免疫相关基因在绝经后骨质疏松症患者外周血白细胞中的表达

文题释义： RNA-seq技术：利用高通量测序技术进行转录组测序分析,检测mRNA、miRNA、circRNA及lncRNA等所有转录本的表达水平,从而探究特定组织或细胞中基因的结构和功能,探寻特定疾病发生、发展的分子机制和信号通路。 骨免疫学：2000年首次提出,认为骨骼是一种免疫器官,在骨髓中形成的多种免疫细胞可与骨骼系统的细胞相互作用,通过经典的RANKL/RANL/OPG系统等信号通路共同调控骨代谢过程。最近提出的“免疫疏松”,进一步揭示骨免疫学在骨质疏松症中的调节作用。   摘要 背景：目前认为骨骼是一种免疫器官,在骨髓中形成的多种免疫细胞可与骨骼系统的细胞相互作用,共同调控骨代谢。研究绝经后骨质疏松症的发病机制,寻找其治疗的分子靶标和信号通路,有助于其预防和治疗。 目的：利用RNA-Seq技术,探讨绝经后骨质疏松症患者外周血白细胞中与免疫相关的基因表达谱的变化。 方法：选取因发生骨折住院治疗的绝经后0-20年的女性40人,首先采用Lunar Prodigy双能X射线骨密度仪扫描后,分为骨量正常组(T>-1)和骨质疏松组(T<-2.5)。全转录组测序(RNA-seq)分别抽取2组各5人的外周血样本,分离白细胞后提取总RNA,筛选2组的表达差异基因并进行GO富集分析,筛选免疫相关表达基因并进行KEGG信号通路分析,收集2组各20人的外周血样本采用Real-time PCR验证KEGG PATHWAY生物信息学分析的结果。研究方案的实施符合上海市浦东新区公利医院的相关伦理要求(20170301)。 结果与结论：①骨质疏松组与骨量正常组相比,表达差异在2倍以上且具有统计学意义的基因为187个(其中表达上调131个,表达下调56个),其中与免疫相关的表达差异基因为29个(其中表达上调25个,表达下调4个);②KIR3DL1、KIR3DL2、KIR2DL4、KLRD1及HSPA6在2组中的表达差异有显著性意义(P < 0.05);③结果说明,KEGG信号通路分析显示上述5个基因在自然杀伤细胞介导的细胞毒作用中发挥重要作用。KIR3DL1、KIR3DL2、KIR2DL4、KLRD1及HSPA6参与的自然杀伤细胞介导的细胞毒作用可能与绝经后骨质疏松症的发生密切相关。ORCID: 0000-0003-4879-0905(陈天宁) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

不同方式诱导骨髓间充质干细胞的效果比较

背景：以往大多采用转化生长因子β1诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化,但诱导效果不佳。目的：对比分析骨髓间充质干细胞与关节软骨细胞共培养诱导、转化生长因子β1诱导骨髓间充质干细胞分化为软骨样细胞的效果。方法：获取SD大鼠关节软骨细胞和骨髓间充质干细胞,分别设置1∶2,1∶1,2∶1浓度组,以转化生长因子β1 诱导组为对照。经诱导培养20 d后MTT法检测细胞活力,阿利新蓝比色法检测氨基聚糖含量,Western Blot检测Ⅱ型胶原蛋白表达。结果与结论：转化生长因子β1组的吸光度值显著小于软骨细胞和骨髓间充质干细胞1∶1组和软骨细胞和骨髓间充质干细胞2∶1组(P < 0.05)。转化生长因子β1组的氨基聚糖含量和Ⅱ型胶原蛋白表达显著低于软骨细胞和骨髓间充质干细胞(1∶2,1∶1,2∶1)组。软骨细胞和骨髓间充质干细胞1∶1组与软骨细胞和骨髓间充质干细胞2∶1组之间各指标比较差异无显著性意义(P > 0.05)。结果表明关节软骨细胞与骨髓间充质干细胞共培养,可使骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化,且骨髓间充质干细胞对软骨细胞诱导存在饱和现象。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

