异具有统计学意义(P 0. 05)。结论 Twist 2细胞分布差异可能与其在肿瘤进展中的作用有关,且可能通过参与上皮间质转化过程,瞬时激活上皮间质转化,进而参与胃癌的侵袭和转移行为。     

抑制MDC1基因蛋白表达对裸鼠食管癌细胞移植瘤大小及放疗敏感程度的影响

目的分析抑制MDC1基因蛋白表达对裸鼠食管癌细胞移植瘤大小及放疗敏感程度的影响。方法取54只SPF级BALB/C雄性裸鼠,构建食管癌动物模型。通过MDC1 mRNA序列,对有效的干扰序列与阴性对照序列进行设计并合成,且与载体p SIH1-H1-cop GFP生成重组质粒。裸鼠随机分为6组,分别为空白对照组(Eca109细胞未进行任何处理)、阴性转染组(转染阴性Eca109细胞)、单一照射组(Eca109细胞仅进行放射线照射)、阳性转染组(转染阳性ECA09细胞)、阴性转染+照射组(转染阴性Eca109细胞联合放射线照射)、阳性转染+照射组(转染阳性ECA09细胞联合放射线照射),每组各9只。采用蛋白印迹法与实时荧光定量PCR法对MDC1蛋白及mRNA表达量进行检测,取MDC1阳性转染Eca109细胞、阴性转染的Eca109细胞,分别将其接种于裸鼠。记录各组裸鼠移植瘤照射后1周、2周、3周、4周的体积变化情况,并用流式细胞仪对裸鼠移植瘤组织中细胞周期分布及细胞凋亡情况进行检测,且根据蛋白印迹法对各组裸鼠移植瘤组织中CHK2、CHK2-T68、CHK1表达情况进行检测,并将所得数据纳入统计学分析。结果p MDC1-shRNA质粒成功构建,且Eca109细胞得以转染,取得MDC1稳定转染的Eca109细胞。接种的裸鼠均成活,且于接种后7 d左右裸鼠爪下移植瘤形成。经15 Gy照射后,单一照射组、阴性转染+照射组裸鼠移植瘤生长速度较空白对照组明显减缓(P 0. 05),阳性转染+照射组裸鼠移植瘤生长速度较其它各组均明显减缓(P 0. 05),生长抑制率明显增高(P 0. 05)。照射前,各组裸鼠移植瘤体积的比较,并无显著差异(P 0. 05);照射后1周、2周、3周、4周,空白对照组裸鼠移植瘤增长较明显,阳性转染+照射组裸鼠移植瘤增长较缓慢,与单一照射组、阴性转染+照射组裸鼠移植瘤体积明显缩小(P 0. 05)。各组裸鼠移植瘤组织中细胞周期分布及细胞凋亡率的比较,并无显著差异(P 0. 05)。与对照组、单一照射组比较,阳性转染+照射组裸鼠移植瘤组织中CHK2-T68磷酸化水平显著下降(P 0. 05),而CHK2与CHK1蛋白表达水平较接近(P 0. 05)。结论 RNA干扰下调MDC1基因蛋白表达具有提高裸鼠食管癌细胞放疗敏感程度的作用,主要体现在阻滞放射线照射后裸鼠移植瘤的肿瘤体积增长方面。     

三氧化二砷对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:观察三氧化二砷(As2O3)对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:20只皮下接种移植瘤大小相似的BALB/c裸鼠,随机分为0.9%氯化钠液(NS)组(n=10)和As2O3组(n=10)。尾静脉注射NS0.2ml.只-1(NS组)或As2O310mg·kg-1(As2O3组),每日1次,连续7d。21d时处死所有裸鼠,测量肿瘤的重量和体积。结果:NS组瘤重0.992±0.401g、体积(1.50±0.57)mm3,As2O3组瘤重(0.526±0.269)g、体积(0.83±0.39)mm3,瘤重和体积明显下降(P<0.01)。结论:As2O3能明显抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤的生长。     

