紫草素减轻低氧-复氧致大鼠心肌细胞系H9c2损伤

目的探索紫草素对低氧-复氧(H/R)损害的H9c2心肌细胞的保护作用。方法将心肌细胞系H9c2分为对照组、H/R组、紫草素(0.1、1和10μmol/L)干预组,每组3个平行孔;MTT法检测紫草素对H9c2细胞毒性;流式细胞计量术检测细胞凋亡和周期;DCFH-DA检测细胞活性氧水平;生化检测细胞中MDA、8-OHdG和GSH含量;qPCR检测细胞γ-GCS、HO-1和NQO1 mRNA表达;Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2、caspase-3、cleaved caspase-3、Keap1和Nrf2蛋白表达;免疫荧光检测细胞Nrf2蛋白进核情况。结果紫草素呈浓度-时间依赖性抑制H9c2细胞增殖(P<0.05);H/R诱导H9c2细胞凋亡、细胞周期阻滞及促进Bax及cleaved caspase-3蛋白表达,抑制Bcl-2蛋白表达(P<0.05),紫草素呈浓度依赖性抑制细胞凋亡、解除细胞周期阻滞及cleaved caspase-3和Bax蛋白表达,增加Bcl-2蛋白表达;紫草素可降低H/R所致活性氧水平、MDA及8-OHdG升高,增高H/R所致GSH含量以及γ-GCS、HO-1和NQO1 mRNA的表达下调,导致Nrf2蛋白的升高及Keap1下调,并促进Nrf2蛋白进核(P<0.05)。结论紫草素减轻低氧-复氧致H9c2心肌细胞的损伤。     

硒对自身免疫性甲状腺炎大鼠Nrf2表达和甲状腺细胞凋亡的影响

目的探讨硒对自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AT)大鼠Nrf2表达的影响及凋亡机制。方法通过甲状腺球蛋白免疫诱导AT大鼠模型,同时给予亚硒酸钠灌胃治疗。TUNEL染色检测甲状腺细胞凋亡情况,免疫荧光染色检测甲状腺Nrf2的表达,Western blot检测Nrf2、Bcl-2、Bax蛋白表达,同时检测各组大鼠自身抗体TGAb、TMAb水平及组织匀浆中SOD活性、MDA含量。结果 AT大鼠经过硒处理后Nrf2、Bcl-2表达及SOD活性明显增加,而Bax表达、MDA含量、TGAb、TMAb水平明显降低(均为P<0.05)。结论通过补硒可显著激活AT大鼠甲状腺Nrf2的表达,降低氧化应激水平,抑制甲状腺细胞凋亡,提示Nrf2可能通过对抗氧化应激损伤进而保护AT大鼠受损的甲状腺细胞。     

NAC减轻香烟烟雾致COPD大鼠的肺组织损伤北大核心CSCD

目的:分析N-乙酰半胱氨酸(NAC)对香烟烟雾致慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织细胞凋亡的保护作用及机制。方法:采用简单随机分组将36只SD大鼠分为对照组、模型组和NAC组,12只/组,造模大鼠采用烟熏联合脂多糖制备大鼠COPD模型。造模后,NAC组灌胃NAC(400 mg/kg),持续灌胃30 d。检测大鼠第0.3秒用力呼气量(FEV_(0.3))、FEV_(0.3)/用力肺活量(FVC)、最大呼气流量(PEF);检测大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-8、肺组织MDA、SOD和GSH-Px水平;检测B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、cleaved Caspase-3、雷帕霉素靶蛋白/S6激酶1(mTOR/S6K1)信号通路表达;HE和TUNEL染色观察肺组织损伤。结果:与对照组相比,模型组大鼠FEV_(0.3)、FEV_(0.3)/FVC和PEF水平明显降低(P<0.05),IL-6、IL-8、TNF-α和MDA水平升高(P<0.05),SOD和GSH-Px活性明显降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),cleaved Caspase-3、Bcl-2和Bax表达上调(P<0.05);与模型组相比,NAC组大鼠IL-6、IL-8、TNF-α和MDA水平降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活性升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),cleaved Caspase-3和Bax表达下调(P<0.05),Bcl-2、p-mTOR/mTOR、p-S6K1/S6K1表达上调(P<0.05)。HE染色结果表明,NAC组大鼠肺组织病理变化明显减轻。结论:NAC可抑制香烟烟雾致COPD大鼠的肺组织细胞凋亡,保护肺组织损伤,其作用机制可能与激活mTOR/S6K1信号通路有关。     

