单一稳定液体试剂直接测定α-淀粉酶

目的 :建立以α- 2 -氯 - 4-硝基苯 -半乳糖吡喃麦芽糖苷 ( Gal- G2 - CNP)作底物的α-淀粉酶 (α-amylase)的直接测定方法。方法 :利用国外最新合成的 Gal- G2 - CNP( alpha- 2 - chloro- 4- nitrophenyl-galactopyranosylmaltoside)作底物 ,用速率法测定α-淀粉酶活力。结果 :线性范围可达 30 0 0 U/L ( r=0 .9998) ,变异系数为 0 .30 %～ 0 .53%。与宝灵曼公司的 ET- G7- PNP法 〔1〕的相比 :r=0 .9998,Y=0 .76X 0 .2 0 ( n=2 0 0 ) ,与 G3 - CNP的相比 r=0 .9999,Y=1 .0 1 X 1 1 .7( n=2 0 0 )。结论 :简便、直接、灵敏、经济、试剂单一稳定、反应转化率高、线性范围宽、基质本身自然水解极微 ,各项指标符合国际临床化学学会( IFCC)提出的“理想的淀粉酶检测方法”的要求〔2〕。适于各种类型的自动分析     

窒息新生儿β-内啡肽白介素-2肿瘤坏死因子-α的变化

目的:观察窒息新生儿的β-内啡肽、白介素-2、肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF)-α水平的变化。方法:测定及比较窒息组(41例)和正常组(20名)β-内啡肽、白介素-2、TNF-α水平。结果:窒息组的β-内啡肽、TNF-α水平较正常组显著升高:其中轻度窒息组β-内啡肽(335±76)ng/L,TNF-α(0.70±0.15)μg/L,重度窒息组β-内啡肽为(882±112)ng/L,TNF-α为(1.12±0.32)μg/L,正常组β-内啡肽(201±83)ng/L,TNF-α(0.35±0.12)μg/L。窒息组的白介素-2明显下降。结论:窒息新生儿的β-内啡肽、TNF-α升高,白介素-2下降,因而可作为评价新生儿窒息后脑损害、脑水肿的客观指标之一。     

131Ⅰ-17-丙烯胺基-17-脱甲基格尔德霉素毒副作用的初步观察

目的 观察131Ⅰ-17-丙烯胺基-17-脱甲基格尔德霉素(131Ⅰ-17-AAG)治疗VX2肝癌移植瘤模型的骨髓及肝脏毒副作用.方法 16只新西兰白兔,制成VX2荷肝癌模型后,按完全随机原则分为2组, 1组(治疗组)8只, 10 mCi131Ⅰ-17-AAG耳缘静脉注射;2组(对照组)8只,为未经治疗的荷瘤兔, 1、2组荷瘤兔均分别于第1、2周耳缘静脉采血,进行血常规(白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板)及酶学(谷草转氨酶、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、谷氨酰转酞酶)检查.结果 2周时白细胞、红细胞和血红蛋白无显著差异(P＞0.05), 血小板、ALT、AST均有显著差异(P＜0.05), 碱性磷酸酶、谷氨酰转移酶无显著差异(P＞0.05).结论 131Ⅰ-17-丙烯胺基17脱甲基格尔德霉素(131Ⅰ -17-AAG)对骨髓造血干细胞及肝功能各项指标有不同程度的影响,且随时间逐步得到恢复.     

体内血栓烷与前列环素的酶代谢产物及其临床意义

11-去氢-血栓烷B_2与2,3-去二甲基-6-酮-前列腺素(PG)F_(Ia)分别是TxB_2与6-酮-PGF_(Ia)的体内酶代谢产物,其测定反映了血小板与内皮细胞的体内真实情况。临床应用结果表明对血栓形成与血栓前疾病的诊断有实际意义。     

