多发性肌炎/皮肌炎患者糖皮质激素治疗前后其受体的改变及意义

为了探讨多发性肌炎 /皮肌炎 (PM/DM )患者外周血白细胞糖皮质激素受体 (GCR )的变化与意义及应用糖皮质激素(GC)疗效的关系 ,应用放射配体结合法 ,以3H标记地塞米松 ( 3H Dex)为配体 ,测定 2 4例PM/DM患者应用激素治疗前后白细胞GCR的变化 ,同时采用放射免疫分析法测定血浆皮质醇浓度。结果表明PM/DM患者应用GC治疗前其GCR特异结合量 ( 3 673± 1195位点 /细胞 )低于正常对照组 ( 4 966± 12 10位点 /细胞 ) ,有显著性差异 (P <0 0 1)。应用GC治疗后 ,激素抵抗组其GCR降低幅度 ( 85 9± 10 8位点 /细胞 )高于激素敏感组降低幅度 ( 62 6± 12 7位点 /细胞 ) ,差异有显著性 (P <0 0 0 1)。PM/DM患者应用GC治疗前后其GCR水平与相对应的血浆皮质醇浓度之间 ,无相关性 (P >0 0 5 )。提示PM/DM患者外周血白细胞GCR水平的变化与PM/DM的发病机制、应用GC治疗的疗效判定、预测预后等可能有密切关系 ,GCR对于PM/DM合并恶性肿瘤患者的意义尚待进一步研究     

糖皮质激素受体研究进展

糖皮质激素(GC)是一种具有重要生理及药理作用的甾体激素。在临床治疗中占有相当重要的地位。因此,对其作用机理的研究历来为人们所重视。1968年,Schaum-burg和Munck首先证实了大鼠胸腺细胞中糖皮质激素受体(GCR)的存在,这就使GC作用机理的研究进入到分子水平。十几年来,人们已经用各种方法研究了GCR的分布,理化性质及生物学功能,并正在分离和纯化GCR,以便更精确地了解其结构与功能。本文就近年来GCR研究进展作一简述:     

免疫反应对糖皮质激素受体的调控及其意义

本文采用绵羊红细胞(SRBC)经腹腔注入C_(57)BL小鼠作为免疫反应模型,观察小鼠在免疫反应中脾脏细胞糖皮质激素受体(GCR)数的变化,发现自SRBC致敏后第五天始小鼠脾脏细胞GCR数明显高于对照组(P<0.005),第七天达高峰,第十一天恢复至正常水平。地塞米松对致敏组和对照组小鼠脾脏细胞由PHA诱导的淋巴细胞转化抑制程度的明显差异可能与脾脏细胞GCR数变化有关。本文还用上述方法研究了妊娠小鼠,发现妊娠小鼠脾脏细胞GCR数明显高于未妊娠小鼠(P<0.05),这在调节母胎免疫反应中具有重要意义。     

血管内皮细胞生长过程中与衰老相关的细胞生物学特征的变化

目的 探讨内皮细胞衰老过程中细胞生物学特征变化。方法 体外培养人脐静脉内皮细胞。通过传代形成细胞的衰老模型。光镜下观察细胞各代的形态结构；流式细胞术检测细胞周期和细胞内自发荧光产物的变化；线粒体膜电位特异染料法检测线粒体膜电位的演变。结果 随着细胞传代次数的增加，内皮细胞结构逐步退化，细胞分裂减缓，细胞周期趋向停滞于G0／G1期。细胞自发荧光有显著性增加，线粒体膜电位则有显著性降低。结论 内皮细胞在复制性衰老过程中，伴随着细胞形态退化、细胞周期异常，细胞内自发荧光产物增加，线粒体膜电位降低。反映内皮细胞衰老时，细胞内线粒体功能降低，脂质过氧化反应增强。     

人牙周韧带细胞成骨诱导分化后的超微结构观察

目的 观察成骨诱导分化培养前后,人牙周韧带细胞超微结构的变化.方法 对人牙周韧带细胞进行体外培养,并进行成骨诱导分化,14d后行透射电子显微镜观察.结果 体外成骨诱导分化培养后,人牙周韧带细胞内细胞器发达,数目较常规培养条件下明显增多.细胞内可见大量的基质小泡、髓样结构及中、低电子密度的圆形和椭圆形小泡样结构.结论 人牙周韧带细胞是一种具有成骨潜能的细胞,经成骨诱导分化培养后,其超微结构具有成骨细胞和成牙骨质细胞的特点.     

TRAIL:TNF配基家族诱导细胞凋亡的新成员

作者克隆了TNF家族的一个新成员,将其命名为TRAIL。它可以在许多细胞内快速诱导细胞凋亡,也能在大多病毒感染的原细胞内诱导细胞程序化死亡。TRAIL为一种Ⅱ型膜蛋白,其C-末端-170氨基酸与Fas配基(FasL)有30％相同,可以在包括胸腺、脾、前列腺和肺等人体组织内广泛表达。人TRAIL基因的遗传结构与TNF家族的其他成员有     

pcDNA3.1-MORC2重组质粒的构建及其在胃癌细胞SGC-7901中的表达和定位

目的 构建真核表达载体pcDNA3.1-MORC2并瞬时转染人胃癌细胞SGC-7901,观察融合蛋白在细胞内表达及定位.方法 以人MORC2 cDNA为模板,PCR扩增MORC2全长编码基因,亚克隆至pcDNA3.1-hisA表达载体.将构建的重组质粒测序并转染到胃癌细胞SGC-7901中,提取细胞蛋白进行Wester...     