基于Nrf2/HO-1信号通路探讨lncRNA H19对支原体感染肺炎小鼠肺组织的影响北大核心CSCD

目的:基于核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路探讨lncRNA H19对支原体感染肺炎(MPP)小鼠肺组织的影响。方法:将60只BALB/c小鼠采用随机数字表法分为对照组、MP组、si-NC组和si-H19组。si-NC组、si-H19组鼻腔分别滴入阴性对照siRNA、lncRNA H19 siRNA。除对照组外,其余组鼻腔滴入MP菌液构建MPP模型,对照组滴入等量培养基。1次/d,连续3 d。同时构建支原体感染A549细胞模型,将A549细胞分为对照组、MP组、si-NC组、si-H19组、pcDNA-NC组和pcDNA-H19组。各组分别转染对应的RNA及质粒。除对照组外,其余组使用MP菌液感染A549细胞。HE染色观察小鼠肺组织病理学改变;qRT-PCR检测肺组织和细胞中lncRNA H19 mRNA的表达;ELISA检测肺组织和细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6的含量;免疫组化染色观察小鼠肺组织B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达;细胞单克隆形成、MTT法及Annexin V-FITC/PI染色检测细胞增殖、凋亡能力;Western blot检测肺组织和细胞中Nrf2、HO-1、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)蛋白表达。结果:支原体感染肺炎小鼠实验中:与对照组相比,MP组、si-NC组双肺塌陷呈灰白色,镜下肺泡大量增生,内有充血及炎症细胞浸润;lncRNA H19 mRNA水平、TNF-α、IL-1β、IL-6、Bax、MMP-9、Nrf2、HO-1蛋白水平升高,CyclinD1、Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05);敲减lncRNA H19后,si-H19组情况较MP组肺部损伤有所改善,lncRNA H19 mRNA水平、TNF-α、IL-1β、IL-6、Bax、MMP-9蛋白水平降低,CyclinD1、Bcl-2、Nrf2、HO-1蛋白水平升高(P<0.05)。同时支原体感染A549实验与支原体感染小鼠肺组织实验结果一致。与对照组相比,MP组细胞增殖能力降低,凋亡能力提高,lncRNA H19 mRNA水平、TNF-α、IL-1β、IL-6、Nrf2、HO-1蛋白水平升高,CyclinD1蛋白水平降低(P<0.05);敲减lncRNA H19后,si-H19组细胞增殖能力提高,凋亡能力降低,lncRNA H19 mRNA水平、TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白水平降低,CyclinD1、Nrf2、HO-1蛋白水平升高(P<0.05);过表达lncRNA H19后,pcDNA-H19组细胞增殖能力降低,凋亡能力提高,lncRNA H19 mRNA水平、TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白水平升高,CyclinD1、Nrf2、HO-1蛋白水平降低(P<0.05)。结论:lncRNA H19在支原体感染肺炎小鼠肺组织中表达上调,敲降lncRNA H19能够减轻小鼠肺部炎症反应,促进细胞增殖并抑制其凋亡,其机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路有关。     

