枯草杆菌对氨茴环霉素的抗性

目的研究枯草杆菌对氨茴环霉素（ＡＮＣ）的抗性特征并克隆抗性片段。方法用递增浓度方法在ＬＢ平板上筛选枯草杆菌菌株１８３１对ＡＮＣ的自发抗性突变株,用鸟枪法在枯草杆菌ＢＤ２２４菌株原生质体中克隆抗性重组质粒,提取重组质粒后再次转化敏感菌株以证实克隆片段的抗性功能。结果对ＡＮＣ强抗性突变株ＤＭ１０４对化学特性不相关的化合物如溴化乙锭和诺丹明产生交叉抗性。钙通道阻断剂异搏定使突变株失去对氨茴环霉素的抗性。基因克隆获得了４个带有ＤＭ１０４染色体上不同片段的重组质粒,只有１个片段与已知的枯草杆菌ｂｍｒ基因同源。用重组质粒再次转化敏感菌株证实克隆片段的抗性功能。结论枯草杆菌对ＡＮＣ的抗性呈多重药物抗性特征,这种抗性可能与染色体上多个位点有关     

淡色库蚊三氟氯氰菊酯抗性株的选育及交互抗性的研究

本研究在实验室条件下进行淡色库蚊（Ｃｕｌｅｘｐｉｎｐｉｅｎｓｐａｌｅｎｓ）三氟氯氰菊酯抗性品系的选育，观察抗性的发展趋势，测定交互抗性谱，分析抗性品系的种群生存力、吸血率、孵化率等主要生物学特征，并比较了两个品系的相对适合度。结果发现：淡色库蚊对三氟氯氰菊酯的抗性经６代的选育后达到４１．８倍。前４代稳步上升，第５代（Ｆ４）有所下降，以后又继续攀升，抗性的发展出现波动：通过对抗性品系（Ｒ）和敏感品系（Ｓ）生长、发育、生殖等观察发现：Ｒ品系在孵化率、化蛹率、羽化率和产卵率等方面均明显低于Ｓ品系，对有关参数进行统计分析发现Ｒ品系相对Ｓ品系仅具０．４１的适合度；经６代选育所得的三氟氯氰菊酯抗性品系对三种拟除虫菊酯药物有明显交互抗性，尤其是与二氯苯醚菊酯交互抗性达４０倍以上，与溴氰菊酯、氯氰菊酯的交互抗性也在２０倍以上，与两种有机磷类杀虫剂马拉硫磷、敌百虫无交互抗性，与氨基甲酸酯类的残杀威不仅没有交互抗性，还稍有下降。这些为进一步研究蚊虫对拟除虫菊酯的抗性机理打下了基础，为防治提供了一些依据。     

实验性NIDDM大鼠的胰岛素抗性

采用放射免疫分析及放射配基受体分析,观察实验性NIDDM大鼠血清胰岛素、红细胞中cAMP以及红细胞胰岛素受体最大结合力。结果表明链脲霉素与高热量饲料诱发的NIDDM大鼠有明显的胰岛素抗性,即在高胰岛素水平(25.29±8.34μU/ml,P<0.001)的同时伴有明显的糖耐量减低(P<0.001)及高脂血症(血清甘油三脂2.15±0.66mmol/L,P<0.001;血清胆固醇2.82±0.44mmol/L,P<0.001)。实验还进一步表明这种胰岛素抗性与红细胞胰岛素受体最大结合力的降低(693.51±149.55cpm/10~5红细胞,P<0.001)一致。据此推测胰岛素受体结合力的降低可能是NIDDM胰岛素抗性的主要原因。     

细胞辐射抗性相关基因的研究进展

电离辐射能够诱导细胞一系列基因的表达。与辐射抗性相关的基因如p53抑癌基因、癌基因、DNA损伤修复相关基因以及影响细胞生长分化的多种调控基因等,通过参与调节细胞周期、促进细胞DNA损伤修复和抑制细胞凋亡等多种途径,最终使得细胞的辐射抗性增加。目前人们对其中一些基因的作用机制已有所了解,而对更多的基因的作用机理尚不清楚。认识细胞辐射抗性相关基因的表达调控和生物功能对阐明细胞辐射抗性分子机制至关重要。     