四种脊椎动物DNA序列复杂性的比较

目的:阐述广义复杂度定义和意义,比较四种脊椎动物DNA序列复杂性,检验我们提出的复杂度定义的正确性和合理性。方法:以不动点,周期2,不等概周期4,混沌和随机序列等简明序列为计算例,以“Bach/猴子击琴”历史著名质疑悬案问题为判据,检验广义复杂度定义的正确性。以人、公牛、老鼠和母鸡四种脊椎动为应用例,以重复性复杂度GCR(2)为主要测度指标,以有序化信息量I=log4-H1和剩余度R=1-H1/log4为参考指标,按定义公式计算GCR(2)、I和R值。结果:在简明计算例中,完全随机序列和完全规则序列的GCR(2)=0,GCC(2)=0,GCT(2)=0,说明完全规则不复杂,完全随机亦不复杂,这完全符合“Bach/猴子击琴”疑案问题的要求,检验了我们提出的广义复杂度定义的正确性。在四种脊椎动物DNA序列之间,GCR(2)、I和R值没有数量级差异,而在数量GCR(2)、I和R之间有数量级差异,即GCR(2)■I(bit),GCR(2)■R(%),而且人的GCR(2),I和R数值远远大于其它三种脊椎动物。结果表明,脊椎动物进化基本上在同一水平上,但人的DNA序列的复杂性、有序化信息量和后备存储剩余度均高于其它脊椎动物。脊椎动物DNA序列的进化有个共同特点:在进化熵减过程中,重点不是放在碱基组成的有序化(I)上,而是放在碱基关联的复杂化GCR(2)上。所有这些结论均符合生物信息学生物分子进化规律,说明我们提出的广义复杂度定义是合理的。     

耳聋基因GJB3c．538C〉T突变致病性效应的初步研究

目的对人GJB3基因c．538C〉T点突变进行生物信息学及功能分析，预测并验证其致病性。方法聚合酶链反应扩增含GJB3基因c．538C〉T突变的编码区全序列，DNA测序验证后与T载体连接，再通过重组DNA技术，将GJB3基因编码区全序列导入pEGFP—N1载体，构建了GJB3基因野生型（pEGFP．Cx31-wT）和突变型（pEGFP．Cx31-R180X）表达载体，验证并纯化后，分别转染人胚肾HEK293细胞，观察EGFP-Cx31融合蛋白在细胞内定位表达情况。通过生物信息学方法分析c．538C〉T突变前后。Cx31蛋白的三维空间结构和平均势能变化。结果细胞内荧光定位结果显示GJB3c．538C〉T突变后，Cx31蛋白只于胞内表达，未能正常形成细胞间隙连接结构。而生物信息学分析结果也表明突变后Cx31蛋白的三维空间结构和Anolea原子平均势能均发生了明显变化。结论GJB3基因c．538C〉T点突变导致其编码的Cx31蛋白的结构与功能发生变化，可能通过影响细胞间隙连接的形成，从而导致遗传性耳聋的发生。     

急性肾小球肾炎免疫状态和糖皮质激素及其受体的变化

本文观察了急性肾炎有关免疫状态和血浆GC及淋巴细胞GCR的相互关系。急性肾炎发病期患儿CIC明显升高,血浆C_3、CH_(50)降低,但此时的血浆GC变化不明显,淋巴细胞GCR数反呈一过性降低.然而,急性肾炎恢复期淋巴细胞GCR数又回升至正常。反映出急性肾炎病程中存在着短暂的GC—GCR系统对免疫的调节障碍。GC及GCR参与的免疫调节过程,对免疫性疾病的发生和发展有一定的作用。     

溶酶体α-甘露糖苷贮积症基因治疗的初步研究

目的探讨溶酶体α－甘露糖苷贮积症基因治疗的可行性。方法以逆转录病毒为载体,将编码人溶酶体α－甘露糖苷酶ｃＤＮＡ导入病猫皮肤成纤维细胞。结果人源ｃＤＮＡ在病猫细胞内表达高活性α－甘露糖苷酶,重组酶的ｐＨ活性范围与正常酶相同,定位于细胞的溶酶体,分泌到细胞外后能通过甘露糖－６－磷酸受体介导的胞饮作用被其他细胞吸收。在体内,由重组病毒感染细胞组成的类器官表达有活性酶可达６周。结论此表达系统是研究溶酶体α－甘露糖苷贮积症基因治疗的有用模型。     

