来氟米特治疗BXSB狼疮鼠的实验研究

目的 探讨来氟米特是否可改善BXSB小鼠的免疫状况和肾脏损害,为临床治疗系统性红斑狼疮(SLE)提供实验依据。方法 3月龄雄性BXSB小鼠分为4组,治疗前后测定尿蛋白;治疗后检测血清尿素氮、肌酐、抗dsDNA抗体以及肾脏免疫复合物。结果 ①各组小鼠治疗前的尿蛋白差异无显著性(P>0.05);②治疗后,来氟米特组的尿蛋白、抗dsDNA抗体明显低于地塞米松组和生理盐水组(P<0.01),而且低于环磷酰胺组,但其组间差异无统计学意义(P>0.05);③来氟米特组的血清尿素氮、肌酐及肾脏免疫复合物均低于其他治疗组(P<0.05或P<0.01)。④与生理盐水组相比,来氟米特组小鼠的生存期明显延长(x²=4.56,P<0.05)。结论 来氟米特可显著改善BXSB小鼠的免疫状况和肾脏功能,能延缓BXSB狼疮鼠的疾病进程。     

来氟米特对BXSB狼疮鼠免疫状况的影响

目的：观察来氟米特对BXSB小鼠免疫状况的影响。方法：48只3月龄的雄性BXSB小鼠分为4组,治疗前后测定24h尿蛋白;治疗后检测血清抗dsDNA抗体以及肾脏免疫复合物。结果：治疗后,来氟米特组的尿蛋白、抗dsDNA抗体明显低于地塞米松和生理盐水组（P〈0.01）,也低于环磷酰胺组,但其组间差异无统计学意义（P〉0.05）;来氟米特组的肾脏免疫复合物低于其他治疗组（P〈0.05或P〈0.01）。与生理盐水组相比,来氟米特组小鼠的生存期明显延长（χ^2=4.56,P〈0.05）。结论：来氟米特可显著改善BXSB小鼠的免疫状况,能延缓BXSB狼疮鼠的疾病进程。     

狼疮肾炎患者尿中NGAL、MCP-1、TGF-β及IL-17的检测

目的探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-17(IL-17)在诊断和监测狼疮肾炎中的意义。方法采用ELISA法检测狼疮肾炎患者66例尿中NGAL、MCP-1、TGF-β及IL-17水平。结果 LN患者尿NGAL[(126.5±95.6)ng/mL]、MCP-1[(1437.6±985.3)ng/mL]、TGF-β[(50.57±27.43)pg/mL]、IL-17 [(110.23±50.12)pg/mL]水平显著高于非LN患者及健康对照组(P0.05),NGAL及MCP-1与SLEDAI(r=0.45,r=0.38)、抗dsDNA IgG(r=0.55,r=0.41)、补体C_3(r=-0.51,r=-0.41)、24 h尿蛋白(r=0.48,r=0.51)密切相关,且NGAL与MCP-1密切相关(r=0.78,P0.01)。结论尿NGAL、MCP-1与LN活动度相关,其在LN的发生、发展中可能起着一定作用,其表达水平有望成为诊断和监测LN的良好指标。     

三七总皂苷对雄激素性脱发小鼠的改善作用及机制研究

目的：明确三七总皂苷（PNS）对雄激素性脱发（AGA）小鼠的治疗效果及其作用机理。方法：40只C57BL/6雄性小鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、三七总皂苷组,每组10只。除空白组外其余各组小鼠皮下注射丙酸睾酮溶液建立雄激素性脱发模型后,每组给予相应试剂或蒸馏水处理。对每组脱发区的毛囊数目、终毛毛囊、毳毛毛囊进行计数并计算终毛/毳毛的比值。测定小鼠血清睾酮、血管内皮生长因子（VEGF）的含量以及小鼠皮肤组织VEGF、转化生长因子-β1 （TGF-β1）表达量。结果：与空白组比较,模型组小鼠背部毛发明显稀疏,总毛囊数目、终毛毛囊数目、终毛/毳毛比值、血清和皮肤组织中VEGF表达量明显下降,皮肤组织中TGF-β1表达量显著上升（均P<0.01）;与模型组比较,三七总皂苷组小鼠毛发增多可见大量新生绒毛;小鼠皮肤总毛囊数目、终毛毛囊数目明显增加,终毛/毳毛比值升高;小鼠血清和皮肤组织VEGF表达量明显升高;TGF-β1表达量降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论：三七总皂苷对C57BL/6AGA小鼠模型有改善作用,其作用机制可能与上调血清和皮肤组织中VEGF表达以及下调皮肤组织中TGF-β1表达有关。     