晚期糖基化终末产物对骨组织细胞代谢的影响

文题释义： 晚期糖基化终末产物：是还原糖(如葡萄糖)和某些代谢产物(如甲基已二醛)与蛋白质氨基经过非酶促反应生成的多种化合物,可以积聚在骨组织中,影响骨组织的结构和力学性能,导致骨强度显著下降。 骨胶原交联：骨胶原分子交联包括有利的酶催化交联(即未成熟的二价交联、成熟的三价交联)和不利的非酶催化交联。在骨组织发育过程中,胶原分子在酶催化的情况下,形成不成熟的二价交联,其中一部分二价交联进一步成熟形成三价交联;而在无酶催化情况下交联反应可形成晚期糖基化终末产物。 背景：随着骨组织工程学的研究和发展,发现晚期糖基化终末产物可以在骨组织中积累,影响骨骼的结构及生物力学性能。目前许多研究发现晚期糖基化终末产物/晚期糖基化终末产物受体通过特殊的作用机制后能够引起以成骨细胞、破骨细胞及骨细胞为主的骨组织细胞发生病理改变,导致骨重建失衡,骨骼强度下降,骨折发生率增加。 目的：综述晚期糖基化终末产物对骨骼生物力学的影响以及晚期糖基化终末产物/晚期糖基化终末产物受体对骨组织细胞的作用机制。 方法：由第一作者检索2005年1月至 2019年 7 月在PubMed、Web of Science 和 Medline数据库发表的有关晚期糖基化终末产物/晚期糖基化终末产物受体对骨组织细胞代谢的影响的文章,检索结果限于英文文献。 结果与结论：最终选取具有代表性的54篇文献进行归纳总结。晚期糖基化终末产物对骨胶原交联的影响,使得骨强度显著下降;晚期糖基化终末产物/晚期糖基化终末产物受体通过使骨组织细胞发生病理机制改变影响骨代谢,使得骨组织细胞发生本质改变。最终导致骨代谢平衡紊乱,骨骼脆性增加。骨质疏松症的发生与骨代谢相关的细胞活力改变有着直接关系,但具体相关作用机制需进一步研究,而这种特殊机制的改变在今后有可能为骨质疏松症提供独特的病理机制、诊断思维和相关治疗及预防策略。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：人工关节;骨植入物;脊柱;骨折;内固定;数字化骨科;组织工程     