DADS对人宫颈癌细胞生长及VEGF蛋白表达的影响

【目的】探讨二烯丙基二硫（DADS）对人宫颈癌Hela细胞生长及血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达的影响。【方法】体外培养人宫颈癌Hela细胞,采用MTT比色法测定DADS对Hela细胞增殖活性的影响;裸鼠皮下注入人宫颈癌Hela细胞建立人宫颈癌裸鼠并种移植模型,观察腹腔注射DADS对宫颈癌移植瘤在Balb／c-nu裸鼠体内生长情况的影响,HE染色后进一步观察DADS对移植瘤组织形态的改变,SP免疫组织化学法观察移植瘤细胞VEGF蛋白酌表迭情况。【结果】DADS对人宫颈癌Hela细胞增殖有一定抑制作用,并呈浓度依赖性,以DADS60mg／L高剂量药物组抑制活性最强;腹腔注射DADS剂量为50mg／kg、100mg／kg和200mg／kg时,细胞增殖抑制率分别为28．1％、38．6%、55．3％,瘤重抑制率分别是35．9％,49．9％,55．4％;HE染色结果示DADS具有杀伤人宫颈癌裸鼠移植瘤细胞作用;SP免疫组织化学法示DADS下调移植瘤细胞VEGF表达。[结论]DADS具有抑制人宫颈癌细胞的生长作用,此作用可能与下调移植瘤细胞VEGF表达有关。     

反义微小RNA-21基因治疗改善膀胱癌化疗敏感性的实验研究及临床应用前景

目的建立裸鼠原位膀胱癌移植瘤模型,探讨反义微小RNA-21（miRNA-21）腺病毒载体＋化疗药物丝裂霉素C（mitomycinC.MMC）对裸鼠膀胱癌发生、发展及转移的作用,为评价基因治疗改善膀胱癌化疗耐药性的策略提供实验依据。方法分别用携带反义miRNA-21载体＋MMC和单独使用携带反义miRNA-21载体或MMC经尿道膀胱灌注治疗成瘤裸鼠,观察肿瘤生长及盆腔淋巴结转移情况,同时应用二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）法检测瘤细胞的增殖,原位末端标记（TUNEL）法测定瘤细胞的凋亡。结果 MTT法检测结果显示,联合用药组,反义miRNA-21组和MMC组细胞的增殖率分别是25.6%±6.9%,50.4%±8.3%,37.9%±2.8%,组间比较,差异具有统计学意义（P〈0.05）。TUNEL法测定结果提示：瘤细胞凋亡率依次为：联合用药组（81.5%±6.1%）,反义miRNA-21组（49.5%±7.3%）,MMC组（56.8%±3.9%）,组间比较P〈0.05。联合用药组10只成瘤裸鼠中无一只出现盆腔淋巴结转移,转移率为零,而单独应用载体或化疗组各发生4只转移,转移率为40%（4/10）,组间差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论基因治疗＋化疗联合治疗人膀胱癌裸鼠原位移植瘤的策略明显优于只用基因或化疗的单一治疗方法。     

VEGF—C反义多肽对乳腺癌裸鼠移植瘤影响的实验研究

目的观察血管内皮生长因子C（VEGF—C）反义多肽对乳腺癌裸鼠皮下移植瘤的影响，探讨以VEGF—C反义多肽用于乳腺癌基因治疗的应用前景。方法制备靶向VEGF—C的反义多肽，构建乳腺癌细胞MCF-7裸鼠皮下移植瘤模型，瘤体内注射VEGF—C反义多肽，观察其对乳腺癌细胞的抑制作用；免疫印迹（Western Blot）检测VEGF—C在瘤组织的表达情况。结果VEGF—C反义多肽具有较强的生物学活性，瘤组织内给予VEGF-C反义多肽后，Western blot分析VEGF—C在瘤组织中的表达降低，肿瘤生长受制，抑瘤率为52％（P〈0．05）。结论 制备出的VEGF—C具有良好的生物学活性，有抗乳腺癌作用。     