黄芪甲苷对光老化小鼠皮肤中转化生长因子-β信号通路的影响

目的 探讨黄芪甲苷对皮肤光老化的保护机制.方法 BALB/c小鼠分为模型组、模型+基质组、模型+黄芪甲苷组、正常对照组.RT-PCR测定转化生长因子β受体Ⅱ(TGF-βRⅡ)、Smad 7的mRNA表达水平,免疫组化观察TGF-βR Ⅱ、Smad 7在小鼠皮肤组织中的蛋白表达情况.结果 正常对照组中,TGF-βR Ⅱ、Smad 7的灰度值比值分别为0.5688±0.0439、0.5900 ±0.0585,阳性表达率分别为(53.00 ±4.72)%、(47.50±3.81)%;模型组中,TGF-βR Ⅱ、Smad 7的灰度值比值分别为0.2588±0.0283、0.8637±0.0514,阳性表达率分别为(28.20±5.24)%、(82.06±2.18)%;模型+基质组中,TGF-βR Ⅱ、Smad 7的灰度值比值分别为0.2653±0.0456、0.8553±0.0575,阳性表达率分别为(28.74±2.28)%、(82.62±4.02)%;模型+黄芪甲苷组中TGF-βRⅡ、Smad 7的灰度值比值分别为0.3767±0.0374、0.7131±0.0410,阳性表达率分别为:(41.64±2.59)%、(64.36±2.62)%.皮肤组织中TGF-βRⅡ和Smad灰度值比值4组小鼠间比较,F值分别为80.98和736.80,TGF-βRⅡ和Smad 7的阳性表达率4组小鼠间比较,F值分别为45.36和132.25,P值均<0.01.与正常对照组相比,模型组TGF-βR Ⅱ mRNA和蛋白表达明显降低,Smad 7 mRNA和蛋白表达显著升高(P值均<0.01).与模型组和模型+基质组比较,模型+黄芪甲苷组TGF-βRⅡ mRNA和蛋白表达明显升高,Smad 7 mRNA和蛋白表达显著下调(P值均<0.01).模型+基质组TGF-βR Ⅱ、Smad 7的mRNA和蛋白表达与模型组相比差异无统计学意义(P值均>0.01).结论 黄芪甲苷可以通过上调TGF-βRⅡ表达和下调Smad 7表达而改变TGF-β通路的信号转导参与抗光老化.