雌性大鼠动情周期中黄体生成素细胞形态变化的图像分析

应用特异性的ａ－ｒＬＨβ抗血清，以ＡＢＣ技术显示垂体黄体生成素（ＬＨ）细胞，通过计算机图像处理系统对ＬＨ细胞的面积，、细胞内液泡面积和细胞形状等参数进行定量和统计分析，获得了大鼠正常动情周期各时期典型的ＬＨ细胞学图像。结果表明，ＬＨ的早期贮存和基础主要同细胞内颗粒变化有是ＬＨ的大量贮存和大量释放同细胞内液泡的变化以及由此产生的细胞大小、细胞形状和细胞结构等形态变化密切相关。提出ＬＨ细胞内液泡变化是     

锚蛋白分子研究进展

锚蛋白作为一种细胞内的连接蛋白,分布广泛,功能多样。有关其蛋白质结构、基因结构特点、组织和细胞分布的研究进展迅速。     

Ki67在正常妊娠和妊娠滋养细胞疾病中的研究进展

Ki-67抗原为细胞内与细胞分裂增殖相关的蛋白抗原，分子量359KD和320KD，在人基因组中有将近30000个碱基对编码，由15个外显子转录加工而成，其编码基因位于第10号染色体上。它存在于增殖细胞中，参与驱动细胞周期的调控网络，在除G0期之外的G1、S、G2、M（有丝分裂期）等细胞周期中表达，在M期达到最大表达峰，与细胞的合成代谢有关，在M期后迅速降解，其表达的高低反映了细胞增殖的程度。故可以用于识别生长中的正常和肿瘤细胞，     

整合素信号预示肿瘤发生

整合素是异二聚体跨膜蛋白，在细胞外与细胞外基质蛋白结合，在细胞内与细胞支架蛋白相联系。在细胞外间质和细胞内结构成分之间起着联结作用。整合素调节和控制细胞生长，并可做为信号受体控制细胞的功能。整合素信号与某些癌基因之间有密切联系。     

整合素信号预示肿瘤发生

整合素是异二聚体跨膜蛋白，在细胞外与细胞外基质蛋白结合，在细胞内与细胞支架蛋白相联系。在细胞外间质和细胞内结构成分之间起着联结作用。整合素调节和控制细胞生长，并可做为信号受体控制细胞的功能。整合素信号与某些癌症基因之间有密切联系。     

p21~(ras)在T细胞中的调节与功能

在T细胞中,T细胞抗原受体、粘附分子CD_2及白细胞介素-2受体受到激发后就必然会激活由原癌基因p21~(ras)所编码的鸟苷酸结合蛋白。本文扼要讨论了p21~(ras)在T细胞中的功能活性及其调节,并且认为细胞表面受体与p21~(ras)的偶联过程中可能有多种细胞内途径的参与。     

慢性肾小球肾炎病人白细胞糖皮质激素受体的变化

以氚标记的地塞米松(~3H-Dex)为配体,用一点分析法测定了23例慢性肾小球肾炎病人混合白细胞的糖皮质激素受体(GCR),平均为8825±2429位点/细胞((?)±SD)。与正常人5154±1635位点/细胞相比相差十分显著,P<0.01。其中16例并发尿毒症患者的GCR平均为9464±2571位点/细胞((?)±SD)。对这种变化的可能机制和临床意义进行了讨论。     

IL-13及其变异体真核表达载体的构建表达与亚细胞定位

目的：体外构建野生型人白细胞介素-13（whIL-13）及变异型人白细胞介素-13（mhIL-13）与增强型绿色荧光蛋白（EGFP）融和蛋白真核表达载体，分析其在COS-7细胞中的表达和亚细胞定位。方法：以RT-PCR方法扩增whIL-13、mhIL-13全长编码基因，构建EGFP-whIL-13、EGFP-mhIL-13融和蛋白真核表达载体，转染COS-7细胞，以激光扫描共聚焦显微镜观察融合蛋白的表达及其在细胞内的分布情况。结果：两种融和蛋白表达载体均构建正确，将其转染COS-7细胞后，在阳性克隆胞浆内均可见明亮的绿色荧光，胞核空虚。结论：成功构建EGFP-whIL-13、EGFP-mhIL-13融和蛋白表达载体，并在COS-7细胞中得到表达，表达的两种融和蛋白细胞内分布特征没有区别，均位于胞浆内。     

家蝇复眼小网膜的超微结构

用电子显微镜研究了家蝇(musca domestica)复眼小网膜的一般结构,特殊结构和小网膜细胞的对称性排列,并比较了在暗适应、明适应和强光适应状态下小网膜细胞的结构。家蝇复眼的每个小网膜一般由八个小网膜细胞组成,某些小网膜是由六、七、九和十个小网膜细胞组成。家蝇的左复眼与右复限、复限的背区与腹区中,小网膜细胞呈镜像对称排列。另外,在复眼的背区或腹区中,有的小网膜细胞之间也呈镜像对称排列。家蝇复眼在强光适应状态下,No.1～6小网膜细胞内大部分色素颗粒移动到感杆(rhabdomere)附近,而No.7～8小网膜细胞内色素颗粒一般不移动,但有些No.7～8小网膜细胞内色素颗粒也有移动。