转移性宫颈癌细胞衍生的外泌体miR-21-5p促进宫颈癌侵袭及转移

目的 探讨转移性宫颈癌组织的旁分泌作用对肿瘤细胞扩散的影响。方法 选择22例转移性宫颈鳞癌患者的手术标本（癌组织和癌旁组织）和血清标本,以及22名健康体检者的血清标本,采用逆转录-实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-21-5p在癌组织和癌旁组织中的表达水平;分别转染miR-21-5p模拟物/抑制剂到宫颈癌SiHa细胞,采用RT-qPCR、细胞集落形成实验、Transwell迁移实验、噻唑蓝（MTT）比色法、蛋白免疫印迹法、双荧光素酶报告分析差异;采用高速离心法提取血清外泌体;采用纳米颗粒跟踪分析（NTA）技术、蛋白免疫印迹法、透射电子显微镜（TEM）对外泌体进行表征鉴定;采用RT-qPCR 检测宫颈鳞癌患者和健康体检者血清外泌体中miR-21-5p的表达差异;采用受试者操作特征（ROC）曲线分析血清外泌体中miR-21-5p对肿瘤转移的诊断效能。结果 miR-21-5p在转移性宫颈鳞癌组织中表达上调;miR-21-5p过表达能促进宫颈鳞癌SiHa细胞集落形成以及细胞增殖与迁移（P均< 0.01）;双荧光素酶报告显示,miR-21-5p可以靶向快速发育生长因子同源蛋白2抗体（SPRY2）,对SPYR2的表达水平进行调控;miR-21-5p模拟物转染的SiHa细胞中,磷酸化丝裂原和应激激活的蛋白激酶、磷酸化核糖体S6蛋白激酶、磷酸化原癌基因C-RAF、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激酶和磷酸化MAPK蛋白的表达均上调（P均< 0.05）。miR-21-5p在宫颈鳞癌患者的血清外泌体中上调（P < 0.05）。血清外泌体评估宫颈癌转移的ROC曲线下面积为0.9375。结论 转移性宫颈鳞癌患者组织中miR-21-5p通过外泌体传递促进肿瘤转移,其机制可能与靶向SPRY2/细胞外调节蛋白激酶/MAPK信号通路有关。     

卡铂与顺铂对宫颈癌移植瘤胸苷磷酸化酶的调节作用

目的：探讨卡铂与顺铂对宫颈癌细胞株裸鼠移植瘤中胸苷磷酸化酶（thymi-dine phosphorylase，TP）的调节作用。方法：36只裸鼠均予皮下接种人宫颈鳞状细胞癌Siha细胞株，生成直径约为6～7mm的移植瘤。随机分为3组，每组12只，分别予腹腔内注射等量的卡铂、顺铂和生理氯化钠，给药10d后处死裸鼠，测量移植瘤体积及重量，计算抑瘤率，并以ELISA法测定移植瘤组织中TP的含量。结果：给药后顺铂组和卡铂组人宫颈癌细胞株裸鼠移植瘤体积均比给药前缩小，且均小于对照组（均为P〈0．05），3组的移植瘤重量由低到高依次为顺铂组、卡铂组、对照组（均为P〈0．05）。卡铂组和顺铂组的抑瘤率分别为1．6％和5．5％，2组的抑瘤率比较差异有统计学意义（P〈0．05）。3组移植瘤组织中TP含量由低至高依次为对照组、卡铂组和顺铂组（P〈0．05-0．01）。结论：卡铂和顺铂对宫颈癌细胞株裸鼠移植瘤中TP的表达具有上调作用，其中以顺铂对TP的上调作用较强。     