Abstract：

Objective To study the protective mechanism of astragaloside on skin photoaging. Methods BALB/c mice were randomly divided into four groups: model group irradiated with ultraviolet rays (UV), model plus matrix group pretreated with the matrix before UV irradiation, model plus astragaloside group pretreated with astragaloside 0.08% cream before UV irradiation, normal control group received no irradiation or pretreatment. After 4-week irradiation, the mice were sacrificed, and skin tissues were resected from the back of these mice. Then, reverse transeription PCR (RT-PCR) and immunohistochemistry were performed to detect the mRNA and protein expression of TGF-βR Ⅱ and Smad 7, respectively. Gray scale ratio was used to represent the mRNA levels of TGF-βR Ⅱ and Smad 7. Results There was a significant difference in the mRNA level (F = 80.98, 736.80, respectively, both P < 0.01) and protein positivity rate (F = 45.36,132.25, respectively,both P < 0.01) of TGF-βR Ⅱ and Smad 7 among the 4 groups. The mRNA level and protein positivity rate of TGF-βR Ⅱwere 0.2588±0.0283 and (28.20 ± 5.24)% respectively in the model group, significantly lower than those in the normal control group[0.5688 ± 0.0439, (53.00 ± 4.72)%, both P < 0.01] and model plus astragaloside group [0.3767 ± 0.0374, (41.64 ± 2.59)%, both P< 0.01]; on the contrary, the mRNA level and protein positivity rate of Smad 7 in the model group [0.8637 ± 0.0514, (82.06 ± 2.18)%] were significantly higher than those in the normal control group [0.5900 ± 0.0585, (47.50±3.81)%, both P < 0.01] and model plus astragaloside group [0.7131 ± 0.0410, (64.36 ± 2.62)%, both P< 0.01]. In the model plus astragaloside group, the mRNA level and protein positivity rate of TGF-βR Ⅱ were significantly higher than in the model plus matrix group [0.2653 ± 0.0456, (28.74 ± 2.28)%, both P < 0.01], while those of Smad 7 were statistically lower than in the model plus matrix group [0.8553 ± 0.0575, (82.62 ± 4.02)%, both P < 0.01]. However,no significant difference was observed in the mRNA level or protein positivity rate of TGF-βR Ⅱ or Smad 7 between the model group and model plus matrix group (all P > 0.01). Conclusion Astragaloside can prevent skin photoaging by the alteration of TGF-β pathway via up-regulating TGF-βR Ⅱ expression and down-regulating Smad 7 expression.     

青蒿琥酯对狼疮样小鼠肾脏白介素6和转化生长因子β的影响

目的 研究青蒿琥酯治疗狼疮样小鼠后肾脏白细胞介素6(IL—6)和转化生长因子β(TGF—β)表达的改变及其临床意义。方法 将亲代BALB/c鼠淋巴细胞经静脉途径输入到(C57BL/6xBALB/x)F1小鼠体内，诱导成狼疮鼠模型。采用免疫组化法检测IL-6和TGF—β在肾脏组织中的表达。结果 狼疮样小鼠肾脏IL-6过度表达，肾小球上皮细胞TGF—β染色程度积分低，肾小球系膜细胞的积分高。青蒿琥酯治疗后，这两种细胞因子的表达都有所改变。结论IIr6和1GF—p可能在狼疮性肾炎的发病过程中起着重要的作用。青蒿琥酯治疗狼疮样小鼠的作用和雷公藤多甙相似。     

狼疮方二号与皮质类固醇合用对狼疮性肾炎作用的实验研究

目的研究中药复方狼疮方二号及皮质类固醇对BXSB狼疮小鼠肾脏中免疫复合物的影响,探讨其对狼疮性肾炎的作用机制。方法将BXSB狼疮模型鼠随机分成4组:空白对照组、中药组、西药组、中西药合用组。四溴酚蓝指示剂法测定尿蛋白含量;双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清中抗ds-DNA抗体含量;直接免疫荧光法测定小鼠肾脏中IgG含量;间接免疫荧光法测定小鼠肾脏中补体C3的含量,并对小鼠肾做HE染色,观察各组小鼠肾皮质及髓质的形态学改变。结果3个给药组尿蛋白含量均与空白对照组有显著性差异(P<0.05)。3个给药组均能显著降低自身抗体(ds-DNA)水平,使其转为阴性(P<0.01)。各给药组均能降低小鼠肾脏IgG、补体C3的荧光强度,与空白对照组相比有显著差异(P<0.05),中西药合用组有非常显著差异(P<0.01)。病理检查发现各给药组均可明显减轻肾损害,其中中西药合用组最为明显。结论狼疮方二号与强的松均对BXSB狼疮小鼠肾脏有明显的治疗作用,中西药合用组疗效优于中药、西药组。     