丹酚酸B减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤

目的研究丹酚酸B(SAB)能否减轻脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤。方法将48只小鼠随机分为对照组、模型组(气管滴注LPS)、SAB低/中/高剂量干预组、莱菔硫烷阳性对照组,检测肺湿/干重比(W/D)值;检测肺泡灌洗液(BALF)中蛋白浓度;HE染色法评价肺组织病理损伤;ELISA检测BALF中TNF-α、 IL-1β和IL-6的含量,检测肺组织MPO、SOD的活性和MDA含量;Western blot检测肺组织中Nrf2、NQO1、HO1、Keap1、NF-κB及p-NF-κB的蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组小鼠肺组织产生病理性变化,W/D值、BALF中蛋白质浓度、炎性细胞因子含量明显升高(P0.05),急性肺损伤模型建立成功。与模型组比较,SAB干预组的各指标值发生显著变化(P0.05);减轻LPS诱导的急性肺损伤小鼠氧化应激,且呈浓度依赖性增强,同时降低Keap1的表达(P0.01);升高Nrf2、NQO1和HO1的表达(P0.01);抑制LPS诱导的NF-κB的表达和NF-κB的磷酸化。结论 SAB可以减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤。     

结直肠癌中Keap1、Nrf2、Gpx4表达与铁死亡的相关性分析及临床意义

目的 探讨结直肠癌中Keap1、Nrf2、Gpx4的表达与铁死亡相关因子PLOOH、MDA、GSH及组织铁含量的相关性及临床意义。方法 收集106例结直肠癌、正常肠黏膜组织，采用免疫组化EnVision法、Western blot、qRT-PCR检测两者中Keap1、Nrf2及Gpx4的表达；应用分光光度法检测PLOOH、组织铁、MDA、GSH的含量，分析其相关性及临床意义。结果 结直肠癌组织中Keap1、Nrf2和Gpx4的阳性率分别为60.5%、35.8%、39.6%,其蛋白相对表达量分别为0.78±0.14、0.70±0.13、0.63±0.10,其mRNA水平分别为0.80±0.018、0.68±0.019、0.52±0.016,各因子在肿瘤中的表达均高于正常肠黏膜组织(P<0.05)。线性回归的对数趋势线分析显示结直肠癌组织中Keap1与Nrf2的表达呈负相关(R²=0.188 1,P<0.05),Nrf2与Gpx4的表达呈正相关(R²=0.252 7,P<0.05)。结直肠癌组织中PLOOH、MDA、GSH及组织...     

基于Nrf2通路探讨阿里红三萜酸减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的作用

目的:探讨阿里红总三萜酸(Fomes officinalis Ames triterpenic acid,FOTa)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的预防作用及核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)通路的影响。方法:将60只昆明小鼠随机分为6组:对照组、模型组、地塞米松(dexamethasone,Dex)组及FOTa(70 mg/kg、140 mg/kg和280 mg/kg)组。FOTa组小鼠连续灌胃给药4周。末次灌胃生理盐水后,地塞米松组小鼠腹腔注射1 mg/kg地塞米松,30 min后除对照组外,其余各组大鼠均给予5 mg/kg LPS腹腔注射诱导小鼠ALI模型。LPS注射10 h后取小鼠肺组织,检测小鼠动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)及氧合指数(PaO2/FiO2);计算肺组织湿/干重比值(wet/dry weight ratio,W/D);ELISA法测定血清中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSHPx)的水平;HE染色观察小鼠肺组织病理学变化;采用RT-qPCR及Western blot检测小鼠肺组织中Nrf2、Kelch样环氧氯丙胺相关蛋白1(Kelch-like epichlorohydrin-associated protein 1,Keap1)及血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)的mRNA及蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠PaO2与PaO2/FiO2降低(P<0.05),PaCO2与W/D升高(P<0.05);血清中MDA水平均升高(P<0.05),SOD与GSH-Px水平降低(P<0.05);肺泡壁增厚,大量红细胞渗出,可见片状血灶;Keap1 mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05)、Nrf2与HO-1 mRNA与蛋白表达水平降低(P<0.05)。与模型组相比:Dex组及FOTa-280 mg/kg组PaO2与PaO2/FiO2升高(P<0.05),PaCO2与W/D降低(P<0.05);血清中MDA水平降低(P<0.05),SOD与GSH-Px水平升高(P<0.05);肺组织中肺泡间质水肿及出血减轻,红细胞渗出减少;Keap1 mRNA与蛋白表达水平降低(P<0.05),Nrf2与HO-1 mRNA与蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:FOTa可以通过抑制Keap1、促进Nrf2与HO-1 mRNA及蛋白表达水平,进而减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤。     