淡色库蚊抗性酯酶B2基因类群的抗性变异分析

淡色库蚊对毒死蜱抗性品系表现为酯酶Ｂ２基因扩增。本文对由酯酶Ｂ２基因扩增所导致的ＯＰ抗性在无杀虫剂压力下的变异性进行了研究。研究结果表明当抗性种群中混有非酯酶基因扩增个体时,其抗性水平逐渐下降,酯栈 增的概率逐渐减少,这可能与抗性基因在生物不适应性有关;在均一的抗性酯酶基因种群中,抗性水平始终较稳定,酯酶的活悸也一直较高,这表明在均的抗性酯酶基因各的遗传中,酯酶等位基因拷贝几乎不会丢失的。根据研究     

创伤弧菌紫外线抗性观察

目的:观察创伤弧菌对紫外线(UV)的抵抗力,确定紫外线有效灭杀创伤弧菌的时间,为创伤弧菌消毒提供实验依据.方法:创伤弧菌ATCC27562、大肠杆菌ATCC25922悬液及平板在强度值达90μW/cm2的紫外线照射不同时间后,进行培养并定量测照射前后的活菌浓度,统计杀菌率,绘制照射前后灭活曲线(t-△lg).结果:创伤弧菌在强度值达90 μW/cm2的紫外线照射下,15 min后定性培养为阴性,定量检测1 min平均灭活对数值LIV悬液法为4.37±0.13、平板法为5.10±0.19,平均杀菌率悬液法为(99.99±0.01)%、平板法为(99.99±0.05)%,照射15min后无菌存活.大肠杆菌在照射1 min后达到消毒水平,10min后达到无菌状态.结论:创伤弧菌经强度值达90 μW/cm2的紫外线照射1 min达到消毒水平(LIV≥4.00),照射15 min创伤弧菌能被迅速有效灭杀.     

疟原虫氯喹抗性调节剂的研究进展

本文对试验用作氯喹抗性调节剂的十一类化合物（药物）的研究进展状况进行了综述，并指出氯喹抗性调节剂的研究意义及进一步研究的困难所在。     

家蝇抗药性的分子遗传机制

综述了近年来家蝇抗药性分子机制的研究进展。脂族酯酶基因(MdaE7)在位置137(Gly)和251(Trp)的氨基酸突变可能与家蝇对有机磷抗性有关;谷胱苷肽S转移酶(GSTs)超量表达在家蝇对有机磷农药的抗性中起重要作用;有机磷抗性家蝇的AChE基因普遍存在Gly262Ala和Phe327Tyr突变。击倒抗性(kdr)和P450介导的代谢抗性是家蝇对DDT和拟除虫菊酯类杀虫剂抗性的重要机制,电压门控钠离子通道的L1041F突变产生Kdr,而M918T和L1041F双突变导致超击倒抗性(superkdr);P450介导的代谢抗性表现出进化可塑性的特点。有关家蝇抗性机制的阐明,可为抗性的检测和监测提供准确和方便的手段。     

淡色库蚊三种有机磷抗性品系的相对适合度分析

本文在淡色库蚊的敌百虫、双硫磷和毒死蜱三种抗性品系筛选的基础上，通过抗性品系和敏感品系的吸血、繁殖、存活和发育等生物学特性的测定和比较，组建实验种群生命表，分析抗性品系的适合度。结果表明：三种抗性品系的吸血率、产卵率和发育速率与敏感品系相比都有所降低，抗敌百虫品系、抗双硫磷品系和抗毒死蜱品系相对敏感品系分别具有：０．５４２、０．６３１和０．６１８的适合度。     

肿瘤细胞多药抗性基因的表达调控

肿瘤细胞多药抗性的一个重要特征是P糖蛋白(Pgp)的过度表达,从人、鼠中分离到编码Pgp的mdrl基因,mdrl基因启动子含有AP1、SP1、热应激等多种反应元件,有三种核蛋白能与mdrl启动子结合。抗肿瘤药物、致癌剂、紫外线、热应激使mdrl基因活化,ras,raf,p53,myc等癌基因参与mdrl基困的表达调控。     