丙氨瑞林对人子宫内膜癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响及机制研究

目的 探讨不同剂量的醋酸丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长及其可能的作用机制.方法 建立子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型,选32只雌性荷瘤裸鼠随机分为4组,即空白对照组、醋酸丙氨瑞林干预组（20 μg/kg、40μg/kg、80 μg/kg）,不同剂量醋酸丙氨瑞林组均采取肌肉注射方式连续给药,4周后处死裸鼠,将移植瘤完整取出,测量肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线、计算抑瘤率,并应用免疫组织化学法检测瘤组织中TGF-β1、Smad2/3、Smad7蛋白的表达.结果 实验对照组、低、中、高剂量醋酸丙氨瑞林组中移植瘤生长曲线斜率依次减小,生长速度依次减慢.低、中、高剂量醋酸丙氨瑞林抑瘤率分别为（13.03±5.4）％、（26.42±7.3）％、（43.27±6.9）％,组间两两比较差异有统计学意义（P＜0.05）.随着醋酸丙氨瑞林浓度的升高,各干预组TGF-β1、Smad2/3蛋白表达水平明显升高,Smad7蛋白表达水平明显下降,且与对照组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 醋酸丙氨瑞林对子宫内膜癌细胞株Hec-1-B裸鼠皮下移植瘤生长有抑制作用,且呈一定的剂量依赖效应,其作用机制可能与调节TGF-β1/Smads信号转导通路有关.     

多西环素对大肠癌裸鼠移植瘤的影响

目的观察金属蛋白酶组织抑制剂（多西环素）对大肠癌裸鼠皮下移植瘤的影响，为大肠癌的治疗寻求一个新的可能治疗途径。方法将10只BALB／C（nu／nu）裸鼠随机分为对照组和实验组，每组5只，将人大肠癌细胞系LoVo细胞种植入裸鼠皮下，建立裸鼠皮下人大肠癌移植瘤模型。对照组应用生理盐水瘤内多点直接注射；实验组应用多西环素瘤内多点直接注射。记录2组裸鼠肿瘤大小，观察肿瘤生长曲线，计算生长抑瘤率。结果第26天肿瘤体积大小和肿瘤生长抑制率：实验组分别为（889．8±80．8）mm^3和49．7％，对照组分别为（1755．8±203．8）mm^3和0，2组比较，差异均有统计学意义（P均〈0．05）。结论多西环素可以抑制大肠癌裸鼠皮下移植瘤的生长，有可能腐用于大肠痛的治疗。     

丙戊酸抗裸鼠Kasumi-1细胞移植瘤血管新生的作用研究

本研究旨在探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸（VPA）体内、体外抑制急性髓系白血病血管新生及其作用机制。用不同浓度的VPA处理人t（8;21）急性白血病细胞株Kasumi-1细胞3d后用RT-PCR及Westernblot分析细胞Angl、Ang2mRNA及蛋白水平的变化;建立Kasumi-1细胞裸鼠移植瘤模型,采用RT-PCR、Westernblot的方法分析对照组和VPA治疗组瘤组织ang]、Ang2、VEGFmRNA及蛋白水平的变化,免疫组织化学的方法分析瘤组织CD34及Angl、An蛇蛋白水平的改变。结果表明,VPAl-3mmol／L处理3d能够下调Kasumi-1细胞AnglmRNA（3mmol／L组0．040±0．008,对照组O．360±0．116）、Ang2mRNA（3mmol／L组0．146±0．038,对照组0．540±0．049）及蛋白的相对表达,呈浓度依赖性;VPA500mg／kg,ip,处理14d能够明显降低裸鼠瘤组织Angl、Ang2、VEGFmRNA及蛋白的相对表达（P〈0．01）,并能明显减少荷Kasumi-1细胞裸鼠移植瘤微血管密度（8．470±0．3001352．600±O．200）。结论：VPA可能通过调节血管生成素及VEGF的表达,阻碍白血病的血管新生,从而抑制白血病细胞浸润、迁移。