普伐他汀和西立伐他汀对高胆固醇喂养兔的血管内皮功能的影响

目的：观察普伐他汀和西立伐他汀对高胆固醇喂养兔的血管内皮功能的影响。方法：28只纯种日本大耳白兔,随机分为4组（每组7只）：高胆固醇对照（HC）组喂以1.5%的高胆固醇饲料共8周,普伐他汀加高胆固醇（P+HC）组和西立伐他汀加高胆固醇（C+HC）组均先喂以1.5%的高胆固醇饲料4周,之后P+HC组继续喂以1.5%的高胆固醇饲料加普伐他汀10 mg·kg^-1·d^-1 4周,C+HC组喂以1.5%的高胆固醇饲料加西立伐他汀0.3 mg·kg^-1·d^-14周,正常对照组（NC组）喂以普通饲料共8周。8周后于麻醉情况下取血测定血脂,并分离胸主动脉去除脂肪和结缔组织,切成4 mm长的血管环置浴槽中做离体灌流实验,分别观察对乙酰胆碱、硝酸甘油和去甲肾上腺素的剂量反应曲线。结果：HC组血清胆固醇水平明显高于NC组,P+HC组和C+HC组则显著低于HC组。HC组血管对乙酰胆碱的内皮依赖性舒张反应明显弱于NC组,且对去甲肾上腺素的收缩反应高于NC组;而P+HC组和C+HC组这些反应接近NC组,它们之间无显著差异。4组血管对硝酸甘油的非内皮依赖性舒张反应相似。结论：普伐他汀和西立伐他汀均可预防高胆固醇喂养兔的血管内皮功能失调,二者之间无显著差异。     

LXR激活对大鼠原代培养海马神经元胆固醇代谢关键酶基因表达的影响

为了探讨肝X受体(LXR)激活对海马神经元胆固醇代谢关键酶基因表达和胆固醇外流的影响,本研究取当天新生大鼠海马神经元行体外培养7d,随机分为TO组(培养液含2.0μmol/L的TO901317)和正常对照组(CON),继续培养48h。用胆固醇氧化酶-比色法检测TO组胆固醇的排出量;应用RT-PCR方法检测两组海马神经元ATP结合盒转运体A1(ABCA1)、HMG-CoA还原酶(HMGR)、胆固醇24-羟化酶(CYP46)、P450侧链裂解酶(P450scc)、固醇生成急性调节蛋白(StAR)和酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)等胆固醇代谢关键酶基因的mRNA的表达。结果显示:TO组mRNA表达上调的酶有HMGR、P450scc和StAR(P<0.01);表达下调的酶是ACAT1(P<0.01);表达不受影响的酶是CYP46。上述结果表明LXR激活、促进细胞内胆固醇外流时,海马神经元可能通过协调胆固醇代谢关键酶基因的表达,增加胆固醇的合成和向神经甾体的转化,抑制胆固醇的储备,而不影响胆固醇排出血脑屏障,从而维持细胞内胆固醇的动态平衡,保证神经元的正常生理功能。     

氧化苦参碱抑制高糖诱导的大鼠肾小管上皮-间充质转化及其机制研究

 目的：探讨氧化苦参碱(OM)对高糖诱导的大鼠肾小管上皮-间充质转化（EMT）的抑制作用及其可能机制。方法：体外培养大鼠近端肾小管上皮NRK52E细胞,随机分为：对照组、高糖组、高糖+OM不同浓度组和高糖+0.50 g/L OM动态观察组。采用real-time PCR和Western blotting方法检测转化生长因子β1（TGF-β1）、Smad7、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E-钙黏素（E-cadherin）mRNA和蛋白的表达。结果：（1）与对照组相比,高糖组TGF-β1、α-SMA mRNA和蛋白表达水平均进行性增高,Smad7蛋白表达进行性降低,E-cadherin mRNA和蛋白表达进行性降低,呈时间依赖性（P＜0.05）,而Smad7 mRNA表达进行性增高（P＜0.05）;（2）与高糖组相比,高糖+ OM不同浓度组随OM剂量增加,TGF-β1、α-SMA mRNA和蛋白表达均逐渐降低,Smad7蛋白表达水平逐渐增高,E-cadherin mRNA和蛋白表达水平逐渐增高,且呈剂量依赖性（P＜0.05）,而Smad7 mRNA表达无明显差异;（3）与高糖组相比,高糖+0.50 g/L OM动态观察组TGF-β1、α-SMA mRNA和蛋白表达持续降低,Smad7蛋白表达持续增高,E-cadherin mRNA和蛋白表达持续增高（P＜0.05）,而Smad7 mRNA表达无明显差异。结论：OM可抑制高糖诱导的NRK52E细胞发生EMT,其机制可能与OM下调TGF-β1表达及上调Smad7蛋白表达,进而抑制TGF-β1/Smads信号通路的致纤维化效应有关。     