重楼皂苷Ⅰ对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用研究北大核心CSCD

目的:探究重楼皂苷Ⅰ(PPⅠ)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的作用机制。方法:将小鼠随机分为对照(Control)组、LPS组、PPⅠ5 mg/kg组、PPⅠ10 mg/kg组、PPⅠ20 mg/kg组和地塞米松(DEX)组,每组8只。PPⅠ各组小鼠灌胃相应剂量PPⅠ,DEX组灌胃2 mg/kg DEX,对照组灌胃生理盐水预处理7 d,鼻腔滴入LPS(5 mg/kg)建立小鼠ALI模型。24 h后处死小鼠,收集肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF),检测肺湿/干重(W/D)值;HE染色观察肺组织损伤情况并评分;检测BALF中总蛋白含量、白细胞和巨噬细胞数;试剂盒检测一氧化氮(NO)、髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量;ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-6水平;Western blot检测小鼠肺组织中p38和AMPK的磷酸化及NLRP3、caspase-1、Nrf2和KEAP1的蛋白表达。结果:与对照组相比,LPS组小鼠肺组织发生病理性变化,肺损伤评分、W/D值、BALF中总蛋白含量、炎症细胞、氧化应激水平和炎症细胞因子含量明显升高(P<0.05,P<0.01),p38磷酸化水平、NLRP3、caspase-1和KEAP1蛋白表达显著上调(P<0.01),AMPK磷酸化水平和Nrf2蛋白表达显著下调(P<0.01)。与LPS组比较,PPⅠ(10 mg/kg和20 mg/kg)和DEX减轻了LPS诱导的ALI,肺损伤评分、W/D值、BALF中总蛋白含量、炎症细胞、氧化应激水平和炎症细胞因子含量明显降低(P<0.05,P<0.01),p38磷酸化水平、NLRP3、caspase-1和KEAP1蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01),AMPK磷酸化水平和Nrf2蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论:PPⅠ能够减轻LPS诱导的小鼠ALI,可能与p38-NLRP3/caspase-1和AMPK-Nrf2/KEAP1信号途径有关。     

p62在喉癌Hep-2细胞化疗耐药中的作用

目的:探讨p62在喉癌细胞Hep-2化疗耐药中的作用及潜在的作用机制。方法:实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)及Western blot法检测喉癌耐药细胞Hep-2/5-FU及其亲本细胞Hep-2中p62的表达水平。在Hep-2/5-FU细胞中转染p62 siRNA敲减p62的表达,采用CCK-8法和流式细胞术检测细胞生存率及细胞凋亡状态;检测细胞中丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的活性来反映细胞氧化应激水平。Western blot检测细胞凋亡相关调控因子Bcl-2、Bax、caspase-8/cleaved caspase-8、caspase-3/cleaved caspase-3的蛋白水平及抗氧化通路Keap1/Nrf2的活性。结果:耐药细胞株Hep-2/5-FU中p62的mRNA及蛋白表达水平均明显高于亲本细胞株Hep-2;并且在亲本细胞株Hep-2中,p62和Nrf2的蛋白表达水平随着顺铂的浓度增加不断升高。沉默p62可抑制喉癌耐药细胞Hep-2/5-FU的生存,促进其凋亡,上调MDA的含量,降低SOD和GSH-Px的活性,同时上调Bax、cleaved caspase-8、cleaved caspase-3和Keap1的蛋白水平,下调Bcl-2、Nrf2及HO-1的蛋白表达。结论:喉癌耐药细胞Hep-2/5-FU中沉默p62可恢复细胞对5-FU的敏感性,其机制可能与抑制Keap1/Nrf2信号通路的活化、调控细胞内氧化应激反应及细胞凋亡有关。     

中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸通过激活Keap1/Nrf2信号通路增强肺纤维化大鼠抗氧化能力

