类mRNA RNA研究进展

类 m RNA RNA (m RNA- like RNA)是一类 3′端有 Poly A ,无典型 ORF,不编码蛋白质 ,而直接在 RNA水平上发挥作用的 RNA分子。近年来的研究表明各种不同的类 m RNA RNA广泛存在于不同的细胞内 ,并发挥着重要的调控作用。它们与细胞的生长和分化、胚胎的发育、肿瘤的形成和抑制密切相关     

体外转录制备的siRNAs对SARS-CoV复制的抑制作用

目的体外研究针对SARS-CoV RNA依赖性RNA聚合酶（RNA-dependent RNA polymerase，RdRp）的小干扰RNA（Small interference RNA，siRNA）对SARS-CoV感染的抑制效应。方法利用Ambion公司在线设计工具，设计出4条针对RdRp基因的siRNAs，并在体外利用试剂盒进行转录合成。在SARS-CoV感染前1d，将这4条体外转录的siRNAs用Lipofectamine 2000试剂转染入Vero E6细胞中。感染后，每天观察感染细胞的细胞病变效应（Cytopathic effect，CPE）。第5天，用空斑形成实验（Plaque formation unit，PFU）检测感染细胞培养上清液中SARS-CoV滴度。结果CPE结果显示，在感染后的前4d，各siRNAs均能有效地保护细胞免受感染；在第5天，4条siRNAs中有3条仍能有效保护细胞不被感染。PFU实验结果显示，在第5天，所有siRNAs转染的细胞培养上清液中，SARS-CoV的滴度均显著低于阳性对照（P〈0．001）。结论实验结果表明针对SARS-CoV的RdRp基因的siRNAs能有效而特异地抑制该病毒在哺乳动物细胞中的复制和繁殖，提示如果应用合适的给药途径，RNAi策略可以用于体内抑制SARS-CoV的感染。     

病毒对抗RNAi的方式

RNAi是近几年的重大科学发现,其作用是对基因表达在转录后水平进行调控,同时RNAi还可以清除外源基因组或抑制外源基因组的复制。因此RNAi的重要功能之一就是宿主细胞抵抗病毒感染;另一方面,病毒也具有一套对抗RNAi的机制。对于这种相互作用过程的研究可从一个新的角度了解RNAi的功能和病毒感染过程。     

RNA干扰分子机制研究进展

RNA干扰 (RNA interference,RNAi)即双链 RNA(double- stranded RNA,ds RNA)介导的同源m RNA特异性降解过程。作为一种简单有效的影响基因表达和一定程度上替代基因敲除的遗传学工具 ,RNAi已在秀丽新小杆线虫、黑腹果蝇、拟南芥、红色面包霉菌等多种模式生物体中得到广泛证实。同时 ,RNAi的分子机制的研究也不断取得进展 ,包括对基因转录后水平、翻译水平、基因组甲基化及沉默信号的传递等层次的研究。清晰地阐明 RNAi作用机理 ,将为大规模的基因系统筛查、新基因的发现、人类肿瘤及难治性疾病的基因治疗提供重要的理论依据和有力的工具。     

shRNA抑制人肺癌细胞A549 SURVIVIN基因表达

目的 构建存活素(SURVIVIN)基因的短发夹RNA(shRNA)表达质粒,为肺癌RNA干扰(RNAi)途径的基因治疗打下基础.方法 设计并合成SURVIVIN短发夹结构模板序列,与穿梭载体重组质粒后转染人肺癌细胞A549,通过RT-PCR法筛选出抑制效果最强的质粒;MTT和Western blot法检测该质粒对细胞增殖和SURVIVOIN表达的影响.结果 构建和筛选出抑制作用最强的质粒;该质粒能明显抑制A549细胞的增殖和SURVIVIN的表达.结论 在RNAi的介导下,SURVIVIN的表达被下调,为肺癌的基因治疗提供实验依据.     

RNA沉寂及其抗病毒效应研究进展

RNA沉寂 (RNAsilencing)是一种新发现的、在RNA水平发挥作用的基因调控机制 ,以序列特异性方式降解病毒、转基因的RNA或内源性mRNA ,发生于真核生物 ,包括在植物细胞中描述的转录后基因沉寂、真菌中的压制现象和动物细胞中的RNA干扰。RNA沉寂发挥作用的一般机制是由dsRNA启动 ,经Dicer酶处理成2 1～ 2 5nt的小片段siRNA ,作为向导序列与核糖核酸酶构成RNA诱导的沉寂复合体 ,降解与dsRNA同源的RNA序列 ,防御外来核酸序列的入侵和调节细胞内基因的表达。作为一种古老的病毒防御机制 ,可通过沉寂同源的病毒基因或沉寂与病毒复制有关的宿主细胞基因 ,在病毒感染的不同时期抑制病毒的复制。RNA沉寂的应用非常广泛 ,在某种意义上 ,RNA沉寂将会产生一场新的生物学革命。     

RNA干扰应用新进展

RNA干扰 (RNAinterference ,RNAi)是近年发展起来的一种特异的靶基因失活技术 ,它可以象基因敲除一样非常有效地鉴定特定基因的功能。RNAi已被证明是破译各种生物中的基因功能的强大工具 ,并将为新型高效药物的开发和基因治疗的发展开辟新的领域。     

核糖核酸干扰

The phenomenon of RNA interference (RNAi) is highly conserved mechanism in the organism evolution. As a immune system , RNAi is a ubiquitous mechanism against invading microorganism in plant and animal cells. Recently, it has been found that RNAi is the process by which double-strand RNA (dsRNA) directs sequence - specific degradation of messenger RNA and the mediations of sequence specific messenger RNA degradation are 21 - and 23 - nucleotide small interfering RNAs that generate by ribonuclease from endogenous longer dsRNA or by transfectious technics from heterologous dsRNA. Over the past few years,the way in which cells respond to dsRNA by silencing homologous genes has revealed a new regulating paradigm in biology.     

非编码RNA与肿瘤关系的研究进展

非编码RNA是指除mRNA、tRNA和rRNA以外,不编码蛋白质的RNA分子.它们在细菌、真菌和哺乳动物等许多生物体的重要生命活动中发挥着极广泛的调控作用.近年来研究表明,非编码RNA既可作为癌基因,也可作为抑癌基因,对肿瘤的发生、发展产生重大的影响.同时,非编码RNA又有希望成为肿瘤诊断的标志物和肿瘤治疗的新靶点.作者综述了小干扰RNA和微小RNA等主要非编码RNA与肿瘤关系的最新研究进展.     

Dicer酶及其在RNA干扰中的作用

RNA干扰(RNAInterference,RNAi)是双链RNA引起的同源mRNA特异性降解的现象。Dicer酶是核糖核酸酶Ⅲ(RibonucleaseⅢ,RNaseⅢ)家族的成员,在RNA干扰的起始阶段起着重要作用。Dicer酶最早在果蝇中发现,包括Dicer-1和Dicer-2,分别以Dicer-1/R3D1-L、Dicer-2/R2D2复合物的形式作用于微小RNA(microRNA,miRNA)和小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)的产生。Dicer酶除了在RNAi中发挥重要作用外,还在调节动物生殖发育中起作用。