新生儿窒息脐血中内源性阿片肽水平的变化及临床意义

目的　探讨新生儿窒息时脐血中内源性阿片肽水平的变化及作用。方法　采用放射免疫测定法测定 4 0例正常妊娠妇女 (对照组 )、33例新生儿窒息孕妇 (窒息组 )静脉血及脐动脉血中 β -内啡肽、强啡肽A1-13 和亮脑啡肽的含量。结果　①窒息组脐血中 β -内啡肽、强啡肽A1-13 和亮脑啡肽的含量分别为 (5 6 9 5 6± 79 4 6 )ng/L、(2 98 6 3± 36 18)ng/L及 (4 98 37± 71 5 2 )ng/L ,对照组分别为 (2 5 0 90± 39 4 0 )ng/L、(10 2 5 0± 2 1 6 3)ng/L及 (32 1 5 2± 39 90 )ng/L ;与对照组相比 ,窒息组脐血中 3种阿片肽含量均显著升高 (P <0 0 1及P <0 0 5 ) ,而重度窒息组与轻度窒息组间也有显著差异 (P <0 0 5 )。②脐动脉血血气分析 :pH为 7 0± 0 1,PaO2 为 (9 0 0± 3 0 0 )mmHg ,PaCO2 为 (6 6 75± 5 2 3)mmHg ;其中 β -内啡肽含量与脐血pH、PaO2呈显著负相关 (r为 - 0 5 6 3及 - 0 6 81,P <0 0 1) ,与PaCO2 呈显著正相关 (r =0 5 2 4 ,P <0 0 1) ;强啡肽A1-13 含量与脐血pH及PaO2 呈负相关 (r为 - 0 398及 - 0 4 32 ,P <0 0 5 ) ,与PaCO2 呈正相关 (r=0 4 2 6 ,P <0 0 5 ) ;亮脑啡肽含量与脐血pH及PaO2 呈负相关 (r为 - 0 347及 - 0 383,P <0 0 5 ) ,与PaCO2 呈正相关 (r =     

早期显性梅毒患者血清IL-2、IL-10和TNF-α检测及其临床意义

目的探讨白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在早期显性梅毒发病机制中的作用。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(DAbS-ELISA)检测53例早期显性梅毒患者(其中一期梅毒25例、二期梅毒28例)和65名正常人血清IL-2、IL-10和TNF-α水平。结果早期显性梅毒患者血清IL-2、IL-10和TNF-α水平明显高于正常对照组(P<0.01);一期梅毒患者血清IL-2和TNF-α水平明显高于二期梅毒患者(P<0.01),血清IL-10水平则低于二期梅毒患者(P<0.01);早期显性梅毒患者中IL-2与IL-10呈负相关(r=-0.760,P=0.000),与TNF-α呈正相关(r=0.633,P=0.000),而IL-10与INF-α无明显相关性(r=-0.063,P=0.575)。结论 IL-2、IL-10和TNF-α均参与了梅毒的发病,IL-10表达上调可能是二期梅毒发生辅助性T(Th)1/Th2细胞免疫应答失衡的主要原因之一。     

血清白介素-2受体、白介素-8表达水平对恶性血液病患者感染的临床价值

目的:探讨恶性血液病发热患者白介素-2受体(IL-2R)及白介素-8(IL-8)表达水平的临床意义。方法:选择2018年4月至2019年10月于安徽医科大学第一附属医院血液内科住院的121例恶性血液病发热患者,将患者分为感染组(61例)和非感染组(60例)同时选择无发热和感染的健康体检者为对照组(40例)。全部发热患者在入院后和感染控制后实时抽血进行C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)和细胞因子检测,健康体检者在体检时抽血检测。结果:感染组血清中IL-2R水平高于对照组,有极其显著统计学差异(P<0.001)感染组血清IL-2R水平高于非感染组,有统计学差异(P <0.05)。基于Spearman分析,恶性血液病患者血清中IL-2R水平与CRP(r=0.557,P<0.001)和IL-8(r=0.479,P<0.001)呈正相关,IL-8水平与CRP呈明显正相关(r=0.318,P<0.001)。与非感染组相比感染组CRP、PCT和IL-2R的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.714(95%CI:0.623-0.806)、0.765(95%CI:0.680-0.851)和0.761(95%CI:0.686-0.836)灵敏度分别为0.705、0.852和0.705,特异度分别为0.717、0.70和0.60;CRP+PCT、CRP+IL-2R、PCT+IL-2R和CRP+PCT+IL-2R联合诊断的AUC分别为0.789(95%CI:0.712-0.866)、0.702(95%CI:0.623-0.782)、0.757(95%CI:0.677-0.838)和0.789(95%CI:0.712-0.866),灵敏度分别为0.738、0.934、0.705和0.738特异度分别为0.840、0.470、0.810和0.840。结论:联合检测CRP、PCT、IL-2R和IL-8有助于恶性血液病感染的诊断,为临床医师初期准确诊断及合理使用抗生素提供有力的依据。     

内源性硫化氢在糖尿病肾病大鼠肾组织中表达

目的探讨内源性硫化氢(H_2S)在糖尿病肾病大鼠肾脏表达和作用。方法比较对照组、糖尿病肾病组(DN组)和外源性H_2S干预组(H_2S组)大鼠肾组织中H_2S合酶活性、胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)、胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase,CBS)mRNA的含量以及肾脏病理改变。结果 DN组大鼠肾脏中H_2S生成减少、CSE mRNA含量降低(P0.01);三组大鼠CBS mRNA差异无统计学意义(P0.05),H_2S组大鼠肾脏病理改变较DN组大鼠减轻。结论 DN组大鼠肾脏内源性H_2S生成减少和CSE表达降低有关。给予外源性H_2S可减缓肾脏病变进展。     