目的观察中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸(果王素)对博莱霉素致大鼠肺纤维化的影响,探讨其是否通过Kelch样ECH相关蛋白1(Keap 1)/核因子E2相关因子2(Nrf 2)信号通路发挥作用。方法随机将60只SD大鼠分为对照组、模型组、(60、120、180)mg/kg中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸处理组和5 mg/kg醋酸泼尼松组,每组10只。对照组大鼠以生理盐水气管内注射,其余5组大鼠则以博莱霉素A5气管内注射建立肺纤维化模型。第2天起,中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸处理组大鼠分别予(60、120、180)mg/kg中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸灌胃,泼尼松组以5 mg/kg醋酸泼尼松灌胃,其余2组予生理盐水灌胃。所有大鼠第28天处死,留取肺组织,HE和Masson染色观察肺部病变,通过试剂盒测定肺组织匀浆中羟脯氨酸(HYP)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,Western blot法检测肺组织中Keap 1、Nrf 2蛋白水平。结果与模型组比较,(60、120、180)mg/kg中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸处理组和泼尼松组肺泡炎症和肺纤维化程度明显减轻,肺组织HYP、ROS、MDA含量、胞质Keap 1蛋白水平降低,而SOD、CAT、GSH-Px含量、胞核Nrf 2蛋白水平升高。此外,与60 mg/kg中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸处理组相比,(120、180)mg/kg中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸处理组和泼尼松组上述指标明显改善,但后三者之间比较无显著性差异。结论中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸能抑制大鼠肺纤维化,与激活Keap 1/Nrf 2信号通路增加抗氧化物生成有一定关系。     

紫檀茋减轻百草枯诱导的模型大鼠肺纤维化

目的 探究紫檀茋(Pte)减轻百草枯(PQ)诱导大鼠肺纤维化的作用及机制。方法 将大鼠随机分为对照(control)组,PQ组(1次性灌胃50 mg/kg百草枯),低、中、高剂量Pte干预组(灌胃PQ 30 min后分别灌胃25、50和100 mg/kg Pte。每天1次,共7 d。)。治疗7 d后,用苏木精-伊红(HE)染色评价肺组织形态,用Masson三色染色评价肺纤维化。ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-1β、IL-6和MIP-2水平。用试剂盒检测肺组织中MDA和SOD含量。Western blot检测肺组织中E-cadherin、α-SMA、vimentin、Nrf2、NF-κB p65、p-NF-κB p65、TGF-β1、Smad3和p-Smad3的蛋白表达。结果 与对照组比较,PQ组大鼠肺组织损伤程度,肺纤维化评分,BALF中的IL-1β、IL-6和MIP-2水平,肺组织中MDA含量,α-SMA、vimentin和TGF-β1的蛋白表达水平,NF-κB p65和Smad3蛋白的磷酸化水平均显著升高(P<0.05),而肺组织中SOD含量,E-cadhe...     

右美托咪定减轻呼吸机相关性肺损伤模型大鼠肺组织损伤

目的 探讨右美托咪定(DEX)对呼吸机相关性肺损伤(VILI)大鼠肺组织Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho激酶1(ROCK1)信号通路的影响。方法 建立VILI大鼠模型,将大鼠分为对照组(control组)、模型组(VILI组)、右美托咪定低、高剂量组(DEX-L、DEX-H组)、右美托咪定高剂量+溶血磷脂酸(LPA)组(DEX-H+LPA组)。测定大鼠肺组织湿/干质量比值(W/D);HE染色观察肺组织病理形态;ELISA试剂盒检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的水平;TUNEL染色法检测肺上皮细胞死亡;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白及RhoA、ROCK1表达水平。结果 DEX可以减轻VILI大鼠肺损伤,降低肺损伤评分、W/D、细胞凋亡率和TNF-α、IL-1β、IL-6水平及Bax、cleaved caspase-3、RhoA、ROCK、α-SMA表达(P<0.05),升高Bcl-2表达(P<0.05);LPA可以促使大鼠肺损伤加重,肺损伤评分、W/D、细胞凋亡...     

