肾移植术后动态监测细胞因子的临床意义

目的：探讨TNF-a、IL-6在肾移植术后急性排斥反应、感染、GsA中毒时的变化。方法：采用ELISA法,动态监测106例患者移植前后血清TNF-a、IL-6豚尿液TNF-a。结果：肾移植术前TNF-a、IL-6与对照组无显著性差别,术后第1天明显升高,TNF-a与IL-6分别于1w及2w左右降至术前水平。急性排斥反应前1～3d血清TNF-a、IL-6及尿液TNF-a即有不同程度升高 ,抗排斥治疗有效后迅速下降。并发感染时血清TNF-a、IL-6显著升高,尿液TNF-a无升高,CsA中毒时均无明显变化。结论：结合临床动态监测血清TNF-a、IL-6及尿TNF-a可做为辅助诊断急性排斥反应的免疫生物学指标。     

肾移植术后血清sICAM-1和sVCAM-1的动态监测及临床意义

目的：探讨肾移植术后监测血清可溶性细胞问粘附分子-1(sICAM-1)和可溶性血管细胞粘附分子-1(sVCAM-1)的临床意义。方法：采用ELISA法，动态监测86例肾移植患者手术前后血清sICAM-l和sVCAM-1的变化。结果：移植术前sICAM-1、sVCAM-l与对照组无显著性差别，术后均明显升高，于第3天时达到高峰，l周至2周后降至术前水平。发生急性排斥反应前l-3天血清sICAM-1、sVCAM-1即开始升高，抗排斥治疗有效后逐渐下降。并发感染时sICAM-1、sVCAM-l显著升高，CsA中毒时无明显变化。结论：动态监测血清sICAM-1、sVCAM-l可做为早期辅助诊断急性排斥反应的免疫学指标，有助于急性排斥反应与CsA肾中毒的鉴别。     

肾移植受者血清TNF-α、IL-6和sIL-2R水平变化及临床意义

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)在肾移植术后急性排斥反应中的变化。方法:采用固相酶标记化学发光免疫分析技术动态监测36例患者肾移植前后血清TNF-α、IL-6和sIL-2R水平,并结合临床资料作全面分析。结果:肾移植受者术后第1天血清TNF-α、IL-6和sIL-2R均明显升高,其中移植稳定组血清IL-6和sIL-2R第1天出现峰值后开始下降,而TNF-α则在术后5天达峰值后开始下降,至第10天均接近术前水平。急性排斥组血清TNF-α、IL-6和sIL-2R水平与肾功能稳定组比较,差异有显著性(P<0.05),抗排斥治疗有效后迅速下降。而环孢素A中毒组与稳定组比较,差异无显著性(P<0.05)。结论:肾移植术后受者血清TNF-α、IL-6和sIL-2R水平的检测,可在一定程度上反映肾移植受者的免疫反应状态,并为急性排斥反应的监测和诊断提供客观依据。     

肾移植受者血清sFas和sFasL变化及在早期急性排异反应预测中的应用

背景：细胞凋亡在移植免疫和移植物功能丧失发生过程中起十分重要的作用,其中Fas/FasL系统被认为是细胞凋亡参与肾移植的急性排异反应过程的主要途径之一。 目的：分析肾移植受者术后血清sFas和sFasL水平变化及其在预测早期急性排异反应中的应用价值。 方法：肾移植受者80例分为肾功能稳定组(49例)、急性排斥反应组(23例)和环孢素A中毒组(8例)。另选择性别、年龄与肾移植受者相匹配的健康体检者50例为对照组。肾移植受者术后均常规使用环孢素A+硫唑嘌呤+泼尼松三联免疫抑制治疗。发生急性排斥反应时给予每日甲基强的松龙6~8 mg/kg冲击治疗,3 d为1个疗程。采用ELISA法检测患者手术前后的血清sFas和sFasL水平。 结果与结论：肾移植组患者手术前的血清sFas和sFasL水平均明显高于对照组(P  < 0.05)。急性排斥反应组血清sFas、sFasL水平高于相同时间段肾功能稳定组(P < 0.05)。环孢素A中毒的肾移植患者术后各时间点血清sFas、sFasL水平变化与肾功能稳定组基本相同,差异无显著性意义。提示动态监测血清sFas、sFasL水平可能对早期诊断及鉴别诊断肾移植急性排斥反应具有重要参考价值。     