葡萄籽原花青素拮抗激素性股骨头坏死骨细胞凋亡的作用

文题释义： 原花青素：广泛存在于蔓蓦、松树皮、越桔、绿茶等植物中,特别是葡萄籽中含有大量的原花青素。自从1961年德国科学家KARL首次在葡萄籽中分离出了2种多酚化合物开始,很多学者对各种花青素进行了广泛深入的研究。大量实验数据证实原花青素具有强力的抗氧化、减少细胞酶抑制以及血管保护等活性,体外实验显示葡萄籽原花青素提取物还具有较强的抗细胞凋亡作用。 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)：是一类蛋白酶家族,成员较多,在人类已经鉴定了11种不同的Caspase,根据其蛋白酶序列的同源性可分为3个亚族：Caspase-1亚族包括 Caspase-1、4、5、11;Caspase-2亚族包括Caspase-2、9;Caspase-3亚族包括Caspase-3、6、7、8、10。 背景：激素性股骨头缺血坏死具有复杂的生物学过程,其发病机制至今未明,临床上缺乏行之有效的治疗手段。因此,探明激素性股骨头缺血坏死的病因学机制,仍然是该领域研究的重要内容。 目的：观察葡萄籽原花青素提取物对激素性股骨头坏死骨细胞凋亡的影响。 方法：日本大耳白兔27只,随机分为3组：模型组静脉注射大肠杆菌内毒素,共2次,每次100 μg/kg,间隔24 h,在第2次注射完成后随即肌肉注射甲基强的松龙20 mg/kg,共注射3次,每次间隔24 h;治疗组进行相同造模,在甲基强的松龙注射同时肌肉注射葡萄籽原花青素提取物200 μg/kg,共注射3次,每次间隔24 h;对照组采用相同剂量注射生理盐水;最后一次注射后第4周空气栓塞法处死动物,取双侧股骨头常规固定脱钙、包埋,切片、苏木精-伊红染色,光镜下计数空缺骨陷窝,Hoechst染色法观察细胞凋亡情况,免疫组织化学染色法观察股骨头组织Caspase-9、Bcl-2的表达。 结果与结论：①模型组空缺骨陷窝率显著高于对照组(P < 0.01);治疗组空缺骨陷窝率显著低于模型组(P < 0.05),但仍高于对照组(P < 0.01);②对照组股骨头组织凋亡细胞较少;模型组股骨头组织中存在大量凋亡细胞,细胞核呈致密浓染;治疗组中凋亡细胞数有所减少,但仍高于对照组水平;③模型组Caspase-9的平均吸光度显著高于对照组(P < 0.01),治疗组Caspase-9的平均吸光度显著低于模型组(P < 0.01),与对照组相比无显著差异;模型组Bcl-2的平均吸光度值显著低于对照组(P < 0.05),治疗组Bcl-2的平均吸光度显著高于模型组(P < 0.01);④结果表明,骨细胞凋亡参与了激素性股骨头坏死的发生发展,葡萄籽原花青素可能通过促进Bcl-2的表达和抑制Caspase-9的表达来减少骨细胞凋亡的发生。 ORCID: 0000-0002-5431-8717(张志峰) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

新疆伊犁哈萨克族成人头面部形态特征

文题释义： 头面部：头面部形态学特征的形成与遗传、环境因素有关。遗传因素、环境因素、营养水平影响着人的头面部发育,饮食成分、营养状况、环境因素会对头面部皮肤、皮下脂肪、弹力纤维的发育产生一定影响,也会影响头面部细胞生理功能。 容貌：头面部各个部位的形态特征的有机组合形成了人的容貌,容貌是进行个人识别的主要依据,而不同民族或种族之间常具有一定的差异。 背景：哈萨克族主要居住在新疆西北部的伊犁哈萨克自治州,其中约80%的哈萨克族分布在伊犁、塔城和阿勒泰地区。为了更全面地了解哈萨克族的体质特征,在新疆伊犁巩留县吉尔格郎乡对20-86岁之间的哈萨克族进行了活体观察和头面部的测量。 目的：了解新疆伊犁哈萨克族成人头面部形态特征。 方法：按照《人体测量手册》规定的方法,在新疆伊犁巩留县吉尔格郎乡测量了422例(男219例,女203例)哈萨克族成年人31项头面部指标,并计算了12项头面部体质指数。 结果与结论：①哈萨克族人群上眼睑皱褶出现率为92.7%;蒙古褶(内眦褶)现率为9.9%;铲型和平型门齿出现率分别为6.6%和93.4%;凸型、凹型和直型鼻梁出现率分别为7.8%、36.5%和55.7%;斜型、纵型和横型鼻孔出现率分别为69.5%、20.8%和9.7%;凸型和非凸型下颏类型出现率分别为68.2%和31.8%;有耳垂型和无耳垂型出现率分别为96.7%和3.3%;有额头发际和无额头发际的出现率为72%和28%;直发和卷发的出现率分别为99.1%和0.9%。②哈萨克族男性多属于圆头型、特圆头型(81.7%;52.5%)、高头型(93.6%)、狭头型(84%)、特狭鼻型(98.2%)、超阔面型(74%);哈萨克族女性多属于圆头型、特圆头型(76.4%;55.7%)、高头型(97%)、狭头型(84%)、特狭鼻型(98.2%)、超阔面型(74%)。③哈萨克族成人具有蒙古人种北亚类型头面部特征。ORCID: 0000-0002-9692-7585(努尔买买提•巴哈夏尔) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