小檗碱抗小鼠脂多糖性肺损伤的作用机制

目的：探讨小檗碱(Ber)对抗脂多糖(LPS)性急性肺损伤(ALI)的作用机制。方法：雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、ALI组和Ber防治组，分别予以双蒸水、Ber(50 mg/kg)灌胃，1次/d，连续3 d，于实验第3 d灌胃后1 h，腹腔注射生理盐水或LPS (20 mg/kg)。测定各组12 h肺湿/干重比值(W/D)，肺泡灌洗液(BALF)中微量总蛋白含量、白细胞(WBC)和中性粒细胞(PMN)总数；观察肺组织病理改变及磷酸化胞浆型磷脂酶A₂(cPLA₂)在肺组织中的表达。进一步用酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF中血栓素B₂(TXB₂)的含量，并测定肺组织丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果：ALI组，LPS 攻击后12 h肺W/D、BALF中蛋白含量、WBC 及PMN总数显著高于对照组(P<0.05)；病理检查发现肺间质充血、水肿，大量炎性细胞浸润。免疫组织化学观察显示肺组织中磷酸化cPLA₂的表达明显增加；同时，BALF中TXB₂含量、肺组织MDA的含量显著高于对照组(P<0.05)。Ber防治组，肺W/D、BALF中蛋白含量、WBC及PMN总数均明显低于ALI组；与ALI组比较，Ber防治组肺组织病理损伤明显减轻(P<0.05)；而且，肺组织中磷酸化cPLA₂的表达明显减少 (P<0.05)； BALF中TXB₂含量和肺组织MDA的含量显著低于ALI组。结论：抑制肺组织cPLA₂的磷酸化并对抗脂质过氧化损伤可能是Ber防治小鼠脂多糖性肺损伤的重要机制。     

MR-1通过抑制PERK/Nrf2途径减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡

 目的:研究肌原纤维形成调节因子1 (MR-1)是否通过抑制蛋白激酶R样内质网激酶 (PERK)/核因子E2相关因子2（Nrf2）途径减轻缺氧/复氧 (H/R)诱导的心肌细胞凋亡。方法:在原代培养的乳大鼠心肌细胞H/R模型上,采用Annexin V/PI双标法检测心肌细胞的凋亡率;以Western blotting检测葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、磷酸化PERK、Nrf2、活化转录因子4 (ATF4)、C/EBP同源蛋白 (CHOP)、Bcl-2和Bax的蛋白水平,研究过表达或敲低对于H/R致心肌细胞凋亡的影响及其与PERK/Nrf2途径活化的关系。结果:H/R引起心肌细胞凋亡;过表达MR-1减轻H/R引起的细胞凋亡 (P<0.01),下调CHOP表达 (P<0.05),引起Bcl-2/Bax值升高 (P<0.01),并抑制H/R诱导的PERK磷酸化、Nrf2核转位和ATF4表达 (P<0.01)。敲低MR-1加重H/R引起的细胞凋亡 (P<0.01)、CHOP表达上调 (P<0.05)和Bcl-2/Bax值下降 (P<0.01),并加重H/R诱导的PERK磷酸化 (P<0.05)、Nrf2核转位和ATF4表达 (P<0.01)。结论:MR-1通过抑制PERK/Nrf2途径而减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡。     

金丝桃甙对百草枯诱导的大鼠急性肺损伤的保护作用

目的 探究金丝桃甙（HYP）对百草枯（PQ）诱导的大鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法 将大鼠随机分为对照组、PQ组、低剂量金丝桃甙组（HYP-L组）、中剂量金丝桃甙组（HYP-M组）和高剂量金丝桃甙组（HYP-H组）,每组12只。给予相应处理7 d后,检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中的白细胞介素（IL）-1β、IL-6和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)水平,以及肺组织中的丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平。通过苏木精-伊红（HE）染色和Masson三色染色评估大鼠肺损伤和纤维化程度。通过Western blot检测肺组织中E-cadherin、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Vimentin及核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)、核因子-κB(NF-κB) p65、p-NF-κB p65、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3和p-Smad3蛋白的表达水平。结果 与对照组比较,PQ组大鼠BALF中的IL-1β、IL-6和MIP-2水平升高（P<0.05）,肺组织中SOD水平降低（P<0.05）,而MDA水平升高（P<0.05）,肺组...     