大鼠肾移植急性排斥反应过程中 IL-17 表达及其意义

目的:探讨IL-17在大鼠肾移植急性排斥反应过程中的表达特点及其意义。方法:将大鼠随机分为正常对照组、同系基因对照组、同种异体移植组、免疫抑制剂干预组,并建立肾移植急性排斥反应模型,用RT-PCR及免疫组织化学方法检测急性排斥时IL-17在肾组织中的表达。结果:同种异体移植组在移植后第3天、5天和7天,移植肾IL-17均明显升高,与其他组相比,均有统计学意义(P0. 05),其中以第5天为最高,差异具有统计学有意义(P0. 05)。结论:IL-17参与了大鼠肾移植急性排斥反应的发生,并为早期事件,IL-17检测可能为人类肾移植早期急性排斥反应的诊断和治疗提供理论依据。     

肾移植患者手术前后血清IL-18的变化及意义

目的:探讨肾移植患者手术前后血清IL-18的变化及临床意义。方法:采用ELISA检测患者手术前与手术后5d、10d、20d血清中IL-18的含量。结果:肾移植患者手术前IL-18水平与正常对照组比较明显升高(P<0.01);急性排斥组手术后5d、10d与其手术前比较IL-18含量无显著性变化(P>0.05),手术后20d明显高于手术前、手术后5d、10d(P<0.01);稳定组手术后5d与其手术前比较IL-18含量明显增加(P<0.01),10d、20d则下降至手术前水平(P>0.05);急性排斥组与稳定组手术后20d比较差异非常显著(P<0.01)。结论:血清IL-18测定是判断急性排斥反应的一个较好的参考指标。     

血清可溶性血管细胞粘附分子1测定在肾移植急性排斥反应中的临床意义

采用酶联免疫吸附法（ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） 监测５６ 例肾移植患者术后血清可溶性血管细胞粘附分子 １ （ｓ Ｖ Ｃ Ａ Ｍ １ ） 水平的变化,旨在探讨其在肾移植术后免疫学监测中的价值。结果发现： 肾移植患者术后ｓ Ｖ Ｃ Ａ Ｍ １ 水平呈规律性变化, 急性排斥反应组ｓ Ｖ Ｃ Ａ Ｍ １ 水平明显高于移植肾功能稳定组和环胞素 Ａ（ Ｃｓ Ａ） 肾中毒组, 差异非常显著（ Ｐ＜ ００１ ） ; 与排斥反应前水平比较, 差异亦非常显著（ Ｐ＜ ００１ ） 。对激素治疗敏感的排斥反应, ｓ Ｖ Ｃ Ａ Ｍ １ 逐渐降至正常水平; 耐激素的排斥反应应用 Ａ Ｔ Ｇ 治疗后, ｓ Ｖ Ｃ Ａ Ｍ １ 在排斥反应后１ 个月内仍维持在较高水平。 Ｃｓ Ａ 肾中毒组, ｓ Ｖ Ｃ Ａ Ｍ １ 水平无明显变化。结果表明,肾移植术后动态监测ｓ Ｖ Ｃ Ａ Ｍ １ 水平的变化, 有助于急性排斥反应的诊断和鉴别诊断, 有助于指导临床治疗。     

肾移植术后检测可溶性白介素2受体和肿瘤坏死因子的临床意义

本文用ＥＬＩＳＡ和放射免疫分析检测了５７例肾移植患者血清中可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）水平。患者术前ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ明显高于正常对照组，术后两者都逐渐下降，排斥反应时升高，排斥组无排斥组差异显著。ＣｓＡ中毒组与无排斥组无明显差异，因此ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ水平监测也可区别ＣｓＡ中毒和排斥反应。动态检测ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ水平可作为肾移植后判断疗效和预后的重要观察     

同种肾移植患者血清IL－6水平变化及其临床意义

采用ＩＬ－６依赖性细胞株Ｂ９．９增殖反应ＭＴＴ法测定了１７例同种肾移植患者术前和术后血清中ＩＬ－６水平。结果表明，患者术前血清中ＩＬ－６水平均较低，术后两天，血清ＩＬ－６水平显著升高，术后无排斥征象、移植肾功能稳定者，血清中ＩＬ－６水平逐渐下降，３周时基本下降至正常水平。而术后发生急性排斥反应者，血清中ＩＬ－６水平急剧升高。可见检测血清中ＩＬ－６水平变化可作为一项早期诊断急性排斥反应的参考指标。     

肾移植排斥反应sIL—2R动态检测

应用ELISA 方法于术前、术后2天、10天、30天动态观察了16例肾移植患者血清中sIL-2R 水平,并与正常人进行了比较。结果显示,患者术前sIL-2R 水平明显高于正常人;术后发生排斥反应者sIL-2R 水平仍很高,未排斥者sIL-2R 下降明显,二者有显著性差异(P<0.01)。以术前水平为参照,动态检测sIL-2R 下降百分率,对早期发现肾移植急性排斥反应具有重要意义。     

E-rosette forming cell numbers in the blood of human renal allograft recipients.