阿维A通过下调Th17细胞相关因子改善硬皮病小鼠模型皮肤及肺组织纤维化程度

目的通过对系统性硬皮病(systemic scleroderma,SSc)小鼠模型外周血、皮肤和肺部Th17和Treg细胞及相关细胞因子表达的检测,探讨阿维A治疗SSc小鼠皮肤和肺纤维化病变可能的作用机制。方法 32只BALB/c小鼠随机均分为PBS对照组、博来霉素模型组、阿维A低剂量(6mg/kg)组和高剂量(12mg/kg)组,给药4周后处死。观察小鼠皮肤及肺部炎症和纤维化的病理切片,流式细胞仪检测外周血中Th17和Treg在CD4~+T细胞比例,通过ELISA检测小鼠血清IL-17A,IL-10,IL-6,TGF-β1的水平,RT-PCR检测皮肤和肺组织中IL-17A,RORγT,IL-6,TGF-β1,Fox P3 mRNA的表达,并分析这些结果的相关性。结果与模型组相比,高/低浓度阿维A组小鼠皮肤厚度和炎症评分均有明显的下降(P0.01),肺部的纤维化评分和炎症评分也有显著降低(P0.05)。流式细胞仪检测发现,经阿维A干预的两组小鼠外周血中Th17细胞比例都有显著增加(P0.01),而Treg细胞比例的变化差异无统计学意义(P0.05)。ELISA检测发现,与模型组比较,治疗组小鼠外周血中IL-17A,TGF-β1,IL-6水平均有显著下降(P0.05),而IL-10的表达均未发生明显变化(P0.05)。RT-PCR检测发现,治疗组皮肤和肺组织中Th17细胞相关因子IL-17A,RORγT,IL-6,TGF-β1表达水平显著下降(P0.05),而皮肤和肺组织中Treg相关的Fox P3 Treg mRNA表达在阿维A干预前后没有明显变化(P0.05)。结论阿维A能够通过降低Th17相关细胞因子的水平,减轻免疫炎症反应,改善硬皮病小鼠皮肤和肺组织纤维化的程度。     

TGF-β1、MMP-2、TIMP-2与子宫脱垂发生的相关性

目的:检测盆腔器官脱垂(POP)患者子宫骶韧带组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)蛋白的表达;分析TGF-β1、MMP-2、TIMP-2各变量之间的相关性;阐明氧化应激可能是POP的发生发展的诱导因素。方法:Western blot检测POP和非POP正常患者子宫骶韧带组织中TGF-β1、MMP-2、TIMP-2蛋白的表达。分析TGF-β1、MMP-2、TIMP-2各变量之间的相关性。结果:Western blot技术检测结果显示,与非POP正常组相比,POP组子宫骶韧带组织中TGF-β1及TIMP-2蛋白表达水平下降,而MMP-2蛋白表达水平增加,使得MMP-2/TIMP-2比值增大,上述差异有统计学意义(P<0.01)。变量间相关性分析结果:POP组组织中TGF-β1蛋白表达与MMP-2蛋白表达呈负相关,(r=-0.463,P<0.05),而TGF-β1蛋白表达与TIMP-2蛋白表达之间呈正相关,相关具有统计学意义(r=0.743,P<0.05);而非POP正常组组织中TGF-β1蛋白表达与MMP-2及TIMP-2蛋白表达均无显著相关性(r=0.183,P>0.05;r=0.342,P>0.05)。结论:TGF-β1、MMP-2、TIMP-2可能通过机械力诱发的氧化应激反应对盆底组织的刺激作用;而TGF-β1在氧化应激中有保护作用。     