过氧化物酶体增殖物激活受体α在实验性大鼠脂肪肝中的表达

目的:研究过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)表达异常在脂肪肝发生中的作用。方法:采用小剂量CCl₄后肢皮下注射, 并高脂饮食复制大鼠脂肪肝动物模型, 检测肝脏甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和游离脂肪酸(FFA)含量及血清谷丙转氨酶(ALT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和FFA含量, 并做病理切片, 测定肝脂变面积。提取肝脏总RNA, 运用半定量RT-PCR方法对肝脏PPARαmRNA的表达情况进行分析。结果:脂肪肝模型组大鼠肝脏TG、TC、FFA含量分别为(1.88±0.20)mmol·L^-1、(11.03±1.12)mmol·L^-1和(1260.38±151.27)μmol·L^-1, 正常对照组则为(0.53±0.10)mmol·L^-1、(1.25±0.25)mmol·L^-1和(334.30±27.09)μmol·L^-1(P＜0.01)。血清ALT、TNF-α和FFA含量亦明显高于对照组。肝脏PPARα的灰度比值:脂肪肝模型组0.41±0.28, 正常对照组1.41±0.29(P＜0.01)。结论:肝细胞中毒性脂肪肝时, 肝脏PPARα表达减少, 使肝中脂质的利用和脂肪酸的氧化均发生障碍, 导致肝脂蓄积。     

青春期糖尿病大鼠生殖腺内5α-还原酶(2型)的基因表达研究

目的:研究青春期糖尿病大鼠生殖功能障碍的可能分子机制。 方法:用链脲菌素复制青春期大鼠糖尿病模型,实验分正常对照(C)组、糖尿病(D)组及糖尿病+胰岛素治疗(ID)组,以Northern blot检测睾丸、附睾、前列腺内5α-还原酶(2型)的mRNA水平。 结果:附睾头部,D组和ID组大鼠的2型酶mRNA水平低于C组(P＜0.05)。 结论:附睾2型5α-还原酶mRNA水平低下可能使双氢睾酮生成减少,从而影响青春期大鼠生殖系统的发育与功能。     

载脂蛋白E在ABCA1和ABCG1介导的胆固醇流出中的作用

目的:探讨载脂蛋白E(ApoE)在ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)和ATP结合盒转运蛋白G1(ABCG1)介导的胆固醇流出中的作用及可能机制。方法:将RAW264.7细胞随机分为3组:空白对照组:用单纯培养基培养;低密度脂蛋白受体基因敲除(LDLr^-/-)组:用20mg/LLDLr^-/-小鼠脂蛋白处理细胞;ApoE基因敲除(ApoE^-/-)组:用20mg/LApoE^-/-小鼠脂蛋白处理细胞。采用透射电镜和酶法检测细胞内脂质含量,用液闪仪技术检测胆固醇流出变化,用免疫印迹技术和实时定量PCR技术检测ABCA1和ABCG1的表达水平。结果:与对照组相比,LDLr^-/-小鼠脂蛋白处理后细胞内脂质含量并未明显改变,而ApoE^-/-小鼠脂蛋白处理48h后,细胞内胆固醇酯增加了60%;同时,与LDLr^-/-小鼠脂蛋白处理组相比,用ApoE^-/-小鼠脂蛋白处理后,巨噬细胞胆固醇流出至载脂蛋白A-I(ApoA-I)和高密度脂蛋白(HDL)的量均明显降低。与对照组相比,LDLr^-/-小鼠脂蛋白和ApoE^-/-小鼠脂蛋白处理显著增加ABCA1和ABCG1的蛋白和mRNA水平,但是ApoE^-/-小鼠脂蛋白对ABCA1和ABCG1蛋白和mRNA水平的诱导程度明显低于LDLr^-/-小鼠脂蛋白。结论:ApoE在介导巨噬细胞胆固醇流出中发挥重要作用,该作用与其调节ABCA1和ABCG1的表达水平有关。     