The incidence of circulating T lymphocytes (ET-RFC) and a sub-population of T lymphocytes (EE-RFC) were monitored in the blood of seventy-one cadaver renal allograft recipients for the first 2 months after transplantation. In patients with uneventful post-operative courses, the incidence of both ET-RFC and EE-RFC fell promptly upon initiation of immunosuppression returning approximately to pre-operative levels 3-5 weeks after operation; the fall in cell numbers was greatest in those patients receiving adjunct ALG therapy. With the onset of an acute rejection episode, the EE-RFC level rose quickly eventually exceeding the pre-operative level; in 88% (thirty episodes) of cases this rise occurred 1-6 days before clinical diagnosis of rejection and in 12% of cases on the same day as clinical diagnosis. The incidence of ET-RFC rose in conjunction with some cases of acute rejection but remained unchanged in other cases. It is suggested that measurement of the incidence of EE-RFC in blood is valuable in predicting the onset of acute rejection and for the differential diagnosis of acute rejection and ischaemic renal damage.     

肾移植急性排斥反应时B7-2/CD28信号通路的表达*☆

背景：以往动物研究表明,在器官移植急性排斥反应时共刺激分子的表达与急性排斥反应密切相关。 目的：观察急性排斥反应时患者移植肾脏组织和外周血中B7-2/CD28信号通路的表达。 方法：对53例同种异体肾移植患者于移植前1 d、移植后1,3,7,14,21,28 d分别取外周血以及在临床诊断急性排斥反应当天和抗排斥治疗1周后额外采血,用流式细胞仪检测共刺激分子B7-2/CD28在外周血淋巴细胞中的表达;同时,行经皮肾穿刺活检供肾修整结束时、移植后7 d、1个月、6个月、1年或以上获取活检肾脏组织,用免疫组织化学方法检测活检组织中B7-2/CD28的表达情况。 结果与结论：移植后1,3 d内所有患者外周血中CD28+,CD4+/CD28+,CD8+/CD28+细胞比率均有显著下降(P < 0.05),一二周后恢复到术前水平;移植后7 d未发生急性排斥反应的患者肾脏组织B7-2阳性表达率显著上升(P < 0.05),1个月后下降至移植前水平(P > 0.05)。移植后发生急性排斥反应的患者外周血CD28+,CD4+/CD28+,CD8+/CD28+细胞比率及肾脏组织B7-2阳性表达率明显上升(P < 0.05),经抗排斥治疗1周后均好转。结果证实,在肾移植后出现急性排斥反应时,肾脏组织以及外周血中共刺激分子B7-2/CD28的表达上调与急性排斥反应的发生密切相关。       

Interleukin 18 (IL-18) upregulation in acute rejection of kidney allograft

Interleukin 18 (IL-18) is a potent proinflammatory cytokine involved in the host defence by upregulating both innate and acquired immune responses and may be of particular importance also in mechanisms of kidney allograft rejection. Immunohistochemical staining of protocol biopsies showed constitutive IL-18 expression in the epithelium of distal tubules with the induction of immunoreactivity in acute rejection patients where also proximal tubules, infiltrating leukocytes, and endothelium were strongly positive. Furthermore, serum levels of IL-18 were significantly elevated in patients with acute rejection of kidney allograft (1247+/-389 pg/l) as compared to patients with uncomplicated outcome of kidney transplantation (444+/-164 pg/l) and subjects with acute tubulointerstitial nephropathy (385+/-155 pg/l, p<0.0001 for both comparisons). Tissue culture model of renal epithelial cells expressed IL-18 mRNA constitutively and released mature IL-18 in response to TNF-alpha and IFN-gamma. We assume that upregulation of epithelial IL-18 plays an important role in immune and immunopathological reactions in renal parenchyma and contributes to rejection mechanisms of kidney allograft.     