黄芪甲苷对光老化小鼠皮肤中转化生长因子-β信号通路的影响北大核心CSCD

目的探讨黄芪甲苷对皮肤光老化的保护机制。方法BALB／c小鼠分为模型组、模型＋基质组、模型＋黄芪甲苷组、正常对照组。RT—PCR测定转化生长因子β受体Ⅱ（TGF—βRⅡ）、Smad7的mRNA表达水平,免疫组化观察TGF-βRⅡ、Smad7在小鼠皮肤组织中的蛋白表达情况。结果正常对照组中,TGF-βRⅡ、Smad7的灰度值比值分别为0．5688±0．0439、0．5900±0．0585,阳性表达率分别为（53．00±4．72）％、（47．50±3．81）％;模型组中,TGF-βRⅡ、Smad7的灰度值比值分别为0．2588±0．0283、0．8637±0．0514,阳性表达率分别为（28．20±5．24）％、（82．06±2．18）％;模型＋基质组中,TGF-βRⅡ、Smad7的灰度值比值分别为0．2653±0．0456、0．8553±0．0575,阳性表达率分别为（28．74±2．28）％、（82．62±4．02）％;模型＋黄芪甲苷组中TGF-βRⅡ、Smad7的灰度值比值分别为O．3767±0．0374、0．7131±0．0410,阳性表达率分别为：（41．64±2．59）％、（64．36±2．62）％。皮肤组织中TGF-βRⅡ和Smad灰度值比值4组小鼠间比较,F值分别为80．98和736．80,TGF-βRⅡ和Smad7的阳性表达率4组小鼠间比较,F值分别为45．36和132．25,P值均〈0．01。与正常对照组相比,模型组TGF-βRⅡmRNA和蛋白表达明显降低,Smad7mRNA和蛋白表达显著升高（P值均〈0．01）。与模型组和模型＋基质组比较,模型＋黄芪甲苷组TGF-βRⅡmRNA和蛋白表达明显升高,Smad7mRNA和蛋白表达显著下调（P值均〈0．01）。模型＋基质组TGF-βRⅡ、Smad7的mRNA和蛋白表达与模型组相比差异无统计学意义（P值均〉0．01）。结论黄芪甲苷可以通过上调TGF-βRⅡ表达和下调Smad7表达而改变TGF—β通路的信号转导参与抗光老化。     

转化生长因子-β1和白介素-12p40在过敏性紫癜发病中的作用

目的:探讨转化生长因子(TGF)-β1和白介素12p40亚单位(IL-12p40)在过敏性紫癜(AP)发病中的作用及意义。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测AP患者(急性期49例,恢复期15例)与30名正常人TGF-β1和IL-12p40水平。结果:①急性期AP患者血清TGF-β1显著高于正常人(P<0.05),患者组治疗前高于治疗后(P<0.01),混合型组TGF-β1值显著升高(P<0.05);②复发组IL-12p40显著高于首发组和对照组(P<0.01)。结论:TGF-β1和IL-12p40可能是介导过敏性紫癜血管炎症损伤过程中的重要细胞因子;TGF-β1与AP的病情严重程度和病程有显著相关性,IL-12p40检测对于监测AP复发有一定意义。     

TGF-β/Smad信号转导通路对紫外线致人工皮肤光损伤中MMP-1、pro-collagen I mRNA表达影响的初步研究

目的 探讨人工皮肤光损伤中TGF-β/Smad信号转导通路与基质金属蛋白酶1及Ⅰ型前胶原蛋白的相互作用.方法 以紫外线照射人工皮肤后,通过Real-Time RT-PCR法(荧光染料掺入法)检测其中基质金属蛋白酶1、Ⅰ型前胶原蛋白、TGFβR Ⅰ及TGFβRⅡmRNA的表达量.结果 紫外线使人工皮肤中基质金属蛋白酶1(MMP-1)的mRNA表达量明显增加,而Ⅰ型前胶原蛋白mRNA的表达下调(P＜0.05),TGFβRⅡmRNA表达显著下调(P＜0.01);加入TGF-β1后MMP-1表达显著下调(P＜0.01),Ⅰ型前胶原蛋白及TGFβRⅡmRNA表达显著增高(P＜0.01);而UV照射后8小时加入TGF-β1,MMP-1表达量较对照组高(P＜0.05),Ⅰ型前胶原蛋白及TGFβRⅡmRNA表达量均较对照组低(P＜0.05).结论 UV可以抑制人工皮肤中Ⅰ型前胶原mRNA的表达、上调MMP-1的表达,而这种调控作用可能与TGF-βRⅡ的表达受抑制,TGF-β/Smad信号传导通路被削弱有关.     