高脂高胆固醇膳食对小鼠PPARα基因表达及机体胆固醇水平的影响

目的:探讨高脂高胆固醇膳食对肝脏PPARα基因表达及机体胆固醇水平的影响。 方法:7-8周龄健康C57小鼠75只，随机分为5组，分别饲以相应配方饲料。 结果:与胆固醇膳食（Chol）相比，胆固醇＋多不饱和脂肪酸膳食（Chol＋PUFA）可增加(P<0.01)小鼠血清总胆固醇(TC)，增加的部分主要集中在HDL-C，降低肝脏胆固醇含量（P<0.01）；胆固醇＋单不饱和脂肪酸膳食（Chol＋MUFA）小鼠血清TC不变，肝脏胆固醇含量降低（P<0.01）；胆固醇＋饱和脂肪酸（Chol＋SFA）膳食可明显增加(P<0.01)小鼠血清TC，增加的部分主要集中在LDL-C，增加肝脏胆固醇含量（P<0.01）；此外，Chol+PUFA 膳食组小鼠肝脏PPARα mRNA和蛋白表达均高于Chol组（P<0.01），Chol+MUFA和Chol+SFA膳食组小鼠肝脏PPARα mRNA表达均明显低于Chol组（P<0.01）。 结论:在胆固醇基础上添加PUFA可诱导PPARα mRNA和蛋白的高表达,添加MUFA、SFA则抑制PPARα mRNA的表达；PPARα基因表达的改变可能进一步影响机体胆固醇水平。     

中链甘油三酯对小鼠胆固醇代谢和胆固醇7α-羟化酶表达的影响

目的：研究中链甘油三酯对小鼠胆固醇代谢的影响及可能的机制。 方法： 分别用AIN-93G配方饲料（BC），含1％胆固醇的AIN-93G配方饲料（Chol），含1％胆固醇和14%富含豆蔻酸的长链甘油三酯（LCT）的AIN-93G配方饲料（Chol＋LCT），含1％胆固醇和14％的中链甘油三酯（MCT）的AIN-93G配方饲料(Chol+MCT)喂养C57小鼠6周，每组15只。观察血清总胆固醇（TC）、肝脏胆固醇含量、机体总胆汁酸含量以及肝脏胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1）的表达。 结果： Chol＋MCT组小鼠血清TC低于（P＜0.01）、肝脏胆固醇高于（P＜0.01）、机体总胆汁酸含量低于（P＜0.01）、CYP7A1表达低于（P＜0.01）Chol组小鼠；Chol＋MCT组小鼠血清TC低于（P＜0.01）、机体总胆汁酸含量以及CYP7A1 表达高于（P＜0.01）Chol+LCT组小鼠、肝脏胆固醇含量不变。 结论： MCT对机体胆固醇水平的影响与CYP7A1表达有关。     

核因子-κB在血管紧张素II介导的大鼠胰腺纤维化发生中的作用

目的:探讨NF-κB在血管紧张素II介导的大鼠胰腺纤维化发生中的作用。方法:SD大鼠(200-300g)随机分为正常组、对照组、治疗组。大鼠胰管内逆行注射2%三硝基苯磺酸(TNBS)复制胰腺纤维化模型。于造模后第1d始,治疗组给予洛沙坦灌胃(10mg·kg^-1·d^-1),模型组给予等量的无菌蒸馏水。分别采用免疫印迹、免疫组化和TransAM^TM方法检测胰腺组织NF-κB表达、分布和活化情况。采用硫堇蓝(toluidineblue)染色和透射电镜观察肥大细胞数量、分布和活化脱颗粒现象。RT-PCR研究胰腺组织细胞间粘附分子(ICAM-1)mRNA表达。结果:造模后第3d大鼠胰腺组织NF-κBp65蛋白表达及其活性增加,第7d达峰值[(0.406±0.086)mg/g总蛋白]。对照组大鼠胰腺组织中肥大细胞活化;ICAM-1mRNA表达于第3d和第7d增加。洛沙坦可抑制NF-κB蛋白表达和肥大细胞活化、下调ICAM-1mRNA表达。结论:血管紧张素II在大鼠胰腺纤维化形成早期可能通过受体AT₁途径促发炎症反应及纤维化,具体机制可能与NFκB表达增加并活化有关。     