淡色库蚊(Culex pipiens pallens)抗性酯酶B_2基因类群的抗性变异分析

淡色库蚊对毒死蜱抗性品系表现为酯酶Ｂ２基因扩增。本文对由酯酶Ｂ２基因扩增所导致的ＯＰ抗性在无杀虫剂压力下的变异性进行了研究。研究结果表明,当抗性种群中混有非酯酶基因扩增个体时,其抗性水平逐渐下降,酯酶扩增的概率逐渐减少,这可能与抗性基因在生物学上的不适应性有关;在均一的抗性酯酶基因种群中,抗性水平始终较稳定,酯酶的活性也一直较高,这表明在均一的抗性酯酶基因种群的遗传中,酯酶等位基因拷贝几乎是不会丢失的。根据研究结果,对蚊虫有机磷杀虫剂抗性的演变进行讨论     

产志贺毒素大肠杆菌O157∶H7的亚碲酸钾抗性基因簇分布和抗性水平

目的 了解产志贺毒素大肠杆菌O157：H7的亚碲酸盐抗性基因簇的分布和抗性水平的关系。方法运用PCR和核酸杂交方法进行基因检测，使用平皿法检测亚碲酸钾抗性水平。结果在所检测的志贺菌、沙门菌、霍乱弧菌、耶尔森菌、泌尿道致病性大肠杆菌、肠产毒性大肠杆菌、肠致病性大肠杆菌、肠侵袭性大肠杆菌、肠黏附性大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌中，只有大肠杆菌O157：H7具有ter(tellurite resistance，ter)基因簇。所检测的34株产志贺毒素的大肠杆菌O157：H7有33株具有ter基因簇，所检测的18株不产生志贺毒素的大肠杆菌O157，4株具有ter基因簇，但是没有该毒力岛的其它基因。ter基因阳性的33株菌中，亚碲酸钾的抗性水平一般较高，4株在750μg/ml以上，19株为500～750μg/ml，10株为250～500μg/ml；而4株ter基因簇阴性的菌株，也表现了高水平的耐药性，其抗性水平均为500～750μg/ml。其它ter基因簇阴性的菌株，20株耐药性为5～10μg/ml，1株10～20μg/ml，6株20～50μg/ml，2株50～100μg/ml，1株100～250μg/ml。结论ter基因簇在产志贺毒素的大肠杆菌O157：H7中高频率存在，而在其它病原菌中没有检测到。高水平的亚碲酸钾抗性可以作为选择性分离产志贺毒素大肠杆菌O157：H7的指标之一。     

白纹伊蚊溴氰菊酯抗性品系生物学特性及可溶性蛋白的研究

在实验室条件下观察白纹伊蚊溴氰菊酯敏感品系与抗性品系的生物学特性,并对两品系的Ⅳ龄幼虫和成蚊的可溶性蛋白提取物进行SDS-PAGE分析.结果表明:与敏感品系比较,抗性品系的幼虫化蛹率明显提高,但羽化率无显著性差异.SDS-PAGE分析表明两品系的Ⅳ龄幼虫与成蚊蛋白条带均有明显区别:成蚊有分子量约为200 kDa的特异性...     

脂肪肝与胰岛素抗性的关系

目的探讨脂肪肝与胰岛素抗性的关系。方法对30例诊断为脂肪肝患者作回顾性分析。结果多数患者合并胰岛素抗性综合征(高血压、肥胖症、糖尿病、高脂血症),18例接受口服葡萄糖耐量试验(OGTT)中,1例确诊为Ⅱ型糖尿病,17例患者中3例空腹血糖减损(IFG),1例糖耐量减退(IGT)及13例糖耐量正常(NGT)具有较正常人为高的血浆胰岛素(INS)浓度,胰岛素抗性脂数为8.91±1.52%。结论脂肪肝与胰岛素抗性所致的代谢紊乱关系紧密,呈正相关系。     