流式细胞技术检测肾移植后外周血白细胞介素18受体的表达

背景：细胞因子常常在肾移植后排斥反应早期即被释放,因此可以作为排斥反应的早期诊断指标。 目的：观察尿毒症患者肾移植前后外周血白细胞介素18受体(IL-18R)表达的变化。 方法：将2004-09/2005-09在解放军济南军区总医院进行的肾移植尿毒症32例患者分为肾功能稳定组24例,急性排斥组8例。另选择以往手术后移植肾功能正常,平均存活时间4年的肾移植患者12例为长期存活组。同期查体未发现异常健康自愿者7例为健康对照组。提取受试者的外周血淋巴细胞,加入双荧光标记的鼠抗人CD4/IL-18Rα及CD8/IL-18Rα单克隆抗体,利用流式细胞仪进行测定。 结果与结论：流式细胞技术检测CD4/IL-18Rα及CD8/IL-18Rα在尿毒症组的阳性率明显高于健康对照组(P=0.02,P=0.04)。肾功能稳定组及长期存活组外周血CD4/IL-18Rα及CD8/IL-18Rα的表达明显低于急性排斥组(P < 0.05)。急性排斥反应组激素冲击治疗后其阳性率明显低于激素冲击治疗前(P < 0.05)。3例耐激素排斥反应者IL-18R表达值高于5例激素治疗有效者。结果显示外周血CD4/IL-18Rα及CD8/IL-18Rα的变化可以较早预测肾移植后急性排斥反应,预测肾移植后恢复情况,评估排斥反应对激素治疗的效果。     

移植肾急性排斥与移植前后血清细胞因子表达的变化

背景：目前异体器官移植后细胞因子变化己经有较多的报道,但有关细胞因子在肾移植患者中的动态变化规律及其与移植急性排斥反应的关系鲜有报道。 目的：观察肾移植受者移植前后血清细胞因子表达变化,并探讨其与移植肾急性排斥的关系。 方法：选择2008年9月至2011年9月武警后勤学院附属医院收治的接受肾移植患者48例,均为首次肾移植,分为肾功能稳定组和急性排斥反应组。另选择健康体检者30人为对照组。 结果与结论：肾功能稳定组、急性排斥反应组移植前1 d血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素8水平与对照组相比差异无显著性意义(P > 0.05)。肾功能稳定组血清3种细胞因子水平均于移植后第1天即开始逐渐升高,在3 d时显著升高(P < 0.05),5 d时开始下降,7 d下降显著(P < 0.05),14 d左右趋于降至移植前水平,21-28 d表达稳定在移植前水平。急性排斥反应组血清3种细胞因子水平于移植后第1天即显著升高(P < 0.05),7-14 d维持在高水平 (P < 0.05),21-28 d稳定下降,但仍明显高于移植前(P < 0.05)。相同时间段,急性排斥反应组血清3种细胞因子水平均明显高于肾功能稳定组(P < 0.05)。提示移植后血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素8动态水平变化在一定程度上反映肾移植受者的免疫反应状态,可作为辅助早期诊断急性排斥反应的免疫生物学指标。     

Combination of IL-1 Receptor Antagonist, IL-20 and CD40 Ligand for the Prediction of Acute Cellular Renal Allograft Rejection

Purpose

The outcome of renal transplantation is difficult to predict, even with an allograft biopsy. The aim of this study was to develop a sensitive, specific and noninvasive method for prediction of acute cellular rejection (ACR).

Methods

Luminex analysis was used to determine the levels of 95 cytokines/chemokines and their soluble receptors in sera from recipients with: ACR (in the first month post-transplantation, before and during rejection, and after rejection reversal); stable allograft function; delayed graft function (DGF); pulmonary infection. Evaluation of significant differential protein expression in ACR patients compared with stable allograft controls revealed a three-analyte combination as a marker of renal transplantation outcome. The predictive value of this combination was further validated in DGF and infection groups and in a blind binary code study of 24 additional serum samples.

Results

Significant differential expression was detected in 26 proteins expressed in patients during the period preceding an ACR episode compared with stable controls. A blood test for discrimination of such patients was developed based on the simultaneous quantification of three analytes (IL-1 receptor antagonist, IL-20 and sCD40 ligand). This test exhibited 90.9 % sensitivity, 96 % specificity, a positive predictive value (PPV) of 95.2 % and a negative predictive value (NPV) of 92.3 %. Moreover, this combination allowed discrimination between patients with ACR and DGF and pulmonary infection.

Conclusions

With further development and validation, this blood test can be used to predict ACR and direct the treatment of transplant patients in the clinic.