长期摄取高钠盐饮食引发的高血压

目的:探讨高钠盐引发的高血压发病机制。方法:雄性SD大鼠40只,分为对照(NC)组、高盐(HS)组、高盐+L-精氨酸(HS+Arg)组、高盐+依那普利(HS+En)组和高盐+特拉唑嗪(HS+Ter)组,每组8只。各组饲料相同。NC组饮去离子水;HS组饮1.5%氯化钠溶液;HS+Arg组、HS+En组和HS+Ter组分别饮用1.5%氯化钠溶液配制的L-精氨酸(4g·kg^-1·d^-1)、依那普利(30mg·kg^-1·d^-1)和盐酸特拉唑嗪(4mg·kg^-1·d^-1)。第8周末,大鼠在戊巴比妥钠麻醉下,直接测量颈总动脉血压,开腹抽取下腔静脉血及剖取肾脏、肾上腺。测定前海葱苷原A样物质(PLC)水平,Na^＋-K^＋-ATP酶活性,NO(x)、内皮素(ET)及血管紧张素II(AngII)水平。结果:HS组大鼠血压显著高于NC组,血浆PLC、ET及肾上腺AngII水平皆显著高于NC组;血浆和肾组织NO(x)和AngII水平、肾脏Na^＋-K^＋-ATP酶活性皆明显低于NC组;HS+Arg组、HS+En组和HS+Ter组大鼠血压和血浆PLC水平皆显著低于HS组,血浆和肾组织NO(x)水平及Na^＋-K^＋-ATP酶活性皆明显高于HS组;HS+Arg组、HS+En组和HS+Ter组肾上腺AngII水平及HS+Arg组血浆ET水平明显低于HS组,并与NC组相近。结论:在高钠盐引发的高血压发病机制中,除钠泵抑制因子释放增加致细胞膜Na^＋-K^＋-ATP酶活性减低外,内皮功能损害致NO释放减少也可能起重要作用。     

黄芪多糖对缺血脑损伤大鼠海马神经递质及c-fos mRNA表达的影响

目的: 观察黄芪多糖(astragalan,AG)对缺血性脑损伤大鼠海马乙酰胆碱(ACh)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)及c-fos mRNA表达的影响。方法: 取Wistar雄性大鼠100只,随机分成假手术组(sham-operated group,SOG)、模型组(model group, MG)、低剂量黄芪多糖治疗组(low-dose astragalan treatment group, L-AGTG)、高剂量黄芪多糖治疗组(high-dose astragalan treatment group, H-AGTG),每组10只。所有MG和AGTG组颈部切开阻断右侧大脑中动脉,造成缺血性脑损伤后,AGTG组腹腔注射AG(5 mg·kg^-1和15 mg·kg^-1)。于1 d、3 d和7 d分别脑血流再灌注,随即评分神经功能缺损情况后取材,测定海马匀浆中ACh、NE和5-HT的含量,采用RT-PCR法半定量分析大鼠海马c-fos的mRNA水平。结果: AG能减轻脑缺血引起的海马损伤。L-AGTG 7 d和H-AGTG 3 d、7 d海马匀浆ACh、5-HT和NE的含量均显著高于MG而低于SOG(P<0.05或P<0.01),且呈现剂量递增趋势;SOG的c-fos mRNA表达低于MG(P<0.05或P<0.01),提示脑缺血因素造成了 c-fos 基因表达增强,加速了下游基因表达,有利于神经细胞的保护;H-AGTG 3 d、7 d c-fos mRNA表达均高于MG(P<0.05),提示黄芪多糖具有上调c-fos mRNA表达的作用。结论: 黄芪多糖能减轻脑缺血再灌注引起的神经细胞损伤、改善海马神经功能,其作用机制与提高海马ACh、NE、5-HT含量和促进 c-fos 基因表达有关。     