CT测量成人寰枢椎后方部分结构数据设计寰枢椎板间融合器

文题释义： 寰枢椎脱位：可分为可复性、难复性和不可复性脱位3种类型，其可导致C_1/2水平脊髓压迫而造成神经功能障碍症状，临床上多需要进行手术治疗，后路钉棒固定融合术是最常用的手术方式。 寰枢椎板间融合器：与寰枢椎侧块关节融合器不同，其直接固定在寰椎后弓与枢椎椎板骨面上，是一种新型融合器，此融合器可配合广泛使用的后路钉棒内固定手术，置入简便，增加植骨与寰椎后弓及枢椎椎板骨面的接触应力，促进骨性融合。 背景：寰枢椎融合器一直以侧块关节融合器为研究热点，但其置入操作风险过大，目前临床上一直缺乏可广泛应用的寰枢椎融合器。 目的：探究成人后路寰枢椎板间融合器的CT影像解剖学可行性并给出初步设计。 方法：对100例成人(男50例，女50例)寰枢椎CT三维成像进行测量，测量指标包括寰椎单侧后弓长度、寰椎后弓厚度、枢椎单侧椎板长度、枢椎椎板厚度、寰椎后弓上缘至枢椎椎板下缘距离，分析寰枢椎后方部分结构的CT测量数据并设计寰枢椎板间融合器。 结果与结论：①男、女性的寰椎单侧后弓长度分别为(23.41±1.48) mm和(22.23±1.25) mm，寰椎后弓厚度分别为(6.00±0.96) mm和(5.28±0.78) mm，枢椎单侧椎板长度分别为(18.54±2.23 )mm和(17.31±0.91) mm，枢椎椎板厚度分别为(5.12±1.31) mm和(4.98±1.26) mm，寰椎后弓上缘至枢椎椎板下缘距离分别为(32.63±2.76) mm和(31.39±4.04) mm；②不同性别的双侧测量数据差异无显著性意义(P > 0.05)；男性的寰椎单侧后弓长度、寰椎后弓厚度、枢椎单侧椎板长度大于女性，差异有显著性意义(P < 0.05)；男性与女性的枢椎椎板厚度、椎后弓上缘至枢椎椎板下缘距离差异无显著性意义(P > 0.05)；③寰枢椎后方部分结构的CT测量结果提示寰枢椎板间融合器是可行的；④寰枢椎板间融合器初步设计成功，并获得国家专利；⑤提示寰枢椎板间融合器具有应用可行性，可用于寰枢椎后路钉棒固定融合过程中，提升寰枢椎间的植骨融合率。 ORCID: 0000-0002-2101-1900(邹小宝)中国组织工程研究杂志出版内容重点：人工关节；骨植入物；脊柱；骨折；内固定；数字化骨科；组织工程     

微流控免疫分析芯片的研究进展

在最近十几年中,微流控芯片技术得到了迅速发展,它可以提高分析速度、增加分析效率、减少样本和试剂的消耗。我们对微流控免疫分析芯片的设计、制作以及应用进行了综述。     

浓度与压力梯度可调的三维细胞培养微流控芯片的研制

目的制作化学浓度梯度与压力梯度可调的细胞三维培养微流控芯片,构建可模拟在体细胞生长所处动态微环境的体外模型。方法利用光刻成型技术、模塑法以及等离子键合工艺,制作3通道结构的微流控细胞培养芯片。通过微注射泵控制微通道内溶液流动生成浓度梯度,利用液面高度差生成压力梯度,并通过骨架染色比较二维培养与三维培养下的细胞形态。结果获得了化学浓度梯度与压力梯度可调的微流控细胞培养芯片。在2μL.min-1的流速下,中间通道的浓度梯度3 h后可达到相对稳定。100 Pa的压力差在中间通道生成的视在压力梯度为0.11 Pa/μm,从而驱动三维支架内间隙渗流的生成。并在微流控芯片内实现脐静脉内皮细胞稳定的三维培养。结论该芯片结构简单,制作方便,能灵活调控细胞生长所处的微环境,可进一步用于研究不同的微环境参数对细胞行为的影响。     