白血病患者外周血IL-2、sIL-2R和IFN-γ测定的临床意义

目的观察白细胞介素-2(IL-2)、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)及γ-干扰素(IFN-γ)与白血病发病的关系及临床意义.方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定20例正常对照和60例白血病患者治疗前后外周血单个核细胞(PBMC)产生的IL-2、IFN-γ和血清中sIL-2R的水平.结果白血病患者治疗前IL-2、IFN-γ水平低于正常对照组,而sIL-2R水平高于正常对照组,差异均有显著性(P<0.05);治疗后IL-2、IFN-γ水平高于治疗前,而sIL-2R水平低于治疗前,二者差异均有显著性(P<0.05).结论 IL-2、sIL-2R和IFN-γ的测定在白血病的治疗监测中有较好的应用价值.     

槐榆汤对痔出血患者凝血功能、血栓素 B2和 6-酮-前列腺素 F1a 的影响

目的:观察槐榆汤对痔出血患者凝血功能和血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)影响,探讨其临床应用价值。方法:30例痔出血患者均服用槐榆汤,共服用7d,观察期间禁用其他止血药物。治疗前后分别测定患者血小板(PLT)、凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)和TXB2和6-酮-前列腺素F1a(6-ketoPGF1a)。结果:槐榆汤能显著缩短患者的TT(P0.05),PT(P0.05),APTT(P0.05),提高FIB的含量(P0.05),提高TXB2(P0.05)而下调6-keto-PGF1a(P0.05)的含量,血小板(PLT)无明显差异(P0.05)。结论:槐榆汤止血、凝血机制可能是通过调节患者TXB2、6-keto-PGF1a含量,影响凝血功能有关。     

冠心病合并幽门螺杆菌感染患者中TIPE2表达水平的研究

目的探讨在冠心病合并幽门螺杆菌感染患者中肿瘤坏死因子-α诱导蛋白-8样因子-2(TIPE2)的表达水平。方法应用实时荧光定量-聚合酶链式反应检测健康对照组(甲组)、无幽门螺杆菌感染的冠心病组(乙组)和伴幽门螺杆菌感染的冠心病组(丙组)的外周血中TIPE2表达水平。结果无论是否伴幽门螺杆菌感染,冠心病组的TIPE2表达水平均明显低于对照组(P=0.000);伴幽门螺杆菌感染冠心病组的TIPE2表达水平明显低于不伴幽门螺杆菌感染冠心病组的TIPE2表达水平(P=0.000)。结论 TIPE2在冠心病患者的外周血中表达明显降低,且合并幽门螺杆菌感染者明显低于不合并幽门螺杆菌感染者。     

狼疮性肾炎诊治中白介素-6、白介素-8测定的意义

目的 :通过对照观察狼疮性肾炎活动期和非活动期患者血清中白介素 -6、白介素 -8含量差别的临床意义。方法 :采用夹心ELISA法检测 3 0例狼疮性肾炎患者治疗前及治疗后 (活动期与非活动期 )空服静脉血各 1次。同期抽取 1 0例临床表现及再次肾活检证实为非活动期狼疮性肾炎患者空服静脉血做对照。结果 :狼疮性肾炎患者活动期白介素 -6、白介素 -8含量分别为(1 1 2 .3±7.48)ng/L、(1 0 5 .3 8± 1 6.0 6)ng/L ,对照组含量分别为 (49.2 3± 1 4.5 )ng/L、(5 7.66± 2 2 .48)ng/L ,2组相比P <0 .0 1 ,治疗组明显高于对照组。治疗组非活动期 (治疗后 )白介素 -6、白介素 -8含量分别为 (5 2 .1 7± 1 2 .46)ng/L、(60 .48± 2 0 .2 7)ng/L ,明显低于活动期 (P <0 .0 1 ) ,但仍高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :通过检测白介素 -6、白介素 -8含量可以判断临床上难以区别的狼疮性肾炎是处于活动期还是非活动期 ,从而更好地指导临床治疗。     