奥贝胆酸对非酒精性脂肪肝大鼠法尼醇X受体及细胞色素P450家族成员7A1基因表达的影响

目的探讨奥贝胆酸对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠法尼醇X受体(FXR)蛋白、细胞色素P450家族成员7A1(CYP 7A1)蛋白及其基因表达的影响,及保肝作用。方法雄性SD大鼠52只通过高脂饲料喂养建立大鼠非酒精性脂肪肝模型;设置对照组11只,模型组、奥低组、奥中组和奥高组共41只,给药4周后,取大鼠相同部位肝脏,免疫组织化学法测定FXR蛋白表达、RT-PCR检测FXR mRNA,Western blotting法检测CYP 7A1蛋白、RTPCR检测CYP 7A1 mRNA的表达水平;通过大鼠肝指数,外周血谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)的浓度,及肝脏组织切片观察,评估肝功能。结果高脂饲料喂养10周后,大鼠具有典型的NAFLD特征,模型建立成功。模型组的FXR蛋白和FXR mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05),奥低组和奥中组的FXR蛋白和FXR mRNA表达水平与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05),奥高组的FXR蛋白和FXR mRNA表达水平显著高于模型组(P<0.05);模型组、奥低组和奥中组的吸光度值显著低于对照组(P<0.05),奥高组显著升高,与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。模型组的CYP 7A1蛋白和CYP 7A1 mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05),奥低组和奥中组的CYP 7A1蛋白和CYP 7A1 mRNA的表达水平与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05),奥高组的CYP 7A1蛋白和CYP 7A1 mRNA表达水平显著低于模型组(P<0.05)。与对照组相比,模型组的肝指数(%)显著增大(P<0.05);奥低组和奥中组的肝指数(%)与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05),奥高组肝指数(%)显著低于模型组(P<0.05)。与对照组相比,模型组的ALT、AST和ALP的浓度显著升高(P<0.05);奥贝胆酸组的ALT、AST和ALP浓度显著低于模型组(P<0.05),且随着奥贝胆酸给药量的增加,ALT、AST和ALP的浓度逐渐降低;肝组织切片观察结果显示,奥贝胆酸呈剂量依赖性改善大鼠肝组织。结论奥贝胆酸高剂量能显著上调FXR蛋白及其基因的表达,并抑制CYP 7A1蛋白及其基因的表达,显著改善大鼠肝功能及肝组织病理状态。     

番石榴叶总三萜对2型糖尿病大鼠的降血糖和血脂作用

目的: 探讨番石榴叶总三萜(TTPGL)对2型糖尿病大鼠血糖及血脂的影响。方法: 采用高糖高脂饮食加腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ, 35 mg·kg^-1)方法建立2型糖尿病大鼠模型。将造模成功的糖尿病大鼠随机分为5组:糖尿病模型组,TTPGL低、中、高剂量组(60、120、240 mg·kg^-1),罗格列酮阳性对照组(3 mg·kg^-1)。另取12只正常大鼠设为正常对照组。给药组每天灌胃给药1次,连续给药6周;模型组和正常对照组则给予同体积的生理盐水灌胃。给药6周后,采用葡萄糖氧化酶法测定大鼠的空腹血糖(FBG);放射免疫法测定空腹胰岛素(FINS),并计算胰岛素敏感指数(ISI);酶联免疫法测定大鼠的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)、游离脂肪酸(FFA)和糖化血红蛋白(GHb);果糖胺法测定糖化血清蛋白(GSP);Western blotting检测脂肪组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达情况。结果: 与正常对照组相比,糖尿病模型组血脂、FBG以及GHb显著升高,FINS及ISI显著下降,脂肪细胞PPARγ蛋白表达水平降低。与模型组相比,TTPGL中、高剂量组大鼠的FBG和GSP显著降低,FINS以及ISI显著升高,脂肪组织PPARγ蛋白的表达水平升高(P<0.01或P<0.05);此外,TTPGL能显著降低糖尿病大鼠血脂水平,TG、TCH和FFA含量均明显降低(P<0.01或P<0.05)。结论: TTPGL能显著降低2型糖尿病大鼠的血糖和血脂水平,明显改善糖尿病动物的糖脂代谢紊乱,升高血清胰岛素水平,提高胰岛素敏感指数;其抗糖尿病作用机制可能与其增加PPARγ蛋白的表达有关。     

大鼠胆汁酸合成加强时肝D-双功能蛋白mRNA表达及活性升高

目的通过研究胆汁酸合成代谢加强时D-双功能蛋白(DBP)表达及活性的变化,从整体水平上探讨DBP在胆汁酸合成中的作用。方法Wistar大鼠20只随机分为2组高胆固醇组和对照组。饲养2周后取材,测定血清总胆固醇、粪胆汁酸、肝胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)和DBPmRNA水平以及DBP活性。结果高胆固醇组血清总胆固醇含量升高,CYP7A1mRNA表达加强,粪中胆汁酸排出增加;同时,肝DBPmRNA表达及活性升高。结论大鼠胆汁酸合成加强时,肝DBPmRNA表达及活性升高,表明在整体水平上DBP可能参与了胆汁酸的合成。     