循环肿瘤细胞检测仪的结构设计与功能分析

为了满足患者对于高质量精准诊疗服务的需求,实现智能化、高通量、高检出率的无创早期筛查,研发一台基于微流控技术的循环肿瘤细胞（CTCs）检测仪。仪器提供高度集成和自动化微流控芯片,采用精准高效的荧光检测系统进行单细胞水平的CTCs检测,并通过检测系统进行程序化检测。仪器可对病人血液中的CTCs进行分离、富集和检测。将人体外周血液样本通过微流控分选芯片得到CTCs富集液,再通过微流控检测芯片和光路检测系统由上位机计数得到血液样本中CTCs的数量。使用裂解红细胞后的模拟血液样本进行了6次实验,在达到0.2 mL/h的最佳流速时, CTCs平均检出率能够达到75.9%以上,组内相关系数大于0.8,证明了该仪器具有较高的检出率和良好的可靠性,可为相关领域的技术突破提供良好的研究设施。     

一种高通量测量单细胞弹性模量的微流控芯片

目的设计微流控芯片以便高效简便地捕获大量单细胞并测量其弹性模量。方法根据流体力学原理,设计微流控阵列及其单细胞捕获单元的通道结构和几何尺寸。培养海拉细胞,制作微流控芯片实物,并采用该芯片进行单细胞捕获实验。采用COMSOL软件对作用在被捕获细胞上的剪切力和压差进行有限元仿真。根据作用在被捕获细胞两侧的压差值和细胞在捕获通道中的伸长长度,计算出细胞的弹性模量。结果所设计的微流控芯片能有效地捕获大量单细胞;计算的单细胞弹性模量为780.7Pa±100.5Pa,与文献中报道的763Pa±93Pa接近。结论本文所提出的微流控芯片可高效捕获单细胞并测量单细胞力学特性。     

Risk of genetic and epigenetic alteration in children conceived following ART: Is it time to return to nature whenever possible?

Assisted reproductive technology may influence epigenetic signature as the procedures coincide with the extensive epigenetic modification occurring from fertilization to embryo implantation. However, it is still unclear to what extent ART alters the embryo epigenome. In vivo fertilization occurs in the fallopian tube, where a specific and natural environment enables the embryo's healthy development. During this dynamic period, major waves of epigenetic reprogramming, crucial for the normal fate of the embryo, take place. Over the past decade, concerns relating to the raised incidence of epigenetic anomalies and imprinting following ART have been raised by several authors. Epigenetic reprogramming is particularly susceptible to environmental conditions during the periconceptional period; therefore, unphysiological conditions, including ovarian stimulation, in vitro fertilization, embryo culture, cryopreservation of gametes and embryos, parental lifestyle, and underlying infertility, have the potential to contribute to epigenetic dysregulation independently or collectively. This review critically appraises the evidence relating to the association between ART and genetic and epigenetic modifications that may be transmitted to the offspring.     

Designing 3-Dimensional <Emphasis Type="Italic">In Vitro</Emphasis> Oviduct Culture Systems to Study Mammalian Fertilization and Embryo Production

The oviduct was long considered a largely passive conduit for gametes and embryos. However, an increasing number of studies into oviduct physiology have demonstrated that it specifically and significantly influences gamete interaction, fertilization and early embryo development. While oviduct epithelial cell (OEC) function has been examined during maintenance in conventional tissue culture dishes, cells seeded into these two-dimensional (2-D) conditions suffer a rapid loss of differentiated OEC characteristics, such as ciliation and secretory activity. Recently, three-dimensional (3-D) cell culture systems have been developed that make use of cell inserts to create basolateral and apical medium compartments with a confluent epithelial cell layer at the interface. Using such 3-D culture systems, OECs can be triggered to redevelop typical differentiated cell properties and levels of tissue organization can be developed that are not possible in a 2-D culture. 3-D culture systems can be further refined using new micro-engineering techniques (including microfluidics and 3-D printing) which can be used to produce ‘organs-on-chips’, i.e. live 3-D cultures that bio-mimic the oviduct. In this review, concepts for designing bio-mimic 3-D oviduct cultures are presented. The increased possibilities and concomitant challenges when trying to more closely investigate oviduct physiology, gamete activation, fertilization and embryo production are discussed.     