利培酮对精神分裂症患者血浆IL-2、IL-6、IL-8的影响及临床意义

目的 探讨利培酮治疗前后首发精神分裂症患者血浆白介素-2(Interleulkin-2,IL-2)、白介素-6(Interleulkin -6,IL-6)、白介素-8(Interleulkin-8,IL-8)的变化及临床意义.方法 45例首发精神分裂症患者用固定剂量的利培酮进行10周治疗,采用酶联免疫吸附法(ELISA)对治疗前后血浆IL-2、IL-6、IL-8浓度进行了检测.结果 治疗前精神分裂症患者血浆IL-2、IL-6、IL-8水平均显著高于对照组(t=5.258,P<0.01;t=4.116,P<0.01;t=2.609,P<0.05);治疗后患者组血浆IL-2、IL-6水平有显著下降(t=3.797、3.386,P<0.01),而IL-8水平变化不明显(t=0.124,P>0.05).结论 精神分裂症患者存在IL-2、IL-6、IL-8介导的免疫功能紊乱,利培酮可能通过抑制IL-2、IL-6的生成而对精神分裂症的免疫功能紊乱进行纠正.     

人胰腺癌5-Fu耐药细胞株的诱导建立及细胞学特性研究

目的建立稳定传代的抵抗5-Fu的人胰腺癌细胞株MiaPaca2-5-Fu,并对细胞生物学特性进行研究。方法逐步增加培养基中5-Fu的浓度,建立对5-Fu耐药的人胰腺癌细胞株MiaPaca2-5-Fu;采用WST法计算出MiaPaca2和MiaPaca 2-5- Fu的半数抑制浓度(IC50)和耐药指敷(RI);检测MiaPaca2和MiaPaca2-5-Fu的生长曲线,计算2个细胞系的倍增时间并进行比较,用流式细胞仪技术检测其细胞周期。结果5-Fu对MiaPaca2和MiaPaca2-5-Fu的IC50分别为(4.29±0.15)μg/mL、(41.55±2.79)μg/mL,RI为9.68(P=0.0019)。根据生长曲线计算出MiaPaca2和MiaPaca2-5-Fu的倍增时间分别为(39.52±0.32)h、(43.27±0.33)h(P=0.0069),2细胞株的G0/G1期、S期、G2/M期均存在显著性差异(P<0.01)。结论成功建立了对5-Fu耐药的人胰腺癌细胞系MiaPaca2-5-Fu,耐药性能明显、稳定,适合于胰腺癌中5-Fu耐药机制的研究。     

腹膜透析对急性胰腺炎大鼠微循环的影响

微循环障碍是重症急性胰腺炎(SAP)发生、发展的关键,改善患者微循环已成为提高临床疗效的重要途径。笔者以前的研究证实腹膜透析(PD)对SAP有良好的清除炎症介质作用[1-2]。本研究通过测定血栓素A2(TXA2)、6-酮-前列腺素FIa(6-K-PGFIa)及内皮素(ET-1)水平和胰腺、肾、肺、小肠的     

15-脱氧-Δ12,14-前列腺素J2对大鼠酸性胃内容物吸入性肺损伤的保护作用

目的:探讨15-脱氧-Δ~(12,14)-前列腺素J_2(15-deoxy-Δ~(12,14)-prostaglandin J2,15d-PGJ_2)在大鼠酸性胃内容物(combined acid and gastric particles,CAGP)吸入性肺损伤中的保护作用。方法:制备大鼠CAGP模型,将20只大鼠模型随机分为对照组与治疗组,每组10只。对照组:气管内滴注CAGP,腹腔内注射PBS;治疗组:气管内滴注CAGP,腹腔内注射15dPGJ_2。肺损伤后4h和12h,两组各取5只大鼠采集标本,测定动脉血氧分压(PaO_2)、肺组织湿重/干重比值(W/D)、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)总蛋白浓度、BALF白细胞计数和分类计数、BALF和血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度、肺组织苏木精-伊红(H-E)染色炎症评分等指标。结果:与对照组比较,损伤后4h和12h,治疗组大鼠肺组织H-E染色炎症程度减轻,肺组织炎症评分下降,动脉血压分压(PaO_2)升高,肺组织W/D、BALF总蛋白浓度、白细胞总数和中性粒细胞数均下降,BALF和血清TNF-α浓度下降(P0.05)。结论:15d-PGJ_2能减轻大鼠CAGP吸入性肺损伤和肺部炎症水平,改善动脉血氧分压。     