远志皂苷减轻Aβ1-40诱导的AD大鼠脑神经元tau蛋白Ser396位点的过度磷酸化

目的:探讨远志皂苷对β-淀粉样肽_1-40(Aβ_1-40)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠脑神经元tau蛋白过度磷酸化的影响。方法:大鼠右侧海马CA1区注射Aβ_1-40建立AD模型,并用远志皂苷(18.5 mg/kg、37.0 mg/kg和74.0 mg/kg)对大鼠进行灌胃治疗;免疫组织化学染色法观察大脑神经元中总tau蛋白、p-tau(Ser³⁹⁶)、蛋白激酶A(PKA)和蛋白磷酸酶2A(PP2A)蛋白的表达;蛋白免疫印迹技术检测大脑神经元中总tau蛋白含量、tau蛋白Ser³⁹⁶位点磷酸化以及PKA、PP2A蛋白的表达水平。结果:与对照组相比,Aβ_1-40组大脑神经元中总tau蛋白含量、tau蛋白Ser³⁹⁶位点磷酸化水平和PKA蛋白的表达水平显著升高,而PP2A蛋白的表达水平明显降低。与Aβ_1-40组相比,远志皂苷各治疗组大鼠大脑神经元中总tau蛋白含量、tau蛋白Ser³⁹⁶位点磷酸化水平和PKA蛋白表达水平下降明显,而PP2A蛋白表达水平显著升高。结论:远志皂苷可能是通过下调PKA蛋白表达量,上调PP2A蛋白表达量,减轻AD大鼠脑神经元中tau蛋白Ser³⁹⁶位点的过度磷酸化,使神经细胞免遭Aβ_1-40的毒害。     

钙拮抗剂对高血压大鼠心房肌L-型钙通道和钠-钙离子交换器mRNA的影响

目的:观察钙拮抗剂地尔硫卓对Goldblatt高血压大鼠模型心房肌L-型钙通道α_1C亚单位(CaL-α_1C)和Na^＋-Ca²⁺交换器(NCX)mRNA的变化影响,在基因水平探讨其潜在的意义。方法:Sprague-Dawley大鼠,高血压组用U型银夹夹住左肾动脉,右肾保留;假手术组(S组)只分离左肾动脉,不夹银夹,套尾法监测尾动脉血压。高血压组术后1周开始治疗,分为高剂量地尔硫艹卓组(HD组)、低剂量地尔硫艹卓组(LD组)和对照组(C组),分别于治疗后4周与S组同时处死动物(各6只),RT-PCR半定量分析CaL-α_1C和NCXmRNA的表达量(以GAPDH为内参照)。结果:C组心房肌CaL-α_1C的mRNA水平分别是S组、HD组、LD组的2.5倍、2.4倍、2.1倍(P＜0.01),S组、HD组、LD组之间无显著差别。C组心房肌NCX的mRNA水平分别是S组、HD组、LD组的1.9倍、1.6倍、2.1倍(P＜0.01),S组、HD组、LD组之间无显著差别。结论:肾性高血压大鼠心房肌CaL-α_1C、NCX的mRNA水平均表现为上调,应用钙拮抗剂能够抑制其上调,抑制作用不依赖于血压水平的降低。     

辛伐他汀对高脂血症大鼠动脉血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达的下调作用

目的:观察高脂血症时动脉血管紧张素Ⅱ1型受体(AT₁)mRNA表达水平、外周血血管活性物质的变化特点及降脂治疗的作用, 探讨辛伐他汀逆转内皮功能障碍的机制。方法:实验包括正常对照组, 另两组通过4周建立高脂血症模型, 此后继续高脂喂养, 其中辛伐他汀治疗组在高脂喂养同时喂服辛伐他汀10mg·kg^-1·d^-1)而高脂血症组不予药物治疗, 第20周检测3组的血脂变化及观察AT₁mRNA表达水平、外周血AngⅡ和NO浓度。结果:高脂血症组AT₁mRNA表达水平高于、血NO水平低于正常对照组、而AngⅡ和收缩压无显著差异。辛伐他汀治疗组总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度胆固醇(LDL-C)显著低于高脂血症组, 且动脉组织AT₁mRNA表达水平也显著低于高脂血症组, 血NO含量高于高脂血症组、但血AngⅡ浓度和收缩压未见显著差异。结论:辛伐他汀在调脂的同时, 下调AT₁mRNA的表达、促进一氧化氮的生成, 从而逆转内皮功能障碍、阻止动脉硬化进展。     