德国小蠊抗药性及抗性机理的研究进展

德国小蠊的抗药性问题日渐突出，成为城市害虫防治的一大难点。德国小蠊抗性机理的研究可为抗性监测、治理以及新型杀虫剂的开发提供理论基础。本文主要就德国小蠊的抗药性产生情况及抗性机理的研究进展进行综述。     

蚊虫对拟除虫菊酯的抗药性检测技术研究进展

本文针对目前拟除虫菊酯在蚊虫防治中的使用情况、蚊虫对拟除虫菊酯的抗药性和蚊虫抗药性监测过程中的检测技术进行了综述。认为生物测定方法检测蚊虫对拟除虫菊酯抗性在实际应用中简便、快捷,但是也存在一定的局限性;随机扩增多态性DNA技术、等位基因特异性PCR、实时荧光定量PCR等分子生物学技术以及解毒代谢酶系在蚊虫对拟除虫菊酯抗性检测中的研究深入,都为寻找准确有效的检测技术提供有效的理论依据。     

淡色库蚊（Culex pipiens pallens）抗性酯酶活性聚集度及有机磷抗性发展动态研究

本文报道浙江省不同地市淡色库蚊（Ｃｕｌｅｘｐｉｐｉｅｎｓｐａｌｅｎｓ）种群的抗性酯酶活性聚集度和对有机磷杀虫剂抗性的发展动态。通过生物测定法，敌百虫对各地市幼虫种群的半致死浓度（ＬＣ５０）分别是：宁波０．３５ｐｐｍ，杭州０．４６ｐｐｍ，舟山０．４７ｐｐｍ，温州０．６６ｐｐｍ，嘉兴０．７１ｐｐｍ，金华０．７５ｐｐｍ和台州１．４３ｐｐｍ。根据各地的历年资料综合分析，自七十年代以来，蚊虫幼虫对敌百虫的抗性逐渐下降，至九十年代初降至最低，但近几年又有回升趋势。通过雌蚊抗性酯酶活性测定，不同地市的抗性酯酶活性指标（Ｉ．Ｖ．）平均值分别是：宁波５７８０．７，杭州６４２５．９，舟山７０４５．９，嘉兴７２５９．９，金华８２８３．２，温州９０４６．３和台州１２９０７．９。与九十年代初相比有所增高。根据抗性酯酶活性指标相似性分析，宁波可划为中度抗性区，杭州、舟山和嘉兴为中高度抗性区，金华和温州为高度抗性区，而台州为强度抗性区。     

白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株4龄幼虫cDNA文库的构建

目的 :构建白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株 4龄幼虫cDNA文库。方法 :抽提、纯化白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株 4龄幼虫总RNA ,进行反转录合成第 1链cDNA ;用Clontech公司SMARTTM cDNA文库构建试剂盒进行长距离PCR ,合成全长双链cDNA ;PCR产物经蛋白酶K消化、提纯后 ,进行SfiI酶切 ;用ChromaSpin 40 0柱将酶切产物进行分级分离 ,然后经 1 1%琼脂糖凝胶电泳鉴定 ,回收 40 0bp以上的组分 ,并与λTriplEx2载体连接 ;连接产物经体外蛋白包装 ,产生未扩增文库 ;检测未扩增文库滴度和重组效率后 ,进行文库的扩增 ,并测定扩增文库的滴度 ;随机挑取 9个噬菌体 ,用载体克隆位点两端的引物进行PCR扩增 ,以检测所构建的cDNA文库的质量。结果 :经检测 ,未扩增文库滴度达 2 0× 10 7pfu mL ,重组效率在 10 -4 稀释度时每块平板约 2 10～ 2 5 5个噬菌斑中均未发现任何蓝色噬斑 ,扩增文库滴度达 1 75× 10 9pfu mL ;用载体克隆位点两端的引物进行PCR鉴定 ,结果显示 :所选 9个噬菌体中均含有重组的cDNA ,并且均在 5 0 0bp以上 ,其中 1kb以上的有 2个、 70 0bp的有 5个、 5 0 0bp的有 2个。结论 :已成功地获得一高质量的白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株 4龄幼虫cDNA文库。