小鼠胚胎体外培养方法的改良

目的改进胚胎培养系统以进一步提高胚胎质量与发育潜能。方法采用内径0.21mm、外径0.28mm的塑料毛细管培养胚胎,将吸有胚胎的毛细管浸在盛有蒸馏水的烧杯内,再将烧杯放置在培养箱里的磁力搅拌器上,允许胚胎在微小的空间内发育并伴随着水的旋转而摆动,更好地模拟了胚胎在输卵管中的运动环境。结果分别对85枚、82枚2-细胞胚胎进行毛细管及微滴培养,其中毛细管培养胚胎的囊胚率以及胚胎细胞数(85.4%,57.0)显著高于微滴培养(36.5%,20.6),囊胚率差异显著(P0.05)。且接种在Matrigel基底膜上形成的内细胞团集落显著增大。结论小鼠胚胎体外培养方法的改良——毛细管培养,促进小鼠植入前胚胎的体外发育。     

Selective salpingography and recanalisation of blocked fallopian tubes

Fallopian tubal disease is a common cause of subfertility. Reproductive surgery or assisted reproduction techniques such as in vitro fertilization (IVF) have been the main treatment options for patients with tubal disease in Ireland, although access to these treatments remains limited. We describe a case of pregnancy following selective salpingography and fallopian tube recanalisation.     

动情期和动情间期小鼠输卵管中氧化应激和抗氧化基因表达差异

目的观察昆明(Kunming,KM)小鼠输卵管中氧化应激和抗氧化基因的表达是否随动情周期而改变。方法分别取动情期和动情间期小鼠输卵管进行RNA提取,用PCR芯片检测氧化应激和抗氧化基因表达的差别,然后用Real Time PCR对差异表达基因进一步验证。结果与动情间期比较,动情期小鼠输卵管中NADPH氧化酶1(NADPH oxidase1,NOX1)、谷胱甘肽过氧化物酶2(glutathion peroxidase 2,GPX2)、超氧化物歧化酶3(superoxide dismutase 3,SOD3)、一氧化氮合酶2(nitric oxide synthase 2,NOS2)等4个基因表达上调。结论动情期小鼠输卵管中NOX1、GPX2、SOD3和NOS2等4个基因表达上调,提示其可能参与维持动情期小鼠输卵管腔内适度的活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)和一氧化氮(nitric oxide,NO)水平,为卵子受精和早胚发育提供必要第二信号分子。     

Localization of gonococcal lipopolysaccharide and its relationship to toxic damage in human fallopian tube mucosa.

An experimental model using human fallopian tubes in organ culture was used to study the localization of purified gonococcal lipopolysaccharide (LPS). LPS was visualized by light microscopy with immunoperoxidase staining. Immediately after addition to fallopian tube organ cultures, gonococcal LPS aggregated on the tips of cilia. By 1 to 2 h after exposure, LPS could be seen distributed throughout the cytoplasm of ciliated and nonciliated cells in structures resembling vesicles. By 12 h, there were sloughed, ciliated cells present in the fallopian tube lumen, which had positive LPS stain on their surfaces as well as in their cytoplasm. By 24 h, LPS was distributed throughout the cytoplasm. Control experiments with rabbit oviduct organ cultures showed that LPS failed to attach, enter, or damage mucosal cells. These studies illustrate the initial localization of LPS on human mucosal cells and its uptake into the cells, which are coincident with toxicity for ciliated epithelial cells.     

Xeno-oestrogens and phyto-oestrogens induce the synthesis of leukaemia inhibitory factor by human and bovine oviduct cells.