芬戈莫德预先给药对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺损伤的保护作用

目的:研究1-磷酸鞘氨醇(S1P)受体激动剂芬戈莫德(FTY720)预先给药对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺损伤的保护作用。方法:30只SD大鼠随机平分为正常组、模型组和FTY720预处理组,FTY720预处理组给予FTY720 3mg/kg灌胃7天进行预处理,之后模型组和FTY720预处理组大鼠构建ARDS模型。检测成模后6h时血氧分压(PaO_2)、肺组织湿干质量比(W/D值)、肺细胞凋亡率(AI)、肺组织中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl2相关X蛋白(Bax)、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-12(Caspase-12)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白表达情况,并制备支气管肺泡灌洗液(BALF)检测其中总蛋白、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平及肺泡通透性指数,HE染色观察肺组织病理变化并计算肺损伤评分。结果:与正常组大鼠相比,模型组大鼠PaO_2降低,肺组织的W/D值、PPI、肺损伤评分、AI、CHOP、Caspase-12、JUK、Bax、Bax/Bcl-2升高,BALF中的TNF-α、IL-1β、MDA水平升高,SOD活性降低,差异均有统计学意义(P0.01);与模型组相比,FTY720预处理组大鼠PaO_2升高,肺组织的W/D值、PPI、肺损伤评分、AI、CHOP、Caspase-12、JUK、Bax、Bax/Bcl-2降低,BALF中的TNF-α、IL-1β、MDA水平降低,SOD活性升高,差异均有统计学意义(P0.01)。结论:FTY720预先给药可能是通过抑制肺组织内质网应激相关细胞凋亡来缓解ARDS大鼠的肺损伤。     

TLR4信号转导途径在年幼期哮喘大鼠气道炎症中的作用

目的：研究哮喘大鼠Toll样受体4(TLR4)表达变化及其对嗜酸性粒细胞(EOS)凋亡的作用机制。方法:清洁级SD大鼠27只，随机分为对照组(A)、哮喘组(B)、地塞米松(D)组，每组9只。用OVA致敏与激发复制哮喘模型。光镜观察肺组织病理变化；BALF中炎症细胞计数；ELISA测定血清IL-10含量；原位杂交测定肺组织TLR4mRNA表达；TUNEL法检测EOS凋亡。结果:(1)光镜观察：B组见肺组织大量炎症细胞侵润，支气管黏液腺增生；D组上述现象明显减轻。(2)BALF中细胞总数、EOS绝对计数和EOS占细胞总数的百分比：B组均明显高于A组(均P<0.01)；D组均明显低于B组(均P<0.01)。(3)血清IL-10含量：B组与A组有显著差异(P<0.01)；D组显著低于B组(P<0.01)。(4)TLR4mRNA的检测：TLR4在肺组织表达B组与A组差异无统计学意义(P>0.05)；D组显著高于B组(P<0.01)。(5)EOS凋亡率检测结果，B组与A组比差异显著(P<0.05)；D组显著高于B组(P<0.01)。相关分析显示，TLR4mRNA表达与EOS凋亡率呈显著正相关(r＝0.612，P<0.01)。结论:DXM上调血清中IL-10水平，诱导肺组织EOS凋亡，可能与TLR4信号通路有关。     