丹参素干预对肺纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响

 目的： 探讨丹参素对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的防治作用及其可能机制。方法： SD大鼠经气管内滴注博莱霉素诱导肺间质纤维化,随后分别腹腔内注射丹参素15 mg·kg-1·d-1(DA组)、地塞米松1 mg·kg-1·d-1(DXM组)和生理盐水2 mL·d-1 (BLM组)进行干预,正常对照组(NC组)气管内滴注和腹腔内注射均用生理盐水。于造模后第28天处死所有大鼠,通过苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色来评价治疗效果;免疫组化技术检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;实时荧光定量PCR测定转化生长因子β1（TGF-β1）、Smad3及Smad7 mRNA的表达。结果： DA组与BLM组相比,肺泡炎症及肺纤维化程度均明显减轻,肺组织α-SMA表达明显减少,肺组织TGF-β1和Smad3 mRNA表达明显减少,Smad7 mRNA明显增多。结论： 丹参素早期应用可减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化,可能通过抑制TGF-β1、Smad3 mRNA和促进Smad7 mRNA的表达而实现。     

拉马克啉对缺氧培养的肺动脉内皮及平滑肌细胞的影响及其机制探讨

目的:探讨三磷酸腺苷(ATP)敏感钾通道开放剂拉马克啉(Lev)对缺氧条件下培养的肺动脉内皮(PAEC)及平滑肌细胞(PASMC)的影响及其可能的作用机制。方法:分析Lev对缺氧条件下培养的PAEC及PASMC的[Ca²⁺]_i、上清液中NO^-₂及ET-1水平、细胞内PKC_α、eNOS、iNOS及PDGF-B的mRNA和蛋白质水平及PASMC增殖和凋亡的影响及其作用的细胞内机制。结果:①Lev可降低缺氧时PASMC及PAEC上清液中ET-1及细胞内PKC_α、iNOS及PDGF-B的mRNA和蛋白质水平,可降低PASMC[Ca²⁺]_i,抑制PASMC增殖,促其凋亡(P均<0.05),而对PAEC[Ca²⁺]_i及PASMC、PAEC上清液中NO^-₂水平及细胞内eNOS的mRNA和蛋白质水平无明显影响(P均>0.05)。②Lev下调缺氧时PASMC及PAEC上清液中ET-1水平及PASMC增殖的机制涉及抑制缺氧时PKC_α信号通道的功能活性。结论:Lev可减轻缺氧对PAEC及PASMC的某些不利影响,其作用的部分机制涉及下调缺氧时PAEC及PASMC内PKC_α信号通道的功能活性和降低PASMC的[Ca²⁺]_i,而与eNOS-NO信号通道无关。     

DMT1在多巴胺能神经元变性中的作用研究

目的: 研究二价金属离子转运蛋白1(DMT1)在乳胞素(lactacystin)诱导的SH-SY5Y细胞中的表达改变,从而进一步了解DMT1在帕金森病(PD)神经元损伤中的可能作用机制。方法: 建立 lactacystin 损伤的SH-SY5Y细胞模型,用免疫荧光、Western blotting等方法检测细胞DMT1表达水平的变化;在高亚铁环境下,荧光探针DCFH-DA检测胞内氧化应激水平的变化,免疫组织化学法、Western blotting检测胞内α-突触核蛋白(α-SYN)聚合体的改变。结果: Lactacystin处理后,细胞活力呈浓度依赖性降低。与正常对照组相比,lactacystin处理组DMT1表达增加(P<0.01)。正常对照组、lactacystin处理组及Fe²⁺处理组3组比较,其细胞活力逐渐降低,胞内氧化应激反应逐渐增强,胞浆α-SYN低聚体(43-55 kD)表达量逐渐增多(P<0.05)。结论: Lactacystin诱导SH-SY5Y细胞高表达DMT1,增强细胞摄铁能力,这可能是铁直接或者通过氧化应激反应促进胞内α-SYN的错误折叠和聚集、最终导致PD神经元损伤的关键因素。