血清葡萄糖氧化酶法新色原物的实验研究

目的以N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐(HDAOS)为新色原物,建立新的葡萄糖氧化酶(GOD)法检测血清葡萄糖。方法用HDAOS代替4-氯酚生成蓝色醌亚胺,测定波长为600 nm。采用本法、葡萄糖氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林-酚(GOD-PAP)法及高效液相色谱(HPLC)法同时测定脂血、溶血、黄疸及外观正常的血清各24份并比较结果,同时对本法进行方法学评价。结果在测定外观正常血清时,3种方法之间差异均无统计学意义(P>0.05);在测定脂血、溶血、黄疸血清时,本法葡萄糖测定结果与GOD-PAP法比较,差异有统计学意义(P<0.05);与HPLC法比较,差异无统计学意义(P>0.05)。本法批内、批间变异系数(CV)均<3.0%;与HPLC法呈良好相关性(r2=0.995 8);在5 min内均可达到反应终点;线性范围为0.20～28.00 mmol/L;血红蛋白<2.0 g/L、乳糜<2.2%、总胆红素<200μmol/L对本法的干扰误差<3%;参考范围为4.10～6.20 mmol/L(男)、4.04～6.15 mmol/L(女);最大吸收波长为595 nm。结论以HDAOS代替4-氯酚生成蓝色醌亚胺,能通过降低脂血、溶血、黄疸光谱吸收的方法消除脂血、溶血和黄疸的干扰,提高GOD法测定葡萄糖的准确性,其使用方法与原有GOD终点法相同。     

一种消除维生素C干扰的血清尿酸检测方法

目的利用4-羟基-2,2,6,6-四甲基-1-氧-哌啶(AAQ-2)作为维生素C(V itC)的熄灭剂,建立双试剂终点法测定血清尿酸(UA),以消除V it C在UA测定中的干扰。方法采用双试剂终点法测定UA。结果方法重复性:日内相对标准差(RSD)为1.50%、1.37%,日间RSD为1.55%、1.40%;平均回收率:99.34%;本法线性可达50~1 550μmol/L。结论本方法可消除血清中高浓度V it C对UA测定的干扰,且适用于自动分析仪。     

~(131)I-17-丙烯胺基-17-脱甲基格尔德霉素毒副作用的初步观察

目的观察131I-17-丙烯胺基-17-脱甲基格尔德霉素(131I-17-AAG)治疗VX2肝癌移植瘤模型的骨髓及肝脏毒副作用。方法16只新西兰白兔,制成VX2荷肝癌模型后,按完全随机原则分为2组,1组(治疗组)8只,10mCi131I-17-AAG耳缘静脉注射;2组(对照组)8只,为未经治疗的荷瘤兔,1、2组荷瘤兔均分别于第1、2周耳缘静脉采血,进行血常规(白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板)及酶学(谷草转氨酶、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、谷氨酰转酞酶)检查。结果2周时白细胞、红细胞和血红蛋白无显著差异(P>0.05),血小板、ALT、AST均有显著差异(P<0.05),碱性磷酸酶、谷氨酰转移酶无显著差异(P>0.05)。结论131I-17-丙烯胺基17脱甲基格尔德霉素(131I-17-AAG)对骨髓造血干细胞及肝功能各项指标有不同程度的影响,且随时间逐步得到恢复。     

AMPA受体拮抗剂对新生鼠缺氧缺血性脑损伤自由基的影响

目的：探讨α-氨基-3-羟基-5-甲基异恶唑-4-丙酸(alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid，AMPA)受体拮抗剂GYKI-52466对缺氧缺血新生鼠脑组织自由基的影响。方法：选用7日龄Wistar大鼠30只．随机分为3组，假手术组，缺氧缺血组和治疗组。治疗组在缺氧缺血后即刻开始予GYKI-5246610mg／kg腹腔注射，每小时注射1次，共4次。缺氧缺血组予等量生理盐水腹腔注射。于处置后24h检测脑组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase SOD)、谷胱甘肽、丙二醛水平。结果：缺氧缺血组脑组织SOD，GSH水平分别为(1．47&;#177;0．15)mkat、(75．03&;#177;5．22)mg／g，明显低于假手术组(2．51&;#177;0．16)mkat、(88．66&;#177;4．50)mg／g(t=3．237-15．573，P均&;lt;0．001)；MDA含量为(8．03&;#177;0．64)pmol／g，较假手术组(5．12&;#177;0．57)pmol／g显著升高(t=6．253～15．373，P&;lt;0．001)。而治疗组脑组织SOD、谷胱甘肽水平分别为(2．73&;#177;0．21)mkat、(83．47&;#177;6．38)mg／g，明显高于缺氧缺血组(P&;lt;0．001；P&;lt;0．005)；丙二醛含量为(6.07&;#177;0．68)pmol／g，较缺氧缺血组显著下降(P&;lt;0．001)。结论：AMPA拮抗剂可通过拮抗氧自由基发挥对缺氧缺血性脑损伤时脑的保护作用。