肠系膜淋巴管结扎对大鼠急性肺损伤的影响

目的：探讨结扎肠系膜淋巴管对失血-脂多糖（LPS）致大鼠急性肺损伤（ALI）的拮抗作用。方法：雄性Wistar大鼠45只，均分为结扎组、未结扎组、假手术组，以失血、LPS复制二次打击模型，结扎组行肠系膜淋巴管结扎术致肠淋巴液断流。在手术创伤后24 h，所有大鼠颈总动脉放血，进行血气分析；从左肺收集支气管肺泡灌洗液（BALF），观察WBC、NO及其合酶、SOD、MDA以及肺泡通透性指数等指标的水平；右肺制备10%组织匀浆，检测MPO、ATPase活性等指标；观察右肺后叶超微结构。结果：二次打击后，未结扎组动脉血PaCO2、BALF中细胞总数及PMN、NO2-/NO3-、NOS、MDA含量以及肺匀浆MPO活性、肺通透性指数均显著高于假手术组，动脉血pH、PaO2、BALF中SOD、肺匀浆ATPase活性显著低于假手术组（P<0.01，P<0.05）；结扎组大鼠BALF中细胞总数及PMN、MDA、NO2-/NO3-含量、肺通透性指数均显著高于假手术组，BALF中SOD活性显著低于假手术组（P<0.01，P<0.05）。但结扎组大鼠动脉血pH、PaO2、肺匀浆ATPase活性显著高于未结扎组，动脉血PaCO2、BALF中细胞总数及PMN、NO2-/NO3-、NOS、MDA含量、肺通透性指数及肺匀浆MPO显著低于未结扎组（P<0.01，P<0.05）；且肺血管内皮细胞损伤程度较未结扎组轻微。结论：肠系膜淋巴管结扎可减轻失血-LPS致大鼠的急性肺损伤。提示二次打击的肠系膜淋巴液在大鼠急性肺损伤的发病过程中发挥着重要作用。     

缺血后处理抑制缺血再灌注大鼠心肌内质网应激相关凋亡

目的:研究缺血后处理(I-postC)对缺血/再灌注(I/R)大鼠心肌组织Caspase-12和CHOP(CEBP Homologous Protein)的影响,从内质网应激角度探讨I-postC抑制I/R心肌细胞凋亡的机制。方法:采用Wistar大鼠在体心脏I/R模型,以TUNEL法检测细胞凋亡,并检测血浆乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK-MB)含量及心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,免疫印迹法检测心肌组织Caspase-12、CHOP、Bcl-2和Bax表达。结果:I-postC显著抑制I/R所致的心肌细胞凋亡(较I/R组低74.3%,P<0.01),上调Bcl-2表达(较I/R组高53.2%,P<0.05)并抑制Bax表达上调(较I/R组低46.1%,P<0.05);与I/R组比较,I-postC组心肌细胞LDH和CK-MB漏出减少(分别较I/R组低37.6%和34.3%,P<0.01),心肌组织MDA含量降低(较I/R组低38.4%,P<0.05),SOD活性上调(较I/R组高18.3%,P<0.05);I-postC抑制I/R所诱导的Caspase-12活化和CHOP表达上调(分别较I/R组低41.7%和33.3%,P<0.01)。结论:I-postC通过抑制Caspase-12活化和CHOP过表达,减轻内质网应激相关凋亡,保护大鼠I/R心肌。     

氯沙坦抑制急性肺损伤大鼠肺组织LOX-1表达

 目的 研究氯沙坦干预大鼠急性肺损伤模型肺组织血凝素样氧化低密度血浆脂蛋白受体-1（LOX-1）表达的变化,探讨LOX-1在急性肺损伤中的表现及氯沙坦的干预机制。方法 将大鼠随机分成：对照组、脂多糖(LPS)组（5mg/kg）及氯沙坦治疗组（8mg/kg）,每组10只。检测动脉血氧分压（PaO2）、肺湿/干质量值（W/D）、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量、血浆和BALF中TNF-α水平及肺组织病理变化,比色法测定肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性,用RT-PCR法检测肺组织LOX-1 mRNA水平,western blot法检测肺组织中LOX-1、ICAM-1、Cleaved caspase-3蛋白的表达。结果 脂多糖处理后大鼠肺部炎症反应显著,PaO2较对照组下降,而肺W/D值、BALF蛋白含量及TNF-α水平、血浆TNF-α水平、MPO活性升高（P<0.05）;LOX-1 mRNA和LOX-1、ICAM-1及Cleaved caspase-3蛋白表达升高（P<0.05）。氯沙坦显著缓解上述变化（P<0.05）。结论 氯沙坦可能通过抑制LOX-1介导的炎症及细胞凋亡减轻急性肺损伤。