斑秃患者外周血CD4~+ CD25~+ Treg细胞计数及TGF-β_1的表达

目的通过检测斑秃患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞计数、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达水平,探讨斑秃的发病机制。方法采用流式细胞技术检测50例未治疗的斑秃患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞的水平变化,ELISA法检测血清中TGF-β1含量,并进行相关性分析,以30例健康者作为正常对照。结果斑秃患者组外周血CD4+CD25+Treg细胞占T淋巴细胞的比率和血清TGF-β1浓度均低于正常对照组(P均<0.01),且重型患者组显著低于正常对照与局限型患者组(P<0.01),局限型患者组低于正常对照组(P<0.05)。斑秃患者外周血CD4+CD25+Treg细胞水平,血清中TGF-β1含量均与SALT评分呈显著负相关(r=-0.566,-0.471;P均<0.01),而两者呈显著正相关(r=0.584,P<0.01)。结论斑秃患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞与血清中TGF-β1呈一定相关性,且两者与斑秃病情的严重程度相关;CD4+CD25+Treg细胞的数量减少和TGF-β1表达降低可能与斑秃的细胞免疫失调有关。     

感染不同亚型HPV的尖锐湿疣组织COX-2和TGF-β1水平检测

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)和转化生长因子-β1(TGF-β1)在感染不同亚型HPV的尖锐湿疣(CA)组织中的表达及与CA的关系。方法用免疫组化方法(SP法)检测COX-2和TGF-β1在30例HPV6/11阳性(低危型组)和30例HPV16/18阳性(高危型组)的尖锐湿疣组织中的水平,同时以25例健康男性正常包皮组织作为对照。结果在低危型组和高危型组CA组织中,COX-2阳性率均为66.7%,正常对照组COX-2阳性率为0%,3组阳性表达强度比较差异有统计学意义(P<0.05);TGF-β1在低危型组、高危型组及正常对照组中全部表达,阳性表达率均为90.0%,3组阳性表达强度比较差异有统计学意义(P<0.05)。在CA组织中COX-2和TGF-β1两者呈显著正相关(P<0.05)。结论感染不同亚型HPV的CA组织中存在COX-2和TGF-β1过表达,且表达水平不同,COX-2和TGF-β1表达水平可能与CA增生程度关系密切。     

扶正汤对MRL/1Pr红斑狼疮小鼠模型肾脏作用的实验研究

目的研究中药扶正汤对MRL/1Pr红斑狼疮小鼠肾脏的影响。方法将MRL/1Pr模型小鼠随机分成4组:0.9%生理盐水对照组(A组)、西药组(B组)、中药组(C组)、中西医结合组(D组),治疗6周。每两周称重量一次;邻苯三酚红-钼络合显色法测定24h尿蛋白含量;直接免疫荧光法测定小鼠肾脏IgG含量;小鼠肾脏HE染色,观察各组小鼠肾组织的形态学改变。结果治疗后A、C、D组体重较治疗前明显增加(P0.01),B组体重较治疗前增加不明显并较其它三组下降(P0.01)。3个给药组尿蛋白含量均有明显下降(P0.01)。C组尿蛋白缓慢下降,B组后期下降不明显。各给药组均能降低小鼠肾脏IgG沉积的荧光强度和面积,与A组相比有显著差异(P0.01),B组荧光强度明显强于C和D组(P0.01)。病理检查发现各给药组均使肾损害明显减轻,D组最为明显。结论扶正汤对狼疮小鼠肾脏有明显的治疗作用,中西药合用和中药组明显优于西药组。     