In bovine oviduct cells 17beta-oestradiol can induce the synthesis of leukaemia inhibitory factor (LIF), a glycoprotein essential for embryo implantation. Therefore substances which are structurally similar to 17beta-oestradiol and possess oestrogenic activity may also modulate LIF synthesis and influence the reproductive process. We used primary cultures of bovine and human oviduct cells (epithelial cells:fibroblasts 1:1) to compare the effects of 17beta-oestradiol, phyto-oestrogens (genistein, biochanin A, daidzein, formononetin, and equol) and xeno-oestrogens [polychlorinated biphenyls (PCB): trichlorobiphenyl, 4-hydroxy-trichlorobiphenyl and 4-hydroxy-dichlorobiphenyl] on LIF synthesis. Immunoreactive LIF-enzyme-linked immunosorbent assay was used to determine the concentration of LIF in the culture medium. Similar to 17beta-oestradiol, genistein (0.02-2 micromol/l) induced LIF synthesis in bovine oviduct cells in a concentration-dependent manner. Equol, biochanin A and daidzein (2 micromol/l), 4-hydroxy-trichlorobiphenyl and 4-hydroxy-dichlorobiphenyl (0.01-10 micromol/l) but not formononetin (2 micromol/l) also induced LIF synthesis in bovine cells. Phyto-oestrogens and xeno-oestrogens also induced LIF synthesis in human oviduct cells (P < 0.05). The stimulatory effects of PCB, phyto-oestrogens and 17beta-oestradiol were blocked by ICI 182,780 (1 micromol/l). Moreover, 17beta-oestradiol, 4-hydroxy-trichlorobiphenyl, 4-hydroxy-dichlorobiphenyl, genistein, tamoxifen and ICI 182,780 displaced [(3)H]17beta-oestradiol from cytosolic oestrogen receptors in bovine oviduct cells. These results suggest that phyto-oestrogens and PCB mimic the effects of oestradiol in inducing LIF synthesis by bovine and human oviduct cells and that these stimulatory effects are oestrogen receptor-mediated. Environmental oestrogens act as endocrine modulators/disrupters and may induce deleterious effects on the reproductive process by influencing LIF synthesis in a non-cyclic fashion leading to tubal infertility.     

Engineered three-dimensional liver mimics recapitulate critical rat-specific bile acid pathways

A critical hepatic function is the maintenance of optimal bile acid (BA) compositions to achieve cholesterol homeostasis. BAs are rarely quantified to assess hepatic phenotype in vitro since existing analytical techniques have inadequate resolution. We report a detailed investigation into the biosynthesis and homeostasis of eight primary rat BAs in conventional in vitro hepatocyte cultures and in an engineered liver mimic. The three-dimensional (3D) liver mimic was assembled with layers of primary rat hepatocytes and liver sinusoidal endothelial cells. A high-pressure liquid chromatography and mass spectrometry technique was developed with a detection limit of 1?ng/mL for each BA, which is significantly lower than previous approaches. Over a 2-week culture, only 3D liver mimics exhibited the ratio of conjugated cholic acid to chenodeoxycholic acid that has been observed in vivo. This ratio, an important marker of BA homeostasis, was significantly higher in stable collagen sandwich cultures indicating significant deviation from physiological behavior. The biosynthesis of tauro-β-muricholic acid, a key primary rat BA, doubled only in the engineered liver mimics while decreasing in the other systems. These trends demonstrate that the 3D liver mimics provide a unique platform to study hepatic metabolism.     

玻璃化冷冻在保存女性生育能力中的应用

随着体外受精-胚胎移植（IVF-ET）技术的不断发展,低温冷冻保存已经成为人类辅助生殖技术（ART）中必不可少的一个环节。目前,人们可以通过低温冷冻卵母细胞、胚胎或卵巢组织来保存女性的生育能力。常用的冷冻方法有慢速冷冻法和玻璃化冷冻法。近年来,玻璃化冷冻已经成为ART领域中引人注目的焦点之一。本文综述了玻璃化冷冻在保存女性卵母细胞、胚胎和卵巢组织中的研究进展。