狼疮方3号颗粒对狼疮模型鼠血清白介素6及脾脏T淋巴细胞亚群的影响

目的研究中药复方狼疮方3号(LCF-3)对BXSB狼疮小鼠血清白介素6(IL-6)以及脾脏T淋巴细胞亚群的作用,探讨其对系统性红斑狼疮(SLE)的作用机制.方法将BXSB狼疮模型鼠随机分成4组:空白对照组、中药组、西药组、中西药合用组.双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清中IL-6的含量;流式细胞术测定小鼠脾脏T淋巴细胞亚群的阳性率.结果 3个给药组均可显著降低IL-6的含量;各给药组对CD3 、CD4 、CD8 T细胞均有提升作用,但中药组对CD4 T细胞的提升作用与对照组相比没有统计学差异(P＞0.05),对CD8 T细胞有非常明显的提升作用(P＜0.01).结论中药复方LCF-3与西药泼尼松均对BXSB狼疮小鼠有明显的治疗作用,中西药合用组疗效优于中药、西药组.     

单核细胞趋化蛋白-1 DNA疫苗治疗姥鲛烷诱导BALB/c狼疮鼠模型的实验研究

目的 应用单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）基因片段的DNA疫苗免疫姥鲛烷诱导的BALB/c狼疮鼠模型,研究MCP-1 DNA疫苗对狼疮鼠模型的免疫抑制作用以及对肾脏的保护效果。方法 BALB/c小鼠随机分为4组：狼疮鼠模型组、疫苗组、空质粒组、正常对照组。制备编码MCP-1基因片段的DNA疫苗,接种于疫苗组。测定各组小鼠体质量、24 h尿蛋白定量,ELISA法测定血清MCP-1抗原和抗体水平,免疫荧光法检测血清ANA;HE染色光镜下观察小鼠肾脏病理变化,免疫组化检测MCP-1、CD68在肾脏内的表达。结果 24周时狼疮鼠模型组、疫苗组、空质粒组和正常对照组间体质量和24 h尿蛋白定量差异有统计学意义,F值分别为20.31,6.74,P值均 < 0.05,LSD检验示疫苗组与狼疮鼠模型组和空质粒组之间差异有统计学意义（P值均 < 0.01）。狼疮鼠模型组、疫苗组、空质粒组和正常对照组血清MCP-1抗原水平分别为（572.6 ± 58.55）、（169.52 ± 28.71）、（601.98 ± 83.43）和（61.11 ± 66.12） ng/L,差异有统计学意义（F = 143.09,P < 0.05）,LSD检验示疫苗组与狼疮鼠模型组、空质粒组之间差异有统计学意义（P < 0.01）;四组的血清MCP-1抗体水平分别为（357.88 ± 82.41）、（770.14 ± 220.91）、（294.25 ± 177.22）和（129.73 ± 168.24） ng/L,方差分析示F = 15.81,P < 0.01,LSD检验示疫苗组与狼疮鼠模型组、空质粒组和正常对照组之间差异有统计学意义。ANA抗体阳性率四组间差异无统计学意义。疫苗组和正常对照组与狼疮鼠模型组和空质粒组比较,肾脏损伤明显减轻,肾脏内MCP-1和CD68阳性细胞明显减少。结论 MCP-1质粒DNA疫苗能够有效抑制狼疮鼠模型血清中MCP-1抗原表达,并诱导MCP-1抗体水平升高。     

长波紫外线照射对硬皮病鼠模型皮肤硬化程度的影响

目的 探讨长波紫外线照射对硬皮病鼠模型皮肤硬化程度的影响。方法 小鼠局部注射博来霉素建立硬皮病鼠模型后，随机分成三组，每组3只小鼠，其中一组小鼠不照射UVA1，另外两组小鼠分别每次照射UVA1 12 min（5.32 J/cm2）、25 min（11.1 J/cm2），连续20次，累积剂量分别为106.4和222 J/cm2。另一批小鼠随机分两组，每组3只小鼠，每日注射博来霉素同时每日照射UVA1剂量分别为5.32 J/cm2和11.1 J/cm2，连续20次，累积剂量分别为106.4和222 J/cm2。结果 和未经UVA1照射的硬皮病鼠模型比较，接受不同剂量UVA1照射后的两组硬皮病小鼠皮损区表真皮厚度显著降低（P ＜ 0.05），羟脯氨酸含量显著降低（P ＜ 0.05）， 真皮中转化生长因子β（TGF-β）表达降低（P ＜ 0.05），基质金属蛋白酶1（MMP-1）表达升高（P ＜ 0.05）。两组小鼠注射博来霉素同时接受不同剂量UVA1照射后皮损处表真皮厚度、TGF-β表达、MMP-1表达差异均无统计学意义（P ＞ 0.05）。结论 UVA1照射博来霉素诱导的硬皮病小鼠模型均可导致皮损处能分解胶原纤维的MMP-1表达增加，促进胶原合成的TGF-β表达降低，胶原含量降低，表真皮厚度降低。     

自拟固胎煎对复发性流产小鼠外周血IL-6、IL-10、IL-17及TGF-β1的影响

目的观察自拟固胎煎对复发性流产模型小鼠外周血白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达及对妊娠结局的影响。方法选取SPF级CBA/J雌鼠(n=48)、BALB/C雄鼠(n=4)、DBA/2雄鼠(n=20)作为研究对象。采用CBA/J雌鼠×BALB/c雄鼠建立正常妊娠模型,以CBA/J雌鼠×DBA/2雄鼠建立复发性流产模型,复发性流产模型孕鼠随机分为中药组、地屈孕酮组和复发性流产组,且将中药组分为高剂量亚组、中剂量亚组、低剂量亚组,正常妊娠组和复发性流产组给予生理盐水,中药高剂量亚组、中剂量亚组、低剂量亚组依次给予28.5g/kg、14.25g/kg、7.125g/kg自拟固胎煎汤剂,地屈孕酮组给予3.0mg/kg地屈孕酮溶液,连续灌胃2周,每天1次。给药结束后处死并解剖小鼠,观察子宫胚胎数量并计算胚胎丢失率,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血IL-6、IL-10、IL-17及TGF-β1的表达水平。结果与复发性流产组比较,中药中剂量亚组、高剂量亚组和地屈孕酮组胚胎丢失率均显著降低,差异具有统计学意义(P0.05);与复发性流产组比较,中药中剂量亚组、高剂量亚组和地屈孕酮组的IL-6和IL-17的表达均显著降低,IL-10和TGF-β1的表达均显著升高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论自拟固胎煎可能通过上调IL-10、TGF-β1的表达水平,下调IL-6、IL-17的表达水平,诱导免疫耐受,减少胚胎丢失率,从而改善妊娠结局。     

温针灸对卵巢功能减退大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的 探讨温针灸通过调节转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号通路对卵巢功能减退(DOR)大鼠卵巢功能的改善效果。方法 采用雷公藤多苷片灌胃法复制DOR模型,温针灸给予关元、气海、中极及双侧肾俞治疗14 d后,采用阴道脱落细胞学检查及HE染色法观察大鼠动情周期和卵巢组织病理形态,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清雌二醇(E₂)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、抗米勒管激素(AMH)水平,采用免疫组织化学法检测卵巢组织TGF-β1的表达,采用Western blot及实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测卵巢组织TGF-β1/Smads通路相关蛋白和mRNA的表达。结果 经温针灸治疗后,DOR大鼠动情周期紊乱率显著降低,卵巢内成熟卵泡数显著增多(P<0.05);血清中E₂、AMH水平显著增加,LH、FSH水平显著降低(P<0.05);显著上调了卵巢组织TGF-β1的蛋白表达及p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3比值,下调了Smad7的蛋白表达(P<0.05);同时显著...